ARTIGO
Análise e comparação da
vitamina B12 sérica em
adeptos ao vegetarianismo e
indivíduos não vegetarianos
ANALYSIS AND COMPARISON OF SOME VITAMIN B12 SINGLE IN ADOPTOS TO
VEGETARIANISM AND INDIVIDUAL NON VEGETARIANS
RESUMO: Este estudo objetivou analisar a vitamina B12 sérica
entre indivíduos vegetarianos e não vegetarianos. Foi realizada uma
análise quantitativa da vitamina B12 em vegetarianos, considerando
as classificações e comparados os níveis plasmáticos da vitamina B12
com pessoas não vegetarianas. A dosagem sérica da vitamina B12
foi realizada em 65 amostras, obtendo-se os seguintes resultados:
56% dos vegetarianos apresentaram níveis abaixo dos valores de
referência, 69% dos veganos apresentaram níveis abaixo dos valores
de referência, quanto aos ovolactos, lactos e ovovegetarianos, 47%
apresentaram níveis baixos. Nos não vegetarianos, 52% apresentaram
níveis baixos da vitamina B12, 71% dos vegetarianos fazem o uso
de suplementação medicamentosa e dos não vegetarianos 9%. Pode-
se então concluir que a dosagem de vitamina B12 é importante para
todos os indivíduos independentemente de sua dieta, os indivíduos não
vegetarianos apresentaram níveis baixos da vitamina B12, semelhante Aline Ericka Lopoes de Barros 1
Guilherme Barbosa de Souza 2
aos resultados dos vegetarianos, entretanto, a maior parte da população
Kassia Juliett E. de Souza Rodrigues 3
vegetariana estudada faz o uso de suplementação medicamentosa. Neusa Mariana Costa Dias 4
Palavras-chave: Dosagem. Vitamina B12. Vegetarianos.
1,2,3,4
Faculdade União de Goyazes
ABSTRACT: This study aimed to analyze serum vitamin B12 be- Correspondente
tween vegetarian and non-vegetarian individuals. A quantitative nmmariana_@[Link]
analysis of vitamin B12 was performed on vegetarians, considering
Rodovia GO-060, 3184 - Laguna Park - Vila
the classifications and comparing plasma levels of vitamin B12 with Emanoel, Trindade - GO, 75380-000
non-vegetarian people. Serum vitamin B12 dosage was performed in
65 samples. The following results were obtained: 56% of vegetarians
presented levels below the reference values, 69% of vegans presented
Recebido: 19.11.2019 | Aprovado: 27.12.2019
levels below the reference values for
ovolact, lactose and ovovegetar-
Revista da Faculdade União Goyazes, Trindade (GO), v.13, n.2, jan./jul. 2019. ISSN 1982-5951, p. 181
ian. , 47% had low levels. In nonvegetarians, 52% had low levels of vitamin B12, 71% of vegetarians
use supplementation and nonvegetarians 9%. It can then be concluded that vitamin B12 dosage is im-
portant for all individuals regardless of their diet, non-vegetarian individuals had low levels of vitamin
B12, similar to the results of vegetarians, however, most of the vegetarian population studied does. use
of drug supplementation.
Keywords: Dosage. Vitamin B12. Vegetarians.
INTRODUÇÃO
Vegetariano é um termo que engloba uma variedade de restrições alimentares onde estas são adap-
tados para cada indivíduo em consonância com alimentos que compõem a dieta vegetariana. Os ve-
getarianos são indivíduos que por livre arbítrio decidem executar um hábito alimentar com restrições,
geralmente consomem vegetais, frutas, cereais, legumes e nozes, dispondo de uma alimentação livre
de alimentos de origem animal. Encontra-se explicações multifatoriais para adesão ao vegetarianismo,
como aspectos relacionados à saúde, ética, direitos dos animais, meio ambiente, fome (visto como um
problema mundial), economia e religião.1
O vegetariano é aquele que não consome nenhum tipo de carne, entretanto, dependendo da inclusão
de derivados de animais à dieta, o vegetariano pode ser classificado com denominações específicas
descritas no quadro abaixo.1
Quadro 1. Principais classificações dos vegetarianos de acordo com o padrão alimentar (inclusão de
alimentos derivados de animais).
Lactovegetariano Consomem leite e laticínios.
Ovolactovegetariano Incluem ovos, leite e laticínios em sua alimentação.
Ovovegetariano Incluem apenas ovos em sua alimentação
Vegetariano estrito Não consomem nenhum tipo de produto de origem animal.
Padrão mais restritivo que exclui qualquer produto de origem animal
Vegano para consumo, incluindo seu vestuário, produtos testados em animais,
entre outros.
Fonte: Adaptado de SOUZA et al.,2013 e MORALEJO, 2014
Todas essas classificações estão dentro dos padrões de uma dieta vegetariana, associada ao consumo
de grãos, cereais, frutas, hortaliças, legumes, nozes e sementes. Estes alimentos formam a base da dieta
vegetariana, entretanto, dentro desses padrões identifica-se variações relacionados a adição ou não de
derivados de animais. Salienta a necessidade de abordagem nutricional individual para avaliar com exa-
tidão a dieta de acordo com as necessidades individuais de micro e macro nutrientes. Nacionalmente ser
vegetariano significa não consumir carne animal, no Brasil há cerca de 15,2 milhões de pessoas que são
vegetarianos (as). As cidades com maiores números de vegetarianos são primariamente São Paulo com
792,120 mil pessoas, seguido do Rio de Janeiro com 632,00 mil e Fortaleza com 350,00 mil.1
Revista da Faculdade União Goyazes, Trindade (GO), v.13, n.2, jan./jul. 2019, p. 182
A dieta vegetariana equilibrada pode atender as necessidades nutricionais dos indivíduos preser-
vando uma vida saudável, porém a falta de conhecimento associado a hábitos dietéticos deficientes em
micronutrientes e macronutrientes predispõe problemas a saúde. Na presença de deficiência nutricional,
é importante estas serem supridas através de suplementos específicos.2
Evidências científicas demostram que a dieta vegetariana adequada pode ser benéfica, visto que
previne doenças, promovendo dessa forma à saúde. Identifica a relação ao menor risco de desenvolver
sobrepeso/obesidade, hipertensão arterial sistêmica, diabetes mellitus. Salienta que a dieta vegetariana
também pode causar risco à saúde devido a possibilidade de carências de micronutrientes essenciais.3
Um quantitativo médio de pessoas idealiza o alimento somente como satisfação de sua fome e não
como fonte de micronutrientes e macronutrientes essenciais para o desenvolvimento funcional do or-
ganismo. São os alimentos que nos fornecem substrato energético para os processos de crescimento,
desenvolvimento e homeostase de todo o organismo.4
A vitamina B12 é absorvida no intestino, e está absorção acontece por receptores presentes no íleo
que se ligam a uma glicoproteína chamada de fator intrínseco, após passar por processos de transporte
no organismo a vitamina B12 é armazenada no fígado, a deficiência da vitamina B12 pode ocorrer por
falta do fator intrínseco, deficiência alimentar, gastrectomia ou de origem idiopática.5
A vitamina B12 em nosso organismo é encontrada predominantemente no soro na forma de metilco-
balamina, e no citosol a adenosilcobalamina. Quando ingerimos produtos de origem animal, a digestão
destas proteínas libera a vitamina B12. A deficiência de vitamina B12 pode trazer várias complicações
ao indivíduo, apresentando-se de formas assintomáticas, ou sintomáticas com manifestações neurológi-
cas, hematológicas e clínicas, onde podem ser caracterizadas por diminuição da hemoglobina, anemia,
danos ao sistema nervoso central, e em alguns casos causa fraqueza entre outros sinais e sintomas.6
Para realizar uma avaliação nutricional, pode-se utilizar diversos métodos, onde este deve ser deci-
dido levado em conta o grupo a ser analisado, o tempo a ser gasto, se há recursos humanos capacitados
para o desenvolvimento destes métodos e o custo real. As dosagens bioquímicas e os exames clínicos
são exemplos de métodos para desenvolver uma avaliação nutricional, onde o método bioquímico visa
avaliar as carências nutricionais especificas ou distúrbios metabólicos e o exame clínico visa a avaliação
física do paciente.7
Estudos científicos demostram que uma alimentação baseada em vegetais com restrição de consumo
ou consumo restrito de alimentos de origem animal pode ser indicado para prevenir doenças crônicas
(cardiovasculopatias, hipertensão arterial sistêmica, diabetes mellitus, entre outras). Evidencia que in-
divíduos vegetarianos possuem uma disposição menor para desenvolver obesidade. As respostas para
estas evidências são explicadas pelo perfil da dieta do indivíduo vegetariano, que é baseada em consumo
de alimentos com baixo teor de gorduras e sódio, além de que o vegetariano tem uma maior ingesta de
fibras, grãos integrais, proteína de soja.3
O risco da dieta vegetariana está relacionado a deficiências de micronutrientes como proteínas, mi-
nerais (ferro, cálcio, zinco), ômega 3, e vitamina B12, o que pode desencadear alterações orgânicas e
desequilibrar a homeostasia corporal, contribuindo para o desenvolvimento de comorbidades por carên-
cias nutricionais.8
Esta pesquisa se justifica pela necessidade de discutir os benefícios e malefícios da dieta vegetariana,
impactando e orientado diretamente os indivíduos que aderem ao vegetarianismo com vistas a promover
saúde e prevenir doenças através da interpretação dos resultados que será obtido. A sociedade, empresas,
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mercado e até mesmo governantes podem-se beneficiar dos resultados e discussão deste trabalho para o
desenvolvimento de estratégias e políticas públicas que orientem a população sobre a dieta vegetariana.
MATERIAL E MÉTODOS
A quantidade de participantes da pesquisa está dentro do limite de 50 a 80 pessoas, esta quantidade
de participantes foi delimitada pela quantidade de teste disponíveis pelo kit accubind monobind. Foi
aplicado questionário com objetivos de avaliar condições de saúde, conhecimento em relação a vitamina
B12 e seus benefícios e malefícios e coleta sanguínea para realização de dosagem sérica de Vitamina
B12 com a metodologia Ensaio Imunoenzimático (ELISA).
População de estudo
Este projeto foi submetido ao comitê de Ética em pesquisa da Faculdade União de Goyazes da cida-
de de Trindade, Goiás, e foi aprovado pelo protocolo 47/20181. A coleta de dados e material biológico
ocorreu em uma Feira Vegetariana localizada na região metropolitana de Goiânia GO. Um total de 44
pessoas aceitaram participar da pesquisa e assinaram o termo de consentimento livre e esclarecido.
Sendo 12 não vegetarianos e 32 vegetarianos (17 ovolactovegetariano, 13 veganos,1 lactovegetariano e
1 ovovegetariano).
Com o intuito de aumentar a população de estudo no dia 19 de outubro de 2018 foi realizado a co-
leta de dados e material biológico de discentes e docentes em uma Instituição de Ensino, localizada em
Trindade-GO. Um total de 22 participantes aceitaram participar da pesquisa e assinaram o termo de
consentimento livre e esclarecido. Sendo 21 não vegetarianos e 1 ovolactovegetarino.
Obteve-se um total de 66 participantes, foi criado dois grupos distintos o grupo de vegetarianos e o
grupo de não vegetarianos, foi utilizado 66 questionários, a análise da vitamina B12 sérica foi realizada
em 65 amostras, sendo, 32 vegetarianas e 33 não vegetarianas, uma amostra foi excluída devido não
atender ao critérios de inclusão, por se tratar de uma amostra hemolisada.
Dosagem da vitamina B12
O estudo foi elaborado no Laboratório de Análises Clínicas da Faculdade União de Goyazes, no
segundo semestre de 2018, foi entregue aos voluntários da pesquisa os laudos com os resultados da do-
sagem sérica da vitamina B12 via correspondência sem nenhum custo aos participantes. A dosagem da
vitamina B12 foi realizada com o teste bioquímico ELISA. A finalidade do teste foi determinar quantita-
tivamente a concentração de Vitamina B12 em soro humano. O princípio do teste é misturar o anticorpo
biotinilado com o soro contendo o antígeno, gerando uma reação entre o antígeno e o anticorpo. A ativi-
dade enzimática da fração de anticorpo ligado é inversamente proporcional à concentração de antígeno
nativo. Ao utilizar várias referências de soro de diferentes concentrações de antígeno conhecidas, uma
curva dose-resposta pode ser construída a partir da qual a concentração de antígeno de uma amostra
desconhecido pode ser determinada.
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Reagentes
Evitar exposição excessiva à luz e ao calor. Após abertos, os reagentes são estáveis por sessenta (60)
dias, quando armazenados entre 2 e 8ºC.
• Calibradores de Vitamina B-12 (Padrões A – F). Albumina de soro humano de referência para Vi-
tamina B-12 nas concentrações de 0,0(A), 100(B), 200(C), 400(D), 1000(E), e 2000(F).
• Reagente Enzimático de Vitamina B-12. B-12 conjugada à enzima em solução proteica estabili-
zada.
• Reagente Biotina de Vitamina B-12. Conjugado anti-vitamina B-12 biotinilado IgG em solução
tamponada.
• Microplaca Revestida com Streptadivina. Microcavidades revestidas por streptavidina e acondi-
cionada em embalagem de alumínio contendo agente dessecante.
• Solução de Lavagem Concentrada. Surfactante em solução salina tamponada.
• Substrato. Tetrametilbenzidina e peróxido de hidrogênio (H2O2) em solução tamponada.
• Solução de Parada. Solução de ácido sulfúrico (H2SO4).
• Agente de Liberação. Solução contendo uma base forte (hidróxido de sódio) e cianeto de potássio.
• Agente Estabilizante. Solução de tris 2 carboxietilfosfina.
• Tampão Neutralizante. Solução contendo tampão que reduz o pH da extração da amostra.
Modo de preparo dos reagentes
• Solução de Lavagem
Foi Diluído o conteúdo do frasco da Solução de Lavagem Concentrada em 1.000 mL de água deio-
nizada.
• Solução agente de extração
Foi adicionado uma alíquota de agente estabilizante para preparar 1/40 de solução diluente (agente
estabilizante / agente de liberação). Foi preparado 4000μl, foi adicionado 100μl de agente estabilizador
para 3900μl de agente de liberação.
• Extração de Amostra e Calibradores
Foi dispensado 100μl de cada amostra e calibradores em tubos de ensaio de vidro individuais. Em
seguida foi pipetado 50μL da solução do agente de extração já antes preparada em cada tubo, em seguida
foi agitado no vortex por 3 vezes de 1-2 segundos, as amostras foram encubadas por 15 min em tempe-
ratura ambiente. Após os 15 min, foi dispensado 50μl de tampão neutralizante, agitado no vortex por 3
vezes de 1-2 segundos, para finalizar a extração.
• Procedimento do teste
1) Foi separada a quantidade necessária de microcavidades para cada Calibradores (Padrão), e amos-
tras de pacientes;
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2) Pipetou-se 50µ do agente de extração nos Calibradores, e amostras dos pacientes em suas respec-
tivas microcavidades;
3) Adicionou 50µL do Reagente Biotina de Vitamina B-12 em todas as microcavidades;
4) Agitou-se a microplaca gentilmente por 20 a 30 segundos manualmente em seguida a placa foi
coberta e incubada por 45 minutos em temperatura ambiente;
6) Adicionou-se 50 µL do Reagente Enzimático em todas as microcavidades;
7) Agitou-se a microplaca gentilmente por 20 a 30 segundos manualmente em seguida a placa foi
coberta e incubada por 30 minutos em temperatura ambiente;
8) O conteúdo das microcavidades foram descartadas por aspiração pela lavadora automática. Foi
adicionado 300 µL da Solução de Lavagem diluída em todas as microcavidades, foram repetidas 4 vezes
este passo, para um total de cinco 5 lavagens. Ao final da lavagem, bateu-se a microplaca por alguns
segundos sobre papel absorvente para garantir a sua completa secagem;
10) Adicionou-se 100 µL do Substrato em todas as microcavidades, em seguida a placa foi coberta e
incubada por 20 minutos em temperatura ambiente;
12) Adicionou-se 50µL da Solução de Parada em todas as microcavidades e homogeneizou-se a pla-
ca gentilmente por 15 a 20 segundos manualmente;
13) A leitura das placa foi realizada na Leitora de Microplacas automatizada, em 450 nm usando o
comprimento de onda de referência de 620-630 nm para minimizar as imperfeições da cavidade.
Resultados/curva padrão
Uma curva-padrão (Figura 1) foi usada para determinar a concentração de vitamina B-12 nas amos-
tras desconhecidas (pacientes), a absorbância de cada cavidade foi lida a 450 nm, na Leitora de Micro-
placas automatizada, usando o comprimento de onda de referência de 620-630 nm para minimizar as
imperfeições da cavidade. Os valores de referência considerados normais para uma população adulta se-
gundo a bula utilizada são: para adultos 200 a 835pg/mL, adultos maiores que 60 anos 110 a 800pg/mL.9
Figura 1. Curva-padrão com absorbâncias utilizadas para traçar resultados obtidos.
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RESULTADOS E DISCUSSÃO
Participaram desta pesquisa 66 pessoas dentre elas 33 vegetarianos segundo sua classificação, e 33
não vegetarianos. Sendo 68% (45) mulheres e 32% (21) homens, com faixa de idade entre 18 a 59 anos.
Quanto há alergias alimentares os resultados foram os mesmos, tanto, para o grupo de vegetarianos,
quanto, para o grupo de não vegetarianos 91% (30) de ambos os grupos não possui nenhum tipo de
alergia alimentar e 9% (3) possui algum tipo de alergia alimentar foram citados intolerância a lactose e
glúten, cafeína, carne suína, camarão e abacaxi.
Dos 33 vegetarianos 48% (16) já fizeram o exame laboratorial para dosagem da vitamina B12 em
alguma época da vida e dos 33 não vegetarianos apenas 19% (6) fizeram a dosagem. Em relação ao
conhecimento 91% (30) dos vegetarianos reconhecem os benefícios da vitamina B12 e 76% (25) sabem
sobre os sintomas da deficiência. Porém, 67% (22) dos não adeptos ao vegetarianismo conhecem os
benefícios desse micronutriente e 61% (20) conhecem os sintomas da deficiência, a vitamina B12 parti-
cipa de várias reações metabólicas no organismo e a sua deficiência pode causar inúmeros transtornos.6
Pessoas idosas e vegetarianos estritos podem ser considerados um grupo de risco, devido à má absor-
ção e pouca ingestão desta vitamina. No presente estudo foi demonstrado maior preocupação por parte
dos adeptos ao vegetarianismo, em reconhecer os malefícios e os benefícios da vitamina B12.
Quanto ao uso de suplementação medicamentosa, foi citado suplementos contendo complexo de vi-
taminas, dos vegetarianos 33% (11) fazem suplementação e dos não vegetarianos 10% (3) fazem suple-
mentação. Obtivemos o número total de 33 participantes vegetarianos, de acordo com as classificações,
dentro do contexto do vegetarianismo, foi criado dois subgrupos, veganos 13 participantes que não con-
somem nada de origem animal e os vegetarianos (ovolactos,lactos e ovovegetarianos) que consomem
algum tipo de derivado animal como ovos, leite, queijos entre outros que totalizam 20 participantes,
dentre estes 25% (5) fazem o uso de suplementação medicamentosa e dos 13 veganos 6 fazem o uso de
suplementação, o que corresponde a 46% dos veganos.
São considerados normais a taxa de vitamina B12 em pg/mL, para adultos entre 200-835 pg/mL, e
para adultos maiores que 60 anos valores entre 110-800pg/mL de acordo com a bula utilizada do Kit
Monobind Accubind. Segundo estudo de valores séricos da vitamina B12 menores que 200pg/mL são
considerados baixos.10
Um total de 11 pessoas tiveram um resultado laboratorial de 50 a 100pg/mL de vitamina B12, 24 pes-
soas resultados entre 101 a 199pg/mL e 30 pessoas resultados maiores que 200pg/mL. Destaca-se que
dos 11 indivíduos com resultados de 50 a 100pg/mL 8 não são vegetarianos, apresentaram uma média
de 76.75pg/ml de vitamina B12 no soro, sendo que os vegetarianos representam 3 pessoas neste grupo
com uma média de 78.66pg/mL de vitamina B12 no soro.
Observou-se que dos resultados abaixo dos valores de referência entre 50 a 100pg/mL o grupo de
não vegetarianos apresenta predominância com níveis baixos em relação ao vegetarianos, ambos os
grupos tem a média de vitamina B12 sérica similares, vários fatores podem influenciar na absorção da
vitamina B12 como gastrite, deficiência no fator intrínseco, alterações gastrointestinais, medicamentos,
entre outras. O que explicaria os níveis dos não vegetarianos abaixo dos valores normais, mesmo tendo
a disposição a vitamina B12 em sua alimentação diária, tendo em vista, que maior parte dos vegetarianos
fazem o uso de suplementação medicamentosa.11,12,13
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CONSIDERAÇÕES FINAIS
A dieta vegetariana proporciona uma vida mais saudável, se for aplicada de maneira adequada levan-
do em conta todos os aspectos da nutrição alimentar, e suprindo quando for necessária alguma carência
que a mesma traga.
A vitamina B12 objeto de estudo desta pesquisa, teve ênfase devido ser uma vitamina exclusivamen-
te de origem animal, tendo em vista que pessoas que não tem a ingesta de produtos derivados de animais
teriam baixa da vitamina B12, analisados os resultados nota-se que o grupo de vegetarianos, participante
desta pesquisa, tem o conhecimento sobre a vitamina B12, mesmo muitos apresentando o déficit da
vitamina B12, a maior parte se preocupa em manter os níveis séricos da vitamina B12 normais, através
de suplementação.
O grupo de não vegetarianos apresentou níveis baixos da vitamina B12, onde mesmo, não tendo uma
dieta restritiva, podendo obter a vitamina através da ingesta, tem níveis baixos semelhantes aos vege-
tarianos, somente a ingestão da vitamina B12, não significa que não haverá a déficit da vitamina B12,
podendo haver fatores que impedem a absorção da vitamina.
Entre os não vegetarianos 52% apresentaram níveis baixos da vitamina B12, entre os vegetarianos
56% apresentaram níveis baixos, tendo assim, uma similaridade entre os grupos, analisando os subgru-
pos dos vegetarianos os que consomem algum tipo de produto de origem animal (ovolactos, lactos e
ovovegetariano) 47% apresentaram níveis baixos e os veganos 69% apresentaram níveis baixos.
Os resultados obtidos pela pesquisa, foi significativo por apresentar níveis similares ao grupo de não
vegetarianos e vegetarianos, em meio aos vegetarianos o predomínio da suplementação.
Há necessidade de acompanhamento profissional nutricional para todos os indivíduos tanto vege-
tarianos como não vegetarianos. Considerando os aspectos da pesquisa, os exames laboratoriais da
dosagem da vitamina B12 sérica, é de suma importância, podendo ser um exame de rotina para ambos
os grupos, pois a deficiência da vitamina B12 pode causar anemia megaloblástica, danos neurológicos
entre outros.
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Tabela 1. Quantas pessoas já realizaram a dosagem da vitamina B12 e se conhecem os benefícios e a
deficiência da vitamina B12.
Já realizaram a dosagem da Conhece os benéficos da Conhece os sintomas da
vitamina B12 vitamina B12 deficiência da vitamina B12
16 (48%) sim 30 (91%) sim 25 (76%) sim
Vegetarianos
17 (52%) não 3 (9%) não 8 (24%) não
6 (19%) sim 22 (65%) sim 20 (59%) sim
Não vegetarianos
27 (81%) não 11 (35%) não 13 (41%) não
Tabela 2. Tempo de adesão ao vegetarianismo relacionado com os níveis da vitamina B12 e suplemen-
tação (complexo de vitaminas).
Níveis da vitamina B12 Uso de suplementação
Tempo de adesão ao
vegetarianismo <200pg/mL 200 a 835pg/mL Sim Não
<Que 1 ano ( 4 )67% ( 2 )33% ( 1 )17% ( 5 )83%
1 a 5 anos ( 10 )62.2% ( 6 )37.5% ( 5 )31% ( 11 )69%
6 a 10 anos ( 1 )50% ( 1 )50% ( 1 )33% ( 2 )67%
>Que 10 anos ( 3 ) 37.5% ( 5) 62.5% ( 3 )43% ( 4 )57%
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Figura 2. Uso de suplementação (complexo de vitaminas) entre vegetarianos e não vegetarianos.
Figura 3. Resultados em porcentagens de vegetarianos e não vegetarianos.
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