PCR comum, possuindo,entretanto, nucleotdeos radioativos e anlogos 2, 3-didesoxirribonucleotdeos fluorescentes de cada um deles.
A incorporao desses bloqueia o posterior crescimento da nova cadeia por no ter a hidroxila 3 terminal necessria para formar a ligao fosfodister seguinte, produzindo fragmentos de vrios comprimentos. O produto da PCR aplicado em um gel no interior de um capilar, e assim, a migrao do DNA acontece at passar pelo detector do equipamento. Um feixe de laser rastreia o gel, excitan A PCR (Polymerase Chain Reaction) uma tcnica que permite a rpida amplificao do genoma, por meio da cpia de milhes de vezes de pequenas quantidades de DNA, mesmo que degradado. A tcnica, criada em 1985, se destaca por ser um procedimento relativamente simples e fcil de realizar em laboratrios, gerando resultados satisfatrios em um curto espao de tempo, o que essencial em eventos como os desastres em massa, pois a identificao das vtimas um dos objetivos imediatos da autpsia mdico-legal.
Evoluo das tecnologias do DNA em laboratrios forenses frente desastres em massa
OLIVEIRA,N.C.L. & SANTOS,S.M.
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Universidade de Pernambuco 2Instituto de Criminalstica Professor Armando Samico
Introduo
Desastres em massa so eventos que resultam em um nmero elevado de vtimas, exigindo rapidez e qualidade nas anlises em identificao humana. Por essas exigncias, surgem tecnologias que procuram atingir cada vez mais a esse objetivo. Partindo desta questo e do pressuposto de que a anlise do DNA para identificao humana uma tcnica de qualidade superior s demais, o seguinte estudo mostra o desenvolvimento das tecnologias aplicadas ao estudo do DNA em eventos similares em comparao com o mtodo tradicional RFLP (Restriction Fragment Length Polymorphism). PCR A PCR (Polymerase Chain Reaction) uma tcnica que permite a rpida amplificao do genoma, por meio da cpia de milhes de vezes de pequenas quantidades de DNA, mesmo que degradado. A tcnica, criada em 1985, se destaca por ser um procedimento relativamente simples e fcil de realizar em laboratrios, gerando resultados satisfatrios em um curto espao de tempo, o que essencial em eventos como os desastres em massa, pois a identificao das vtimas um dos objetivos imediatos da autpsia mdico-legal.
Objetivos
Descrever a evoluo nas anlises do DNA humano para fins forenses em desastres em massa. PCR em tempo real Esta tecnologia possui os mesmos princpios da PCR convencional, mas requer sistemas pticos que captam a fluorescncia emitida no decorrer da reao e sua transmisso destes para um software de computador que permite a aquisio dos dados e anlise final da [Link] esta singularidade,permite aos laboratrios acurarem a quantidade necessria de DNA de amostras a ser utilizado nas anlises, por meio da quantificao do DNA humano total de uma amostra, alm de mostrar os nveis de degradao e a presena de inibidores da PCR,prevenindo reanlises desnecessrias em amostras degradadas.
Resultados e discusses
DNAmt As anlises de marcadores de DNA mitocondrial (DNA mt) revelam-se vantajosas, pois possuem um total aproximado de 500 a 2000 cpias,quando comparadas ao DNA nuclear,que possuem apenas [Link] contexto, o uso DNAmt torna-se til em desastres em massa,pois esta abundncia fornece uma maior resistncia a sua degradao, que freqente em eventos como [Link] herdado por via maternal,as relaes familiares com as linhagens pelos perfis obtidos so facilmente reconhecidas.
Concluso
Pelo que foi apresentado, verifica-se que houve um aumento significativo na sensibilidade e na velocidade nas tcnicas de anlise do DNA. A automao, que surgiu com o PCR, PCR em tempo-real e o seqenciamento permitiu uma maior padronizao e preciso dos resultados, melhorando significativamente a qualidade dos exames de DNA nos desastres em massa.
Sequenciamanto do DNA O sequenciamento de DNA um processo que determina a ordem dos nucleotdeos em uma amostra.A DNA polimerase utilizada para copiar uma determinada seqncia de um DNA unifilamentar, como em uma reao de PCR comum, possuindo,entretanto, nucleotdeos radioativos e anlogos 2, 3-didesoxirribonucleotdeos fluorescentes de cada um deles. A incorporao desses bloqueia o posterior crescimento da nova cadeia por no ter a hidroxila 3 terminal necessria para formar a ligao fosfodister seguinte, produzindo fragmentos de vrios comprimentos. O produto da PCR aplicado em um gel no interior de um capilar, e assim, a migrao do DNA acontece at passar pelo detector do equipamento. Um feixe de laser rastreia o gel, excitando os marcadores, que emitem luz em um comprimento de onda especfico, de acordo com o corante utilizado. A luz detectada e o padro do espectro analisado com ajuda de programas que permitem gerar as seqncias de DNA.
Referncias Bibliogrficas
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