EXPLIQUE COMO SÃO FEITAS AS DILUIÇÕES SERIADAS PARA PREPARO DE
AMOSTRAS
A diluição é feita de forma seriada, série de diluições simples que amplifica o fator de
diluição, pegar uma amostra inicial, preparar, tirar 1 ml, passar para um tubo que tem 9
ml de solução diluente, e assim sucessivamente. Sempre 1ml em 9ml de outro tubo.
Serve para chegar em uma placa contável de colônias para saber quantas Unidades
Formadoras de Colônias (UFC) por ml tem no produto, sabendo se está dentro ou fora
do plano de amostragem.
O QUE SÃO PLANOS DE AMOSTRAGEM DE 2 E 3 CLASSES?
Plano de amostragem de 2 classes: classifica o lote analisado em 2 categorias,:
“Qualidade Aceitá vel” ou “Qualidade Inaceitá vel”, considerando se o resultado está
acima ou abaixo do limite microbioló gico estabelecido
Plano de amostragem de 3 classes: com base em um limite microbioló gico "m" e um
limite microbioló gico "M", classifica o lote analisado em trê s categorias: Qualidade
aceitável (m), Qualidade intermediária (c), Qualidade inaceitável (M).
EXPLIQUE O QUE É N, C, M MINÚSCULO E M MAIÚSCULO.
N - número de amostras analisadas
C - número de amostras aceitas entre m e M
m - limite inferior
M- limite máximo
QUAL A DIFERENÇA ENTRE OS MÉTODOS POUR PLATE E SPREAD PLATE?
Pour plate- inoculação em profundidade; pode ser usado para quantificar amplo
volume de bacté rias (1 mL ou mais) poré m alguns microrganismos nã o resistem a
temperatura do vertido e nã o se desenvolvem bem (fungos).
Inoculaçã o da amostra no fundo da placa de Petri (vazia) e cobertura com volume de
á gar liquefeito (aquecido) seguido de homogenizaçã o da amostra com o meio de
cultura
Spread plate - inoculação em superfície; o volume inoculado é limitado à capacidade de
absorçã o de líquido pelo meio de cultura, que nã o permite a inoculaçã o de mais do que
0,5mL por placa
Inoculaçã o da amostra sobre o meio de cultura só lido na placa de Petri (vazia) e
espalhamento com alça de Drigalski esterilizada
QUAL OBJETIVO DA CONTAGEM CBHAM?
Mé todos quantitativo de avaliaçã o da quantidade total de microrganismos
heterotró ficos, mesó filos e aeró bios de uma amostra.
Importância: Aná lise de qualidade: maté rias primas, ingredientes, manipulador,
utensílios e produto; Aná lise da validade comercial do produto: início da deterioraçã o
(valor acima dos limites).
QUAL MEIO DE CULTURA USADO PARA CONTAGEM DE BOLORES E
LEVEDURA E QUAL TEMPERATURA DE INCUBAÇÃO?
— Agar batata dextrose
•agar com pH acidificado (3,5) e usa antimicrobiano (cloronfemicol)
•temperatura entre 20-25°C (quadro de revisão) 25°-30°C (slide dela)
QUAL A DIFERENÇA ENTRE COLIFORMES TOTAIS E COLIFORMES
TERMOTOLERANTES?
ambos são conjunto de gram negativos que são capazes de
fermentar a lactose produzindo compostos ácidos e gás.
a diferença está na temperatura:
totais: 35°-37°C
termotolerantes: 45°C
EXPLIQUE O PRINCÍPIO DE TUBOS MÚLTIPLOS NA COLIMETRIA E AS
ETAPAS PARA DETERMINAÇÃO DE COLIFORMES TOTAIS E COLIFORMES
TERMOTOLERANTES:
tubos múltiplos: dividido em fase presuntiva e fase
confirmativa:
fase presuntiva: envolve homogeneização e transferência da
amostra para tubos de ensaio ( 9 ou 15 ao todo) com tubos de
Durhan invertidos no fundo para coleta de gás
e o meio de cultura apropriado (caldo lauril triptose)
fase confirmativa: se faz o repique dos tubos presuntivos
positivos para tubos com caldo verde brilhante e tubos de
Durhan invertidos.
Após incubação a 35°C por 24-48 horas, identificam-se os
positivos pelos sinais de crescimento, como a produção de gás
nos tubos de Durhan.
ETAPAS:
Teste Presuntivo: Caldo LST ——> tubos múltiplos
Teste Confirmativo: Caldo VBBL (totais) / EC
(termotolerantes) —-> tubos múltiplos.
Teste Completo: Tubos + —-> Ágar EMB —-> Ágar
inclinado —-> coloração de Gram > Prova bioquímica (E.
coli)
QUAL MEIO DE CULTURA E PROVAS BIOQUÍMICAS
UTILIZADOS PARA DETERMINAÇÃO DE
ESTAFILOCOCOS COAGULASE POSITIVO?
Agar Baird Parker - colônias pretas com halo claro
Provas bioquímicas:
Catalase +: capacidade de quebrar peróxido de hidrogênio
(H2O2)
Coagulase + : teste verifica a capacidade de coagular soro
sanguíneo.
QUAL EFEITO DA TOXINA ESTAFILOCÓCICA?
hemolisinas: hemólise
enterotoxinas TERMORRESISTENTES (ação em 2 a 4h)
- diarreias, vômito, hipotermia
Alimentos associados: lácteos, carne, aves, produtos
processados e itens de panificação.
QUAL MEIO DE CULTURA E PROVAS BIOQUÍMICAS
UTILIZADOS PARA DETERMINAÇÃO DE
SALMONELLA SPP?
QUAL MEIO DE CONTAMINAÇÃO PRINCIPAL COM
SALMONELLA?
contaminação feco-oral - ovo e maionese.
pré enriquecimento(ATP) —>enriquecimento seletivo (
rappa port. vassileadis) —> agar (verde verde brilhante e
ágar macConkey) —-> prova bioquímica LIA - TSI
QUAL MEIO DE CULTURA E PROVAS BIOQUÍMICAS
UTILIZADOS PARA DETERMINAÇÃO DE BACILLUS
CEREUS?
Agar MYP, ágar nutriente inclinado.
testes bioquímicos: prova da hidrólise da gelatina - não
solidifica
prova do acetil metil carbinol - voges proskauer - mesmo
de coliformes - positivo.
QUAIS EFEITOS DAS TOXINAS DE BACILLUS
CEREUS?
Quadro gastrointestinal com ausência de febre.
toxina emética - náusea e vômito
toxina diarreica - cólica e diarreia aquosa
QUAL MEIO DE CULTURA E CARACTERÍSTICA DE
INCUBAÇÃO PARA DETERMINAÇÃO DE
CLOSTRÍDEOS SULFITO REDUTORES?
Ágar TSC, incubação em jarra de anaerobiose
QUAIS ESPÉCIES E EFEITOS DAS TOXINAS DE
CLOSTRÍDEOS REDUTORES?
C tetani- bloqueia liberação de transmissores inibitórios
C botulinum- bloqueia liberação de acetilcolina
C perfringens- gangrena - lecitinase - intoxicação alimentar -
super antígeno