FACULDADE DE MEDICINA
DEPARTAMENTO DE BIOQUÍMICA
BIOQUÍMICA ESTRUTURAL
ENZIMAS Armando Filipe
SUMÁRIO
• INTRODUÇÃO
• IMPORTÂNCIA DAS ENZIMAS
• CONCEITOS IMPORTANTES
• PROPRIEDADES
• COMPOSIÇÃO QUÍMICA
• MECANISMO DE AÇÃO
• CLASSIFICAÇÃO/NOMECLATURA
• FACTORES QUE INFLUENCIAM A ACTIVIDADE ENZIMÁTICA
PRÉ TESTE
• O QUE ENTENDE POR HOLOENZIMA?
• QUE NOÇÃO TEM SOBRE INIBIDOR REVERSÍVEL?
• ALGUMAS ESTRATÉGIAS DE REGULAÇÃO DAS ENZIMAS
INTRODUÇÃO
• Duas condições fundamentais para haver vida
• A capacidade do organismo em se autorreplicar
• A capacidade de catalisar reações químicas com surpreendente
eficiência e selectividade
O2
Sacarose CO2 e H2O
Saco de açúcar armazenado durante Sacarose energia em
anos segundos
processo lento (favorável)
catálise
(tempo útil)
OMP descarboxilase: promove a descarboxilação da orotidina (se espontaneamente,
levaria 78 milhões de anos
• CATÁLISE
• CATALIZADOR
• São maioritariamente proteínas, e como tal, produzidas sob controlo do DNA
• Com as enzimas, as células executam em milésimos de segundos a síntese de
moléculas que in victro , sem enzimas levariam semanas para serem realizadas
• Poder catalítico extraordinário (maior do que os catalisadores sintéticos)
• Alto rendimento
• Alto grau de especificidade
• São os efetores da informação genética contida no DNA
• Actuam à temperatura do organismo e limites definidos de pH
• Área medica (doenças; diagnóstico/prognóstico; tratamento)
• Por serem catalisadores eficientes, são utilizadas para síntese in victro
em laboratório experimental na produção industrial (engenharia química,
de alimentos e agricultura)
CONCEITOS IMPORTANTES
• Enzimas: catalisadores biológicos, viabilizam a actividade celular,
quebrando ou juntando moléculas para formar novos compostos
• Com excepção de um pequeno grupo de moléculas de RNA (Ribozimas),
que têm actividade catalítica, as enzimas são proteínas
PROPRIEDADES
• Actividade catalítica: depende da integridade da sua conformação
proteica nativa (alta eficiência, grau de especificidade, regulação)
• Quando desnaturada ou dissociada em subunidades a actividade
catalítica é destruída
• Quando fraccionada em aa constituintes - actividade catalítica é sempre
destruída
• As estruturas proteicas primária, secundária, terciária e quaternária são
essenciais para a actividade catalítica
COMPOSIÇÃO QUÍMICA
• APOENZIMA OU APOPROTEÍNA: componente proteico da enzima
• COFATOR:
• Iões metálicos: Fe2+, Mg2+, Mn2+, Zn2+
• Moléculas orgânicas não proteicas: coenzimas (carregadores
transitórios de grupos funcionais específicos, derivados de nutrientes
orgânicos)
• GRUPO PROSTÉTICO: enzima ligada covalentemente ao cofator (coenzima
ou iões inorgânicos)
• HOLOENZIMA: enzima completa, catalíticamente ativa, ligada à sua
coenzima e/ou ião metálico
ENZIMAS – ESTRUTURA
Estrutura Holoenzima
Enzimática
Proteína Cofator
Ribozimas
Apoenzima ou Pode ser:
Apoproteína • íon inorgânico
RNA • molécula orgânica
Coenzima
Se covalente
Grupo Prostético
Fig. 5.6
(funcional – ativa)
• Transportadoras de hidrogênio
• Transportadoras de grupos químicos
Característica Enzimas Catalisadores Químicos
Especificidade ao substrato alta baixa
Sensibilidade à T e pH alta baixa
Custo de obtenção (isolamento e purificação) alto moderado
Formação de subprodutos baixa alta
Atividade Catalítica (temperatura ambiente) alta baixa
sim não
Presença de cofatores
LOCAL ONDE ATUAM AS ENZIMAS
• Enzimas intracelulares: no citosol e/ou associadas a organoides
• Unilioculares: encontram-se em um único local celular
• Biloculares: estão presentes em dois lugares diferentes
• Exemplos:
• Uniloculares: lactato desidrogenase: citosol
• Biloculares: GOT; malato desidrogenase: citosol e mitocôndrias
• Padrão enzimático: distribuição e conteúdo das enzimas nos tecidos ou
órgãos
• Endoenzimas: enzimas intracelulares, atuam dentro das células que à
produzem
• Exoenzimas: extracelulares, são sintetizadas na célula, mas atravessam a
membrana cellr para actuar no espaço peri plasmático ou nas imediações
da célula
MECANISMO DE ACÇÃO
Não são consumidos na reação
Catalase
H2O2 H2 O + O2
E+S E+P
Atuam em pequenas concentrações
decompõe
1 molécula de Catalase 5 000 000 de moléculas de
H2O2
pH = 6,8 em 1 min
Número de renovação = n° de moléculas de substrato convertidas em produto
por uma única molécula de enzima em uma dada unidade de tempo.
Não alteram o estado de equilíbrio
•Abaixam a energia de ativação;
Energia Energia de ativação sem enzima
Energia de ativação com enzima
Diferença entre S
a energia livre P
de S e P
Caminho da Reação
ACÇÃO ENZIMÁTICA
• A molécula da enzima possui um ou mais centros activos (sítio activo ou de
ligação)
E+S ES P+E
Substrato se liga ao
SÍTIO ATIVO
da enzima
MODELOS DE LIGAÇÃO ENZIMA-SUBSTRATO
Modelo Chave-fechadura Emil Fischer (1894)
Modelo do Encaixe Induzido
Chave-fechadura Encaixe Induzido
HEXOKINASE
ENCAIXE INDUZIDO
NOMENCLATURA E CLASSIFICAÇÃO
• Nome usual: utiliza nomes de enzimas consagrados pelo uso, como por
exemplo: tripsina, pepsina, ptialina.
• Nome recomendado: utilizado no dia a dia, utiliza o sufixo "ase" para
caracterizar a enzima; geralmente menciona-se o substrato, ou seja, a
molécula na qual a enzima exerce sua ação catalítica.
- Urease : catalisa a hidrólise da uréia em amônia e CO2;
- Arginase : catalisa a hidrólise da arginina em ornitina e uréia;
- Fosfatase : catalisa a hidrólise de ésteres de fosfato.
• Classificação sistemática: sistema internacional de classificação das
enzimas (IUBMB)
• Nome sistemático: é mais complexo que os anteriores e dá informações
precisas sobre a função metabólica da enzima. Este sistema de
classificação divide as enzimas em seis classes principais, nas quais
estão inclusas subclasses de acordo com o tipo de reação catalisada.
• Classe 1. Óxido-redutases: reações de óxido-redução ou transferências de
elétrons (íons hidreto ou átomos de H). Exemplos: desidrogenases e
peroxidases.
• Classe 2. Transferases: reações de transferências de grupos funcionais entre as
moléculas. Exemplos: aminotransferases e quinases.
• Classe 3. Hidrolases: reações de hidrólise, em que ocorre a quebra de uma
molécula em moléculas menores com a participação da água. Exemplos:
amilase, pepsina e tripsina.
• Classe 4. Liases: reações em que pode ocorrer a adição de grupos a duplas
ligações ou a remoção de grupos deixando dupla ligação. Exemplo: fumarase.
• Classe 5. Isomerase: reações em que ocorrem a formação de isômeros.
Exemplo: epimerase.
• Classe 6. Ligase: reações de síntese em que ocorre a união de moléculas com
gasto de energia, geralmente, proveniente do ATP. Exemplo: sintetases.
• Código de 4 dígitos que caracteriza o tipo de reação catalisada
• EC (emzyme commission)
• 1º dígito – classe
• 2º dígito – subclasse
• 3º dígito – sub-subclasse
• 4º dígito – indica o substrato
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FATORES QUE ALTERAM A VELOCIDADE DAS REAÇÕES
ENZIMÁTICAS
• pH
• Temperatura
• Concentração das enzimas
• Concentração dos substratos
• Presença de inibidores
• pH óptimo
• Temperatura óptima: atividade máxima
• Temperatura máxima: enzima possui atividade constante
ESTRATÉGIAS DE REGULAÇÃO
DAS ENZIMAS
• Disponibilidade de enzima
• Disponibilidade de substrato e compartimentação
• Ativação proteolítica
• Regulação alostérica
• Modulação covalente reversível
BIBLIOGRAFIA
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PAULO: CENGAGE LEARNING, 2007. INDICADO PELOS PROFESSORES.
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