Análise da Atividade da Urease

Este documento descreve um método para determinar se farelo de soja recebeu processamento térmico suficiente para inativar fatores antinutricionais. Ele mede a atividade da enzima urease, que é destruída pelo calor assim como os fatores antinutricionais. Amostras de farelo são incubadas com soluções de uréia e fosfato, e a diferença no pH indica a atividade da urease. Um valor padrão de até 0,15 indica processamento térmico adequado.

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1.

Definição

Esta análise determina se o farelo no seu processo de fabricação recebeu

processamento térmico suficiente para inativar os fatores antinutricionais presentes
no grão de soja. Sua metodologia consiste em determinar a redução da atividade da
enzima urease presente no grão de soja. Existe uma correlação direta entre os fatores
antinutricionais e a urease; ambos são termolábeis, ou seja, destruídos pelo calor.
Portanto com a inativação da enzima urease teoricamente os fatores antinutricionais
estariam destruídos. Na análise da atividade ureática é utilizada uma solução padrão
de fosfato e uma solução padrão de uréia. No caso de uma subtostasgem do produto a
enzima urease estará ativa quebrando a molécula de uréia formando amônia dando
um caráter alcalino à solução e desta maneira variando o pH. Quando a enzima está
inativada esta reação não ocorre e a variação do pH é mínima.

1. Material e Reagentes

- balança analítica

- suporte de pesagem

- tubo teste com tampa

- banho-maria

- béquer

- solução padrão de fosfato 0,005 M e pH 7,0

- solução padrão de ureia pH 7,0

- solução de hidróxido de sódio 0,1 N

- solução de ácido clorídrico 0,01 N

2. Procedimento

- Pesar 0,2 ± 0,002 g de amostra e transferir para o tubo teste

- Adicionar 10 mL de solução padrão de uréia pH 7,0

- Em outro tubo preparar a mesma quantidade de amostra adicionando a solução
padrão de fosfato 0,005 M e pH 7,0 com intervalo máximo de 5 minutos entre a
preparação de uma solução e a outra