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Ast/Tgo: Instruções de Uso Método Cinético UV

O documento descreve o conjunto Transaminase AST/TGO UV, destinado à determinação da Aspartato Amino Transferase (AST) em soro ou plasma humano, com informações sobre reagentes, procedimentos e cuidados no armazenamento. O método utiliza espectrofotometria para medir a atividade da AST, sendo crucial seguir as instruções para garantir resultados precisos e evitar contaminações. Os valores de referência para homens são até 38 U/L e para mulheres até 31 U/L.
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Ast/Tgo: Instruções de Uso Método Cinético UV

O documento descreve o conjunto Transaminase AST/TGO UV, destinado à determinação da Aspartato Amino Transferase (AST) em soro ou plasma humano, com informações sobre reagentes, procedimentos e cuidados no armazenamento. O método utiliza espectrofotometria para medir a atividade da AST, sendo crucial seguir as instruções para garantir resultados precisos e evitar contaminações. Os valores de referência para homens são até 38 U/L e para mulheres até 31 U/L.
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REAGENTES AMOSTRA

Apresentação com 125 mL: Soro ou plasma (EDTA ou Heparina).


1. Tampão: 2 frascos com 50 mL cada, de solução tampão TRIS 100 mmol/L em pH Sob refrigeração (2-8ºC), a AST no soro ou plasma é estável por 4 dias e duas
7,5, L-alanina 500 mmol/L, aspartato desidrogenase  600U/L, lactato desidrogenase semanas a -10ºC.
1.200 U/L e azida sódica 0,1 g/L. Conservar entre 2-8°C. Nota: Cerca de 10% da atividade da AST perdem-se a cada cinco dias quando a
2. Reagente Enzimático: 2 frascos com 12,5 mL cada, de solução contendo NADH amostra é armazenada a 4ºC, ou em um dia a 25ºC. Portanto, sempre que possível,
INSTRUÇÕES DE USO (Versão Ago/23) 0,18 mmol/L, -cetoglutarato 15 mmol/L, e azida sódica 15,5 mmol/L. Conservar entre preparar e analisar a amostra no dia da coleta.

AST/TGO
2-8°C.
PROCEDIMENTO
MATERIAIS NECESSÁRIOS NÃO FORNECIDOS Preparo do Reagente de Trabalho: Adicionar 4 (quatro) partes do conteúdo do
Método Cinético UV Espectrofotômetro frasco de Tampão (1) com 1 (uma) parte do conteúdo do frasco de Reagente
Centrífuga Enzimático (2) e homogeneizar bem. Este reagente é estável 14 dias, se mantido
FINALIDADE Banho-maria fora da geladeira apenas o tempo necessário para as dosagens. Desprezar o
O conjunto Transaminase AST/TGO UV é um sistema que se destina à determinação Cronômetro Reagente de Trabalho caso sua absorbância em 340nm, medida contra a água, for
da Aspartato Amino Transferase (AST) no soro ou plasma humano. Exclusivo para uso Vidraria inferior a 1,00.
em diagnóstico “in vitro”. Pipetas manuais ou automáticas
Água destilada ou deionizada Dosagem (Soro ou Plasma):
PRINCÍPIO DE AÇÃO
A determinação das transaminases por métodos enzimáticos combina a elevada CUIDADOS NO ARMAZENAMENTO E TRANSPORTE DOS REAGENTES Condições para os testes
especificidade de ação das enzimas com a simplicidade operacional envolvida. No Antes de serem abertos, os reagentes podem ser transportados em temperaturas na Temperatura de trabalho 37ºC  0,5 ºC
presente método, a AST cataliza a transferência do grupo amino do aspartato para o faixa de 15 - 25ºC, até um limite de 48 horas. Comprimento de onda 340 nm
-cetoglutarato com formação de glutamato e oxalacetato. Este, sob a ação da As datas de fabricação e validade aparecem no rótulo da embalagem. Não usar
Desidrogenase málica (MDH), é convertido em malato. Simultaneamente, o NADH reagentes cuja data de validade tenha expirado. Todos os reagentes devem ser 1-Pré-aquecer o Reagente de Trabalho durante 2 minutos a 37ºC.
presente é oxidado a NAD. A velocidade de diminuição da concentração de NADH no mantidos sob refrigeração, na faixa de 2 - 8ºC. Não congelar. Manter ao abrigo da luz. 2-Acertar o zero do aparelho com água destilada.
meio pode ser seguida espectrofotometricamente em 340 nm, sendo proporcional à Os reagentes devem permanecer fora do refrigerador apenas o tempo necessário para 3-Pipetar em um tubo de ensaio
concentração de AST na amostra. O sistema contém também a enzima desidrogenase as dosagens. Volume
láctica, visando a eliminação da interferência de cetoácidos endógenos. Reagente de Trabalho 1,0mL
PRECAUÇÕES E CUIDADOS ESPECIAIS Amostras 0,1mL
SIGNIFICADO CLÍNICO [Link] para uso diagnóstico “in vitro”.
A aspartato amino transferase (glutamato-oxaloacetato-transaminase) pertence ao [Link] contaminação com íons metálicos ou agentes oxidantes. 4-Homogeneizar e transferir para uma cubeta termostatizada a 37ºC. Acionar o
grupo das transaminases que catalisam a interconversão dos aminoácidos e α- O espectrofotômetro ou mesmo equipamentos automatizados devem ficar livres de cronômetro.
cetoácidos através da transferência de grupos amino. A aspartato amino transferase contaminação microbiana, ser calibrados corretamente e receber manutenção de 5-Após 90 segundos, anotar a absorbância inicial Aº e efetuar novas leituras após 1,
encontra-se vulgarmente distribuída nos tecidos do organismo. Embora a maior acordo com as instruções do fabricante. 2, 3 minutos ( A1, A2 e A3 respectivamente). A média das diferenças entre as leituras,
atividade da enzima seja registrada no músculo cardíaco, é também possível detectar 3.Não misturar ou trocar diferentes lotes de reagentes. Evitar contaminação A média, será usada nos cálculos abaixo.
uma atividade significativa no cérebro, fígado, mucosa gástrica, tecido adiposo, microbiana dos reagentes e não utilizar reagentes que tenham sinais de contaminação
musculatura esquelética e rins. ou precipitação. CÁLCULOS
Além de estar presente no citoplasma, a AST existe igualmente nos citoplasmas e nas [Link] pipetas de vidro e ponteiras descartáveis separadas para cada amostra,
mitocôndrias das células. Em lesões tissulares ligeiras, a forma predominante de AST AST/GOT (U/L) = A médio x 1746
controle (se utilizado) e reagente e não trocar as tampas dos frascos dos reagentes, a
é a dos citoplasmas, com uma quantidade mais reduzida a ser libertada pelas Exemplo:
fim de evitar contaminação cruzada, o que poderia causar resultados errôneos. 5.Não Abs. inicial = 1,740; A1 = 1,730; A2 = 1,718; A3 = 1,707.
mitocôndrias. Nos casos de lesões tissulares mais graves, observa-se a libertação de dispensar os reagentes em tubulação contendo ferro galvanizado.
uma maior quantidade de enzimas ligadas às mitocôndrias. Níveis elevados de A1 = 0,010; A2 = 0,012; A3 = 0,011. A médio = 0,011
[Link] reagentes contêm azida sódica, irritante para pele e mucosas. Caso haja contato
transaminases são indicadores de enfarte do miocárdio (deve-se ressaltar que a AST/GOT (U/L) = 0,011 x 1746
com quaisquer desses reagentes, lavar imediatamente a área afetada com água em
sensibilidade e especificidade da dosagem de AST no diagnóstico do infarto agudo do AST/GOT (U/L) = 19,2
profusão. Em caso de ingestão acidental, procurar auxílio médico imediato.
miocárdio são baixas, tornando a determinação desta enzima a menos indicada para 7.Não comer, beber, fumar, armazenar ou preparar alimentos, ou aplicar cosméticos
este diagnóstico), hepatopatias, distrofia muscular e lesões dos órgãos internos. Várias VALORES DE REFERÊNCIA
dentro da área de trabalho onde reagentes e amostras estiverem sendo manuseados.
drogas comumente usadas encontram-se relacionadas ao aumento da AST dentre [Link] luvas descartáveis quando manusear amostras clínicas ou reagentes.
elas: isoniazida, fenotiazinas, clorotiazida, gentamicina, eritromicina, cloranfenicol, Valor Referência (37°C)
[Link] sempre as mãos após trabalhar com material potencialmente infeccioso.
progesterona, esteroides anabolizantes, opiáceos, indometacina, halotano, metildopa [Link] amostras devem ser descartadas, após o uso, em recipientes específicos. Homens até 38 U/L
e uso prolongado de aspirina. 11.Não dispensar em coletores de lixo comuns ou nas redes de água e esgotos. Mulheres até 31 U/L
[Link] o material biológico deve ser processado como sendo potencialmente
contaminante. LINEARIDADE
A reação é linear até valores 440 U/L. Se o valor de A médio for igual ou maior a
0,200 em 340 nm, diluir a amostra com solução de NaCl 0,85% e repetir a dosagem.
Multiplicar o resultado obtido pelo fator de diluição.
DADOS ESTATÍSTICOS DE DESEMPENHO DO TESTE CONDIÇÕES DE GARANTIA DA QUALIDADE DO PRODUTO SÍMBOLOS UTILIZADOS PARA PRODUTOS DIAGNÓSTICOS
Sensibilidade: 100%. O desempenho deste sistema diagnóstico, medido pelas propriedades descritas nesta IN VITRO
Exatidão: A comparação com método similar, já validado, mostrou um coeficiente de Instrução de Uso, está garantido até a sua data de vencimento, desde que obedecidas
as seguintes condições: Conteúdo suficiente para <n> testes
correlação, r igual a 0,99 a partir de amostras aleatórias oriundas de pacientes de
ambulatório. A equação de regressão obtida foi : Y = 0,964x+0,139 que demosntra 1.A adesão estrita, pelo usuário, ao quadro de procedimento técnico.
uma exatidão de 99%. Data limite de utilização do produto (dd/mm/aaaa)
[Link] condições de armazenamento estarem de acordo com o recomendado nesta
Precisão: Instrução de Uso.
Repetibilidade: A realização de 20 determinações de uma amostra com valor dentro Material Calibrador
[Link] materiais necessários e não fornecidos com o produto, estarem em boas
da faixa de referência, obtendo-se os seguintes resultados. condições de uso. Limite de temperatura (conservar a)
Repetibilidade Amostra
Média 17 ASSESSORIA CIENTÍFICA Consultar instruções de uso
Desvio Padrão 1,1 Para esclarecimentos de dúvidas e Assessoria Científica ligue:
(31) 3157-3688 ou (11) 99217-8407 Código do Produto
Coeficiente de Variação (%) 6,5
e-mail: sac@[Link] Produto para Diagnóstico In Vitro
Reprodutibilidade: A realização de 20 determinações de uma amostra, realizada por Liofilizado
um operador diferente, utilizando o mesmo equipamento de medição, com valores Katal Biotecnológica Ind. Com. Ltda.
dentro da faixa de referência, obtendo-se os seguintes resultados: Rua: Leiria, 1.160 - CEP 31255-100.
Belo Horizonte - MG – Brasil – CNPJ: 71.437.917/0001-04 Corrosivo
Reprodutibilidade Amostra Responsável Técnica: Raquel Miranda Gonzaga - CRBio 076936/04-D
MS.: 10377390208 Risco Biológico
Média 20
Data da última revisão: 29/08/2023
Desvio Padrão 0,5
Coeficiente de Variação (%) 2,5 Tóxico

Sensibilidade analítica: O método apresenta uma variação de absorbância em 340 Reagente


nm igual a 0,0006 em cada acréscimo de 1U/L na concentração de AST. O limite de Fabricado por
detecção do método é igual a 0,47 U/L.
Número de Lote
AUTOMAÇÃO
Aplicações para analisadores automáticos estão disponíveis, se solicitadas.

CONTROLE DE QUALIDADE
O laboratório deve ter como prática de rotina o uso de soros controle comerciais.
Preferivelmente deve participar de programas de controle externo de qualidade, a
exemplo daqueles oferecidos pela SBAC e SBPC.

INTERFERENTES
Hemólise conduz a resultados falsamente elevados.
Em amostras muito ictéricas a absorbância da amostra mascara uma redução da
absorbância da reação, com resultados baixos ou mesmo negativos, sendo necessário
fazer uma diluição prévia da mesma.

REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS
1. Bergmeyer, H.U (Ed.) Methods of Enzymatic Analysis, Academic Press, p.1985.
2. Karmen, A. J. Clin Invest. 34 : 131, 1955
3. IFCC report Clin. Chim. Acta 105:147(F),1980
4. Katal: Dados de arquivo.

APRESENTAÇÃO
125 mL Volume
1. Tampão 2 x 50 mL
2. Reagente Enzimático 2 x 12,5 mL

AST/TGO

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