AULA DE MICROSCOPIA PROF ARLINDO COSTA

PARTES DO MICROSCPIO Mecnicas a) P: feito de ligas de metais pesados para impedir que o aparelho tombe. b) Estativo: haste ou suporte que se articula com o p, sustenta o tubo, a platina, o condensador, o aparelho e os mecanismos macromicromtricos. c) Platina ou mesa: de forma redonda ou retangular, fixa, mvel ou giratria no plano horizontal ou ento apresenta uma parte inferior fixa ao estativo e outra superior, deslizante. As platinas fixas geralmente compensam sua Imobilidade por meio de peas deslizantes, chamadas "cherriot". Entre as garras do ltimo se encaixa a lmina com o material a ser estudado: pode ser deslocado para frente, para trs, direita ou esquerda, sempre no mesmo plano, por meio de cremalheiras laterais. No centro h uma abertura para a passagem dos raios luminosos, coletados pelo espelho, e dirigidos pelo condensador e o diafragma sobre a preparao entre lmina e a lamnula, projetando da atravs do tubo e da ocular at a retina do observador. d) Tubo: no microscpio monocular o tubo representa um cilindro metlico, com um encaixe posterior, da preciso para sua adaptao a outro encaixe, porm de corte investido na cremalheira. e) Dispositivos macro e micromtrico : entre o tubo e o estativo h uma pea deslizante em sentido vertical, acionada por dois tipos de "botes" os "macromtricos" e "micro-mtricos". Com o mecanismo macromtrico obtm-se focalizao tica grosseira da pea a ser examinada, enquanto que, com o dispositivo micromtrico obtm-se deslocamentos do tubo at de dois milsimos de milmetro ou menos ainda, dando desta forma nitidez imagem. f) Revlver: colocado na extremidade inferior do tubo nos modelos mais antigos ou dos dispositivos macro e micro-mtricos nos instrumentos modernos de tubo bipartido. munido de 3 ou 4 vos circulares, providos de matrizes para roscas. Nestas matrizes se enroscam as 3 ou 4 objetivas, sempre na ordem de seu aumento progressivo. Basta, ento, durante os trabalhos microscpicos, fazer girar mecanismos de cmbio de objetivas ou revlver em um s sentido, para obter-se aumentos sucessivos ou vice-versa, j focalizados, pelo menos, macrometricamente. ticas a) Oculares: so encaixadas nas extremidades superiores do tubo. Podem ser retiradas e substitudas facilmente segundo a necessidade do momento. importante saber que as oculares ampliam apenas a imagem formada pela objetiva. No tornam mais ntidas as estruturas do objeto a ser estudado. Seria ilgico, portanto, empregarem-se nos trabalhos microscpicos objetivas de pouco aumento prprio e oculares de grande poder de ampliao. Tambm no se pode aconselhar o uso simultneo de objetivas e oculares de forte aumento. O campo visual seria pouco ntido nas estruturas das clulas. Por exemplo, se apresentariam apagadas, quase no haveria luminosidade e o campo tico seria mnimo. No estudo geral das clulas ou dos tecidos e no controle dos processos de colorao e diferenciao dos cortes so suficientes oculares com aumento prprio pequeno ou mdio. H, assim, satisfatria nitidez das estruturas, campo visual grande bem uniformemente iluminado e poupana de nossa vida. Na escolha das oculares para um microscpio h um princpio importante a observar: que as qualidades ticas das mesmas somente atingem seu grau mximo de aproveitamento quando esto combinadas com as objetivas certas.

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b) Objetivas: so sistemas ticos, construdos com 4 a 6 ou mais lentes superpostas. Alm de fornecerem uma imagem ampliada de um objeto qualquer, procuram corrigir tambm os defeitos cromticos dos raios luminosos e de esfericidade. c) Condensador com diafragma: o condensador est colocado por baixo da platina. Sua funo fornecer bastante luz. Para tanto provido de um sistema de lentes convergentes, que concentram e jogam o maior nmero de feixes luminosos pela lente frontal da objetiva. indispensvel quando se empregam grandes aumentos. O condensador, idealizado por Abee e aperfeioado cada vez mais, permite ao pesquisador obter a iluminao desejvel para cada caso. H condensadores para o "campo claro" e contrastes de fases para campo escuro. No campo claro a lente frontal geralmente "desvivel", o que permite iluminarem-se rapidamente grandes campos claros, quando os trabalhos so executados com aumentos pequenos. Todos os condensadores para o campo claro e contrastes de fases esto equipados com um diafragma do sistema ris, cuja abertura regulvel para perfeito ajuste a cada caso. Alm disso, h uma cremalheira, que permite o afastamento total do diafragma. Fecha-se o diafragma, quando se usa objetivas de pouco aumento, para eliminar os raios laterais. Abre-se o diafragma na medida em que se vo aumentando as ampliaes. d) Espelho: encaixado por baixo do condensador, num vo do p do microscpio. redondo e articula-se entre duas laterais. Uma de suas faces plana e a outra cncava. A primeira colhe e projeta os raios paralelos e divergentes e a segunda os convergentes. O espelho cncavo usado nas ampliaes pequenas; o plano, juntamente com o condensador, nas grandes e nas imerses. AUMENTO DE UM MICROSCPIO calculado atravs da multiplicao do aumento da ocular pelo aumento da objetiva. FOCALIZAO DE UM MICROSCPIO Objetivas e distncias focais a c) a) procurar a objetiva de menor aumento. b) acertar a iluminao do microscpio de acordo com objetiva a ser usada. olhando por fora da ocular, ir movendo o canho para baixo por meio do parafuso macromtrico at que a objetiva se aproxime o mais possvel da lmina sem tocar nela. olhando agora atravs da ocular, girar o parafuso macromtrico em sentido inverso (elevando o canho) at perceber o foco (enxergar alguma coisa). CUIDADOS COM O MICROSCPIO a) no deve ficar exposto luz ou ao calor. b) aps o uso limpar as objetivas com um papel prprio ou pano macio. c) para transportar o microscpio, segur-lo pelo estativo e pela base. d) s girar os parafusos macromtrico e micromtrico quando houver real necessidade. ROTEIRO PRTICO LMINA DE MUCOSA BUCAL Preparao da lmina a) usando-se um cotonete, retirar clulas da mucosa da face interna da bochecha. b) fazer um pequeno esfregao em uma lmina.

d) e) dar nitidez imagem com o parafuso micromtrico.

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c) colocar uma lamnula sobre o esfregao. d) corar com azul de metileno, colocando uma gota do corante.

e) no lado oposto da lamnula, encoste um pedao de papel de filtro para tirar o excesso de corante.

Prepare outra lmina pelo mesmo processo, utilizando o corante lugol. Focalizao da lmina Seguir as instrues descritas nos fundamentos tericos.

Resumindo: GENERALIDADES DE MICROSCOPIA O microscpio um instrumento que permite a observao de pequenos seres ou estruturas no perceptveis a olho nu: H vrios tipos de microscpio: Simples ou lupa, ampliao at 600 x; ptico ou composto, ampliao at 2000 x; Eletrnico, ampliao at 2.000.000 x; Protnico, ampliao at 1.000.000 x. O microscpio mais usado nos laboratrios o ptico. Ele consta, basicamente, de uma parte mecnica, uma parte ptica e um sistema de iluminao. DESCRIO DOS COMPONENTES MECNICOS P ou Base - Sustenta o aparelho, tem o formato de urna ferradura; Joelho - Ponto de articulao entre o p e o brao. Permite a inclinao do aparelho quando o observador trabalha sentado; Brao Sustenta a parte ptica. ponto de apoio para as mos, juntamente com o p, ao se transportar o aparelho; Parafusos: Macro e Micromtrico - Localizados no brao, permite ao serem movimentados deslocar e conseqentemente focar a estrutura em observao; O Macromtrico ou Cremalheira - o maior. Seus movimentos permitem focalizar em um primeiro momento a estrutura; Canho - Tubo ligado ao brao que abriga em suas extremidades as oculares e o revlver com as objetivas; Revlver - Estrutura situada na extremidade inferior do canho dotado de lentes objetivas; O revlver ao ser girado, alterna as objetivas; Platina ou Mesa - Superfcie plana sobre a qual colocada uma lmina de vidro com a estrutura a ser observada. Apresenta um orifcio central e duas presilhas

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de fixao. Em microscpios mais sofisticados existe um dispositivo-Charriot, que alm de fixar a lmina de vidro permite o deslocamento da mesa em vrias direes. DESCRIO DOS COMPONENTES PTICOS Oculares - Lentes (1 ou 2) situadas na extremidade superior do canho; Objetivas - Lentes (3 ou 4) de valores diferentes situadas no revlver; - Tanto as oculares como as objetivas apresentam nmeros correspondentes aos aumentos que proporcionam. A ampliao total de um microscpio calculada multiplicando-se o valor da ocular pelo da objetiva: AT = AocXAobj. DESCRIO DOS COMPONENTES DO SISTEMA DE ILUMINAO Espelho - Est localizado junto a base. Recebe e reflete para cima os raios luminosos. Pode ter uma face plana e outra cncava. Condensador - Recebe os raios luminosos do espelho e os concentra em direo ao orifcio da platina. Diafragma - Disco dotado de orifcio de diversos dimetros que permitem regular a quantidade de luz que se dirige ao preparado em observao. EXERCCIO 01) Relacione os componentes mecnicos do microscpio: 02) Relacione os componentes ticos do microscpio

03) Como se calcula o aumento total do objeto a ser estudado?