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DNA

Il documento descrive la scoperta del DNA attraverso vari scienziati, iniziando da Miescher che identificò la nucleina, seguito da Griffith che dimostrò la trasformazione batterica. Avery confermò che il materiale genetico era un acido nucleico, mentre Hershey e Chase provarono che il DNA era il materiale genetico nei virus. Infine, Crick e Watson, basandosi sui lavori di Franklin e Chargaff, scoprirono la struttura a doppia elica del DNA.

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DNA

Il documento descrive la scoperta del DNA attraverso vari scienziati, iniziando da Miescher che identificò la nucleina, seguito da Griffith che dimostrò la trasformazione batterica. Avery confermò che il materiale genetico era un acido nucleico, mentre Hershey e Chase provarono che il DNA era il materiale genetico nei virus. Infine, Crick e Watson, basandosi sui lavori di Franklin e Chargaff, scoprirono la struttura a doppia elica del DNA.

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-dna-

Storia
Miescher
Medico Svizzero (1869), Miescher che lavorando con i Globuli Bianchi elabora una sostanza piena di P (Fosforo):
La Nucleina [DNA]

Si inizia a pensare che sono le Proteine che trasportano il ‘libretto d’istruzione’. I biologhi pensavano che il
materiale genetico dovesse:
• Essere presente in quantità differenti a seconda della specie
• Avere la capacità di replicarsi
• Agire all’interno della cellula regolandone lo sviluppo

Quindi capiscono che:


• Sono biomolecole che presentano una grande varietà di strutture e funzioni specifiche
• Sono presenti non solo nei cromosomi ma anche nel citoplasma dove svolgono funzioni chiave
• Malattie genetiche e mutazioni determinano come un effetto di una variazione nella produzione di
determinate proteine

Griffith
Medico Inglese (1928), Griffith che lavorando con lo Streptococcus pneumoniae / pneumococco (da la polmonite)
che voleva sviluppare un vaccino per questa malattia. Capisce che esiste in 2 varianti di Streptococcus
pneumoniae e li usa su delle cavie (i topi):
- R rought (Ruvido/Irregolare): Prive di capsula protettiva=› NO polmonite, non virulento
- S smooth (Liscio): Avvolti da una capsula fatta da Polisaccaridi, che riescono ad attraversare la membrana
plasmatica dell’individuo =› Polmonite, virulento

Esperimenti completi=
- S (li uccide con il calore) + R =› [S] + R =› S (solo una parte non la totalità): I batteri R si trasformano in
batteri S (ma non il contrario!)
Cosa c’è che fa avere questa trasformazione? “Il Fattore di Trasformazione” (Estratto acellulare), la sostanza
chimica proveniente da una cellula si può trasformare geneticamente in un altra cellula
Avery
Medico Canadese (1944 circa), Avery ripete l’esperimento di Griffith ma fa dei
controlli, per vedere se cambia il risultato:

Prende S e li uccide con il calore, per poi filtrare i residui.

S =› 4 barattoli, dove inserisce per ciascuno Enzimi diversi:


- Lipasi (distrugge i Lipidi)
- Glicasi (distrugge gli zuccheri)
- Proteasi (distrugge le proteine)
- Nucleasi (distrugge gli acidi nucleici)

4 barattoli + R =› Nei 4 barattoli aggiunge R:


- Lipasi (distrugge i Lipidi)= S e R
- Glicasi (distrugge gli zuccheri)= S e R
- Proteasi (distrugge le proteine)= S e R
- Nucleasi (distrugge gli acidi nucleici)= R, quindi non si trasforma il ceppo
inserito
Dal momento che soltanto la DNasi (Nucleasi) distrugge la sostanza
trasformante, quella sostanza deve essere un Acido Nucleico

Venne considerato non del tutto corretto perchè:


• Era un campo di studi nuovo e non si sapeva ancora che i batteri possedessero geni
• Alcuni scienziati pensavano che gli Acidi Nucleici fossero troppo semplici per essere
il materiale genetico, specialmente messo a confronto con le Proteine

Hershey e Chase
Genetisti Statunitensi (1952), Hershey e Chase usando il virus Batteriofago T2/Fago
T2 (scelto perchè più semplice di un batterio)

Batteriofago= Virus che infetta soltanto i batteri

L’esperimento di Hershey-Chase:
Rendono radioattivo un ceppo P e un’altro ceppo S quindi fanno sviluppare 2 ceppi
diversi di virus
Il Fago T2 ha:
1) 32P (fosforo) all’interno della testa, quindi nel Materiale Genetico
2) 35S (zolfo) nel capside

I 2 gruppi di virus vengono uniti ai batteri con scopo che i virus i infettino, come
primo passaggio Frullati e hanno subito in seguito una Centrifuga (per depositare i
batteri in fondo alla provetta) il fluido surnatante
contiene il virus
1) 32P si trova nel Pellet insieme ai batteri
2) 35S si trova nel fluido surnatante insieme ai virus
L’esperimento dimostra che il materiale genetico è costituito da Acidi Nucleici, il
DNA

Virus:
• Esterno= Evelope: Virus con rivestimento lipidico esterno, derivato dalla
membrana della cellula ospite, quindi può attraversare le membrane delle
cellule facilmente
• Capside=Testa (Capside)
Collo (Guaina)
Piede (Coda, Piastra basale e Fibra caudale)

Rosalind Franklin
Biofisici Inglesi (1951), Rosalind Franklin [DONNA!] e Maurice Wilkins scoprono la Cristallografia a raggi X, che
riesce a fare una foto alla struttura delle macromolecole (quindi anche del DNA). Loro suggeriscono che il DNA
ha una forma ad elica. Wilkins mostra il prodotto (non ancora pubblicato) di Franklin a Crick e Watson

Il DNA era un polimero di nucleotidi e che ciascun nucleotide era composto da:
- 1 molecola dello zucchero desossiribosio
- 1 gruppo fosfato
- 1 base azotata

Basi azotate:
Purine (2 anelli)=
- Adenina (A)
- Guanina (G)
Pirimidine (1 anello)=
- Citosina (C)
- Timina (T)
- Uracile (U)=› RNA

Chargaff
Chimico Austriaco, Chargaff stava studiando la composizione dell’acido nucleico e NON vede che è fatto da 4
nucleotidi diversi ma erano ripetuti a blocco (ATCG-ATCG… =› n_blocco) ma vede che le percentuali di ciascun
nucleotide è presente in tutte le cellule, i nucleotidi non invecchiano con l’individuo e vede che i rapporti tra i
nucleotidi sono costati all’interno della stessa specie =› Variano tra una specie e l’altra
%T/%A e %C/%G = 1 ( Per tutte le specie) =› Queste basi vanno a coppie, Complementarità delle basi

• La % dei 4 tipi di nucleotidi è sempre la stessa nel DNA di cellule provenienti da tessuti diversi del medesimo
individuo
• La composizione delle molecole del DNA non è influenzata da fattori esterni o dall’età dell’organismo
• Il rapporto tra la percentuale delle due Purine A e G varia da una specie all’altra; ciò suggerisce una
relazione con il significato del messaggio scritto nella biomolecola
• In tutte le specie, la quantità di A è uguale alla T (A=T) e la quantità di G è uguale a quella di C (G=C); di
conseguenza la quantità totale delle Purine è uguale a quella delle Pirimidine (A+G=T+C)

Crick e Watson
Fisico Inglese, Crick e Genetista Statunitense, Watson (1953) scoprono che il DNA
ha una struttura a doppia elica, grazie alla scoperta di Franklin e Pauling

Decidono di usare i risultati della Cristallografia:


Il DNA ha una forma ad elica

Decidono di rappresentare la struttura del DNA con modelli 3D:


Scoprirono che, in accordo con i dati fisici e matematici, nella molecola di DNA ci
fossero 2 catene polinucleotidiche affiancate che andavano in direzioni opposte,
cioè erano Antiparallele

Decidono di usare i risultati di Chargaff:


Quantità Purine = Quantità Pirimidine

Creano quella che secondo loro era la struttura del DNA:


Scheletro zucchero (Collegati da legami covalenti) fosfato+Basi azotate
(Interazioni deboli 2-3)
Separo i due filamenti= ACGTCAACT (Iniziale)
TGCAGTTGA

Duplicato:
ACGTCAACT
TGCAGTTGA (Iniziale)
4 = Possibilità di Basi Azotate
n

Struttura
DNA= Due catene polinucleotidiche appaiate e avvolte tra loro intorno allo stesso asse a formare una doppia
elica
• Le catene sono complementari e Antiparallele
• I legami tra nucleotidi sono legami covalenti, mentre quelli che uniscono i due filamenti appaiati sono legami
ad idrogeno
• L’elica ha diametro costante e avvolgimento Destrogiro, quindi va in senso orario rispetto all’asse
• L’avvolgimento crea un Solco Maggiore e un Solco minore
• Servono 10 nucleotidi per fare un giro di 360°

DNA= Deosossiribosio (-O in 2’)


RNA= Ribosio

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