PERBANDINGAN KONSENTRASI AIR REBUSAN DAN SERBUK

CACING TANAH Lumbricus rubellus TERHADAP DAYA HAMBAT

PERTUMBUHAN Salmonella thypi SECARA IN VITRO

Proposal Karya Tulis Ilmiah

Disusun Oleh :

Tazkiyatul Amaliyah
P27903114087

KEMENTERIAN KESEHATAN REPUBLIK INDONESIA

POLITEKNIK KESEHATAN KEMENKES BANTEN
JURUSAN ANALIS KESEHATAN
2017
PERBANDINGAN KONSENTRASI AIR REBUSAN DAN SERBUK
CACING TANAH Lumbricus rubellus TERHADAP DAYA HAMBAT
PERTUMBUHAN Salmonella thypi SECARA IN VITRO

Proposal Karya Tulis Ilmiah

Disusun sebagai salah satu syarat untuk menyelesaikan

Program Diploma III Analis Kesehatan

Disusun Oleh :

Tazkiyatul Amaliyah
P27903114087

KEMENTERIAN KESEHATAN REPUBLIK INDONESIA

POLITEKNIK KESEHATAN KEMENKES BANTEN
JURUSAN ANALIS KESEHATAN
2017
 KEMENTERIAN KESEHATAN REPUBLIK INDONESIA
POLITEKNIK KESEHATAN BANTEN
LEMBAR PERSETUJUAN PEMBIMBING
PROPOSAL KARYA TULIS ILMIAH

Yang bertanda tangan di bawah ini menyatakan bahwa

Proposal Karya Tulis Ilmiah dengan judul

PERBANDINGAN KONSENTRASI AIR REBUSAN DAN SERBUK

CACING TANAH Lumbricus rubellus TERHADAP DAYA HAMBAT
PERTUMBUHAN Salmonella thypi SECARA IN VITRO

Disusun oleh :
Tazkiyatul Amaliyah
P27903114087

Telah diperiksa dan disetujui untuk dipertahankan

pada Sidang Proposal Karya Tulis Ilmiah

Pembimbing I Pembimbing II

H. Ahmad, SKM, [Link] dr. Citra Trisna, MARS

NIP. 196710051988031003 NIP. 197504152005012004

Mengetahui,
Ketua Jurusan Analis Kesehatan
Politeknik Kesehatan Banten

Nining Kurniati, [Link], [Link]

NIP.195909191980032002
 KEMENTERIAN KESEHATAN REPUBLIK INDONESIA
POLITEKNIK KESEHATAN BANTEN
LEMBAR PENGESAHAN PENGUJI
PROPOSAL KARYA TULIS ILMIAH

Proposal Karya Tulis Ilmiah ini telah diujikan

pada Sidang Proposal Karya Tulis Ilmiah

Program Pendidikan Diploma III Jurusan Analis Kesehatan Tangerang

Politeknik Kesehatan Banten
Tanggal : 03 Maret 2017

PERBANDINGAN KONSENTRASI AIR REBUSAN DAN SERBUK

CACING TANAH Lumbricus rubellus TERHADAP DAYA HAMBAT
PERTUMBUHAN Salmonella thypi SECARA IN VITRO

Disusun oleh :
Tazkiyatul Amaliyah
P27903114087

Penguji :

Tanda Tangan

Penguji 1 : H. Ahmad, SKM, [Link] ( )

NIP.196710051988031003

Penguji 2 : dr. Citra Trisna, MARS ( )

NIP. 197504152005012004

Penguji 3 : Hj. Een Sukaedah, SKM, [Link] ( )

NIP.195701241980102001
 KATA PENGANTAR

Puji Syukur kehadirat Allah SWT yang telah memberikan rahmat dan
hidayah-Nya serta atas ridho-Nya penulis dapat menyelesaikan Proposal Karya
Tulis Ilmiah ini yang berjudul “PERBANDINGAN KONSENTRASI AIR
REBUSAN DAN SERBUK CACING TANAH Lumbricus rubellus TERHADAP
DAYA HAMBAT PERTUMBUHAN Salmonella thypi SECARA IN VITRO”.
Karya Tulis Ilmiah ini adalah tugas akhir yang merupakan salah satu syarat untuk
menyelesaikan Pendidikan Program Diploma III Analis Kesehatan Politeknik
Kesehatan Kemenkes Banten.

Dalam penyusunan Proposal Karya Tulis Ilmiah ini, penulis banyak

mendapatkan saran, bimbingan dan motivasi dari berbagai pihak. Untuk itu,
penulis berterima kasih kepada :

1. Ibu Hj. Een Sukaedah, SKM, [Link] selaku Direktur Politeknik Kesehatan
Kemenkes Banten.
2. Ibu Nining Kurniati, [Link], [Link] selaku Ketua Jurusan Analis Kesehatan
Tangerang Politeknik Kesehatan Kemenkes Banten.
3. Bapak H. Ahmad, SKM, [Link] selaku Dosen Pembimbing I yang telah
meluangkan waktunya untuk membimbing, memberi petunjuk, saran dan
dukungan untuk terselesaikannya Proposal Karya Tulis Ilmiah ini.
4. Ibu dr. Citra Trisna, MARS selaku Dosen Pembimbing II yang telah
meluangkan waktunya untuk membimbing, memberi petunjuk, saran dan
dukungan untuk terselesaikannya Proposal Karya Tulis Ilmiah ini.
5. Seluruh Staff dan Dosen Jurusan Analis Kesehatan Tangerang atas
bimbingan dan dukungannya.
6. Ibu dan Bapak tercinta dan adikku yang saya banggakan, atas do’a restu,
dukungan semangat dan nasehat sampai terselesaikannya Proposal Karya
Tulis Ilmiah ini.
 7. Semua pihak, teman-teman yang telah mendo’akan, memberi dukungan
dan membantu dalam penyusunan Proposal Karya Tulis Ilmiah ini
sehingga Proposal ini dapat terselesaikan dengan baik.

Semoga Allah SWT membalas semua kebaikan dan selalu diberikan

perlindungan serta hidayah-Nya.

Penulis menyadari bahwa Proposal Karya Tulis Ilmiah ini jauh dari kata
sempurna. Oleh karena itu, penulis mengharapkan kritik dan saran yang
membangun untuk memperbaiki dan menyempurnakan tugas akhir penulis.

Atas perhatian saudara/i penulis mengucapkan terima kasih dan semoga

bermanfaat bagi penulis dan semua pihak yang terkait.

Tangerang, Februari 2017

Penulis

ii
 DAFTAR ISI

LEMBAR JUDUL

LEMBAR PERSETUJUAN PEMBIMBING

LEMBAR PENGESAHAN PENGUJI

KATA PENGANTAR ............................................................................................. i

DAFTAR ISI ............................................................................................................ iii

DAFTAR TABEL ................................................................................................... vi

DAFTAR GAMBAR ............................................................................................... vii

DAFTAR LAMPIRAN ........................................................................................... viii

BAB I PENDAHULUAN

A. Latar belakang ..................................................................................................... 1

B. Rumusan masalah ................................................................................................ 3

C. Tujuan Penelitian .................................................................................................. 3

D. Manfaat Penelitian................................................................................................ 4

BAB II TINJAUAN PUSTAKA

A. Dasar Teori ........................................................................................................... 5

1. Cacing Tanah .................................................................................................. 5

a. Taksonomi dan Morfologi ............................................................................... 5

b. Kandungan Lumbricus rubellus ...................................................................... 7

c. Manfaat Cacing Tanah .................................................................................... 8

2. Demam Tifoid ................................................................................................ 9

iii
 a. Penyakit Demam Tifoid .................................................................................. 9

b.. Diagnosis Demam Tifoid ............................................................................... 9

c. Pengobatan ...................................................................................................... 11

3. Salmonella sp. ................................................................................................ 11

a. Klasifikasi ........................................................................................................ 11

b. Morfologi dan Fisiologi .................................................................................. 12

c. Patogenitas....................................................................................................... 13

4. Metode Pengujian Antibakteri ........................................................................ 13

a. Metode Difusi .................................................................................................. 14

b. Metode Dilusi .................................................................................................. 15

B. Kerangka Pemikiran ............................................................................................. 17

C. Kerangka Konsep ................................................................................................. 18

D. Hipotesis ............................................................................................................... 18

E. Definisi Operasional ............................................................................................ 19

BAB III METODOLOGI PENELITIAN

A. Desain Penelitian .................................................................................................. 20

B. Lokasi dan Waktu Penelitian ................................................................................ 20

C. Populasi dan Sampel Penelitian ........................................................................... 20

D. Instrumen Penelitian ............................................................................................. 21

1. Metode ............................................................................................................ 21

2. Alat .................................................................................................................. 21

3. Bahan .............................................................................................................. 21

iv
E. Cara Pengumpulan Data ....................................................................................... 22

1. Sterilisasi Alat ................................................................................................. 22

2. Pembuatan Sampel .......................................................................................... 22

3. Pembuatan Suspensi Bakteri 0,5 MacFarland ................................................. 23

4. Pembuatan Media MacConkey Agar .............................................................. 24

5. Pengenceran Konsentrasi Sampel ................................................................... 24

6. Penentuan KHM (Konsentrasi Hambat Minimum) ........................................ 25

7. Penentuan KBM (Konsentrasi Bunuh Minimum)........................................... 25

F. Analisis Data ......................................................................................................... 26

H. Jadwal Penelitian .................................................................................................. 26

DAFTAR PUSTAKA .............................................................................................. 27

LAMPIRAN

v
 DAFTAR TABEL

Tabel 1 Komposisi Asam amino pada Cacing Tanah ............................................... 7

Tabel 2 Definisi Operasional .................................................................................... 19

Tabel 3 Variasi Konsentrasi Sampel ......................................................................... 25

Tabel 4 Jadwal Penelitian.......................................................................................... 26

vi
 DAFTAR GAMBAR

Gambar 1 Cacing Tanah............................................................................................ 5

Gambar 2 Morfologi Cacing Tanah .......................................................................... 6

Gambar 3 Salmonella thypi ....................................................................................... 12

Gambar 4 Kerangka Pemikiran ................................................................................ 17

Gambar 5 Kerangka Konsep ..................................................................................... 18

vii
 DAFTAR LAMPIRAN

Lembar Bimbingan Proposal..................................................................................... 28

viii
 BAB I

PENDAHULUAN

A. Latar Belakang Masalah

Penyakit infeksi adalah salah satu masalah kesehatan terbesar di dunia,

termasuk Indonesia. Penyakit infeksi dapat disebabkan oleh virus maupun bakteri.
Indonesia merupakan negara berkembang dengan angka kejadian penyakit infeksi
tertinggi yang didominasi oleh infeksi saluran pernapasan dan infeksi saluran
cerna. Salah satu penyakit infeksi akut yang sering terjadi yaitu demam tifoid.
Demam tifoid merupakan penyakit infeksi akut yang disebabkan oleh infeksi
bakteri Salmonella thypi.1

Demam tifoid adalah penyakit infeksi akut yang biasanya mengenai

saluran pencernaan dengan gejala demam selama ± 7 hari, gangguan pada
pencernaan dan gangguan kesadaran. Demam tifoid merupakan suatu infeksi akut
yang terjadi pada usus kecil yang disebabkan oleh kuman Salmonella thyphi.
Demam tifoid merupakan kasus penyakit infeksi terbesar di seluruh dunia dan
tidak tergantung pada iklim. Higienitas makanan merupakan sumber dari penyakit
ini meskipun lingkungan hidup umumnya adalah baik. 2

Data Kesehatan Dunia World Health Organization (WHO) tahun 2013

memperkirakan terdapat sekitar 17 juta kasus kematian per tahun dengan 600.000
orang meninggal karena demam tifoid dan 70% kematiannya terjadi di Asia.
Di Indonesia sendiri, penyakit ini bersifat endemik. Menurut WHO,
penderita dengan demam tifoid di Indonesia tercatat 81,7 per 100.000.3

Untuk penatalaksanaan pada demam tifoid yang masih sering

digunakan ialah istirahat, perawatan, terapi penunjang, diet, serta pemberian
antibiotik. Antibiotik adalah zat kimiawi yang dihasilkan oleh
mikroorganisme yang mempunyai kemampuan untuk menghambat
pertumbuhan atau membunuh mikroorganisme lain. Pengobatan antibiotik
merupakan pengobatan utama karena pada dasarnya patogenesis infeksi
Salmonella typhi berhubungan dengan keadaan bakterimia. Antibiotik empiris
yang akan diberikan dipilih berdasarkan derajat keparahan penyakit,
kemudahan pemberian, dengan memperhatikan sensitivitas terhadap
Salmonella typhi. Keberhasilan pengobatan juga didukung oleh pemantauan
perjalanan penyakit.4

Obat standar yang saat ini digunakan untuk pengobatan demam tifoid
yaitu kloramfenikol, ampisilin atau amoksilin, kotrimoksasol (pengobatan lini
pertama). Antibiotik alternatif lain untuk pengobatan demam tifoid yaitu
golongan sefalosporin generasi ketiga (seftriakson dan sefotaksim secara
intravena, cefixim secara oral), dan golongan fluoro-kuinolon.5

Selain obat antibiotic di atas, banyak masyarakat yang menggunakan obat

tradisional yang berasal dari tumbuhan atau hewan untuk menurunkan panas atau
mengobati demam tifoid. Berdasarkan pengalaman, peneliti sendiri pernah
menggunakan obat tradisional untuk demam tifoid yang berasal dari cacing tanah
(Lumbricus rubellus). Berdasarkan penelitian Fara Deni pada tahun 2015,
menyebutkan bahwa cacing tanah Lumbricus rubellus efektif dalam menghambat
pertumbuhan bakteri Salmonella thypi. Cacing tanah telah banyak diteliti oleh
beberapa ahli mengenai kandungan dan khasiat di dalamnya. Cacing tanah jenis
Lumbricus rubellus sangat mudah ditemukan di Indonesia, cacing ini
mengandung enzim lumbrikinase yang berfungsi sebagai antibakteri.6

Dalam pandangan Islam, cacing tanah termasuk dalam hasyarat yaitu

binatang kecil yang ada di bumi. Menurut ulama Malikiyah, hukum asal makanan
adalah halal. Selama tidak membahayakan maka hasyarat halal dengan syarat di
sembelih atau dimatikan terlebih dahulu. Dengan demikian, mengkonsumsi cacing
tanah sebagai obat diperbolehkan dengan syarat cacing harus dimatikan terlebih
dahulu.7

Di Jawa Barat dan Lampung, cacing tanah ini memang dipercaya ampuh
menurunkan demam. Bagi masyarakat awam pembuatan ekstrak dari cacing tanah
Lumbricus rubellus untuk obat demam tifoid masih sangat sulit untuk dilakukan.
Sebagian besar masyarakat mengolah cacing tanah dengan cara dikeringkan atau
membeli serbuk cacing tanah yang telah dicampur dengan berbagai bahan kimia
dalam proses pembuatannya, sedangkan tak jarang juga masyarakat merebus
cacing tanah dan mencampurkannya dengan madu atau susu untuk digunakan
sebagai obat demam tifoid. Oleh sebab itu, penulis tertarik mengambil judul
“Perbandingan Konsentrasi Air Rebusan dan Serbuk terhadap Daya Hambat
Pertumbuhan Salmonella thypi secara In Vitro”.

B. Rumusan Masalah

Berdasarkan latar belakang masalah di atas, didapatkan rumusan masalah

sebagai berikut:

1. Apakah air rebusan cacing tanah (Lumbricus rubellus) memiliki kemampuan

menghambat pertumbuhan bakteri Salmonella thypi?
2. Apakah serbuk cacing tanah (Lumbricus rubellus) memiliki kemampuan
menghambat pertumbuhan bakteri Salmonella thypi?
3. Berapakah perbandingan konsentrasi kadar hambat minimal dan kadar bunuh
minimal air rebusan cacing tanah dan serbuk cacing tanah (Lumbricus
rubellus) yang mampu menghambat pertumbuhan bakteri Salmonella thypi?

C. Tujuan Penelitian

Adapun tujuan penulis dalam penelitian ini adalah sebagai berikut:

1. Tujuan Umum
1) Untuk mengetahui kemampuan cacing tanah (Lumbricus rubellus) dalam
mengobati penyakit demam tifoid.
2. Tujuan Khusus
1) Untuk mengetahui adanya kemampuan air rebusan cacing tanah
(Lumbricus rubellus) dalam menghambat pertumbuhan bakteri Salmonella
thypi.
2) Untuk mengetahui adanya kemampuan serbuk cacing tanah (Lumbricus
rubellus) dalam menghambat pertumbuhan bakteri Salmonella thypi.
3) Untuk mengetahui perbandingan tingkat konsentrasi hambat minimal air
rebusan cacing tanah dan serbuk cacing tanah (Lumbricus rubellus) yang
mampu menghambat pertumbuhan bakteri Salmonella thypi?

D. Manfaat Penelitian

Beberapa manfaat yang ingin dicapai dari penelitian ini adalah:

1. Bagi Masyarakat
Peneliti dapat memberikan informasi ilmiah kepada masyarakat mengenai
kemampuan air rebusan cacing tanah dan serbuk cacing tanah dalam
menghambat pertumbuhan Salmonella thypi, sehingga dapat digunakan
sebagai alternatif pengobatan demam tifoid.
2. Bagi Peneliti
Hasil penelitian ini dapat menambah wawasan peneliti mengenai manfaat
cacing dibidang kesehatan serta melatih kemampuan peneliti untuk
memecahkan masalah dan menuangkannya kedalam suatu karya tulis
ilmiah
3. Bagi Institusi
Sebagai informasi ilmiah kepada institusi yang dapat diaplikasikan dalam
bidang mikrobiologi klinis serta dapat dijadikan bahan referensi bagi
peneliti selanjutnya untuk meningkatkan kualitas penelitian bagi institusi.
 BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

A. Dasar Teori
1. Cacing Tanah

Cacing tanah adalah hewan tingkat rendah yang tidak memiliki tulang
belakang (avertebrata) dan bertubuh lunak. Hewan ini digolongkan kedalam filum
Annelida karena seluruh tubuhnya tersusun atas beberapa segmen (ruas) yang
terbentuk seperti cincin. Pada setiap segmen tubuhnya terdapat rambut yang keras
dan berukuran pendek yang disebut chaeta (seta). Mereka umumnya ditemukan
hidup di tanah, memakan bahan organik hidup dan mati. Cacing tanah melakukan
respirasi melalui kulitnya.7

Gambar 1 Cacing Tanah7

a. Taksonomi dan Morfologi

Kingdom : Animalia
Filum : Annelida
Kelas : Oligochaeta
Ordo : Haplotaxida
Family : Lumbricidae
Genus : Lumbricus
Spesies : Lumbricus rubellus
 Tubuh cacing tanah terbagi menjadi lima bagian, yakni bagian
depan (anterior), bagian tengah, bagian belakang (posterior), bagian
punggung (dorsal), dan bagian bawah atau perut (ventral). 7
Gambar morfologi cacing tanah dapat dilihat di bawah ini :

Gambar 2 Morfologi Cacing Tanah Lumbricus rubellus7

Mulut terdapat di depan segmen pertama, sedangkan anus berada

di bagian belakang segmen terakhir. Mulut dan anus ini bukan merupakan
segmen, melainkan bagian dari tubuh tersendiri. Mulut cacing juga
dilengkapi dengan prostomium (bibir mulut), yakni berupa tonjolan daging
yang dapat menutup lubang mulut. Prostomium terdiri atas sel sel sensor
berstruktur seperti lensa yang menggantikan fungsi mata. Selain itu,
prostomium juga mampu membedakan material berbahaya selama proses
makan. 7
Di bagian bawah setiap segmen, selain memiliki seta, juga terdapat
pori pori yang berhubungan dengan alat ekskresi (nephridia). Fungsi seta
adalah sebagai alat pencengkram atau pelekat yang kuat. Gerakan seta ini
diatur oleh otot yang memanjang dan melingkar. Sedangkan pori pori
berfungsi menjaga kelembapan kulit cacing tanah agar selalu basah.
Lendir berfungsi memudahkan cacing bergerak dengan melicinkan tubuh.
Lendir ini dihasilkan oleh kelenjar lender (mukus). 7
 Pada cacing tanah dewasa terdapat alat untuk menyiapkan proses
perkembangbiakan yang disebut Klitelum. Klitelum merupakan bagian
tubuh cacing tanah yang menebal, terletak diantara anterior dan posterior,
warnanya lebih terang daripada warna tubuhnya. 7

b. Kandungan Lumbricus rubellus

Kandungan protein cacing tanah lebih tinggi dibandingkan dengan
kandungan lemaknya. Kadar protein cacing tanah mencapai 58-78% dari
bobot kering, dihitung dari jumlah nitrogen yang terkandung di dalamnya.
Presentasi ini lebih tinggi daripada protein yang terdapat dalam daging
ternak ruminansia (seperti: sapi, kerbau, dan kambing) yang hanya sebesar
65%, atau telur , ikan, kacang kedelai yang hanya sebesar 45%. Selain
mengandung energy 900-1.400 kal, abu 8-10%, lemak tidak jenuh,
kalsium, fosfor, dan serat. Kadar lemak cacing tanah terbilang rendah,
yakni hanya 3-10% dari bobot keringnya. Komposisi asam amino cacing
tanah terdiri atas 9 asam amino esensial dan 4 asam amino non esensial.
Tabel 1 menunjukkan komposisi asam amino pada cacing tanah.7
No Zat Gizi Komposisi

1 Asam amino esensial

 Arginin 4,13
 Histidin 1,56
 Isoleusin 2,58

 Leusin 4,84

 Lisin 4,33

 Metionin 2,18
2,25
 Fenilalanin
2,95
 Threonin
3,01
 Valin
2 Asam amino non esensial
 Sistin 2,29
  Glisin 2,92
 Serin 2,88
 Tirosin 1,36

Dari berbagai hasil penelitian diperoleh data bahwa cacing tanah

mengandung peroksidase, katalase, ligase, dan selulase. Enzim enzim ini
berfungsi memperbaiki proses fisiologis tubuh dan melancarkan sirkulasi
darah. Selain itu, cacing tanah juga mengandung asam arachidonat yang
dikenal dapat menurunkan panas tubuh yang disebabkan oleh infeksi.
Menurut beberapa sumber, cacing tanah dapat mengobati penyakit tifus
karena mengandung beberapa senyawa aktif, diantaranya enzim
Lumbrikinase.7

c. Manfaat Cacing Tanah

Cacing tanah mempunyai peran penting bagi manusia. Sebagai
obat obatan, cacing ini diyakini ampuh dalam menyembuhkan berbagai
jenis penyakit, diantaranya: Demam tifoid, diare, pelancar aliran darah,
stroke, dan hipertensi. Selain sebagai obat obatan, cacing juga dapat
dijadikan sebagai bahan baku kosmetik, campuran dalam makanan ternak
seperti: ayam, kambing, dan sapi. Cacing juga sebagai dekomposer yang
membantu pengolahan tanah dan taman.7
Pemanfaatan cacing tanah sebagai antipiretik lebih aman karena
komponen kimia cacing tanah tidak menimbulkan efek toksik bagi
manusia sehingga aman untuk dikonsumsi. Satu satunya efek toksik cacing
tanah ialah cacing tanah dapat mengakumulasi logam berat yang ada pada
tanah dalam tubuhnya. Cacing tanah dapat menoleransi logam berat dalam
konsentrasi yang cukup tinggi. Dari hasil pengujian kimia diketahui bahwa
senyawa aktif sebagai antipiretik dari ekstrak cacing tanah adalah
golongan senyawa alkaloid.7
2. Demam Tifoid

a. Penyakit Demam Tifoid

Demam tifoid adalah penyakit infeksi akut pada saluran

pencernaan dengan gejala demam yang lebih dari satu minggu, gangguan
pada pencernaan, dan gangguan kesadaran. Demam tifoid disebabkan
oleh infeksi bakteri Salmonella thypi.2,8

Mekanisme masuknya kuman diawali dengan infeksi yang terjadi

pada saluran pencernaan, basil diserap oleh usus melalui pembuluh limfe
lalu masuk kedalam peredaran darah sampai di organ organ lain, terutama
hati dan limpa. Basil yang tidak dihancurkan berkembang biak dalam hati
dan limpa sehingga organ organ tersebut akan membesar disertai dengan
rasa nyeri pada perabaan, kemudian basil masuk ke dalam darah
(bakterimia) dan menyebar ke seluruh tubuh terutama kedalam kelenjar
limfoid usus halus, sehingga menimbulkan tukak pada mukosa diatas
jaringan usus halus yang disebut plak Peyeri; tukak tersebut dapat
menimbulkan perdarahan dan perforasi usus. Gejala demam disebabkan
oleh endotoksin, sedangkan gejala pada saluran pencernaan disebabkan
oleh kelainan pada usus.2

Komplikasi biasanya terjadi pada usus halus, namun hal tersebut

jarang terjadi. Apabila komplikasi ini terjadi pada seorang anak, maka
dapat berakibat fatal. 2

b. Diagnosis Penyakit Demam Tifoid

Pengkajian diagnostik yang perlu dilakukan adalah pemeriksaan

laboratorium dan radiografi, meliputi hal hal berikut:
1) Pemeriksaan Darah
Untuk mengidentifikasi adanya anemia karena asupan
makanan yang terbatas, malabsorspi, hambatan pembentukan darah
dalam sumsum tulang, dan penghancuran sel darah merah dalam
peredaran darah. Leukopenia dengan jumlah leukosit antara 3000-
8000/mm3 ditemukan pada fase demam. Hal ini diakibatkan oleh
penghancuran leukosit oleh endotoksin. Aneosinofilia yaitu
hilangnya eosinophil dari darah tepi. Trombositopenia terjadi pada
stadium demam, yakni pada minggu pertama, Limfositosis
umumnya jumlah limfosit meningkat akibat rangsangan
endotoksin. 8
2) Pemeriksaan Serologis
Tes serologis widal adalah reaksi antara antigen (suspensi
Salmonella yang telah dimatikan) dengan aglutinin yang
merupakan antibody spesifik terhadap komponen basil Salmonella
didalam darah manusia. Prinsip test ini adalah terjadinya reaksi
aglutinasi antara antigen dengan agglutinin yang dideteksi.8
Banyak faktor yang dapat mempengaruhi reaksi widal
sehingga didapatkan hasil positif palsu atau negatif palsu. Hasil tes
negatif palsu seperti pada keadaan pembentukan antibodi yang
rendah yang dapat ditemukan pada keadaan gizi buruk, konsumsi
obat immunosupresif, leukemia, dll. Sedangkan hasil tes positif
palsu dapat dijumpai pada keadaan pasca vaksinasi, mengalami
infeksi subklinis pada beberapa waktu yang lalu.8
3) Pemeriksaan Bakteriologis
Spesimen pemeriksaan yang dapat digunakan adalah darah,
urin, dan tinja. Untuk demam tifoid, darah biasanya mengandung
Salmonella thypi di minggu pertama, sedangkan pada biakan urin,
bakteri ditemukan pada minggu kedua. Biakan bakteri yang
diisolasi dari tinja biasanya akan menunjukkan hasil positif di
minggu kedua atau ketiga. Isolasi dan identifikasi Salmonella
 biasanya dilakukan dengan teknik perbenihan pada agar darah,
MacConkey agar, dan Salmonella shigella agar. Bakteri ini tumbuh
tanpa meragikan laktosa, gram negatif dan menunjukkan gerak
positif. 9

c. Pengobatan

Pengobatan antibiotika yang efektif dapat mengurangi

angka kematian. Antibiotik Kloramfenikol masih digunakan
sebagai obat standar demam tifoid. Obat obat lain seperti ampisilin,
amoksilin, trimetropim-sulfametoksasole dapat dipergunakan
untuk demam tifoid dimana strain kuman penyebab telah resisten
terhadap kloramfenikol, selain bahwa obat obat tersebut kurang
toksik dibandingkan kloramfenikol. 8,10

3. Salmonella sp.

a. Klasifikasi

Kingdom : Bacteria

Philum : Proteobacteria

Kelas : Gamma Proteobacteria

Ordo : Enterobacteriales

Famili : Enterobacteriaceae

Genus : Salmonella

Spesies : Salmonella enteric, Salmonella thypi

 Gambar 3 Salmonella thypi 11

b. Morfologi dan Fisiologi

Salmonella merupakan bakteri gram negatif berbentuk

batang, bersifat motil dan patogenik. Salmonella thypi bergerak
dengan flagella peritrik, tidak bersimpai, tidak memiliki fimbria,
dan tidak membentuk spora, tidak memiliki kapsul. Dinding selnya
terdiri atas lipoprotein, fosfolipid, protein, lipopolisakarida (LPS)
dan tersusun sebagai lapisan lapisan. Salmonella thypi memiliki
diameter 0,5-0,8 µm dan panjang 1-3 µm. Besar koloni dalam
media pembenihan rata rata 2-4 mm. Dalam pembenihan agar
Salmonella shigella, agar Endo, agar MacConkey, koloni
Salmonella berbentuk bulat, kecil, dan tidak berwarna, sedangkan
pada media Wilson Blair agar koloni Salmonella berwarna hitam.9

Salmonella thypi tumbuh pada suasana aerob dan anaerob

fakultatif, pada suhu 15-41°C . Suhu pertumbuhan optimum
37,5°C dengan pH media 6-8 . Salmonella memiliki gerak positif,
dapat tumbuh dengan cepat pada pembenihan biasa, tidak meragi
laktosa, sukrosa, membentuk asam, memberikan hasil positif pada
reaksi fermentasi manitol dan sorbitol, dan memberikan hasil
negatif pada reaksi fermentasi sukrosa dan laktosa. 9
 c. Patogenitas

Salmonellosis adalah istilah yang menunjukkan adanya

infeksi Salmonella sp. Manifestasi klinik Salmonellosis pada
manusia ada 4 sindrom, yaitu:

 Gastroenteritis merupakan infeksi usus yang dan tidak

ditemukan toksin sebelumnya. Terjadi karena menelan
makanan yang tercema Salmonella thypi , misalnya daging
dan telur. Masa inkubasinya 12-48 jam, gejalanya demam,
mual, sakit kepala, muntah, diare hebat, dan terdapat darah
dalam tinja.9
 Demam tifoid yang disebabkan Salmonella thypi, dan
demam paratifoid disebabkan Salmonella parathypi A, B,
dan C. Kuman yang masuk melalui mulut masuk kedalam
lambung untuk mencapai usus halus, lalu ke kelenjar getah
bening. Kemudian memasuki ductus thoracicus. Kemudian
kumam masuk dalam saluran darah (bakterimia) timbul
gejala dan sampai ke hati, limpa, sumsum tulang, ginjal,
dan lain lain. Selanjutnya di organ tubuh tersebut
Salmonella sp. berkembang biak.9
 Bakterimia (septicemia) merupakan invasi dini bakteri ke
dalam peredaran darah yang biasanya disebabkan infeksi
Salmonella non thypi yaitu Salmonella choleraesuis.
Timbul kelainan lain pada bagian tubuh seperti
osteomyelitis, pneumonia, abses paru paru, meningitis, dan
sistem kekebalan yang menurun.9

4. Metode Pengujian Antibakteri

Pada uji ini, yang akan diukur adalah respon pertumbuhan populasi
mikroorganisme terhadap agen antimikroba. Salah satu manfaat dari
uji antimikroba adalah diperolehnya suatu system pengobatan yang
efektif dan efisien. Penentuan setiap kepekaan kuman terhadap suatu
obat adalah dengan menentukan kadar obat terkecil yang dapat
menghambat pertumbuhan kuman secara in vitro. Beberapa cara
pengujian antibakteri adalah sebagai berikut:
a. Metode Difusi
Pada metode ini, penentuan aktivitas didasarkan pada
kemampuan difusi dari zat antimikroba dalam lempeng agar yang
telah diinokulasikan dengan mikroba uji. Hasil pengamatan yang
diperoleh berupa ada atau tidaknya zona hambatan yang akan
terbentuk disekeliling zat antimikroba pada waktu tertentu masa
inkubasi.12 Pada metode ini dapat dilakukan dengan 3 cara, yaitu:
1) Cara Cakram (Disc)
Cara ini merupakan cara yang paling sering digunakan
untuk menentukan kepekaan kuman terhadap berbagai macam
obat obatan. Pada cara ini digunakan suatu cakram kertas
saring (paper disc) yang berfungsi sebagai tempat menampung
zat anti mikroba. Kertas saring tersebut kemudian diletakkan
padalempeng agar yang telah diinokulasi mikroba uji,
kemudian diinkubasi pada waktu tertentu dan suhu tertentu,
sesuai dengan kondisi optimum dari mikroba uji. Pada
umumnya, hasil yang didapat bisa diamati setelah inkubasi
selama 18-24 jam pada suhu 37°C. Hasil pengamatan yang
diperoleh berupa ada atau tidaknya zona bening yang terbentuk
disekeliling kertas cakram yang menunjukkan zona hambat
pada pertumbuhan bakteri.13
Metode cakram disc atau cakram kertas ini memiliki
kelebihan dan kekurangan. Kelebihannya adalah mudah
dilakukan, tidak memerlukan peralatan khusus dan relatif
murah. Sedangkan kelemahannya adalah ukuran zona bening
yang terbentuk tergantung oleh kondisi inkubasi, inoculum,
predifusi, preinkubasi, serta ketebalan medium. 13
 2) Cara Parit (ditch)
Suatu lempeng agar yang telah diinokulasikan dengan
bakteri uji dibuat sebidang parit. Parit tersebut berisi zat
antimikroba, kemudian diinkubasi pada waktu dan suhu
optimum yang sesuai dengan mikroba uji. Hasil pengamatan
yang diperoleh berupa ada tidaknya zona hambat yang akan
terbentuk di sekitar parit. 13
3) Cara Sumuran (hole/cup)
Pada lempeng agar yang telah diinokulasikan dengan
bakteri uji dibuat suatu lubang yang selanjutnya diisi dengan
zat antimikroba uji. Kemudian setiap lubang tersebut diisi
dengan zat uji. Setelah diinkubasi dengan suhu dan waktu yang
sesuai dengan mikroba uji, dilakukan pengamatan dengan
melihat ada tidaknya zona hambatan di sekeliling lubang. 13

b. Metode Dilusi
Pada metode ini dilakukan dengan mencampurkan zat
antimikroba dan media agar, yang kemudian diinokulasikan
dengan mikroba uji. Hasil pengamatan yang akan diperoleh berupa
tumbuh atau tidaknya mikroba didalam media. Aktivitas zat
antimikroba ditentukan dengan melihat konsentrasi hambat
minimum (KHM) yang merupakan konsentrasi terkecil dari zat
antimikroba uji yang masih memberikan efek penghambatan
terhadap pertumbuhan mikroba uji.12 Metode ini terdiri atas dua
cara, yaitu:
1) Pengenceran Serial dalam Tabung
Pengujian dilakukan dengan menggunakan sederet serial
tabung reaksi yang diisi dengan inoculum kuman dan larutan
antibakteri dalam berbagai konsentrasi. Zat yang akan diuji
aktivitas bakterinya diencerkan sesuai dengan serial dalam
media cair,kemudian diinokulasikan dengan kuman dan
 diinkubasi pada waktu dan suhu yang sesuai dengan mikroba
uji. Aktivitas zat ditentukan sebagai kadar hambat minimal
(KHM). 12
2) Penipisan Lempeng Agar
Zat antibakteri diencerkan dalam media agar dan kemudian
dituangkan kedalam cawan petri. Setelah agar membeku,
diinokulasikan kuman kemudian diinkubasi pada waktu dan
suhu tertentu. Konsentrasi terendah dari larutan zat antibakteri
yang masih memberikan hambatan terhadap pertumbuhan
kuman ditetapkan sebagai Konsentrasi Hambat Minimum
(KHM). 12
B. Kerangka Pemikiran

Cacing Tanah

Cacing Lumbricus
rubellus

Fungsi Kesehatan Fungsi Pertanian

Penghancur gumpalan Anti mikroba Sumber Protein

darah (Fybrimolysis)

Demam Tifoid Air rebusan Serbuk

Mengandung:

Enzim Lumbrokinase

Asam Arachidonat

Asam amino
Metode Dilusi

Perbandingan daya
Bakteri Salmonella
hambat terhadap
thypi
Salmonella thypi

: Variabel yang diperiksa

: Variabel yang tidak diperiksa
 C. Kerangka Konsep

1. Konsentrasi Air rebusan

cacing tanah (Lumbricus
rubellus)
2. Konsentrasi Serbuk cacing Salmonella thypi
tanah (Lumbricus
rubellus)
VARIABEL BEBAS VARIABEL TERIKAT

D. Hipotesis
Terdapat perbandingan tingkat konsentrasi air rebusan dan serbuk
cacing tanah Lumbricus rubellus terhadap daya hambat pertumbuhan
bakteri Salmonella thypi secara in vitro.
E. Definisi Operasional
Tabel 2 Definisi Operasional

No. Variabel Definisi Metode Alat Ukur Hasil Ukur Skala

1. Konsentrasi air Air rebusan cacing Pengenceran Pipet Ukur Tingkat Rasio
rebusan cacing tanah Lumbricus Konsentrasi
tanah rubellus adalah
(Lumbricus cairan yang
rubellus) diperoleh dari hasil
pemanasan cacing
dalam air dengan
suhu ± <70°C.
2. Konsentrasi Serbuk cacing Pengenceran Pipet Ukur Tingkat Rasio
larutan serbuk tanah Lumbricus Konsentrasi
cacing tanah rubellus diperoleh
(Lumbricus dari cacing tanah
rubellus) yang di keringkan
dan dihaluskan.
2. Salmonella Salmonella thypi Dilusi Visual Ada/Tidak Rasio
thypi yang dicampurkan secara visual
dengan zat
antibakteri.
 BAB III

METODOLOGI PENELITIAN

A. Desain Penelitian

Penelitian ini menggunakan desain penelitian eksperimental laboratorium,

dimana penelitian dilakukan langsung di laboratorium secara in vitro untuk
menggambarkan perbandingan nilai konsentrasi daya hambat objek penelitian
terhadap bakteri uji, dengan studi literatur untuk memperkuat teori-teori yang
digunakan dalam penelitian.

B. Lokasi dan Waktu Penelitian

1. Penelitian dilakukan di Balai Laboratorium Kesehatan Daerah Dinas

Kesehatan Provinsi Banten.

2. Waktu penelitian dilakukan pada bulan Maret sampai dengan bulan

April tahun 2017.

C. Populasi dan Sampel Penelitian

1. Populasi dalam penelitian ini adalah cacing tanah Lumbricus rubellus

yang diperoleh dari peternak cacing di wilayah Tangerang sebanyak 1 Kg.
Populasi yang telah didapatkan kemudian diternak kembali oleh peneliti untuk
menghasilkan populasi lebih banyak agar memudahkan peneliti dalam pemilihan
dan pengumpulan sampel.

2. Sampel yang digunakan dalam penelitian ini adalah cacing tanah

Lumbricus rubellus yang dipilih sesuai kebutuhan peneliti dari peternak cacing di
wilayah Tangerang yang diternak kembali oleh peneliti. Sampel cacing tanah
dibuat menjadi dua bentuk, yaitu air rebusan dan serbuk. Masing masing sampel
terbuat dari 100 gram cacing tanah yang dilarutkan dalam 100 mL aquadest.

D. Instrumen Penelitian

1. Metode

Metode yang digunakan dalam penelitian ini adalah metode dilusi

untuk mengetahui perbandingan Kadar Hambat Minimal (KHM) dan Kadar
Bunuh Minimal (KBM) air rebusan dan serbuk cacing tanah terhadap
pertumbuhan bakteri Salmonella thypi secara in vitro.

2. Alat

 Oven  Erlenmeyer  Rak Tabung

 Hotplate  Cawan Petri  Ose
 Pembakar spirtus  Gelas Beaker  Pipet Volum
 Timbangan  Tabung Reaksi  Gelas Ukur
 Inkubator  Kertas Saring  Batang Pengaduk
 Kapas dan kasa  Kertas coklat  Label
 Blender  Densitometer  Mikropipet

3. Bahan

 Cacing Tanah (Lumbricus rubellus)

 Biakan murni bakteri Salmonella thypi
 Media MacConkey Agar
 NaCl Fisiologis 0,85%
 Aquadest Steril
 Kloramfenikol (Control positif)
 Alkohol 70%
 E. Cara Pengumpulan Data

Data yang dikumpulkan adalah data primer berdasarkan uji yang

dilakukan dengan metode dilusi dengan tiga kali pengulangan untuk mengetahui
perbandingan konsentrasi daya hambat air rebusan cacing tanah dan serbuk cacing
tanah yang dapat menghambat bakteri uji Salmonella thypi.

1. Sterilisasi Alat

1) Alat gelas yang akan digunakan seperti tabung reaksi,

Erlenmeyer, pipet dibungkus terlebih dahulu dengan
menggunakan kertas coklat.
2) Kemudian alat alat tersebut dimasukkan kedalam oven
untuk disterilisasi dengan suhu 180°C selama 2 jam.

2. Pembuatan Sampel

 Air rebusan Cacing Tanah

1) Cacing tanah dipilih sesuai kebutuhan peneliti.

2) Cacing tanah dicuci hingga bebas dari kotoran yang

menempel. Lalu dikeringkan. Simpan pada suhu ±4°C
selama 12 jam.

3) Cacing tanah ditimbang untuk pembuatan air rebusan.

4) Untuk pembuatan air rebusan, 100 gram cacing tanah

yang telah ditimbang dimasukkan ke dalam Erlenmeyer
berisi aquadest steril 100 mL untuk konsentrasi air rebusan
100%.

5) Campuran cacing tanah dan aquadest dipanaskan diatas

hot plate pada suhu <70°C selama 10 menit.

6) Air rebusan cacing tanah disaring dan diambil filtratnya.

  Larutan serbuk Cacing Tanah

1) Cacing tanah dipilih sesuai kebutuhan peneliti.

2) Cacing tanah dicuci hingga bebas dari kotoran yang

menempel. Lalu dikeringkan. Simpan pada suhu ±4°C
selama 12 jam.

3) Cacing tanah ditimbang untuk pembuatan serbuk cacing.

4) Cacing tanah dikeringkan menggunakan oven pada suhu

180°C selama 4-6 jam.

5) Kemudian granul cacing tanah dihaluskan menggunakan

blender

6) Kemudian cacing tanah yang telah berbentuk serbuk

disaring hingga dihasilkan partikel yang lebih kecil.

7) Larutkan serbuk cacing tanah kedalam 100 mL aquades

steril untuk mendapatkan larutan serbuk konsentrasi 100%.

3. Pembuatan Suspensi Bakteri 0.5 Mac Farland

1) NaCl Fisiologis 0,85% dipipet 10 mL kedalam tabung

reaksi steril

2) Biakan murni Salmonella thypi dimasukkan kedalam 10

mL NaCl Fisiologis 0,85% menggunakan ose, lalu
dihomogenkan.

3) Kekeruhannya diukur berdasarkan standar kekeruhan

MacFarland
4. Pembuatan Media MacConkey Agar

1) Serbuk MacConkey Agar ditimbang sesuai kuantitas

yang diperlukan.

2) Serbuk MacConkey Agar yang telah ditimbang masing

masing dimasukkan kedalam Erlenmeyer 500 mL.

3) Aquades ditambahkan kedalam Erlenmeyer yang telah

berisi serbuk MacConkey Agar sesuai kuantitas yang
diperlukan.

4) Kemudian larutan dipanaskan diatas hotplate sampai

mendidih dan homogen.

5) Larutan disterilkan dalam autoclave pada suhu 121°C

selama 15 menit.

6) Larutan didiamkan hingga suhu hangat (45-50°C),

7) Larutan Media MacConkey Agar dimasukkan kedalam

cawan petri secara aseptik.

5. Pengenceran Konsentrasi Sampel

1) Air rebusan cacing tanah konsentrasi 100% diencerkan

menjadi konsentrasi 80%, 40%, dan 10% menggunakan
aquadest steril. Variasi konsentrasi air rebusan dan larutan
serbuk yang akan digunakan pada perlakuan dapat dilihat
pada table 3.

Variasi Volume Pelarut Volume

Konsentrasi sampel (mL) aquades Akhir
(mL) (mL)

80% 4 1 5
 40% 2 3 5

10% 0,5 4,5 5

7. Penentuan KHM (Konsentrasi Hambat Minimum)

1. Dari tiap konsentrasi tabung pengenceran sampel,

diambil 0,5 mL sampel dan diinokulasikan 0,5 mL
suspensi bakteri Salmonella thypi.
2. Kontrol bakteri yaitu suspensi bakteri Salmonella thypi
0,5 MacFarland.
3. Kontrol sampel atau kontrol negatif yaitu sampel air
rebusan dan larutan serbuk.
4. Kontrol positif yaitu 0,5 mL kloramfenikol dan 0,5 mL
suspensi bakteri.
5. Inkubasi pada suhu 37°C selama 18-24 jam.
6. Amati kekeruhan dan bandingkan dengan kontrol.
7. Tentukan KHM (Konsentrasi Hambat Minimum)
berdasarkan kekeruhan sampel.

8. Penentuan KBM (Konsentrasi Bunuh Minimum)

1) Setelah KHM ditentukan, goreskan hasil KHM pada

media MacConkey steril.

2) Inkubasi pada suhu 37°C selama 18-24 jam.

3) Untuk KBM (Konsentrasi Bunuh Minimum) atau MBC

(Minimum Bactericidal Concentration) ditentukan dengan
mengamati media MacConkey yang telah diinkubasi.
Jika koloni tidak ditemukan pada media tersebut, maka
dapat ditentukan KBM.
 F. Analisis Data

Hasil penelitian ini akan dianalisis dan disajikan dalam bentuk tabular dan
tekstular.

G. Jadwal Penelitian

Tabel 4 Jadwal Penelitian

No Kegiatan Bulan: Maret Bulan: April Bulan: Mei Bulan: Juni

Penelitian
1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4

1 Pengambilan √
Sampel

2 Pemeriksaan √
Sampel

3 Pengumpulan √ √ √ √
Data

4 Pengolahan Data √ √

5 Analisis Data √ √

6 Penyusunan √ √ √
Laporan
 DAFTAR PUSTAKA

1. Mardiastuti, dkk. Emerging Resistance Pathogen: Situasi Terkini di Asia,

Eropa, Amerika Serikat, Timur Tengah, dan Indonesia. Majalah Kedokteran
Indonesia Vol. 57; 2007
2. Nursalam, dkk. Asuhan keperawatan bayi dan anak (untuk perawat dan
bidan), Edisi 1. Jakarta: Salemba; 2011
3. Depkes RI. Profil Kesehatan Indonesia Tahun 2013. Jakarta: Depkes RI; 2014
4. Slamet S,. Buku Ajar Penyakit Dalam Jilid II. Jakarta: FK UI; 2009
5. Nelwan. Ilmu Penyakit Dalam. Jilid I. Jakarta : Balai penerbit FKUI; 1999.
6. Fara Deni. Uji Daya Hambat Ekstrak Cacing Tanah terhadap Salmonella
thypi secara in vitro. Skripsi. Universitas Sanata Dharma; 2015
7. Khairuman S.P. Mengeruk Untung dari Beternak Cacing. Jakarta: Agromedia
Pustaka; 2010
8. Kementrian Kesehatan Republik Indonesia. Keputusan Menteri Kesehatan RI
Nomor 364/MENKES/SK/V/2006 tentang Pedoman pengendalian demam
tifoid. Jakarta: Kemenkes RI; 2006
9. Radji, Maksum. Buku Ajar Mikrobiologi Panduan Mahasiswa Farmasi dan
Kedokteran. Jakarta: EGC; 2010
10. Sujudi,dkk. Buku Ajar Mikrobiologi Kedokteran. Edisi Revisi. Jakarta:
Binarupa Aksara Publisher
11. Anonim. 2016. Salmonella thypi [Link]
[Link] Diunduh pada tanggal 29 Desember 2016 pukul
20.35 WIB.
12. Jawetz., et al. Mikrobiologi Kedokteran Jawetz, Melnick, & Adelberg, Ed.23,
Translation of Jawetz, Melnick, and Adelberg’s Medical Microbiology,
23thEd. Alih bahasa oleh Hartanto, H., et al. Jakarta: EGC; 2007.
13. Pelczar, Michael J. ECS. Chan. Dasar-dasar mikrobiologi. Jakarta. UI Press;
2008.