Toxicologia
Dosagem de etanol no
sangue
Prof. Dr. Carlos Roberto da Silva Júnior
Realizar a dosagem de etanol em
sangue e alimentos pelo método de
Nicloux
Conhecimentos prévios
Produção de álcool endógeno e a influência nas
análises toxicológicas
Disponível em: <[Link] Acesso em: 26 mai. 2021
Conhecimentos prévios
O consumo de álcool e o esporte:
Uma visão geral em atletas universitários
Disponível em: <[Link] Acesso em: 26 mai. 2021
Conhecimentos prévios
Química Geral, Analítica e Orgânica
Métodos de extração
Rotinas de laboratório
Procedimentos operacionais
Pesagem
Manipulação de produtos químicos
Manipulação de amostras biológicas
Convite ao estudo
Como é feita a dosagem de álcool no sangue?
Por que é importante conhecer métodos alternativos de dosagem
alcoólica?
Quais são os efeitos observados pelo uso do álcool?
Como ocorre a extração do álcool do sangue?
O que é a destilação?
O que é a titulação?
Como é determinada a dosagem alcoólica?
Equipamentos de proteção individual (EPI)
É obrigatório o uso de jaleco de mangas longas, óculos de proteção,
máscara, calças compridas, calçado fechado onde nenhuma parte do
pé fique exposta, cabelo preso, caso possua cabelos compridos e
luvas de procedimento.
Reagentes,
equipamento,
vidrarias e
materiais
Reagentes
Ácido pícrico 20 g para cada 5 alunos
Bicromato de potássio 2 g para cada 5 alunos
Ácido sulfúrico concentrado 5 ml para cada 5 alunos
Equipamentos
Balança analítica 1 por laboratório
Chapa aquecedora ou manta aquecedora 1 para cada 5 alunos
Vidrarias e materiais
Pipeta 5 ml 2 para cada 5 alunos
Pipetador de borracha ou pêra 1 para cada 5 alunos
Proveta de 100 ml 2 para cada 5 alunos
Pérolas de vidro 100 g por laboratório
Erlenmeyer 2 para cada 5 alunos
Kit destilação (coluna de destilação, coluna de
condensação – condensador, conexões, balão de
destilação) 1 para cada 5 alunos
Vidrarias e materiais
Suporte universal 1 para cada 5 alunos
Garra para suporte universal 1 para cada 5 alunos
Garra para bureta 1 para cada 5 alunos
Bureta de 50 ml 1 para cada 5 alunos
Béquer de 50 ml 2 para cada 5 alunos
Béquer de 100 ml 2 para cada 5 alunos
Vídeo 01
Procedimento –
Parte 01
Atividade proposta
Dosagem de etanol em sangue e alimentos pelo método de Nicloux
(Titulométrico)
CUIDADOS ESPECIAIS COM A COLETA DE SANGUE
Horário: os fatores toxicocinéticos envolvidos na absorção, distribuição e
biotransformação do etanol determinam uma rápida queda dos níveis
plasmáticos do toxicante. O etanol possui a propriedade de se distribuir
igualmente em tecidos lipídicos (dissolução na porção lipídica da membrana
celular) e em tecidos hídricos como pulmões e rins (é hidrofílico). A
biotransformação ocorre predominantemente no fígado
(vias enzimáticas de oxidação através do álcool
desidrogenase e do aldeído desidrogenase); frações
inalteradas são eliminadas pelos pulmões (via ar exalado)
e rins.
CUIDADOS ESPECIAIS COM A COLETA DE SANGUE
A principal via de eliminação é a renal (metabólitos), ou em condições de grande
consumo, pelos pulmões. Segundo Larini (1993), cerca de 70% do etanol é
eliminado em 12 horas e 100% do etanol é eliminado em 24 horas.
Uso de anticoagulantes: podem ser utilizados diversos tipos de anticoagulantes
como citrato ou heparina. A importância do uso de anticoagulante refere-se ao
fato do etanol se distribuir no plasma e nos eritrócitos em
proporções semelhantes. Portanto, amostras coaguladas
ou soro não podem ser utilizadas para dosagem alcoólica
pelo Método de Nicloux.
CUIDADOS ESPECIAIS COM A COLETA DE SANGUE
Transporte: enviar a amostra rapidamente ao laboratório em frasco lacrado,
identificado e sob refrigeração.
Volume: colher 10 ml (exame + contraprova).
Armazenamento: armazenar vedado, sob refrigeração; se necessário, pode-se
congelar a amostra.
Princípio do método
Baseado na oxidação do etanol pelo bicromato de potássio (dicromato de
potássio) 1,9% em meio sulfúrico. Em solução fortemente ácida e a
quente, o íon Cr6+ é reduzido a Cr3+ de cor azul-esverdeada, enquanto o
etanol é oxidado a acetaldeído, depois a ácido acético, gás carbônico e
água.
Preparo de soluções
Solução de ácido pícrico: pesar 19g de ácido pícrico e completar
com água destilada em balão volumétrico q.s.p. 1000 mL; levar à
leve fervura; descansar de um dia para outra para formação dos
cristais de saturação
Solução de bicromato de potássio 1,9%: pesar
1,9g de bicromato de potássio para 100 ml de
água destilada – em balão volumétrico de 100mL
Procedimento
Homogeneizar a amostra e pipetar 5mL de sangue em balão de destilação
Acrescentar 20 ml de água destilada (hemólise), 40 ml de ácido pícrico
saturado (desproteinização) e pérolas de vidro (para evitar ebulição
violenta)
Vídeo 02
Procedimento
Proceder a destilação,
recolhendo 20 ml de
destilado
Fonte: <[Link]
Vídeo 03
Procedimento
Separar 5 ml de destilado e acrescentar lentamente, pelas paredes do
tubo, 5 ml de ácido sulfúrico concentrado (agitar com cuidado)
Titular 5 ml de destilado com bicromato de potássio 1,9% até a mudança
de cor de azul a verde-amarelado e anotar o volume gasto de bicromato
Realizar a titulação em duplicata
Realizar os cálculos para determinar a dosagem de
álcool em sangue
Vídeo 04
Dosagem de
etanol no sangue
pelo método
Nicloux
Dosagem de etanol
Faça os cálculos a partir das informações a seguir e emita seu
resultado em “g de etanol/litro de sangue”.
Cálculos:
1mL de bicromato de potássio 1,9% ---- 0,005g de etanol
Volume gasto de bicromato --------------- X g de etanol
Dosagem de etanol
X g de etanol ------------------------------------------ 5 ml destilado
Y g de etanol ------------------------------------------ 20 ml de destilado
Dosagem de etanol
Y g de etanol ------------------------------- 5 ml de sangue total
Z g de etanol ------------------------------- 1000 ml de sangue total
Dosagem de etanol
O resultado negativo (0,0 g de etanol/L de sangue total) corresponde
ao aparecimento de cor amarela no destilado, logo ao início da
titulação: como não há etanol para ser oxidado, o Cr6+ do bicromato
de potássio não é reduzido, permanecendo com a cor amarela do
próprio bicromato.