PROF.
DAVI VERGARA
Duplicação
do DNA
BIOLOGIA BÁSICA
O processo de duplicação ocorre no núcleo das células eucarióticas e tem a participação
de enzimas e nucleotídeos. Já em células procarióticas, a duplicação do DNA ocorre no
citosol, sendo o modelo de replicação bacteriana o nosso referencial de estudo.
Análise simples e geral da replicação
A replicação do DNA é semi-conservativa: cada nova molécula de DNA é formada por
uma fita antiga (parental ou molde) e outra recém-sintetizada.
O DNA precisa ser desnaturado para o enfraquecimento das ligações de hidrogênio
entre as fitas. A helicase desliza sobre a cadeia nova abrindo a hélice à sua frente pelo
rompimento das ligações de hidrogênio. A DNA-polimerase adiciona novos
nucleotídeos a cada uma das fitas do DNA parental, e a nova fita é sintetizada.
Figura 1: Duplicação semiconservativa do DNA. Note que na duplicação um filamento da
molécula inicial é preservado, por isso se diz que a replicação do DNA é semiconservativa. As
fitas em azul correspondem à molécula de DNA parental, e as fitas vermelhas e rosas
correspondem às cadeias de DNA novas.
Modelos alternativos para a replicação
Matthew Meselvon e Franklin Stahl realizaram um experimento cultivando bactérias
[Link] com DNA marcado com isótopos do 15N e 14N, onde comprovaram a replicação
semiconservativa do DNA.
Figura 2: As três hipóteses da replicação do DNA.
A primeira replicação no meio 14N gerou um abanda híbrida de DNA (15N e 14N),
eliminando o modelo conservativo. A segunda replicação produziu bandas de DNA leve
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e DNA híbrido, resultado que refuta o modelo dispersivo e corrobora o modelo
conservativo.
Análise detalhada da replicação
A replicação de um DNA inicia em pontos especiais chamados de origens de replicação,
pequenas porções de DNA com sequências específicas de nucleotídeos. Enquanto o
cromossomo bacteriano (circular) possui apenas uma única origem de replicação, o
cromossomo eucariótico (linear) pode possuir centenas, ou mesmo milhares, de origens
de replicação.
Figura 3: origens de replicação em uma célula eucariótica.
Em cada extremidade da bolha de replicação está a forquilha de replicação, região em
forma de Y em que as fitas de DNA parental estão sendo desenroladas. As proteínas
helicase (desenrola e separa as fitas) e topoisomerase (alivia a tensão causada pelo
desenrolamento do DNA ) participam desse processo de desenrolamento.
A cadeia de nucleotídeos inicial produzida durante a síntese de DNA, na verdade, é uma
pequena porção de RNA, não de DNA. Essa cadeia de RNA, chamada de
oligonucleotpideo iniciador (primer), é sintetizada pela enzima primase.
Enzimas chamadas de DNA-polimerases catalizam a síntese do novo DNA pela adição
de nucleotídeos a uma cadeia preexistente. Os princípios gerais são os mesmos entre as
bactérias [Link] e os eucariotos.
Figura 4: Representação simplificada da fita-líder e da fita descontínua do DNA.
Esse modo de replicação do DNA, em que uma das cadeias é sintetizada continuamente
e a outra, descontinuamente, é chamado de síntese semidescontínua. Uma das fitas de
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DNA sintetizada por esse mecanismo é chamada de fita-líder ou contínua, onde apenas
um primer é necessário para a síntese dessa fita.
Figura 5: Um resumo da replicação do DNA em bactérias. Esse processo é bem semelhante em
células eucarióticas.
Para alongar a outra fita de DNA no sentido obrigatório 5´→3´, a DNA-poli III precisa atuar
sobre a outra fita-parental no sentido contrário ao da forquilha de replicação. A fota de
DNA alongada nessa direção é chamada de fita retardada ou descontínua, em uma série
de fragmentos chamados de fragmentos de Okazaki. Nessa fita, vários primers serão
necessários devido aos fragmentos de Okazaki.
A DNA-ligase realizará a tarefa de unir os fragmentos de Okazaki para formar uma fita
contínua de DNA. Na figura 5 observa-se também a presença de dois tipos de DNA
polimerase, que apresentam as seguintes funções:
• DNA-pol I: remove os nucleotídeos de RNA do primer, a partir da sua extremidade
5´, e os substitui por nucleotídeos de DNA;
• DNA-pol III: sintetiza uma nova fita de DNA pela adição de nucleotídeos a um
primer de RNA, ou a uma cadeia de DNA preexistente
Exercícios
1. (OBB 2006 caderno 1) Um pedaço reduzido de a) TCGATCGAAGGG
DNA isolado a partir de espigas de milho b) UGCUUGCUUCCC
apresenta a seguinte sequência: c) UCGAUCGAAGGG
d) AGCTAGCTTCCC
5ʹ TCGATCGAAGGG-3ʹ e) AGCUAGCUUGGG
Qual das alternativas abaixo representa a 2. (UFRGS 2017) Observe a figura abaixo, que
sequência do RNAm que será transcrito a partir ilustra os diferentes modelos propostos para a
da fita complementar a acima representada? replicação do DNA.
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4. (UFRGS 210) A Leia o quadrinho abaixo.
O experimento de Meselson e Stahl, realizado
em 1957, comprovou que o modelo correto para
a replicação do DNA é o
Adaptado de: <[Link] Acesso em: 8
jan. 2006.
a) I, porque a dupla-hélice original não contribui
com a nova dupla-hélice. Considere o enunciado abaixo, referente ao
b) I, porque, na replicação dispersiva, a significado da resposta de Mafalda, e as três
densidade do novo DNA é a metade da propostas para completá-lo.
densidade do DNA original.
c) II, porque a dupla-hélice original é A expressão direção 5’ -> 3’ refere-se
preservada, e uma nova molécula é gerada.
d) III, porque cada nova molécula de DNA 1 – à ligação entre fosfato e açúcar no processo
contém uma fita nova e uma antiga completas. de replicação do DNA.
e) III, porque, na replicação semiconservativa, 2 – à atividade da enzima RNA polimerase no
uma das fitas do DNA original é degradada. processo de transcrição do RNA.
3 – à união entre os aminoácidos no processo de
3. (UFRGS 2013) Sabe-se que a replicação do tradução das proteínas.
DNA é semiconservativa. Com base nesse Quais propostas estão corretas?
mecanismo de replicação, assinale com V
(verdadeiro) ou F (falso) as afirmações abaixo. (A) Apenas 1.
( ) O DNA original atua como molde, e cada (B) Apenas 2.
novo DNA possui uma fita antiga e outra nova. (C) Apenas 3.
( ) Os quatro ribonucleosídeos trifosfatados, (D) Apenas 1 e 2.
dATP, dGTP, dCTP e dUTP, devem estar (E) 1, 2 e 3.
presentes.
( ) O DNA deve ser desnaturado (desenrolado) 5. (OBB 2014 2ª fase) Entre os biólogos, há um
para tornar-se acessível ao pareamento das conceito molecular clássico de que um gene é
novas bases. um segmento de DNA que codifica um produto
( ) A enzima DNA polimerase adiciona funcional. Em uma célula eucariota, diferentes
nucleotídeos novos de acordo com o molde de elementos presentes no DNA podem estar
DNA. incluídos nessa definição clássica e, portanto,
A sequência correta de preenchimento dos um gene é uma sequência de DNA que inclui os:
parênteses, de cima para baixo, é
a) éxons e os íntrons.
(A) V – V – F – F. b) éxons, regiões reguladoras não codificantes
(B) F – V – V – V. e regiões intergênicas.
(C) V – F – V – V. c) éxons, íntrons e regiões reguladoras não
(D) F – V – F – F. codificantes.
(E) F – F – F – V. d) éxons e regiões reguladoras não codificantes
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6. (OBB 2015 2ª fase) A enzima que catalisa a c) DNA glicosilases, endonucleases;
replicação semiconservativa é a DNA d) DNA ligase, DNA polimerase;
polimerase e) DNA glicosilases, DNA polimerase.
a) I 10. (OBB 2007 2ª fase) Não é correto afirmar
b) II que a região codificante de um gen é:
c) III
d) IV a) antecedida por uma região promotora;
e) V b) sempre transcrita;
c) codifica a proteína relativa a este gen;
7. (OBB 2013 2ª fase) Marque a opção abaixo que d) corresponde aos nucleotídeos que serão
contém uma enzima que NÃO participa do transcritos e traduzidos;
processo de replicação do DNA: e) nenhuma das respostas anteriores
a) polimerase 11. (OBB 2017 2ª fase) A figura abaixo mostra
b) helicase possíveis origens de uma replicação:
c) ligase
d) topoisomerase
e) replicase
8. (OBB 2011 2ª fase) O material genético, na
maioria dos seres vivos, é a molécula de Ácido
Desoxirribonucléico (ADN). Essa molécula
possui a capacidade de ser replicada, mantendo
as informações contidas em suas sequências de
bases nitrogenadas. A respeito da replicação do Tradução: template – molde. Em qual ou quais
ADN, marque a alternativa correta: dos locais da fita de DNA o primer 5'-GUUCC-3'
conseguiria se ligar para iniciar esta replicação?
a) A molécula de ADN possui a capacidade de
autoduplicação, pois apenas moléculas de ADN a) apenas em B
participam desse processo. b) B e D
b) Numa célula eucariótica, a replicação do ADN c) A e C
pode ocorrer dentro de organelas. d) B e C
c) Em cada bolha de replicação encontramos o e) apenas em A
complexo de replicação, que é constituído de
ARNm, ARNt e ARNr. 12. (OBB 2008 2ª fase) A respeito da replicação
d) A energia necessária para a replicação do do DNA se pode afirmar que:
ADN é oriunda, por exemplo, das moléculas de
ATP. a) é bidirecional e só envolve enzimas DNA
e) Moléculas de ARN nunca podem sofrer polimerases e DNA ligases.
replicação. b) as cadeias complementares são sintetizadas
de modo contínuo.
9. (OBB 2006 caderno 1) O reparo de DNA c) as cadeias complementares são construídas
envolve três passos e três grupos de enzimas com a utilização de nucleosídeos trifosfatados.
distintos: - Reconhecimento e remoção de d) é unidirecional e envolve outras enzimas além
porções mutadas do DNA por enzimas das polimerases e das ligases.
nucleases de reparo - Nova síntese da região e) as DNA polimerases só adicionam
cortada - Ligação com a cadeia remanescente. nucleotídeos às cadeias complementares.
As duas últimas funções supracitadas são
realizadas respectivamente por: 13. (OBB 2008 2ª fase) Fragmentos de Okasaki
podem ser encontrados na seguinte região da
a) DNA glicolases, DNA ligase; célula eucariota:
b) DNA polimerase, DNA ligase;
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a) núcleo. d) utilizar os iniciadores 5’GGCGAGTGAG 3’ e
b) hialoplasma. 5’TTCAGAGATC 3’.
c) lisossomos. e) utilizar os iniciadores 5’GGCGAGTGAG 3’ e
d) peroxissomos. 5’CTAGAGACTT 3’.
e) complexo golgiense
15. (OBB 2006 caderno 1) A Uma molécula de
14. (OBB 2008 2ª fase) Uma das fitas de uma DNA sofreu duas mudanças espontâneas na sua
molécula de DNA está apresentada: estrutura. Primeiramente ela sofreu (I).........., que
resultou da deformação térmica das ligações N-
5’ GGCGAGTGAGTCAGAACAGAGAGATCTCTGAA glicosídicas da adenina e guanina com a
desoxirribose, e (II)......., que converteu a
Considere que iniciadores de 10 nucleotídeos citosina em uracila. As alterações citadas no
funcionem para esta reação de replicação trecho acima são respectivamente:
hipotética. Para replicação da região sublinhada
é correto: a) depurinação e deaminação;
b) deaminação e exclusão de nucleotídeo;
a) utilizar os iniciadores 5’GGCGAGTGAG 3’ e c) desnaturação e deaminação;
5’GATCTCTGAA 3’. d) metilação e adenilação;
b) utilizar os iniciadores 5’CTCACTCGCC 3’ e e) desnaturação e adenilação.
5’GATCTCTGAA 3’.
c) utilizar os iniciadores 5’CCGCTCACTC 3’ e
5’CTAGAGACTT 3’.
Gabarito
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15
D D C D C C E B B B D C A D E
Referências
1. Amabis, José Mariano; Martho, Glberto Rodrigues. Biologia. – 2. Ed. – São Paulo:
Moderna, 2004.
2. Reece, Jane; Urry, Lisa..[et al]. Biologia de Campbell. – 10 Ed. – Porto Alegre: Artmed,
2015.
3. Poltronieri, Aldo César. Citologia – Biologia. Sistema de Ensino COC.
4. Figuras: Davi Fernandes Peralvo Vergara
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