IMSP Spitalul Cărpineni

LABORATORUL DIAGNOSTIC CLINIC

Determinarea conținutului de colesterol

prin metoda enzimatic-colorimetric

Cod : PS- 16

Ediția : 01
Revizia : 01
Exemplar nr.: 01

Numele, prenumele Funcția Data Semnătura

Elaborat: Irina TULBU Responsabil de calitate 20.03.2024

Șef de laborator
Avizat:
Aprobat: Ion PURICE Director

Data aprobării / aplicării: ____________________

Destinatarul: Conducerea IMSP Spitalul Cărpineni și Laboratorul Diagnostic Clinic
Exemplar: ■ controlat □ necontrolat
Copiile sunt numerotate și controlate.
Avertisment: Documentul de față este proprietatea LDC IMSP Spitalul Cărpineni
Reproducerea și difuzarea documentului sunt în exclusivitate dreptul LDC IMSP Spitalul Cărpineni.

pagina 1 din 7
 IMSP Spitalul Cărpineni PROCEDURA SPECIFICĂ Exemplar: 01
Laboratorul Diagnostic Clinic Determinarea conținutului de Ediția : 01
colesterol prin metoda enzimatică- Revizia : 01
colorimetric Data : 20.03.2024
Cod : PS - 16

Indicatorul aprobării și reviziilor

Revizia / Elementele Elaborat Verificat Aprobat
Data modificării (numele, prenumele, ( nume, prenume, (nume, prenume,
(capitol, pagina, funcția, semnătura*) funcție, funcția,
alineat) semnătura*) semnătura*)

pagina 2 din 7
 IMSP Spitalul Cărpineni PROCEDURA SPECIFICĂ Exemplar:01
Laboratorul Diagnostic Clinic Determinarea conținutului de Ediția : 01
colesterol prin metoda enzimatic - Revizia : 01
colorimetric Data : 20.03.2024
Cod : PS - 16

Cuprins:
Pagina de gardă
Indicatorul aprobărilor și reviziilor
1. Scopul
2. Domeniul de aplicare
3. Documente de referință
4. Definiții și prescurtări
5. Descrierea procedurii
5.1 Semnificația clinică
5.2 Condițiile prealabile
5.3 Echipamente și resurse
5.4 Modul de operare
5.5 Raportarea rezultatelor
5.6 Asigurarea și controlul calității
5.7 Precauții
6. Responsabilități
7. Înregistrări
8. Interferențe
9. Performanța
10. Anexe

pagina 3 din 7
 IMSP Spitalul Cărpineni PROCEDURA SPECIFICĂ Exemplar:01
Laboratorul Diagnostic Clinic Determinarea conținutului de Ediția : 01
colesterol prin metoda enzimatic - Revizia : 01
colorimetric Data : 20.03.2024
Cod : PS - 16

1. Scopul Prezenta procedură descrie forma și conținutul procedurii de determinare a conținutului de

colesterol în serul uman prin metoda enzimatic - colorimetric
2. Domeniul Prezenta procedură este utilizată de șeful de laborator, asistenta medicale de laborator pentru
de aplicare executarea analizei de determinare a conținutului de colesterol total în ser, în cadrul
Laboratorului Diagnostic Clinic al IMSP Spitalul Cărpineni.

3. Document ISO 15189 Laboratoarele medicale. Cerințe particulare pentru calitate și competență.
e de Ordinul MS nr.517 din 14.12.2006
referință Instrucțiunea producătorului setului de reactivi.
Biochimia medicală – Lîsîi.
Instrucțiunea producătorului setului de reactivi.
4. Definiții și Colesterol total
termeni Lungimea de undă 505 nm,
Temperatura 37ºC,
Ser, plasmă.
5. Descrierea
procedurii:

5.1 Semnificația Colesterolul este o substanță cu structură chimică de sterol care intră în compoziția
clinică membranelor ce înconjoară și protejează ficatul, măduva spinării, creierul și alte țesuturi.
Colesterolul nimerește în organismul uman prin alimentație de origine animală, însă el se mai
găsește și în alimente de origine vegetală. O mare parte din colesterol este sintetizat de către
ficat, iar ce este în exces se depozitează în organism pe pereții vaselor de sânge, contribuind la
apariția diferitor tipuri de afecțiuni. Dozarea colesterolului total permite depistarea
hipercolesterolemiei, care în concentrații foarte crescute poate duce la un risc de accident
vascular și la apariția aterosclerozei sau la maladii cardio-vasculare.
5.2 Condiții Pregătirea pacientului
prealabile Recoltarea: respectarea cerințelor prevăzute în procedura operațională PO-01
Materialul pentru analiză - sânge venos.
Condiții de transport - se transportă în eprubete cu capace unice.
Condiții de păstrare – serul obținut este stabil.
Pregătirea probelor secundare: probele primare se centrifughează timp de 5-10 min. 3000
rot/min. Serul se separă imediat de cheag. Probele hemolizate nu se testează.
5.3 Echipament și Analizatorul biochimic CLINDIAG
resurse Pipete automate cu capacitate de 10 – 1000 mkl cu vârfuri de unică folosință,
Eprubete,
Centrifugă.

pagina 4 din 7
 IMSP Spitalul Cărpineni PROCEDURA SPECIFICĂ Exemplar:01
Laboratorul Diagnostic Clinic Determinarea conținutului de Ediția : 01
colesterol prin enzimatic - Revizia : 01
colorimetric Data : 20.03.2024
Cod : PS - 16

5.4 Modul de
operare
5.4.1 Reactivi și Reactivi: - R – tampon de GOOD Ph 6,7
alte substanțe - phenol – 24 mmol/l
- amino – 4 – antipirin – 0,5 mmol/l
- colesterol esteraza ≥ 180 µ/l
- colesterol oxidaza ≥ 200 µ/l
- peroxidaza ≥ 1000 µ/l
- azid de sodiu ≤ 0,1 %
Standart: colesterol – 15, 17 mmol/l.
Rectivii sunt stabili, păstrați la temperatura de 2 – 8 ºC, feriți de lumină, până la data indicată pe
etichetă. Reactivul și standartul sunt gata pentru lucru.
5.4.2 Principiul Colesterolul se determină după fermentare, hidroliză și oxidare. În procesul reacției se formează
reacției indicatorul hinonimin din peroxidul de hidrogen și amino – 4 antipirină în prezența fenolului și
peroxidazei.
5.4.3 Schema de reactivi control-blanc standartul - proba-ser, plasma
operare calibratorul
reactiv - R 1000 mkl 1000 mkl 1000 mkl
apa distilată 10 mkl
standartul 10 mkl
proba 10 mkl
Se amestecă bine și peste 5 min de incubație se măsoară absorbția la lungimea de undă 505
Diferența absorbției probei∗n
nm. Calculul:
Diferențaabsorbției standartului
n – concentrația standartului la temperatura de 37ºC.
5.4.4 Calibrarea Pentru calibrare se utilizează soluția standart completată în set sau achiziționată separat. La utilizarea
unui calibrator rezultatele testelor se vor calcula după formula expusă mai sus. La utilizarea câtorva
soluții de calibrare cu diferite concentrații se calculează factorul mediu reieșind din numărul de
calibratori, conform procedurii PO-06.
Frecvența calibrărilor: nu mai rar de o dată în 6 luni cu condiția că, pe parcurs n-au apărut
neconformități. La apariția neconformităților, constatarea erorilor după rezultatele materialelor de
control, aplicarea unui nou lot de reagenți, reparația echipamentului etc, calibrarea se execută
obligatoriu.
5.5 Raportarea Valori de referință: ser, plasmă:
rezultatelor mg/dl mmol/l
Normal < 200 md/dl < 5,17 mmol/l
Moderat 200 – 239 mg/dl 5,17 – 6,18 mmol/l
Valori de alertă > 240 mg/dl ≥ 6,21 mmol/l
La constatarea valorilor de alertă se anunță RC, care la rândul lui anunță medicul curant.
5.6 Asigurarea Se utilizează ser de control: Elitrol I – referințe normale
și controlul Elitrol II – referințe patologice
pagina 5 din 7
calității Biocont C – referințe cunoscute.

PROCEDURA SPECIFICĂ Exemplar:01

IMSP Spitalul Cărpineni Determinarea conținutului de Ediția : 01
Laboratorul Diagnostic Clinic colesterol prin metoda enzimatic - Revizia : 01
colorimetric Data : 20.03.2024
Cod : PS - 16

5.7 Precauții Standartul conține azid de sodium care în prezența plumbului formează azid metalic explozibil,
de respectat legislația în vigoare.
[Link]ăți Șeful laboratorului: supervizează solicitările pentru analiză,
nominalizează executantul analizei,
validează formularul cu rezultatul analizei.
Executantul analizei: verifică funcționalitatea mijloacelor de măsură,
execută analiza conform procedurii,
înregistrează rezultatele intermediare, calculele, rezultatele finale,
rezultatul controlului intern,
comunică responsabilului de calitate în cazul analizelor neconforme, erori,
defecte în echipament.
7.Înregistrări Formularul de trimitere la analize nr.201/e, 202/e.
Formularul de raportare a rezultatului analizei nr.209/e, 228/e.
Registrul de înregistrare a rezultatelor nr.250/e.
Lista de lucru nr.251/e.
Registrul de înregistrare a rezultatelor controlului intern de calitate.
8. Interferența Bilirubina conjugată, bilirubina neconjugată, hemoglobina, acid ascorbic.
9. Performanțe Reactivul are linearitatea 0,52 mmol/l
Limita de detecție egală 0,111 mmol/l
Sensibilitatea analitică de 0,015 mmol/l.
[Link] Instrucțiunea setului de reagenți al producătorului
Lista de difuzare a procedurii.

pagina 6 din 7
 IMSP Spitalul Cărpineni PROCEDURA SPECIFICĂ Exemplar: 01
Laboratorul Diagnostic Clinic Determinarea conținutului de Ediția : 01
colesterol prin metoda enzimatic - Revizia : 01
colorimetric Data : 20.03.2024
Cod : PS - 16

Cod L-02-03

Lista difuzare/retragere
Nume document: Procedura specifică de determinare a conținutului de colesterol prin metoda
enzimatic – colorimetric.
Cod document PS – 16 Ediția 01 Revizia 01

Nr. Data Persoana care difuzează/retrage Persoana care primește

exemplar Difuzare/retragere Documentul Documentul
(nume, prenume, semnătura) (nume, prenume,
semnătura)

pagina 7 din 7