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Amplificação no Teste PCR: Etapa 3

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Etapa 3: amplificação

Na 3º etapa amplificação ou polimerização – a temperatura é aumentada novamente.


Sendo necessário para atingir a temperatura ideal de trabalho da enzima Taq DNA
polimerase (cerca de 70 graus Celsius). Este precisa dos primers de PCR inseridos
anteriormente como iniciador para iniciar seu trabalho.

Isso consiste em anexar e ligar os blocos de construção de nucleotídeos adicionados


apropriados à extremidade 3′ do primer. Desta forma obtemos uma sequência de DNA que
é complementar à fita molde.

Na prática, a amplificação efetiva do DNA requer de 20 a 30 ciclos de reação, com os


produtos de cada ciclo servindo como DNA-molde para o próximo – dando origem ao termo
“reação em cadeia” da polimerase.

Após este processo uma amostra da reação será sujeita a eletroforese (técnica de
separação de fragmentos de DNA) para determinar se um fragmento de DNA foi aplicado
com sucesso ou não.

Como funciona o teste PCR?

O exame PCR pode ser feito por meio de amostras de sangue,de escarro ou de secreções
orofaríngeas (fundo da garganta) ou nasofaríngeas (fundo do nariz). Após a coleta do
material, a amostra é devidamente armazenada e encaminhada para o laboratório para que
seja processada na máquina de PCR, passando pelas etapas antes descritas e, assim, seja
possível realizar o exame de acordo com o objetivo.

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