Estrutura e Classificação dos Vírus
Estrutura e Classificação dos Vírus
Um vírus é uma entidade submicroscópica consistindo de um único ácido nucleico cercado por uma proteína.
casaco e capaz de replicação apenas dentro das células vivas de bactérias, animais ou plantas.
Eles são parasitas intracelulares obligados e, uma vez dentro da célula hospedeira viva, o vírus entra
integrado ao metabolismo de seu hospedeiro, tornando difícil o controle por meios químicos. Ele
é difícil matar um vírus com antibióticos. Drogas que destroem a capacidade do hospedeiro de ser usado por um
vírus para replicação, tendem a ser altamente tóxicos e ter um efeito negativo e às vezes mortal
efeito na célula hospedeira.
Propriedades dos Vírus.
Eles não têm organização celular.
Eles contêm apenas um tipo de ácido nucleico, seja DNA ou RNA, mas nunca ambos.
Eles são parasitas intracelulares obrigatórios.
Eles carecem das enzimas necessárias para a síntese de proteínas e ácidos nucleicos e são
dependent for replication on the machinery of host cells.
Eles são facilmente transmitidos de um organismo para outro, não são afetados por antibióticos
e pode ser cristalizado.
Eles se multiplicam por um processo complexo e não por fissão binária.
Eles não são afetados por antibióticos antibacterianos.
Antes de um vírus entrar em uma célula, ele é uma partícula de vírus livre chamada virion. Um virion não pode crescer ou
realizar quaisquer funções biossintéticas ou bioquímicas porque é metabolicamente inerte. Vírus
não são células. Eles variam em tamanho de 20 nanômetros (vírus da poliomielite) a 300 nanômetros
(vírus da varíola) e não pode ser visto sob um microscópio de luz.
Medindo o tamanho dos vírus
Passando-os através de uma membrana de colódio
Microscopia eletrônica
Sedimentação na ultracentrífuga
Medições comparativas.
Forma dos vírus
A forma geral da partícula viral varia em diferentes grupos de vírus.
A maioria dos vírus animais é aproximadamente esférica, irregular e pleomórfica.
Por exemplo, o vírus da varíola é em forma de tijolo, o vírus da raiva é em forma de bala, o vírus do mosaico do tabaco é
em forma de bastão
ESTRUTURA VIRAL
Os principais componentes de um vírus são:
• Núcleo de ácido nucleico. O núcleo de ácido nucleico pode ser DNA ou RNA que compõe o
informação genética (genoma) do vírus. Genomas de RNA ocorrem apenas em vírus. O genoma
pode ser de fita simples ou fita dupla, circular ou linear, segmentado ou não segmentado.
De acordo com o ácido nucleico presente, os vírus podem ser classificados em vírus de DNA e vírus de RNA.
vírus.
•Capsídeo. O capsídeo é a camada de proteína que encapsula um vírus e protege o ácido nucleico.
do ambiente. O capsídeo é composto por um grande número de capsômeros, que é feito de
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moléculas de polipeptídeo. O capsídeo com o ácido nucleico encerrado é conhecido como nucleocapsídeo.
Ele também desempenha um papel em como alguns vírus se ligam a uma célula hospedeira. Um capsídeo consiste em uma ou mais
proteínas que são exclusivas do vírus e determinam a forma do vírus.
Funções do capsídeo
Ele protege o genoma viral da destruição física e da inativação enzimática por
nucleases em material biológico.
Ele fornece o local de ligação que permite ao vírus se anexar a um local específico no hospedeiro.
célula.
Facilita a montagem e embalagem da informação genética viral.
Serve como um veículo de transmissão de um hospedeiro para outro.
É antigênico e específico para cada vírus
Ele fornece a simetria estrutural à partícula viral.
Envelope. Um envelope é uma bicamada de membrana que alguns vírus possuem fora de seu capsídeo. Se
um vírus não tem um envelope, o vírus é chamado de vírus nu. Fatores ambientais
que podem danificar o envelope são:
• Aumento de temperatura
Temperatura de congelamento
• pH abaixo de 6 ou acima de 8
solventes lipídicos
• Alguns desinfetantes químicos (cloro, peróxido de hidrogênio e fenol)
Vírus Envolto:
O envelope ou cobertura externa do vírus contendo lipídio é derivado da membrana plasmática.
membrana da célula hospedeira durante a liberação por brotamento da superfície da célula.
O envelope é glicoproteína por natureza.
Vírus envelopados são suscetíveis à ação de solventes lipídicos, como éter,
clorofórmio e detergente.
Ex. Vírus do herpes, vírus da hepatite B, vírus HIV
Um vírus nu é mais resistente a mudanças e é menos provável que seja afetado por condições que
pode danificar o envelope. Vírus nus são mais resistentes a mudanças de temperatura e pH.
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Exemplos de doenças causadas por vírus nus são varicela, herpes zóster, mononucleose, e
herpes simples.
Peplômeros:
Em partícula viral madura, as glicoproteínas frequentemente aparecem como espinhos projetados na parte externa
superfície do envelope que são conhecidos como peplômeros.
Um vírus pode ter mais de um tipo de peplômeros. Por exemplo, o vírus da influenza possui dois tipos.
dos peplômeros, a hemaglutinina e a neuraminidase.
Funções dos peplômeros
Ajuda na ligação do vírus aos receptores da célula hospedeira para iniciar a entrada do
virion dentro da célula.
Ele se liga a receptores nas células vermelhas do sangue, fazendo com que essas células se aglutinem.
Possui atividade enzimática semelhante à neuraminidase, que cliva o ácido neuramínico do hospedeiro.
glicoproteínas celulares.
Possui propriedades antigênicas.
CLASSIFICAÇÃO
Em (1927), Johanson foi o primeiro a tentar a classificação de vírus de plantas.
Holmes (1948) manteve os vírus sob a ordem virales e os classificou em três
pedidos com base no ataque ao host.
1. Faginae - infectar bactérias
2. Phytophaginae - infectam plantas
3. Zoophagineae - infect animals
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Lwoff, Home e Toumier (1962) propuseram um sistema de classificação chamado Lm
sistema baseado em :
(i) Tipo de ácido nucleico (DNA/RNA)
(ii) Simetria (helíca/cúbica/bilateral)
(iii) Presença ou ausência de envoltório ao redor do nucleocapsídeo.
Diâmetro do capsídeo helicoidal.
(v) Número de capsômeros em tipos cúbicos.
Peso molecular do vírus.
(vii) Forma e tamanho do vírus.
(viii) Diâmetro do nucleocapsídeo enrolado/número de capsômeros em forma cuboide.
(ix) Diâmetro do nucleocápside em enrolamento.
(x) Multiplicação intracelular.
(xi) Modo de transmissão do vírus.
The LHT systemis not a natural classification system and does not show any evolutionary
relação filogenética. Classifica os vírus com base em características químicas e estruturais comuns
recursos que podem ser determinados com precisão.
Classificação de acordo com o comitê provisório de nomenclatura de vírus (PNVC) de
a Associação Internacional de Sociedades Microbiológicas com base no sistema de Lwoff,
Horne e Tournier (1962) é o seguinte
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Classificação por Gasjens e King (1975)
Os principais grupos de vírus são classificados de acordo com o tipo de ácido nucleico, simetria,
presença ou ausência de um envelope e local de montagem (nuclear ou citoplasmático) do capsídeo
com material genético.
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Classificação de Baltimore
David Baltimore, um laureado com o Nobel, propôs um esquema que englobava todos os vírus, baseado em
seus genomas, natureza e seus modos de replicação e expressão gênica. O internacional
o comitê de taxonomia de vírus (ICTV) usa isso, junto com outros parâmetros, para classificar
vírus em famílias e gêneros.
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O esquema revisado de Baltimore baseia-se na importância fundamental do mRNA em
ciclo de replicação dos vírus. A classificação de Baltimore (primeiramente definida em 1971) é uma classificação
sistema que classifica vírus em um dos sete grupos dependendo de uma combinação de seu
ácido nucleico (DNA ou RNA), estrandamento (fita simples ou dupla), sentido, e
método de replicação. Assim, os vírus são agrupados de acordo com seu mecanismo de
sintese de mRNA e sua estratégia de replicação. Por convenção, todo mRNA é designado como
RNA de sentido positivo (+). Fitas de DNA e RNA viral que são complementares ao
O mRNA é designado como sentido negativo (-) e aqueles que têm a mesma sequência são chamados
+ve sentido. Desta forma, 7 classes de natureza dos genomas virais nessa classe.
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FORMAS DOS VÍRUS
Um vírus pode ter uma de duas estruturas. Estas são:
• Vírus helicoidal. Um vírus helicoidal é em forma de bastão ou fio. O ácido nucleico e os capsômeros são
entrelaçados na forma de hélice ou espiral. Ex. Vírus da influenza, vírus parainfluenza, raiva
vírus
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Multiplicação/ reprodução viral
As informações genômicas necessárias para a replicação viral estão contidas no ácido nucleico viral.
mas faltando enzimas biossintéticas. O vírus depende da maquinaria sintética do hospedeiro
célula para replicação. A multiplicação viral segue os seguintes passos.
I. Adsorção ou Afixação
II. Penetração
III. Desnudamento
IV. Biossíntese
V. Maturação
VI. Lançamento
Adsorção ou Afixação
A adsorção ou anexo é específica e é mediada pela ligação da superfície do virion
estrutura, conhecida como ligantes, para receptores da superfície celular. Devido ao ajuste exato necessário,
os vírus têm um alcance limitado de hospedeiros.
Exemplo. No caso do vírus da influenza, a glicoproteína de superfície hemaglutinina se liga especificamente a
resíduos de ácido silícico de locais de receptores de glicoproteínas do trato respiratório.
No caso do HIV, a glicoproteína de superfície gp120 atua como um ligante e se liga às células CD4 T.
linfócitos.
Penetração
Após a ligação, a partícula do vírus é absorvida dentro da célula. Isso ocorre por meio do sistema de receptores.
endocitose mediada (viropexia). A maioria dos vírus não envolvidos entra por mediação de receptor
endocitose. Vírus envelopados fundem suas membranas com membranas celulares para entregar o
nucleocapsídeo ou genoma diretamente no citoplasma.
Desnudação
Este é o processo de remoção do vírus de suas camadas externas e capsídeo para que o ácido nucleico
é liberado na célula. Com a maioria dos vírus, a desnaturação é realizada pela ação dos lisossomos.
enzimas da célula hospedeira. O genoma dos vírus de DNA, exceto os poxvírus, deve ser entregue
no núcleo, enquanto a maioria dos vírus RNA permanece no citoplasma.
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Biossíntese
Esta fase inclui a síntese não apenas do ácido nucleico viral e da proteína de cápside, mas também
das enzimas necessárias nas várias etapas da síntese viral, montagem e liberação. Em
proteínas reguladoras de adição também são sintetizadas, que servem para desligar a função celular normal
metabolismo e dirigir a produção sequencial de componentes virais.
Passos da biossíntese
Transcrição do RNA mensageiro (mRNA) a partir do ácido nucleico viral.
A tradução do mRNA em proteínas iniciais que iniciam e mantêm a síntese de
componente viral.
Replicação do ácido nucleico viral.
Síntese de proteínas tardias ou estruturais que são os componentes do virion filhote
capsídeo.
Maturação
A montagem dos vários componentes virais em virions ocorre logo após a replicação de
o ácido nucleico viral. Isso pode ocorrer no núcleo ou no citoplasma. No caso de
vírus envoltos o envoltório é derivado da membrana nuclear da célula hospedeira e da membrana plasmática
membrana.
Lançamento
Os vírus podem ser liberados das células após a lise da célula, por exocitose ou por brotamento a partir de
a membrana plasmática. Vírus que existem como nucleocapsídeos nus podem ser liberados pela lise
da célula hospedeira ou fagocitose reversa. A liberação de vírus envelopados ocorre após a brotação
da membrana plasmática sem matar a célula hospedeira. De 3.000 a 100.000
virions podem ser liberados, dependendo do vírus. Duração total do ciclo - de 8 a
36 horas
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A maneira mais fácil de entender como os vírus se replicam é estudar os ciclos de vida dos vírus.
chamados bacteriófagos. Os bacteriófagos se replicam por meio de um ciclo lítico ou um ciclo lisogênico.
A diferença entre esses dois ciclos é que a célula morre no final do ciclo lítico e permanece
vivo no ciclo lisogênico.
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Ciclo Lítico
Cultivo de vírus
Os vírus são parasitas intracelulares obrigatórios, portanto, dependem do hospedeiro para sua sobrevivência. Eles
não podem ser cultivados em meios de cultura não vivos ou apenas em placas de ágar, eles devem requerer vivos
células para apoiar sua replicação.
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2. Fazer pesquisa sobre a estrutura viral, replicação, genética e efeitos na célula hospedeira.
3. Preparar vírus para a produção de vacinas.
Inoculação Animal
2. Inoculação em ovo embrionado
3. Cultura de Células
1. Inoculação Animal
Vírus que não são cultivados em ovos embrionados e cultura de tecido são cultivados
em animais de laboratório como camundongos, porquinhos-da-índia, hamsters, coelhos e primatas são
usado.
The selected animals should be healthy and free from any communicable diseases.
Camundongos mamando (com menos de 48 horas de idade) são os mais comumente usados.
Ratos de leite são suscetíveis ao togavírus e aos vírus coxsackie, que são inoculados.
por via intracerebral e intranasal.
Os vírus também podem ser inoculados por via intraperitoneal e subcutânea.
Após a inoculação, o vírus se multiplica no hospedeiro e desenvolve a doença. Os animais são
observado para sintomas de doença e morte.
Então o vírus é isolado e purificado a partir do tecido desses animais.
A inoculação viva foi usada pela primeira vez em voluntários humanos para o estudo da febre amarela
vírus.
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2. Inoculação em ovo embrionado
Good Pasture em 1931 foi o primeiro a usar o ovo fertilizado de galinha para o cultivo de
vírus.
O processo de cultivo de vírus em ovos embrionados depende do tipo de ovo
que é usado.
Os vírus são inoculados em embriões de galinha com 7 a 12 dias de idade.
Para a inoculação, os ovos são primeiro preparados para cultivo, a superfície da casca é primeiro
desinfetado com iodo e penetrado com uma pequena broca estéril.
Após a inoculação, a abertura é selada com gelatina ou parafina e incubada a 36°C
por 2-3 dias.
Após a incubação, o ovo é quebrado e o vírus é isolado do tecido do ovo.
O crescimento e a multiplicação viral no embrião do ovo são indicados pela morte do
embrião, por dano celular do embrião, ou pela formação de pústulas ou lesões típicas em
as membranas do ovo
Os vírus podem ser cultivados em várias partes do ovo, como a membrana corioalantóica,
cavidade alantoica, saco amniótico e saco vitelínico.
Após a incubação e incubação, lesões visíveis chamadas pocks são observadas, que são
área cinza branca em CAM transparente.
O vírus Herpes simplex também é cultivado.
Um vírus único causa uma única pústula
Este método é adequado para estudos de placas.
Cavidade alantoica:
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A inoculação é principalmente realizada para a produção da vacina contra o vírus da influenza, febre amarela,
rábica.
A maioria dos vírus aviários pode ser isolada usando este método.
3. Amniotic sac:
1. O local de inoculação varia com diferentes vírus. Ou seja, cada vírus tem
diferentes locais para seu crescimento e replicação.
2. Cultura Celular (Cultura de Tecidos)
Nos últimos anos, o uso de culturas de células animais in vitro como meio de crescimento para os vírus tem sido
substituiu o ovo embrionado. As células são cultivadas artificialmente em laboratório. As cultivadas
células animais agem como células bacterianas. Para iniciar a cultura celular, uma pequena fatia de tecido animal é
tratados com enzimas que separam cada célula. As células estão suspensas em uma solução de
pressão osmótica adequada, nutrientes e hormônios de crescimento que são necessários para a célula
crescimento. As células se aderem à superfície do vidro e formam uma camada que é coberta com
inoculação viral e esperou para que os virions se depositassem nas superfícies celulares. As células estão cobertas com um
camada fina de ágar para prevenir a propagação de virions e facilitar a infecção celular. Vírus
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inoculado na suspensão celular destrói o monolayer. O fenômeno é chamado de citopático
efeito que é detectado como as placas formadas pelos bacteriófagos. As placas são formadas em
as células infectadas que são detectadas por coloração com corantes específicos. Ex. Azul de Trypan.
vermelho neutro. que diferencia as células mortas das células vivas.
As células cultivadas obtidas do tecido fatiado são conhecidas como linhagens celulares primárias.
linhas celulares primárias começam a degenerar após algumas gerações.. Portanto, as linhas celulares diploides
podem ser estabelecidas a partir de embriões humanos. As linhagens celulares diploides podem ser mantidas por cerca de
100 gerações.
Existem três tipos de cultura de tecidos: cultura de órgãos, cultura de explantes e cultura de células.
As culturas de órgãos são feitas principalmente para parasitas altamente especializados de certos órgãos, por exemplo.
A cultura de células é o processo pelo qual as células são cultivadas em condições controladas.
As células são cultivadas in vitro em vidro ou em uma superfície de plástico tratada em um meio de crescimento adequado.
médio.
No início, o meio de crescimento, geralmente uma solução salina equilibrada contendo 13 aminoácidos,
açúcar, proteínas, sais, soro de bezerro, tampão, antibióticos e vermelho de fenol são tomados e o
o tecido ou célula hospedeira é inoculado.
Na incubação, a célula se divide e se espalha na superfície de vidro para formar uma confluição.
monocamada.
Eles são diplóides e contêm o mesmo número de cromossomos que as células parentais.
Eles podem ser subcultivados até 50 vezes por transferência serial após a senescência e
a linhagem celular está perdida.
Eles são usados para a isolamento de alguns vírus fastidiosos e produção de viral
vacinas.
Exemplos: Cepa de pulmão embrionário humano, cepa de célula de embrião de Rhesus
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3. Culturas heteroploides (linhas celulares contínuas):
1. Herpes Simples Vero Hep-2, diploide humano (HEK e HEL), âmnio humano
[Link] humano (HEL, HEK)
3. Fibroblastos diploides humanos CMV
[Link]írusHep2, HEK,
[Link]írus MK, BGM, LLC-MK2, diploide humano, Vero, Hep-2, Rhabdomiossarcoma
[Link] BMK, BGM, LLC-MK2, vero, hep-2
[Link], BGM, LLC-MK2, diploide humano, Rd
8. Influenza AMK, LLC-MK2, MDCK
9. Influenza BMK, LLC-MK2, MDCK
10. ParainfluenzaMK, LLC-MK2
[Link], LLC-MK2, HEK, Vero
[Link]-2, Vero
13.Vírus do rinovírus humano diploide (HEK, HEL)
[Link], HEK
[Link]éolaVero, RK13
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Cultivo de vírus de plantas e bacteriófagos
Existem alguns métodos de Cultivo de vírus de plantas, como culturas de tecidos vegetais, culturas
de células separadas, ou culturas de protoplastos, etc. vírus podem ser cultivados em plantas inteiras.
As folhas são inoculadas mecanicamente esfregando-se com uma mistura de vírus e um abrasivo.
Quando a parede celular é rompida pelo abrasivo, os vírus entram em contato direto com o plasma.
membrana e infectar as células hospedeiras expostas. Uma lesão necrótica localizada frequentemente se desenvolve devido a
a morte rápida das células na área infectada. Alguns vírus de plantas podem ser transmitidos apenas se um
a parte doente é enxertada em uma planta saudável.
Cultivo de bacteriófagos
Os bacteriófagos são cultivados em culturas de caldo ou ágar de organismos jovens e em crescimento ativo.
células bacterianas.
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