AKTIVITAS ANTIBAKTERI GEL EKSTRAK

DAUN BELUNTAS (Pluchea indica L.f)

TERHADAP Staphylococcus aureus
SECARA IN VITRO

SKRIPSI

Oleh :

RABI’A ADHAWIYAH
1513206015

PROGRAM STUDI S1 FARMASI

STIKES KARYA PUTRA BANGSA
TULUNGAGUNG
JULI 2019
 AKTIVITAS ANTIBAKTERI GEL EKSTRAK
DAUN BELUNTAS (Pluchea indica L.f)
TERHADAP Staphylococcus aureus
SECARA IN VITRO

SKRIPSI

Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat mencapai gelar Sarjana Farmasi
([Link].) Program Studi S1 Farmasi
STIKes Karya Putra Bangsa Tulungagung

Oleh :

RABI’A ADHAWIYAH
1513206015

PROGRAM STUDI S1 FARMASI

STIKES KARYA PUTRA BANGSA
TULUNGAGUNG
JULI 2019

i
 SKRIPSI

AKTIVITAS ANTIBAKTERI GEL EKSTRAK

DAUN BELUNTAS (Pluchea indica L.f)
TERHADAP Staphylococcus aureus
SECARA IN VITRO

Yang diajukan oleh :

RABI‟A ADHAWIYAH
1513206015

Telah disetujui oleh :

Pembimbing I, Pembimbing II,

Dr. Dra. Sri Winarsih, [Link]., Apt. Choirul Huda, [Link]., Apt.
NIDN. 0023085401 NIDN.072 603 8502

ii
 SKRIPSI

AKTIVITAS ANTIBAKTERI GEL EKSTRAK

DAUN BELUNTAS (Pluchea indica L.)
TERHADAP Staphylococcus aureus
SECARA IN VITRO
Oleh :
Rabi‟a Adhawiyah
1513206015

Telah lolos uji etik penelitian dan dipertahankan di hadapan Panitia Penguji
Skripsi Program Studi S1 Farmasi STIKes Karya Putra Bangsa

Tanggal : ......

Ketua Penguji : Dr. Dra. Sri Winarsih, [Link]., Apt. ( ....................... )

Anggota Penguji : 1. Choirul Huda M. Farm., Apt ( ........................)

: 2. Amalia Eka Putri, M. Farm., Apt (........................ )

: 3. Yunita Diyah S., [Link]. (........................ )

Mengetahui,

Ketua STIKes Karya Putra Bangsa

dr. Denok Sri Utami, M.H.

iii
 PERNYATAAN

Dengan ini saya menyatakan bahwa dalam skripsi ini tidak terdapat karya yang
pernah diajukan untuk memperoleh gelar kesarjanaan di suatu Perguruan Tinggi
dan sepanjang pengetahuan saya juga tidak terdapat karya atau pendapat yang
pernah ditulis atau diterbitkan oleh orang lain kecuali yang secara tertulis diacu
dalam naskah ini dan diterbitkan dalam daftar pustaka.

Tulungagung, Juli 2019

Penulis,

Rabi‟a Adhawiyah

iv
 KATA PENGANTAR

Dengan mengucap syukur kehadirat Allah SWT, yang telah melimpahkan

rahmat dan hidayah-Nya, sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi ini.
Adapun judul skripsi ini adalah “Aktivitas Antibakteri Gel Ekstrak Daun Beluntas
(Pluchea indica L.f) terhadap Staphylococcus aureus secara In Vitro”. Skripsi ini
diajukan sebagai salah satu syarat kelulusan dalam rangka memperoleh gelar
Sarjana Farmasi STIKes Karya Putra Bangsa Tulungagung.
Penulis menyadari bahwa skripsi ini sangat sulit terwujud sebagaimana
yang diharapkan, tanpa bimbingan dan bantuan serta tersedianya fasilitas-fasilitas
yang diberikan oleh beberapa pihak. Oleh karena itu, penulis sampaikan terim
kasih dan hormat kepada :
1. dr. Denok Sri Utami M.H selaku ketua STIKes Karya Putra Bangsa
Tulungagung.
2. Dara Paranidya, [Link]., Apt selaku Kaprodi S1 Farmasi dan pembimbing
akademik STIKes Karya Putra Bangsa Tulungagung.
3. [Link]. Sri Winarsih, [Link].,Apt selaku pembimbing I yang telah memberikan
bimbingan, ilmu, dan pengarahan dalam menyelesaikan skripsi ini.
4. Choirul Huda [Link].,Apt selaku pembimbing II yang telah memberikan
bimbingan, motivasi, nasehat dan pengarahan dalam menyelesaikan penulisan
skripsi ini.
5. Bapak/Ibu Dosen Program Studi S1 Farmasi STIKes Karya Putra Bangsa
yang telah memberikan banyak ilmu, nasehat dan motivasi kepada penulis.
6. Seluruh jajaran Laboran STIKes Karya Putra Bangsa yang telah bersedia
meluangkan waktu dan tenaga untuk menemani penulis melakukan penelitian
di Laboratorium.
7. Seluruh keluarga besar penulis, terima kasih atas do‟a, dukunganserta
pengertiannya sehingga penulis bisa menyelesaikan skripsi dan studi S1
Farmasi di STIKes Karya Putra Bangsa.

v
8. Teman-teman Departemen Bahan Alam Hima, Bunga, Ajie, Malik, Dian dan
teman-teman yang lain atas kerja sama dan kebersamaan yang begitu hangat
selama melaksanakan penelitian ini.
9. Semua pihak yang telah ikut membantu penulis selama proses penelitian dan
penyusunan skripsi ini (teman-teman apotek Sentral Farma Febriananda,
Endah, Oppie, Mbak Evi, Mbak Amel, Ibu Lili, teman-teman SMP Bela dan
Ratna, kemudian Mas Frida, Mas Adib, teman-teman S1 Farmasi Luk Luil,
Yesi, Lisa, Vony, Binti, Ameylia, Galih, Sri Wahyuni, Kartika, Riska, Laila,
Alief, Fitria, Ayu, Bayu).
Penulis menyadari bahwa skripsi ini belum sempurna. Oleh karena itu
penulis mengharapkan saran dan kritik yang membangun demi perbaikan proposal
ini. Semoga proposal ini dapat bermanfaat bagi penulis dan pembaca.

Tulungagung, Juli 2019

Penulis

vi
 DAFTAR ISI

HALAMAN JUDUL ................................................................................. i

HALAMAN PERSETUJUAN ................................................................ ii
HALAMAN PENGESAHAN .................................................................. iii
HALAMAN PERNYATAAN ORISINALITAS ................................... iv
KATA PENGANTAR ............................................................................... v
DAFTAR ISI .............................................................................................. vii
DAFTAR TABEL ..................................................................................... xii
DAFTAR GAMBAR ................................................................................. xiii
DAFTAR LAMPIRAN ............................................................................ xiv
INTISARI ................................................................................................. xv
ABSTRACT .............................................................................................. xvi
BAB I PENDAHULUAN ..................................................................... 1
1.1 Latar Belakang .................................................................... 1
1.2 Rumusan Masalah ............................................................... 4
1.3 Tujuan Penelitian ................................................................. 4
1.4 Hipotesis .............................................................................. 4
1.5 Manfaat Penelitian ............................................................... 5
BAB II TINJAUAN PUSTAKA ........................................................... 6
2.1 Obat Tradisional ................................................................. 6
2.2 Tanaman Beluntas ............................................................... 6
2.2.1 Klasifikasi ................................................................ 6
2.2.2 Morfologi ................................................................ 7
2.2.3 Kandungan ............................................................... 7
[Link] Flavonoid .................................................... 7
[Link] Tanin ........................................................... 8
[Link] Saponin ....................................................... 9
2.2.4 Khasiat ..................................................................... 10
2.3 Simplisia ............................................................................. 10
2.3.1 Definisi ................................................................... 10

vii
 2.3.2 Syarat ....................................................................... 11
2.3.3 Penyiapan Simplisia................................................. 12
2.3.4 Serbuk dan Kadar air Simplisia ............................... 13
2.4 Ekstraksi ............................................................................... 14
2.4.1 Metode Ekstraksi .................................................... 15
[Link] Ekstraksi Cara Dingin .................................. 15
[Link] Ekstraksi Cara Panas ................................... 15
2.4.2 Pelarut ...................................................................... 17
[Link] Akuades ...................................................... 18
[Link] Etanol .......................................................... 18
[Link] Etil Asetat ................................................... 19
[Link] Kloroform ................................................... 19
[Link] Petroleum eter ............................................. 19
[Link] Heksana ....................................................... 19
2.5 Gel ................................................................................. 20
2.5.1 Definisi ................................................................... 20
2.5.2 Monografi Bahan .................................................... 20
2.5.3 Evaluasi ................................................................... 21
2.6 Bakteri ................................................................................ 23
2.6.1 Definisi .................................................................... 23
2.6.2 Penggolongan Bakteri ............................................. 23
2.7 Staphylococcus aureus ........................................................ 25
2.7.1 Klasifikasi ............................................................... 25
2.7.2 Morfologi ................................................................ 26
2.7.3 Identifikasi Staphylococcus aureus ........................ 27
[Link] Pewarnaan Gram ......................................... 27
[Link] Mannitol Salt Agar ..................................... 27
[Link] Uji Katalase ................................................ 27
[Link] Uji Koagulase ............................................. 27
2.8 Antibakteri .......................................................................... 28
2.9 Uji Aktivitas Antibakteri .................................................... 29

viii
 2.9.1 Metode Difusi .......................................................... 29
[Link] Metode Disc diffusion ................................. 29
[Link] Metode E-test .............................................. 30
[Link] Ditch-plate technique .................................. 30
[Link] Cup-plate technique .................................... 30
[Link] Gradient-plate techniques .......................... 30
2.9.2 Metode Dilusi .......................................................... 31
[Link] Metode dilusi cair (broth dilution test) ....... 31
[Link] Metode dilusi padat (solid dilution test) ...... 31
2.10 Klindamisin ........................................................................ 31
BAB III METODE PENELITIAN .......................................................... 33
3.1 Kerangka Konsep ............................................................... 33
3.2 Bahan ................................................................................. 34
3.3 Alat ................................................................................. 34
3.4 Populasi Penelitian ............................................................. 35
3.5 Sampel Penelitian ................................................................ 35
3.6 Definissi Operasional ......................................................... 35
3.7 Variabel Penelitian ............................................................. 35
3.7.1 Variabel Bebas ........................................................ 36
3.7.2 Variabel Terikat ...................................................... 36
3.8 Prosedur Penelitian .............................................................. 36
3.8.1 Determinasi Tanaman ............................................. 36
3.8.2 Pembuatan Simplisia ............................................... 36
3.8.3 Uji Kadar Air Simplisia ........................................... 37
3.8.4 Pembuatan Ekstrak .................................................. 37
3.8.5 Uji Bebas Etanol Ekstrak ......................................... 37
3.8.6 Skrining Fitokimia ................................................... 38
[Link] Flavonoid ..................................................... 38
[Link] Tanin ............................................................ 38
[Link] Saponin ....................................................... 38
3.8.7 Sterilisasi Alat dan Bahan........................................ 38

ix
 3.8.8 Pembuatan Media .................................................... 38
[Link] Pembuatan Media NB .................................. 38
[Link] Pembuatan Media MSA ............................... 39
[Link] Pembuatan Media NA.................................. 39
3.8.9 Uji Identifikasi Staphylococcus aureus .................. 39
3.8.10 Pembuatan Suspensi Bakteri ................................... 39
3.8.11 Formulasi Gel .......................................................... 39
[Link] Formulasi Standar ...................................... 39
[Link] Formulasi Gel Ekstrak Daun Beluntas ..... 40
3.8.12 Pembuatan Gel ........................................................ 40
3.8.13 Evaluasi Gel ............................................................ 40
[Link] Uji Organoleptis......................................... 40
[Link] Uji pH ........................................................ 40
[Link] Uji Homogenitas ........................................ 41
[Link] Uji Daya Sebar .......................................... 41
[Link] Uji Daya Lekat ........................................... 41
[Link] Uji Daya Proteksi....................................... 41
[Link] Uji Stabilitas Fisik ..................................... 41
3.8.14 Uji Aktivitas Antibakteri Gel................................... 41
3.9 Jalan Penelitian ................................................................... 42
3.10Replikasi Kelompok Penelitian .......................................... 43
3.11Analisis Statistika ................................................................ 43
BAB IV HASIL PENELITIAN & PEMBAHASAN
4.1 Determinasi Tanaman ......................................................... 46
4.2 Pemeriksaan Karakteristik Ekstrak ..................................... 46
4.2.1 Uji Kadar Air Simplisia .......................................... 47
4.2.2 Ekstrak Daun Beluntas ........................................... 47
4.2.3 Uji Bebas Etanol ..................................................... 48
4.3 Skrining Fitokimia .............................................................. 48
4.3.1 Uji Flavonoid .......................................................... 49
4.3.2 Uji Tanin ................................................................. 50

x
 4.3.3 Uji Saponin ............................................................. 51
4.4 Uji Bakteri Staphylococcus aureus .................................... 52
4.4.1 Pewarnaan Gram Bakteri ........................................ 52
4.4.2 Uji Koagulase .......................................................... 53
4.4.3 Uji Katalase ............................................................ 54
4.4.4 Identifikasi Media MSA ......................................... 54
4.5 Evaluasi Sediaan Gel .......................................................... 55
4.5.1 Organoleptis ............................................................ 55
4.5.2 Uji Homogenitas ..................................................... 57
4.5.3 Pengujian pH .......................................................... 57
4.5.4 Uji Daya Sebar ........................................................ 58
4.5.5 Uji Daya Lekat ........................................................ 59
4.5.6 Uji Daya Proteksi .................................................... 60
4.6 Uji Aktivitas Antibakteri Gel Ekstrak Daun Beluntas ....... 61
4.7 Analisis Statistika ............................................................... 65
4.7.1 Uji Normalitas Data ................................................ 65
4.7.2 Uji Homogenitas Data ............................................ 66
4.7.3 Uji One Way Anova ................................................ 66
4.7.4 Uji Korelasi ............................................................. 68
BAB V PENUTUP
5.1 Kesimpulan ......................................................................... 69
5.2 Saran ................................................................................. 69
DAFTAR PUSTAKA ............................................................................... 70

xi
 DAFTAR TABEL

TABEL Hal
II.1 Sifat Etanol .......................................................................................... 17
II.2 Kategori respon hambatan pertumbuhan bakteri berdasarkan
diameter zona hambat ........................................................................... 31
III.1 Formulasi standar gel ........................................................................... 39
III.2 Formulasi gel ekstrak daun beluntas .................................................... 40
IV.1 Uji Kadar Air Simplisia Serbuk Pluchea indica L.f ............................. 47
IV.2 Hasil Uji Susut Pengeringan Daun Beluntas ........................................ 48
IV.3 Hasil Rendemen Ekstrak ...................................................................... 48
IV.4 Hasil Uji Bebas Etanol Daun Beluntas ................................................ 49
IV.5 Hasil Skrining Fitokimia Daun Beluntas ............................................. 50
IV.6 Uji Identifikasi bakteri Staphylococcus aureus ................................... 53
IV.7 Uji Organoleptis ................................................................................... 57
IV.8 Uji Homogenitas .................................................................................. 58
IV.9 Uji Ph.................................................................................................... 59
IV.10 Uji Daya Sebar ..................................................................................... 60
IV.11 Uji Daya Lekat ..................................................................................... 61
IV.12 Uji Daya Proteksi ................................................................................. 62
IV.13 Hasil zona hambat gel antibakteri ekstrak daun beluntas terhadap
Staphylococcus aureus ......................................................................... 64
IV.14 Hasil Uji Normalitas Data .................................................................... 66
IV.15 Hasil uji Homogenitas Data ................................................................. 67
IV.16 Hasil Uji One Way Anova .................................................................... 67
IV.17 Homogeneous ....................................................................................... 68
IV.18 Hasil Uji Korelasi ................................................................................. 69

xii
 DAFTAR GAMBAR

GAMBAR Hal
2.1 Daun Beluntas (Pluchea indica L.f) ..................................................... 6
2.2 Struktur Flavonoid................................................................................ 8
2.3 Struktur Tanin ...................................................................................... 9
2.4 Struktur Saponin ................................................................................... 10
2.5 Bakteri Staphylococcus aureus .............................................................. 26
3.1 Kerangka Konsep Penelitian ................................................................ 33
4.1 Uji Flavonoid; Uji Tanin; Uji Saponin ................................................ 50
4.2 Reaksi Flavonoid dengan H2SO4...................................................................................... 51
4.3 Reaksi Tanin dengan FeCl3 .................................................................................................. 52
4.4 Reaksi Saponin dengan air ................................................................... 53
4.5 Hasil Pewarnaan Gram Bakteri Staphylococcus aureus ...................... 54
4.6 Uji koagulase ........................................................................................ 55
4.7 Uji Katalase .......................................................................................... 55
4.8 Sebelum; sesudah penanaman Staphylococcus aureus pada MSA ...... 56
4.9 Uji Organoleptis ................................................................................... 56
4.10 Uji Homogenitas .................................................................................. 58
4.11 Uji pH ................................................................................................... 59
4.12 Uji Daya Sebar ..................................................................................... 60
4.13 Uji Daya Lekat ..................................................................................... 61
4.14 Uji Daya Proteksi ................................................................................. 62
4.15 Uji aktivitas antibakteri terhadap Staphylococcus aureus.................... 63

xiii
 DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran Hal
1. Hasil Determinasi Pluchea indica ........................................................ 80
2. Dokumentasi Penelitian........................................................................ 81
3. Kerangka Uji Aktivitas Antibakteri dengan Metode Difusi Cakram ... 87
4. Perhitungan Pembuatan Media Pertumbuhan Bakteri ......................... 88
5. Perhitungan Hasil .................................................................................. 89
6. Formulasi dan Perhitungan Bahan Sediaan Gel .................................. 90
7. Hasil Orientasi Gel Ekstrak Pluchea indica ......................................... 91
8. Hasil Analisis Data .............................................................................. 95
9. Alur Prosedur Kerja ............................................................................ 99

xiv
 AKTIVITAS ANTIBAKTERI GEL EKSTRAK DAUN BELUNTAS
(Pluchea indica L.)TERHADAP Staphylococcus aureus
SECARA IN VITRO

RABI’A ADHAWIYAH
Prodi S1 Farmasi

INTISARI

Staphylococcus aureus merupakan bakteri yang mudah ditemukan dimana-

mana, bersifat patogen dan sering menyebabkan infeksi. Di Jakarta pada periode
tahun 1986-1993 terjadi peningkatan angka kejadian infeksi S. aureus hampir
empat kali lipat dari 2,5% menjadi 9,4%. Staphylococcus aureus menyebabkan
bermacam – macam infeksi seperti pneumonia, meningitis, empiema, endokartitis,
jerawat, pioderma atau impetigo. Salah satu pilihan untuk menanggulangi suatu
infeksi adalah dengan menggunakan antibiotik, akan tetapi penggunaan antibiotik
sudah menjadi resistensi akibat penggunaan yang tidak tepat. Oleh karena itu,
diperlukan adanya terapi alternatif dari tumbuhan yang berpotensi tinggi sebagai
antibakteri. Daun beluntas memiliki potensi sebagai antibakteri terhadap S. aureus
yang merupakan bakteri penyebab infeksi pada manusia, untuk mempermudah
penggunaannya sebagai obat maka perlu dibentuk menjadi sediaan farmasi yaitu
gel. Tujuan penelitian ini adalah mengetahui aktivitas antibakteri gel ekstrak daun
beluntas terhadap Staphylococcus aureus menggunakan metode difusi agar.
Metode penelitian yang digunakan adalah eksperimental. Sampel daun
beluntas diekstraksi menggunakan metode soxhletasi dengan etanol 70%. Kontrol
positif yang digunakan adalah gel klindamisin dan kontrol negatif adalah basis gel
tanpa ekstrak. Ekstrak daun beluntas dibuat menjadi sediaan gel dengan
konsentrasi 5%, 10%, dan 15%. Sediaan gel dilakukan evaluasi mencakup uji
organoleptis, pH, homogenitas, daya sebar, daya lekat, dan daya proteksi selama
dua minggu atau empat belas hari. Analisa statistik dilakukan dengan kolmogorov-
smirnov, levene statistic, One Way Anova dan spearman.
Hasil pengujian aktivitas antibakteri gel ekstrak daun beluntas
menunjukkan gel ekstrak daun beluntas mempunyai aktivitas antibakteri terhadap
Staohylococcus aureus. Gel ekstrak daun beluntas dengan konsentrasi 5%; 10%;
dan 15% secara berurutan memiliki rata-rata zona hambat sebesar 7±0,81 mm;
9,5±0,57 mm; dan 13,5±0,57 mm. Aktivitas antibakteri diduga berasal dari
aktivitas senyawa flavonoid, tanin dan saponin dalam ekstrak daun beluntas. Gel
ekstrak daun beluntas memiliki daya hambat lebih kecil dibanding dengan gel
klindamisin yang memiliki rata-rata zona hambat sebesar 31,25±1,91 mm. Gel
esktrak daun beluntas memenuhi syarat uji organoleptis, homogentis, pH, daya
sebar, daya lekat, dan daya proteksi serta stabil dalam masa penyimpanan.

Kata kunci : Antibakteri, gel, Pluchea indica, Staphylococcus aureus

xv
 ANTIBACTERIAL ACTIVITIES OF BELUNTAS LEAF (Pluchea indica L.)
EXTRACT ON Staphylococcus aureus
IN VITRO

RABI'A ADHAWIYAH
S1 Pharmacy Study Program

ABSTRACT

Staphylococcus aureus is a bacterium that is easily found everywhere. It

is known as pathogenic and often causes infection. In Jakarta in the period 1986-
1993, the incidence of S. aureus infection increased nearly fourfold from 2.5% to
9.4%. Staphylococcus aureus causes various infections such as pneumonia,
meningitis, empyema, endocartitis, acne, pyoderma or impetigo. One option to
overcome an infection is to use antibiotics, but the use of antibiotics has become a
resistance due to improper use. Therefore, there is a need for alternative
therapies from plants that have high potential as antibacterial. Beluntas leaves
have the potential as an antibacterial against Staphylococcus aureus which is a
bacterium that causes infection in humans. Use as a drug it is necessary to form a
pharmaceutical preparation, namely gel. The purpose of this study was to
determine the antibacterial activity of beluntas leaf extract gel against
Staphylococcus aureus using agar diffusion method.
The research method used is experimental. Beluntas leaf samples were
extracted using the soxhletation method with 70% ethanol. The positive control
used is clindamycin gel and negative control is the base gel without extract.
Beluntas leaf extract was made into gel preparations with a concentration of 5%,
10%, and 15%. The gel preparations were evaluated including organoleptic test,
pH, homogeneity, dispersion, adhesion, and protection for two weeks or fourteen
days. Statistical analysis was carried out with kolmogorov-smirnov, levene
statistics, One Way Anova and spearman.
The results of the antibacterial activity of the beluntas leaf extract gel
showed that the beluntas leaf extract gel had antibacterial activity against
Staohylococcus aureus. Beluntas leaf extract gel with a concentration of 5%;
10%; and 15% in sequence have an inhibition zone average of 7 ± 0.81 mm; 9.5 ±
0.57 mm; and 13.5 ± 0.57 mm. Antibacterial activity is thought to originate from
the activity of flavonoid compounds, tannins and saponins in beluntas leaf extract.
Beluntas leaf extract gel has a smaller inhibition compared to Klindamycin gel
which has an average inhibition zone of 31.25 ± 1.91 mm. Beluntas leaf extract
gel fulfills organoleptic, homogeneous, pH, dispersion, adhesion, and protection
and is stable during storage.

Keywords: Antibacterial, gel, Pluchea indica, Staphylococcus aureus

xvi
 BAB I
PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Indonesia merupakan salah satu negara dengan kekayaan hayati terbesar di
dunia yang memiliki lebih dari 30.000 spesies tanaman tingkat tinggi. Hingga saat
ini, tercatat 7000 spesies tanaman telah diketahui khasiatnya namun kurang dari
300 tanaman yang digunakan sebagai bahan baku industri farmasi secara regular.
WHO pada tahun 2008 mencatat bahwa 68% penduduk masih menggantungkan
sistem pengobatan tradisional yang mayoritas melibatkan tumbuhan untuk
menyembuhkan penyakit (Saifuddin, et al., 2011).
Obat tradisional adalah bahan atau ramuan bahan yang berupa bahan
tumbuhan, hewan, mineral, sediaan sarian (galenik), atau campuran dari bahan
tersebut yang secara turun temurun telah digunakan untuk pengobatan dan dapat
diterapkan sesuai dengan norma yang berlaku di masyarakat (Permenkes RI No.
007 Tahun 2012), bahan - bahan yang digunakan tidak mengandung bahan kimia
sintetik.
Salah satu tanaman yang dapat dimanfaatkan sebagai pengobatan adalah
tanaman beluntas. Masyarakat Indonesia umumnya memanfaatkan tanaman
beluntas sebagai lalapan dan obat tradisional. Sebagai obat tradisional, beluntas
dimanfaatkan untuk menghilangkan bau badan dan mulut, mengatasi kurang nafsu
makan, mengatasi gangguan pencernaan pada anak, menghilangkan nyeri pada
rematik, nyeri tulang dan sakit pinggang, menurunkan demam, mengatasi
keputihan dan haid yang tidak teratur, hal ini disebabkan adanya kandungan
senyawa fitokimia dalam daun beluntas (Nurhalimah, 2015).
Daun beluntas memiliki kandungan kimia antara lain alkaloid, flavonoid,
polifenol, tanin, monoterpen, sterol dan kuinon. Kandungan flavonoid di dalam
daun beluntas membuat daun ini memiliki aktivitas antibakteri terhadap bakteri
Gram positif. Kandungan senyawa fenolnya berguna untuk mengganggu
pertumbuhan Gram negatif (Widyawati, et al., 2014). Martina (2012), mengatakan

1
 2

daun beluntas dapat menghambat pertumbuhan bakteri Streptococcus mutans

dalam rongga mulut dengan konsentrasi 25% pada sediaan obat kumur. Penelitian
lainnya membuktikan ekstrak daun beluntas mampu menghambat pertumbuhan
bakteri Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis, Pseudomonas aeruginosa
(Manu, 2013) dan Propionibacterium acnes (Rahmi et al., 2015).
Staphylococcus aureus merupakan bakteri yang mudah ditemukan dimana-
mana dan bersifat patogen oportunistik, berkoloni pada kulit dan permukaan
mukosa manusia. Sumber infeksi bakteri ini berasal dari lesi terbuka maupun
barang-barang yang terkena lesi tersebut, selain itu ada beberapa tempat di rumah
sakit yang beresiko tinggi dalam penyebaran bakteri ini, seperti unit perawatan
intensif, perawatan neonatus, dan ruang operasi (Brooks et al., 2007; WHO,
2012). Staphylococcus aureus juga merupakan bakteri penyebab infeksi
nosokomial yang banyak terjadi di Indonesia. Di Jakarta pada periode tahun 1986-
1993 terjadi peningkatan angka kejadian infeksi Staphylococcus aureus hampir
empat kali lipat dari 2,5% menjadi 9,4% (Nasir, 2010).
Antibiotik merupakan pilihan terbaik untuk menanggulangi suatu infeksi.
Antibiotik merupakan senyawa obat yang digunakan untuk mengobati infeksi
yang disebabkan oleh bakteri dan mikroorganisme selain bakteri (Bahi dan
Anizar, 2013). Klindamisin merupakan salah satu contoh antibiotik dengan
mekanisme kerjanya sebagai bakteriostatik ataupun bakterisidal, yang tergantung
pada konsentrasi obat, tempat infeksi dan organisme penyebab infeksi (Mulyani,
et al., 2017). Klindamisin digunakan untuk mengobati infeksi serius yang
disebabkan oleh bakteri anaerob atau aerob Gram positif (BPOM RI, 2015).
Staphylococcus aureus merupakan bakteri Gram positif (Brooks, et al., 2005),
sehingga klindamisin dipilih sebagai kontrol positif pada percobaan. Akan tetapi,
penggunaan antibiotik yang tidak tepat dapat menyebabkan terjadinya resistensi
(Sholih, et al., 2015). Oleh karena itu, diperlukan adanya terapi alternatif dari
tumbuhan yang berpotensi tinggi sebagai antibakteri.
Daun beluntas dapat berfungsi sebagai antibakteri karena didalamnya
mengandung senyawa aktif antibakteri. Untuk mengambil senyawa aktif
antibakteri dalam tumbuhan dapat dilakukan dengan menggunakan metode
 3

ekstraksi. Ekstraksi merupakan suatu metode yang digunakan untuk menarik satu
atau lebih senyawa dari tempat asalnya dengan menggunakan pelarut yang sesuai
(Syamsuni, 2006). Metode yang diduga efektif dalam mengekstrak senyawa
adalah soxhletasi. Prinsip soxhletasi adalah penyaringan yang berulang-ulang
sehingga hasil yang didapat sempurna dan pelarut yang digunakan relatif sedikit.
Kadji, et al. (2013) menyatakan, ekstraksi cara soxhlet menghasilkan rendemen
yang lebih besar jika dibandingkan dengan maserasi. Dari sini, dibuatlah ekstrak
soxhlet daun beluntas.
Dalam penggunaannya, untuk memudahkan pengaplikasian ekstrak daun
beluntas sebagai antibakteri maka dapat dibuat dalam bentuk sediaan farmasi
Salah satu sediaan farmasi yang efektif untuk mengobati infeksi akibat
Staphylococcus aureus yaitu gel. Gel adalah sediaan semipadat yang terdiri dari
suspensi yang dibuat dari partikel anorganik yang kecil atau molekul organik yang
besar terpenetrasi oleh suatu cairan (Ansel, 2008). Sediaan gel dipilih karena
mudah mengering, membentuk lapisan film yang mudah dicuci dan memberikan
rasa dingin di kulit (Panjaitan, et al., 2012).
Sediaan gel merupakan salah satu sediaan semi padat yang relatif kurang
stabil zat aktifnya dibandingkan sediaan padat sehingga perlu dilakukan uji
stabilitas. Uji stabilitas merupakan bagian penting program uji bahan obat.
Stabilitas sediaan setengah padat tergantung pada basis dan sifat kimia zat
aktifnya. Komposisi dan pembuatan sediaan setengah padat juga menjadi
perhatian (Cartensen dan Rhodes, 2000). Banyak faktor yang mempengaruhi
stabilitas produk farmasi, seperti stabilitas dari bahan aktif, interaksi antara bahan
aktif dan bahan tambahan, proses pembuatan, proses pengemasan, dan kondisi
lingkungan selama pengangkutan, penyimpanan, dan penanganan, dan jangka
waktu produk antara pembuatan hingga pemakaian (Vadas, 2010).
Berdasarkan uraian di atas, penelitian ini bertujuan untuk mengetahui
aktivitas antibakteri gel ekstrak daun beluntas (Pluchea folium) terhadap
Staphylococcus aureus yang merupakan bakteri penyebab infeksi di kulit.
 4

1.2 Rumusan Masalah

1. Apakah ekstrak daun beluntas (Pluchea indica L.f) dalam sediaan gel
menurunkan jumlah koloni Staphylococcus aureus secara in vitro?
2. Apakah efektivitas gel ekstrak daun beluntas tidak berbeda dengan gel
klindamisin dalam menghambat pertumbuhan Staphylococcus aureus
secara in vitro ?
3. Bagaimanakah stabilitas fisik sediaan gel yang mengandung ekstrak daun
beluntas (Pluchea indica L.f)?

1.3 Tujuan
1. Mengetahui aktivitas ekstrak daun beluntas (Pluchea indica L.f) dalam
sediaan gel menurunkan jumlah koloni Staphylococcus aureus secara in
vitro.
2. Mengetahui konsentrasi gel ekstrak daun beluntas (Pluchea indica L.f)
yang setara dengan gel klindamisin dalam menghambat pertumbuhan
Staphylococcus aureus secara in vitro.
3. Mengetahui stabilitas fisik sediaan gel yang mengandung ekstrak daun
beluntas (Pluchea indica L.f)

1.4 Hipotesis
1. Gel ekstrak daun beluntas menghambat pertumbuhan bakteri
Staphylococcus aureus secara in vitro, semakin tinggi dosis semakin luas
zona hambat yang terbentuk.
2. Zona hambat gel ekstrak daun beluntas (Pluchea indica L.,f) tidak berbeda
dengan zona hambat gel klindamisisn terhadap bakteri Staphylococcus
aureus secara in vitro.
 5

1.5 Manfaat
1.5.1 Bagi Peneliti
Penilitian ini diharapkan dapat menambah pengetahuan terkait daun
beluntas (Pluchea indica L.f) bisa dimanfaatkan dalam bentuk sediaan
farmasi sebagai antibakteri terhadap Staphylococcus aureus.
1.5.2 Bagi Instansi
Penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi ilmiah
mengenai daun beluntas (Pluchea indica L.f) sebagai bahan rujukan dan
atau referensi penelitian selanjutnya.
1.5.3 Bagi Masyarakat
Pemanfaatan daun beluntas sebagai bahan obat masih kurang
dikalangan masyarakat, sehingga penelitian ini diharapkan mampu
menunjukkan manfaat daun beluntas (Pluchea indica L.f) sebagai
antibakteri terhadap Staphylococcus aureus.
 BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Obat Tradisional
Obat tradisional adalah bahan atau ramuan bahan yang berupa bahan
tumbuhan, hewan, mineral, sediaan sarian (galenik), atau campuran dari bahan
tersebut yang secara turun temurun telah digunakan untuk pengobatan dan dapat
diterapkan sesuai dengan norma yang berlaku di masyarakat (Permenkes RI No.
007 Tahun 2012), bahan - bahan yang digunakan tidak mengandung bahan kimia
sintetik.

2.2 Tanaman Beluntas

2.2.1 Klasifikasi
Klasifikasi tanaman beluntas menurut Syamsuhidayat dan Hutapea (1991):
Kingdom : Plantae
Divisi : Spermathophyta
Sub divisi : Angiospermae
Kelas : Dicotyledonae
Bangsa : Asterales
Suku : Asteraceae
Marga : Pluchea
Jenis : Pluchea indica(L.)Less

Gambar 2.1 Daun beluntas (pluchea indica l.) (Direktorat jenderal tanaman
pangan dan hortikultura, 1994)

6
 7

2.2.2 Morfologi
Tanaman beluntas merupakan tanaman perdu tegak yang sering bercabang
banyak dan memiliki ketinggian 0,5-2 m. Daun tanaman beluntas berambut, dan
berwarna hijau muda. Helaian daun beluntas berbentuk oval elips dengan pangkal
daun runcing dan tepi daunnya bergerigi. Letak daun beluntas berseling dan
bertangkai pendek dengan panjang daun sebesar 2,5-9 cm dan lebar 1-5,5 cm (van
Steenis, 2008).
Bunga tanaman beluntas merupakan bunga majemuk dengan bentuk
bongkol kecil, berkumpul dalam malai rata majemuk terminal. Bunga beluntas
memiliki tabung kepala sari berwarna ungu, dan tangkai putik dengan 2 cabang
ungu yang menjulang jauh (van Steenis, 2008).
Buah tanaman beluntas berbentuk gangsing, keras dan berwarna cokelat.
Ukuran buah beluntas sangat kecil dengan panjang 1 mm. Buah beluntas memiliki
biji kecil dan berwarna cokelat keputih-putihan (van Steenis, 2008; Pujowati,
2006).
2.2.3 Kandungan
Beluntas mengandung asam amino (leusin, isoleusin, triptofan, treonin),
lemak, kalsium, fosfor, besi, vitamin A dan C. Akar beluntas mengandung
flavonoid dan tannin, tanaman beluntas juga mengandung benzyl asetate, benzyl
alcohol, serta eugenol (Ningtyas, 2012).
Daun beluntas memiliki kandungan kimia antara lain alkaloid, flavonoid,
polifenol, tanin, monoterpen, sterol dan kuinon. Kandungan flavonoid di dalam
daun beluntas membuat daun ini memiliki aktivitas antibakteri terhadap bakteri
gram positif. Kandungan senyawa fenolnya berguna untuk mengganggu
pertumbuhan bakteri bakteri gram negatif (Widyawati et al., 2014).
1. Flavonoid
Flavonoid merupakan golongan fenol alam yang terbesar, terdapat dalam
tumbuhan hijau. Flavonoid berfungsi sebagai bakteriostatik dan mekanisme
kerjanya mendenaturasi protein sel bakteri serta merusak membran sitoplasma.
Senyawa flavonoid dapat merusak membran sitoplasma yang menyebabkan
bocornya metabolit penting dan menginaktifkan sistem enzim bakteri. Kerusakan
 8

ini memungkinkan nukleotida dan asam amino merembes keluar dan mencegah
masuknya bahan-bahan aktif ke dalam sel, keadaan ini dapat menyebabkan
kematian bakteri (Prajitno, 2007).
Sebagian besar senyawa flavonoid dalam bentuk glikosida (gula dan
aglikon) dan juga sebagai aglikon. Dalam bentuk glikosidanya flavonoid larut
dalam air dan sedikit larut dalam pelarut organik. Struktur senyawa flavonoid
secara biosintesis berasal dari penggabungan jalur sikimat C6-C3(cincin A) dan
jalur asetat malonat (Hahlbrock & Griscbach, 1975 ; Wong, 1976).

Gambar 2.2 Struktur flavonoid (Chastelyna, 2016)

Flavonoid terutama senyawa yang mudah larut dalam air dan diekstraksi
dengan etanol 70% (Harborne, 1987). Untuk mengekstraksi senyawa flavonoid
dari tumbuhan biasanya digunakan pelarut yang memiliki polaritas yang sesuai
dengan flavonoid tersebut karena kelarutan flavonoid berbeda-beda (Robinson,
1995). Aglikon flavonoid adalah senyawa polifenol, sehingga mempunyai sifat
kimia senyawa fenol yaitu agak bersifat asam sehingga dapat larut dalam basa.
Flavonoid yang mempunyai gugus hidroksil tak tersubstitusi atau suatu gula
merupakan senyawa polar dan umumnya cukup larut dalam pelarut seperti etanol,
metanol, aseton, air, dan lain-lain (Markham, 1988).
2. Tanin
Tanin adalah senyawa metabolit sekunder yang terdapat pada beberapa
tanaman. Tanin alami larut dalam air dan memberikan warna pada air, warna
larutan tanin bervariasi dari warna terang sampai warna merah gelap atau coklat,
karena setiap tanin memiliki warna yang khas tergantung sumbernya (Ahadi,
2003). Semua jenis tanin dapat larut dalam air, metanol, etanol, aseton dan pelarut
organik lainnya. Kelarutannya besar, dan akan bertambah besar apabila dilarutkan
 9

dalam air panas. Tanin akan terurai menjadi pyrogallol, pyrocatechol dan
phloroglucinol bila dipanaskan sampai suhu 99-102oC (Risnasari, 2002).

Gambar 2.3 Struktur inti tanin (Chastelyna, 2016)

Menurut Ajizah (2004), mekanisme kerja tanin sebagai antibakteri dengan
mengerutkan dinding sel atau membran sel sehingga menganggu permeabilitas sel
itu sendiri. Akibat terganggunya permeabilitas, sel tidak dapat melakukan
aktivitas hidup sehingga pertumbuhannya terhambat.
3. Saponin
Saponin berasal dari kata latin yaitu “Sapo” yang berarti mengandung busa
stabil bila dilarutkan dalam air. Kemampuan busa dari saponin disebabkan oleh
kombinasi dari sapogenin yang bersifat hidrofobik (larut dalam lemak) dan bagian
rantai gula yang bersifat hidrofilik (larut dalam air) (Naoumkina, et al., 2010).
Saponin mudah larut dalam air dan tidak larut dalam eter (Hartono, 2009).
Saponin dapat menyebabkan hemolisis pada sel darah merah. Hal ini
disebabkan karena saponin berikatan dengan kolesterol dari membran sel sehingga
dapat merusak membran (Faradisa, 2008). Mekanisme kerja saponin sebagai
antibakteri adalah dengan menurunkan tegangan permukaan sehingga
menyebabkan kebocoran sel dan mengakibatkan senyawa intraseluler akan keluar
(Robinson, 1995).
 10

Gambar 2.4 Struktur saponin (chastelyna, 2016)

2.2.4 Khasiat
Beluntas merupakan salah satu tanaman obat tradisional yang cukup
tersebar luas di Indonesia. Sebagian orang memanfaatkan tanaman ini sebagai
pagar pekarangan. Daun beluntas berkhasiat sebagai peluruh keringat (diaforetik),
penyegar, obat TBC kelenjar, dan nyeri pada rematik (Koireowa et al., 2012).
Pemanfaatan beluntas dalam kehidupan sehari-hari oleh masyarakat yaitu sebagai
sayuran dan obat-obatan. Daun beluntas juga digunakan secara empiris dan
dipercaya mempunyai khasiat menambah nafsu makan, membantu melancarkan
pencernaan, membantu menghilangkan bau badan, bau mulut, menurunkan panas,
meredakan nyeri pada tulang, meredakan sakit pinggang, dan juga mengobati
keputihan (Pulio et al., 2012).
Secara ilmiah ekstrak daun beluntas memiliki aktivitas antibakteri
terhadap bakteri Staphylococcus aureus dengan terbentuknya zona hambat sebesar
17,7 mm (Wulandari et al., 2012). Efek analgesik ekstrak daun beluntas juga
terlihat pada pemberian ekstrak daun beluntas pada menit ke-30 dan terus
memberikan efek pada menit ke-60 dalam dosis 300 mg/kgBB yang merupakan
dosis maksimum karena pada dosis tersebut sudah mencapai kadar terapeutik
maksimum (Sibarani et al., 2013).

2.3 Simplisia
2.3.1 Definisi
Simplisia adalah bahan alam yang telah dikeringkan yang digunakan untuk
pengobatan dan belum mengalami pengolahan, kecuali dinyatakan lain suhu
pengeringan tidak lebih dari 60oC (BPOM RI, 2014)
 11

2.3.2 Syarat
Simplisia yang aman dan berkhasiat adalah simplisia yang tidak
mengandung bahaya kimia, mikrobiologis, dan bahaya fisik, serta mengandung
zat aktif yang berkhasiat. Ciri simplisia yang baik adalah dalam kondisi kering
(kadar air < 10%), untuk simplisia daun, bila diremas bergemerisik dan berubah
menjadi serpihan, simplisia bunga bila diremas bergemerisik dan berubah menjadi
serpihan atau mudah dipatahkan, dan simplisia buah dan rimpang (irisan) bila
diremas mudah dipatahkan. Ciri lain simplisia yang baik adalah tidak berjamur,
dan berbau khas menyerupai bahan segarnya (Herawati et al., 2012).
Dalam hal simplisia sebagai bahan baku dan produk siap konsumsi
langsung dapat dipertimbangkan 3 konsep untuk menyusun parameter standar
umum :
1. Simplisia sebagai bahan kefarmasian seharusnya memenuhi 3
parameter mutu umum suatu bahan (material), yaitu kebenaran jenis
(identifikasi), kemurnian (bebas dari kontaminasi kimia dan biologis)
serta aturan penstabilan (wadah, penyimpanan dan transportasi).
2. Simplisia sebagai bahan dan produk konsumsi manusia sebagai obat
tetap diupayakan memenuhi 3 paradigma produk kefarmasian, yaitu
Quality-Safety-Efficacy (mutu-aman-manfaat).
3. Simplisia sebagai bahan dengan kandungan kimia yang bertanggung
jawab terhadap respon biologis harus mempunyai spesifikasi kimia,
yaitu informasi komposisi (jenis dan kadar ) senyawa kandungan
(Depkes RI, 2000).
Standarisasi suatu simplisia tidak lain pemenuhan terhadap persyaratan
sebagai bahan dan penetapan nilai berbagai parameter dari produk seperti yang
ditetapkan sebelumnya. Standarisasi simplisia mempunyai pengertian bahwa
simplisia yang akan digunakan yang tercantum dalam monografi terbitan resmi
Departemen Kesehatan (Materia Medika Indonesia). Sedangkan sebagai produk
yang langsung dikonsumsi (serbuk jamu) masih harus memenuhi persyaratan
produk kefarmasian sesuai dengan peraturan yang berlaku (Depkes RI, 2000).
 12

2.3.3 Penyiapan Simplisia

Untuk menghasilkan simplisia yang bermutu dan terhindar dari cemaran
umumnya dilakukan tahapan kegiatan berikut ini :
a. Sortasi basah
Dilakukan untuk memisahkan kotoran-kotoran atau bahan-bahan asing
lainnya dari bahan simplisia. Misalnya simplisia yang dibuat dari akar
suatu tanaman obat, bahan-bahan asing seperti tanah, kerikil, rumput,
batang, daun, akar yang telah rusak, serta pengotoran lainnnya harus
dibuang.
b. Pencucian
Dilakukan untuk menghilangkan tanah dan pengotor lannya yang
melekat pada bahan simplisia. Pecucian dilakukan dengan air bersih,
misalnya air dari mata air, air sumur dari PAM. Bahan simplisia yang
mengandung zat yang mudah larut dalam air yang mengalir, pencucian
hendaknya dilakukan dalam waktu yang sesingkat mungkin. Pencucian
dilakukan tiga kali, satu kali dapat menghilangkan 25% dari jumlah
mikroba, bila pencucian dilakukan sebanyak tiga kali, jumlah mikroba
yang tertinggal hanya 42% dari jumlah mikroba awal (Depkes RI,
2000).
c. Perajangan
Beberapa jenis bahan simplisia perlu mengalami perajangan bahan
simplisia. Semakin tipis bahan yang akan dikeringkan maka semakin
cepat penguapan air, sehingga memperecepat waktu pengeringan.
Akan tetapi irisan yang terlalu tipis juga dapat menyebabkan
berkurangnya/hilangnya zat berkhasiat yang mudah menguap,
sehingga mempengaruhi komposisi, bau, dan rasa yang diinginkan.
d. Pengeringan
Tujuannya yaitu untuk mendapatkan simplisia yang tidak mudah
rusak, sehingga dapat disimpan dalam waktu yang ebih lama. Dengan
mengurangi kadar air dan menghentikan reaksi enzimatik akan dicegah
penurunan mutu atau perusakan simplisia. Air yang masih tersisa
 13

dalam simplisia pada kadar tertentu dapat merupakan media

pertumbuhan kapang dan jasad renik lainnya. Proses pengeringan
sudah dapat menghentikan proses enzimatik dalam sel bila kadar
airnya dapat mencapi kurang dari 10%. Hal-hal yang perlu
diperhatikan selama proses pengeringan adalah suhu pengeringan,
kelembaban udara, aliran udara, waktu pengeringan, dan luas
permukaan bahan.
Suhu yang terbaik pada pengeringan adalah tidak melebihi 60ºC, tetapi
bahan aktif yang tidak tahan pemanasan atau mudah menguap harus
dikeringkan pada suhu serendah mungkin, misalnnya 30ºC sampai
45ºC. Terdapat dua cara pengeringan yaitu pengeringan alamiah
(dengan sinar matahari langsung atau dengan diangin-anginkan) dan
pengeringan buatan (menggunakan instrumen).
e. Sortasi kering
Tujuan sortasi adalah untuk memisahkan benda-benda asing seperti
bagian-bagian tanaman yang tidak diinginkan dan pengotoran-
pengotoran lainnya yang masih ada dan tertinggal pada simplisia
kering.
f. Penyimpanan
Setelah tahap pengeringan dan sortasi kering selesai maka simplisia
perlu ditempatkan dalam suatu wadah tersendiri agar tidak saling
tercampur antara simplisia satu dengan yang lainnya. Selanjutnya,
wadah-wadah yang berisi simplisia disimpan dalam rak pada gudang
penyimpanan. Untuk persyaratan wadah yang akan digunakan sebagai
pembungkus simplisia adalah harus inert, artinya tidak mudah bereaksi
dengan bahan lain, tidak beracun, mampu melindungi bahan simplisia
dari cemaran mikroba, kotoran, serangga, penguapan kandungan aktif
serta dari pengaruh cahaya, oksigen, dan uap air (Depkes RI, 2000).
2.3.4 Serbuk dan Kadar Air Simplisia
Serbuk simplisia nabati adalah bentuk serbuk dari simplisia nabati, dengan
ukuran derajat kehalusan tertentu. Sesuai dengan derajat kehalusannya, dapat
 14

berupa serbuk sangat kasar, kasar, agak kasar, halus, dan sangat halus. Serbuk
simplisia nabati tidak boleh mengandung fragmen jaringan dan benda asing yang
bukan merupakan komponen asli dari simplisia yang bersangkutan antara lain
telur nematoda, bagian dari serangga dan hama serta sisa tanah (Ditjen POM,
1995).
Derajat kehalusan simplisia perlu diperhatikan dalam proses ekstraksi.
Derajat kehalusan simplisia penting untuk mengupayakan agar penarikan dapat
berlangsung semaksimal mungkin, kehalusan menyangkut luas permukaan yang
akan berkontak dengan pelarut untuk ekstraksi (Agoes, 2007).
Umumnya ekstraksi akan bertambah baik bila permukaan serbuk simplisia
yang bersentuhan dengan cairan penyari makin luas. Dengan demikian maka
makin halus serbuk simplisia seharusnya makin baik ekstraksinya (Departemen
Kesehatan RI, 1986).
Berdasarkan penelitian Sapri, et al., (2012) diketahui bahwa pada
rendemen ekstrak etanol daun sirsak yang dihasilkan pada ukuran serbuk 40 mesh,
60 mesh, dan 80 mesh yaitu semakin besar ukuran nomor mesh yang digunakan
dalam pengayakan simplisia semakin besar pula rendemen yang dihasilkan. Jadi,
ukuran serbuk simplisia berpengaruh terhadap rendemen ekstrak yang diperoleh,
dimana semakin kecil ukuran serbuk simplisia, maka semakin besar rendemen
ekstrak.
Kadar air dari serbuk simplisia harus kurang dari 10%. Karena reaksi
enzimatik tidak berlangsung bila kadar air dalam simplisia kurang dari 10%.
Dengan demikian proses pengeringan sudah dapat menghentikan proses enzimatik
dalam sel bila kadar airnya dapat mencapai kurang dari 10% (Prasetyo dan
Entang, 2013).

2.4 Ekstraksi
Menurut Departemen Kesehatan RI (2006), ekstraksi adalah proses
penarikan kandungan kimia yang dapat larut dari suatu serbuk simplisia, sehingga
terpisah dari bahan yang tidak dapat larut.
 15

2.4.1 Metode Ekstraksi

Terdapat dua cara ekstraksi degan menggunakan pelarut antara lain cara
dingin dan cara panas. Ekstraksi cara dingin terdiri dari maserasi dan perkolasi,
sedangkan cara panas yaitu refluks, soxhlet, digesti, infus dan dekok (Depkes RI,
2000)
[Link] Ekstraksi Cara Dingin
1. Maserasi
Maserasi adalah proses ekstraksi simplisia menggunakan pelarut dengan
beberapa kali pengadukan pada suhu ruangan. Prosedurnya dilakukan dengan
merendam simplisia dalam pelarut yang sesuai dalam wadah tertutup. Pengadukan
dilakukan dapat meningkatkan kecepatan ekstraksi. Kelemahan dari maserasi
adalah prosesnya membutuhkan waktu yang cukup lama. Ekstraksi secara
menyeluruh juga dapat menghabiskan sejumlah besar volume pelarut yang dapat
berpotensi hilangnya metabolit. Beberapa senyawa juga tidak terekstraksi secara
efisien jika kurang terlarut pada suhu kamar (27ºC). Ekstraksi secara maserasi
dilakukan pada suhu kamar (27ºC), sehingga tidak menyebabkan degradasi
metabolit yang tidak tahan panas (Departemen Kesehatan RI, 2006).
2. Perkolasi
Perkolasi merupakan proses mengekstraksi senyawa terlarut dari jaringan
selular simplisia dengan pelarut yang selalu baru sampai sempurna yang
umumnya dilakukan pada suhu ruangan. Perkolasi cukup sesuai, baik untuk
ekstraksi pendahuluan maupun dalam jumlah besar (Departemen Kesehatan RI,
2006).
[Link] Ekstraksi Cara Panas
1. Refluks
Ekstraksi dengan cara ini pada dasarnya adalah ekstraksi
berkesinambungan. Bahan yang akan diekstraksi direndam dengan cairan penyari
dalam labu alas bulat yang dilengkapi dengan alat pendingin tegak, lalu
dipanaskan sampai mendidih. Cairan penyari akan menguap, uap tersebut akan
diembunkan dengan pendingin tegak dan akan kembali menyari zat aktif dalam
 16

simplisia tersebut. Ekstraksi ini biasanya dilakukan 3 kali dan setiap kali
diekstraksi selama 4 jam (Departemen Kesehatan RI, 2006).
2. Digesti
Digesti adalah maserasi kinetik (dengan pengadukan kontinu) pada suhu
yang lebih tinggi dari suhu ruangan, yaitu secara umum dilakukan pada suhu 40-
50ºC (Departemen Kesehatan RI, 2006).
3. Infusa
Infusa adalah ekstraksi dengan pelarut air pada suhu penangas air (bejana
infus tercelup dalam penangas air mendidih), suhu terukur (96-98ºC) selama
waktu tertentu (15-20 menit) (Departemen Kesehatan RI, 2006).
4. Dekok
Dekok adalah infus pada waktu yang lebih lama dan suhu sampai titik
didih air, yaitu pada suhu 90-100ºC selama 30 menit (Departemen Kesehatan RI,
2006).
5. Soxhlet
Metode ekstraksi soxhlet adalah metode ekstraksi dengan prinsip
pemanasan dan perendaman sampel. Hal itu menyebabkan terjadinya pemecahan
dinding dan membran sel akibat perbedaan tekanan antara di dalam dan di luar
sel. Dengan demikian, metabolit sekunder yang ada di dalam sitoplasma akan
terlarut ke dalam pelarut organik. Larutan itu kemudian menguap ke atas dan
melewati pendingin udara yang akan mengembunkan uap tersebut menjadi tetesan
yang akan terkumpul kembali. Bila larutan melewati batas lubang pipa samping
soxhlet maka akan terjadi sirkulasi. Sirkulasi yang berulang itulah yang
menghasilkan ekstrak yang baik (Departemen Kesehatan RI, 2006).
Ekstraksi menggunakan soxhlet dengan pelarut cair merupakan salah satu
metode yang paling baik digunakan dalam memisahkan senyawa bioaktif dari
alam. Cara ini memiliki beberapa kelebihan dibanding yang lain antara lain
sampel kontak dengan pelarut yang murni secara berulang, kemampuan
mengekstraksi sampel lebih tanpa tergantung jumlah pelarut yang banyak (Rais,
2014).
 17

Keuntungan dari metode ini adalah proses ektraksi yang kontinyu, sampel
terekstraksi oleh pelarut murni hasil kondensasi sehingga tidak membutuhkan
banyak pelarut dan tidak memakan banyak waktu. Kerugiannya adalah senyawa
yang bersifat termolabil dapat terdegradasi karena ekstrak yang diperoleh terus-
menerus berada pada titik didih (Seidel V, 2006). Berdasarkan penelitian
Mukhriani (2014), rendemen yang dihasilkan pada metode soxhletasi lebih
banyak dibanding metode ekstraksi maserasi.
Metode soxhletasi hanya cocok pada senyawa yang tidak mudah menguap
dan tahan panas. Pelarut yang digunakan dalam proses soxhletasi yaitu pelarut
yang mudah menguap dan melarutkan senyawa aktif yang terdapat dalam sampel
dengan pertimbangan sifat kepolaran pelarut tersebut (Harborne, 1987).
2.4.2 Pelarut
Pelarut merupakan salah satu faktor yang menentukan dalam proses
ekstraksi, sehingga banyak faktor yang harus diperhatikan dalam pemilihan
pelarut (Guenther, 2006). Terdapat dua pertimbangan utama dalam memilih jenis
pelarut, yaitu pelarut harus mempunyai daya larut yang tinggi dan pelarut tidak
berbahaya atau tidak beracun. Pelarut yang digunakan dalam ekstraksi harus dapat
melarutkan ekstrak yang diinginkan saja, mempunyai kelarutan yang besar, tidak
menyebabkan perubahan secara kimia pada komponen ekstrak dan titik didih
kedua bahan tidak boleh terlalu dekat (Guenther, 2006). Sifat pelarut yang baik
untuk ekstraksi yaitu toksisitas dari pelarut yang rendah, mudah menguap pada
suhu yang rendah, dapat mengekstraksi komponen senyawa dengan cepat, dapat
mengawetkan dan tidak menyebabkan ekstrak terdisosiasi (Tiwari et al., 2011).
Pemilihan pelarut juga akan tergantung pada senyawa yang ditargetkan.
Faktor-faktor yang mempengaruhi pemilihan pelarut adalah jumlah senyawa yang
akan diekstraksi, laju ekstraksi, keragaman senyawa yang akan diekstraksi,
kemudahan dalam penanganan ekstrak untuk perlakuan berikutnya, toksisitas
pelarut dalam proses bioassay, potensial bahaya kesehatan dari pelarut (Tiwari et
al, 2011).
 18

[Link] Akuades
Akuades berasal dari istilah latin aquadestilata yang berarti air suling. Air
suling merupakan air yang diperoleh dari pengembunan uap air akibat penguapan
atau pendidihan air (Ham, 2006). Ikatan hidrogen air pada tekan atmosfer bersifat
mengalir (flow) pada suhu 100ºC dan densitasnya 1 g/ml (Winarno, 2002).
[Link] Etanol
Etanol biasa disebut etil alkohol, hidroksietan atau alkohol, diproduksi
melalu fermentasi gula, karbohidrat dan pati, biasa digunakan sebagai pelarut,
antiseptik, obat penenang, industri parfum dan obat-obatan. Etanol merupakan
pelarut organik (Lewis, 1993). Sifat-sifat etanol dapat dilihat pada Tabel II.1
Tabel II.1 Sifat-sifat Etanol (Schefan dan Morris, 1983)
Nama lain Etanol, hidroksi ethan, metil
karbinol, ansol
Rumus bangun C2H5OH
Sifat Mudah menguap berbau khas, tidak
beresidu
Berat molekul 46,7
Titik leleh -117,3-112ºC
Titik didih 78,4ºC
Berat jenis 0,789 g/mL
Kelarutan Dalam arm eter, kloroform, dan
metil alkohol
Etanol merupakan senyawa alkohol dengan formula C2H5OH yang
berbentuk cair, tidak berwarna, larut dalam air, eter, kloroform dan aseton.
Dihasilkan dari peragian kanji, hidrolisis bromoetana dengan kalium hidroksida
(Basri, 1996). Berdasarkan penelitian Fathurrachman (2014), konsentrasi etanol
mempengaruhi hasil rendemen ekstrak dan juga hasil uji fitokimia senyawa dalam
tanaman sirsak. Ekstrak etanol 70% menghasilkan % rendemen lebih tinggi
dibanding ekstrak etanol 96%. Hal ini dikarenakan adanya perbedaan polaritas
antara pelarut etanol 96% dan 70%.
Dalam dunia kimia, farmasi dan kedokteran, etanol banyak digunakan,
diantaranya sebagai pelarut. Etanol merupakan pelarut polar yang banyak
digunakan untuk mengekstrak komponen polar suatu bahan alam dan dikenal
sebagai pelarut universal. Komponen polar dari suatu bahan alam dalam ekstrak
 19

etanol dapat diambil dengan teknik ekstraksi melalui proses pemisahan (Santana,
et al., 2009).
Etanol 60-80% berkhasiat sebagai bakterisida yang kuat dan cepat
terhadap bakteri-bakteri, sebagai germisida alat-alat, sebagai obat sedatif dan
depresan sistem saraf pusat yang memberikan efek tenang dan euforia (Al-Jawi,
2005; Masters, 2002; Makiyah et al., 2005).
[Link] Etil Asetat
Etil asetat / etiletanoat adalah suatu zat cair tak berwarna dengan bau buah
yang semerbak bertitik didih 77ºC dan d = 0,9 g/ml (Arsyad, 2001). Dalam
penelitian gandapura, pelarut yang digunakan adalah metanol, etil asetat dan
hesana, ternyata hasil ekstraksi dari masing-masing pelarut menunjukkan bahwa
rendemen ekstrak tertinggi dihasilkan ekstrak emtanol yang bersifat polar, diikuti
oleh etil asetat dan heksana (Hermani, 2004).
[Link] Kloroform
Kloroform (triklorometana) merupakan salah satu senyawa haloform yang
mudah menguap, sukar terbakar (tetapi uapnya mudah terbakar), tidak larut
dalam air tetapi larut dalam alkohol dan eter, uapnya bersifat membius dan bila
terkena udara dan cahaya dapat membentuk gas fosgen yang beracun. Kloroform
digunakan untuk pembuatan senyawa fluorokarbon, sebagai pelarut (cat), dan
sebagai anastetik. Kelarutan dalam air pada suhu 25ºC (Ham, 2006).
[Link] Petroleum Eter
Petroleum eter merupakan campuran hidrokarbon berupa cairan jernih,
mudah menguap, mudah terbakar (Ham, 2006).
[Link] Heksana
Heksana mempunyai karakteristik sangat tidak polar volatil, mempunyai
bau khas yang dapat menyebabkan pingsan. Titik didih heksana pada tekanan 760
mmHg adalah 66-71ºC. (Schefan dan Morris, 1983). N-heksana merupakan jenis
pelarut nonpolar sehingga n-heksana dapat melarutkan senyawa - senyawa bersifat
nonpolar (Maulida dan Zulkarnaen, 2010)
 20

2.5 Gel
2.5.1 Definisi
Gel adalah sediaan semi solid dimana terdapat nteraksi antar partikel
koloid dengan suatu pembawa berupa cairan (Jones, 2008). Gel merupakan sistem
semi padat terdiri dari suspensi yang dibuat dari partikel anorganik yang kecil atau
molekul organik yang besar, terpenetrasi oleh suatu cairan (Dirjen POM, 1995).
Polimer-polimer yang biasa digunakan untuk membuat gel-gel farmasetika
meliputi gom alam tragakan, pectin, karagen, agar asam alginate, serta bahan-
bahan sintetis dan semisintetis seperti metilselulosa, hidroksimetilselulosa,
karboksimetilselulosa, dan carbopol (Yulianhar, 2009).
Gel dikelompokkan menjadi gel organik dan anorganik berdasarkan sifat
fase koloidal. Gel organik dibagi menjadi gom alam (seperti gom arab, karagen,
dan gom xantan), dan gom hasil sintesa (seperti hidroksipropil selulosa dan metil
hidroksipropil selulosa). Sifat pelarut akan menentukan apakah gel merupakan
hidrogel (dasar air) atau organogel (dengan pelarut bukan air). Gel padat dengan
konsentrasi pelarut rendah dikenal sebagai “xero gel”, sering dihasilkan dengnan
cara penguapan pelarut, sehingga menghasilkan kerangka gel (Amalia, 2012).

2.5.2 Monografi Bahan

a. CMC Na
Natrium karboksimetilselulosa (Na CMC) merupakan garam natrium dari
asam selulosaglikol dan dengan demikian berkarakter ionik. Sediaan dengan 7-
10% zat bersifat mudah disebarkan, konsistensinya plastis. Untuk membuat salap,
serbuknya digerus dengan bahan penahan lembab, ke dalamnya ditambahkan air
sebagian demi sebagian dan dibiarkan membengkak. Proses pembengkakannya
hanya sambil diaduk kontinyu, sedikit tergantung dari suhu. Na CMC bisa larut
baik di dalam air dingin maupun air panas. Larutan dalam airnya stabil terhadap
suhu dan tetap stabil dalam waktu lama pada suhu 100oC, tanpa mengalami
koagulasi (Voight, 1971).
Na CMC digunakan secara luas untuk formulasi sediaan farmasi oral dan
topikal, terutama karena tingkat viskositas yang dimilikinya. Pada konsentrasi
 21

yang lebih tinggi, biasanya 3-6 %, digunakan sebagai basis dalam pembuatan gel
dan pasta, glikol sering kali dimasukkan untuk mencegah penguapan. Bobot
molekul Na CMC adalah 90.000-700.000 (Rowe et al., 2003).
b. Gliserin
Pada sediaan topikal dan kosmetik, gliserin sering digunakan terutama
sebagai humektan dan emolient. Gliserin / gliserol dapat campur dengan air dan
dengan etanil (95%); praktis tidak larut dalam kloroform, dalam eter, dan dalam
minyak lemak (Amalia, 2012).
c. Propilen glikol
Propilen glikol banyak digunakan sebagai pelarut dan pembawa dalam
pembuatan sediaan farmasi dan kosmetik, khususnya untuk zat-zat yang yang
tidak stabil atau tidak dapat larut dalam air. Propilen gilkol adalah cairan bening,
tidak berwarna, kental, dan hampir tidak berbau. Memiliki rasa manis sedikit
tajam menyerupai gliserol. Dalam kondisi biasa, propilen glikol stabil dalam
wadah yang tertutup baik dan juga merupakan suatu zat kimia yang stabil bila
dicampur dengan gliserin, air, atau alkohol. Propilen glikol juga digunakan
sebagai penghambat pertumbuhan jamur (Lodėn, 2009).
Propilen glikol telah banyak digunakan sebagai pelarut dan pengawet
dalam berbagai formulasi parenteral dan nonparenteral. Propilen glikol secara
umum merupakan pelarut yang lebih baik dari gliserin dan dapat melarutkan
berbagai bahan, seperti kortikosteroid, fenol, obat-obatan sulfa, barbiturat, vitamin
A dan D, alkaloid, dan banyak anastesi lokal (Rowe., et al, 2005)

2.5.3 Evaluasi
Evaluasi sediaan salep meliputi pemeriksaan organoleptis, uji pH, uji
homogenitas, uji daya sebar, uji daya lekat, dan uji stabilitas.
1. Organoleptik
Pengujian organoleptik dilakukan dengan mengamati sediaan salep dari
bentuk, bau, dan warna sediaan (Hernani et al., 2012).
 22

2. Uji pH
Uji pH merupakan salah satu bagian kriteria pemeriksaan sifat fisik dalam
memprediksi kestabilan salep, dimana profil pH menentukan stabilitas bahan aktif
dalam suasana asam atau basa. Kriteria salep yang baik harus memenuhi krikteria
pH kulit yaitu 4,5 - 6,5 (Naibaho et al., 2013).
3. Uji Homogenitas
Uji homogenitas bertujuan untuk mengetahui kehomogenan salep. sediaan
salep tersebar secara merata atau tidak. Hal ini berkaitan dengan kehomogenan
ketersebaran bahan obat. Apabila sediaan homogen, maka menandakah bahwa
dosis obat tersebar secara tepat (Hernani et al., 2012).
4. Uji Daya Sebar
Uji daya sebar bertujuan untuk mengetahui kelunakan massa salep
sehingga dapat dilihat kemudahan pengolesan sediaan salep pada kulit. Sediaan
salep yang bagus dapat menyebar dengan mudah di tempat aksi tanpa
menggunakan tekanan (Hernani et al., 2012).
5. Uji Daya Lekat
Uji daya lekat bertujuan untuk mengetahui waktu yang dibutuhkan oleh
salep untuk melekat dikulit (Hernani et al., 2012).
6. Uji daya proteksi
Uji daya proteksi ini bertujuan untuk mengetahui kemampuan dalam
melindungi sediaan topikal dari pengaruh luar, dalam hal ini yang digunakan
sebagai parameter adalah cairan yang bersifat basa (Amatullah et al, 2017).
7. Uji Stabilitas Fisik
Stabilitas obat adalah kemampuan suatu produk untuk mempertahankan
sifat dan karakteristiknya agar sama dengan yang dimilikinya pada saat dibuat
(identitas, kekuatan, kualitas, kemurnian) dalam batasan yang ditetapkan
sepanjang periode penyimpanan dan penggunaan (shelf-life) (Joshita, 2008).
Tujuan pemeriksaan kestabilan obat adalah untuk menjamin bahwa setiap bahan
obat yang didistribusikan tetap memenuhi persyaratan yang ditetapkan meskipun
sudah cukup lama dalam penyimpanan. Pemeriksaan kestabilan digunakan
 23

sebagai dasar penentuan batas kadaluarsa, cara-cara penyimpanan yang perlu

dicantumkan dalam label (Lachman, 1994).
Ketidakstabilan fisik sediaan ditandai dengan adanya pemucatan warna
atau munculnya warna, timbul bau, perubahan atau pemisahan fase, pecahnya
emulsi, pengendapan suspensi (caking), perubahan konsistensi, pertumbuhan
kristal atau perubahan bentuk kristal, terbentuknya gas dan perubahan fisik
lainnya (Djajadisastra, 2004).

2.6 Bakteri
2.6.1 Definisi
Nama bakteri berasal dari bahasa Yunani “ bacterion” yang berarti batang
atau tongkat. Sekarang nama itu dipakai untuk menyebut sekelompok
mikroorganisme bersel satu, tubuhnya bersifat prokariotik, yaitu tubuhnya terdiri
atas sel yang tidak mempunyai pembungkus inti. Bakteri berkembangbiak dengan
membelah diri, karena bakteri begitu kecil maka hanya dapat dilihat dengan
menggunakan mikroskop. Bakteri walaupun bersel satu tetapi mempunyai
beberapa organel yang dapat untuk melaksanakan beberapa fungsi hidup (Waluyo,
2004).
2.6.2 Penggolongan Bakteri
Untuk memahami beberapa kelompok organisme, diperlukan klasifikasi.
Tes biokimia, pewarnaan Gram, merupakan kriteria yang efektif untuk klasifikasi.
Hasil pewarnaan mencerminkan perbedaan dasar dan kompleks pada sel bakteri
(struktur dinding sel), sehingga dapat membagi bakteri menjadi 2 kelompok, yaitu
bakteri Gram-positif dan bakteri Gram-negatif.
1. Bakteri Gram-negatif
 Bakteri Gram Negatif Berbentuk Batang (Enterobacteriacea).
Bakteri Gram negatif berbentuk batang habitatnya adalah usus
manusia dan binatang. Enterobacteriaceae meliputi Escherichia,
Shigella, Salmonella, Enterobacter, Klebsiella, Serratia, Proteus.
Beberapa organisme seperti Escherichia coli merupakan flora
normal dan dapat menyebabkan penyakit, sedangkan yang lain
 24

seperti salmonella dan shigella merupakan patogen yang umum

bagi manusia.
 Pseudomonas, Acinobacter dan Bakteri Gram Negatif Lain.
Pseudomonas aeruginosa bersifat invasif dan toksigenik,
mengakibatkan infeksi pada pasien dengan penurunan daya tahan
tubuh dan merupakan patogen nosokomial yang penting
 Vibrio Campylobacter, Helicobacter, dan Bakteri lain yang
berhubungan.
Mikroorganisme ini merupakan spesies berbentuk batang Gram-
negatif yang tersebar luas di alam. Vibrio ditemukan didaerah
perairan dan permukaan air. Aeromonas banyak ditemukan di air
segar dan terkadang pada hewan berdarah dingin.
 Haemophilus , Bordetella, dan Brucella
Gram negatif Hemophilis influenza tipe b merupakan patogen bagi
manusia yang penting.
 Yersinia, Franscisella dan Pasteurella.
Berbentuk batang pendek Gram-negatif yang pleomorfik.
Organisme ini bersifat katalase positif, oksidase positif, dan
merupakan bakteri anaerob fakultatif (Jawetz, 2004).
2. Bakteri Gram-positif
 Bakteri Gram positif pembentuk spora : Spesies Bacillus dan
Clostridium.
Kedua spesies ini terdapat dimana-mana, membentuk spora,
sehingga dapat hidup di lingkungan selama bertahun-tahun.
Spesies Basillus bersifat aerob, sedangkan Clostridium bersifat
anaerob obligat.
 Bakteri Gram-positif Tidak Membentuk Spora :
Spesies Corynebacterium, Listeria, Propionibacterium,
Actinomycetes. Beberapa anggota genus Corynebacterium dan
kelompok Propionibacterium merupakan flora normal pada kulit
dan selaput lender manusia.
 25

 Staphylococcus
Berbentuk bulat, biasanya tersusun bergerombol yang tidak teratur
seperti anggur. Beberapa spesies merupakan anggota flora normal
pada kulit dan selaput lendir, yang lain menyebabkan supurasi dan
bahkan septikemia fatal. Staphylococcus yang patogen sering
menghemolisis darah, mengkoagulasi plasma dan menghasilkan
berbagai enzim ekstraseluler. Tipe Staphylococcus yang berkaitan
dengan medis adalah Staphylococcus aureus, Staphylococcus
epidermidis dan Staphylococcus saprophyticus.
 Streptococcus
Merupakan bakteri gram-positif berbentuk bulat yang mempunyai
pasangan atau rantai pada pertumbuhannya. Beberapa
streptococcus merupakan flora normal manusia tetapi lainnya bisa
bersifat patogen pada manusia. Ada 20 spesies diantaranya ;
Streptococcus pyogenes, Streptococcus agalactiae, dan jenis
Enterococcus (Jawetz, 2004).

2.7 Staphylococcus aureus

2.7.1 Klasifikasi
Klasifikasi Staphylococcus aureus yaitu (Agus Herdiana, 2015):
Kingdom : Bacteria
Filum : Firmicutes
Kelas : Cocci
Ordo : Bacillales
Keluarga : Staphylococcaceae
Marga : Staphylococcus
Spesies : Staphylococcus aureus
 26

Gambar 2.5 Bakteri Staphylococcus aureus (Brooks et al., 2008)

Staphylococcus aureus merupakan bakteri yang sering ditemukan sebagai
flora normal pada kulit dan selaput lendir manusia. Staphylococcus aureus
merupakan salah satu dari bakteri Gram positif berbentuk bulat. Hidup didalam
saluran – saluran pengeluaran lendir dari tubuh manusia dan hewan seperti
hidung, mulut, dan tenggorokan dan dapat dikeluarkan pada waktu batuk atau
bersin. Staphylococcus aureus memiliki kemampuan untuk mensintesis lipase
yang dapat mengubah sebum trigliserid menjadi asam lemak bebas yang dapat
merangsang inflamasi. Bakteri ini dapat menyebabkan bermacam – macam infeksi
seperti pneumonia, meningitis, empiema, endokartitis, jerawat, pioderma atau
impetigo (Martina, 2012).

2.7.2 Morfologi
Staphylococcus aureus adalah bakteri patogen utama pada manusia.
Termasuk dalam family Staphylococcacea, berukuran 0,5-1,5µm dan membentuk
pigmen kuning keemasan. Bentuk sel kokus tunggal, berpasangan, tetrad, dan
berbentuk rantai juga tampak dalam biakan cair. Bakteri fakultatif anaerob dan
tidak termasuk spora (Agus Herdiana, 2015).
 27

2.7.3 Identifikasi Staphylococcus aureus

[Link] Pewarnaan Gram
Pewarnaan Gram bertujuan untuk mengamati morfologi sel
staphylococcus dan mengetahui kemurnian sel bakteri. Pengecatan Gram
merupakan salah satu pewarnaan yang paling sering digunakan, yang
dikembangkan oleh Christian Gram (Ferdiaz, 1993). Bakteri dikelompokkan
sebagai Gram positif apabila selnya terwarnai keunguan, dan Gram negatif apabila
selnya terwarnai merah.
[Link] Mannitol salt agar
Mannitol salt agar (MSA) merupakan media selektif dan media diferensial
(Sharp, 2006). Penanaman dilakukan dengan cara satu ose biakan diambil dari
media pepton, dan diusapkan pada media MSA, kemudian diinkubasi pada 37 C
selama 24 jam (Lay, 1994). Koloni bakteri Staphylococcus aureus pada media
MSA akan berwarna kuning karena memfermentasi manitol.
[Link] Uji Katalase
Katalase merupakan salah satu uji cepat yang dapat dilakukan untuk
mengidentifikasi Staphylococcus aureus karena bakteri ini menghasilkan enzim
katalase. Uji ini dapat membedakan koloni Staphylococcus yang berwarna putih
sampai abu-abu dengan koloni Streptococcus (Goldman dan Lorrence, 2009). Uji
katalase dilakukan dengan mereaksika hidrogen peroksida (H2O2) dengan
suspensi bakteri, hasil positif ditandai oleh terbentuknya gelembug-gelembung
udara (Hadioetomo, 1990).
[Link] Uji Koagulase
Uji koagulase dilakukan dengan 2 metode, yaitu uji slide dan uji tabung.
Uji slide atau clumping factor digunakan untuk mengetahui adanya enzim
koagulase yang terikat sel bakteri. Uji slide dikerjakan dengan cara setetes
aquadest atau NaCl fisiologis steril diletakkan pada kaca benda, kemudian satu
ose bakteri yang diuji dan disuspensikan. Setetes plasma diletakkan di dekat
suspensi biakan tersebut, keduanya dicampur dengan menggunakan ose dan
kemudian digoyangkan. Reaksi positif terjadi apabila dalam waktu 2-3 menit
terbentuk presipitat granuler (Bruckler et al., 1994).
 28

Uji tabung digunakan untuk mengetahui adanya koagulase bebas dengan

cara 200 µl plasma dimasukkan secara aseptis ke dalam tabung reaksi steril.
Sebanyak 3-4 koloni biakan Staphylococcus sp. yang diuji ditambahkan ke dalam
tabung reaksi kemudian dicampur hati- hati. Selanjutnya, tabung dimasukkan ke
dalam inkubator pada suhu 37oC. Pengamatan dilakukan pada 4 jam pertama, dan
sesudah 18-24 jam. Reaksi positif akan terjadi apabila terbentuk clot atau jelly dan
ketika tabung dimiringkan jelly tetap berada di dasar tabung (Lay, 1994).

2.8 Antibakteri
Antibakteri merupakan zat yang dapat mengganggu pertumbuhan atau
bahkan mematikan bakteri dengan cara mengganggu metabolisme mikroba yang
merugikan. Menurut Jawetz dan Adelbergs, (2005) antibakteri dapat dibedakan
berdasarkan mekanisme kerjanya, yaitu :
a. Menghambat pembentukan dinding sel
Mekanisme penghambatan dinding sel oleh antibakteri ditujukan untuk
dinding sel bakteri yang terdiri dari peptidoglikan yang merupakan
suatu senyawa kompleks polimer mukopeptida (glikopeptida).
Penyerangan tersebut menyebabkan tekanan osmotik di dalam sel lebih
tinggi daripada di luar sel sehingga mengakibatkan terjadinya lisis atau
kebocoran sel, misalnnya penggunaan penicillin.
b. Mengubah permeabilitas membran sel
Membran sel berperan penting dalam mengatur keluar masuknya zat
antar sel dengan lingkungan luar. Mekanisme kerja antibakteri dalam
mengubah permeabilitas membran sel bakteri yaitu dengan cara
merusak membran sel sehingga fungsi permeabilitas membran
mengalami kerusakan yang mengakibatkan kematian sel. Contoh
antibakteri yang dapat melakukan hal ini adalah polimiksin, kolistin,
nistatin dan sebagainya.
c. Menghambat sintesis protein
Sintesis protein merupakan hasil akhir dari dua proses utama yaitu
transkripsi dan translasi. Antibakteri yang dapat mengganggu proses
 29

transkripsi ataupun translasi sehingga menghambat sintesis protein

adalah streptomisin, tetrasiklin, kloramfenikol dan sebagainya.
d. Menghambat sintesis asam nukleat
Antibakteri ini bekerja dengan cara membentuk kompleks dengan
DNA yang menyebabkan terhambatnya proses replikasi DNA,
misalnya asam nalidiksat.
Resistensi adalah ketidakmampuan antibiotik untuk membunuh bakteri dan
menghambat pertumbuhan bakteri dengan pemberian pada kadar maksimum yang
dapat ditolerir oleh inang. Resistensi mikroorganisme terhadap antibiotik dapat
terjadi dengan beberapa cara, yaitu dengan merusak antibiotik dengan enzim yang
diproduksi bakteri, mengubah reseptor titik tangkap antibiotik, mengubah fisiko
kimiawi target sasaran antibiotik pada sel bakteri, antibiotik tidak dapat
menembus dinding sel akibat perubahan sifat dinding sel bakteri dan antibiotik
masuk ke dalam sel bakteri, namun segera dikeluarkan dari dalam sel melalui
mekanisme transpor aktif ke luar sel (Drlica dan Perlin, 2011). Beberapa strain
bakteri mungkin saja resisten terhadap lebih dari satu antibiotik (Clark et al.,
2012).

2.9 Uji Aktivitas Antibakteri

Uji antibakteri dilakukan untuk mengetahui aktivitas suatu bakteri
terhadap antibakteri secara in vitro. Pengujian ini dapat dilakukan dengan dua
metode yakni metode penyebaran (Diffusion method) dengan menggunakan
cakram kertas dan metode pengenceran (Dillution method) (Kristanti, 2008).
2.9.1 Metode Difusi
[Link] Metode disc diffusion
Metode ini digunakan untuk menentukan aktivitas agen antimikroba.
Lempengan yang berisi agen antimikroba diletakkan pada media Agar yang telah
disebari bakteri yang akan berdifusi pada media agar tersebut. Zona (daerah)
jernih disekeliling cakram kertas (Paper disk) mengindikasikan adanya hambatan
pertumbuhan mikroorganisme oleh agen antimikroba pada permukaan media Agar
(Pratiwi, 2012). Menurut Pratama (2015) setelah dilakukan inkubasi, diameter
 30

zona hambat yang jernih disekitar cakram diukur menggunakan jangka sorong
untuk mengetahui kekuatan inhibisi obat melawan organisme uji. Metode ini
dipengaruhi oleh beberapa faktor fisik dan kimia, selain faktor antara obat dan
organisme misalnya seperti sifat medium dan difusi, ukuran molekular dan
stabilitas obat (Jawetz, et al., 2005).
[Link] Metode E-Test
Metode ini digunakan untuk mengestimasi MIC (Minimum inhibitory
concentration) atau Kadar Hambat Minimum (KHM), yaitu konsentrasi minimal
suatu agen antibakteri untuk dapat menghambat pertumbuhan bakteri. Dalam
metode ini menggunakan strip plastik yang mengandung agen antibakteri dari
kadar terendah sampai tertinggi lalu diletakkan pada permukaan media Agar yang
telah ditanam bakteri. Pengamatan dilakukan pada area jernih yang
ditimbulkannya menunjukkan kadar agen antibakteri yang menghambat
pertumbuhan bakteri pada media Agar (Pratiwi, 2012)
[Link] Ditch-plate technique
Sampel uji pada metode ini berupa agen antibakteri yang diletakkan pada
parit yang dibuat dengan cara memotong media Agar dalam cawan petri pada
bagian tengah secara membujur dan bakteri uji maksimum 6 macam digoreskan
ke arah parit yang berisi agen antibakteri (Pratiwi, 2012).
[Link] Cup-Plate technique
Metode ini hampir sama dengan metode disc diffusion, dimana dibuat
sumur pada media Agar yang telah ditanami dengan bakteri dan pada sumur
diberikan agen antibakteri yang akan diujikan (Pratiwi, 2012).
[Link] Gradient-plate techniques
Konsentrasi agen antibakteri pada metode ini yang terdapat pada media
Agar secara teoritis bervariasi dari 0 sampai maksimal. Media Agar dicairkan dan
larutan uji ditambahkan. Campuran tersebut dituang ke dalam cawan petri lalu
diletakkan dalam posisi miring. Selanjutnya nutrisi kedua dituang di atasnya. Plate
diinkubasi selama 24 jam untuk memungkinkan agen antibakteri berdifusi.
Bakteri uji maksimal 6 macam digoreskan pada arah mulai dari konsentrasi tinggi
ke rendah. Hasil dihitung sebagai panjang total pertumbuhan bakteri maksimum
 31

yang mungkin dibandingkan dengan panjang pertumbuhan hasil goresan (Pratiwi,

2012).
Tabel II. 2 Kategori respon hambatan pertumbuhan bakteri berdasarkan
diameter zona hambat (Repi et al., 2016)
Diameter Zona Hambat Respon Hambatan
≥ 21 mm Sangat Kuat
11 – 20 mm Kuat
6 – 10 mm Sedang
< 5 mm Lemah

2.9.2 Metode Dilusi

[Link] Metode dilusi cair / broth dilution test (serial diution)
Prinsip metode dilusi (pengenceran) adalah senyawa antibakteri
diencerkan hingga diperoleh beberapa macam konsentrasi, kemudian masing-
masing konsentrasi ditambahkan suspensi bakteri uji dalam media cair. Perlakuan
tersebut akan diinkubasi dan diamati ada atau tidaknya pertumbuhan bakteri, yang
ditandai dengan terjadinya kekeruhan. Larutan uji senyawa antibakteri pada kadar
terkecil yang terlihat jernih tanpa adanya pertumbuhan bakteri uji, ditetapkan
sebagai Kadar Hambat Minimal (KHM) atau Minimal Inhibitory Concentration
(MIC). Larutan yang ditetapkan sebagai KHM tersebut selanjutnya dikultur ulang
pada media cair tanpa penambahan bakteri uji ataupun senyawa antibakteri, Dan
diinkubasi selama 18-24 jam. Media cair yang tetap terlihat jernih setelah inkubasi
ditetapkan sebagai Kadar Bunuh Minimal (KBM) atau Minimal Bactericial
Concentration (MBC) (Pratiwi, 2009). Konsentrasi minimal yang diperlukan
untuk membunuh 99,9 % pertumbuhan bakteri dikenal sebagai Konsentrasi Bunuh
Minimum (KBM) (Forbes et al, 2007).
[Link] Metode dilusi padat (solid dilution test)
Metode ini serupa dengan metode dilusi cair namun menggunakan media
padat (solid). Keuntungan metode ini adalah satu konsentrasi agen antibakteri
yang diuji dapat digunakan untuk menguji beberapa mikroba uji (Pratiwi, 2008).
2.10 Klindamisin
Klindamisin digunakan karena mempunyai mekanisme kerja yang sama
seperti senyawa yang terkandung dalam ekstrak daun beluntas.
 32

Klindamisin menghambat sebagian besar kokus Gram-positif dan sebagian

besar bakteri Gram-negatif aerob seperti Haemophilus, Mycoplasma dan
Chlamydia (Kemenkes, 2011). Kindamisin merupakan antibiotik yang digunakan
untuk jenis bakteri Gram positif seperti Staphylococcus aureus (Gaballah dan
Ghazal, 2018). Mekanisme kerja klindamisin sama dengan eritromisin.
Klindamisin sebagai antibakterial bekerja dengan menghambat pertumbuhan atau
reproduksi dari bakteri yaitu menghambat sintesa protein. Mekanisme kerja
klindamisin meliputi memotong elongasi rantai peptida, memblok site A pada
ribosom, kesalahan membaca pada kode genetik atau mencegah penempelan
rantai oligosakarida pada glikoprotein. Klindamisin digunakan untuk mengobati
infeksi serius yang disebabkan oleh bakteri anaerob atau aerob Gram positif
(BPOM RI, 2015).
Karakteristik klindamisin menurut FI Edisi IV adalah sebagai berikut
(DepKes RI, 1995) :
Nama obat : Klindamisin hidroklorida
Nama lain : Clindamycini hydrocloridum
Nama kimia : Metil 7-kloro-6,7,8-trideoksi-6-(metil-trans-4-propil-L-2-
pirolidinakarboksamido)-1tio-L-treo-ɑ-D-galakto-
oktopiranosida [21462-39-5]
RM : [Link]
BM : 461,44 g/mol
Kemurnian : Klindamisin hidroklorida mengandung tidak kurang dari
800µg per mg
Pemerian : Mudah larut dalam air, dalam dimetilformamida dan dalam
metanol. Larut dalam etanol, praktis tidak larut dalam
aseton
pH : 3,0-5,5
Penyimpanan : Dalam wadah tertutup rapat
Kegunaan : Antibakteri Pembanding
 BAB III
METODE PENELITIAN

3.1 Kerangka Konsep

Ekstrak daun beluntas Gel mengandung bahan kimia (CMC,

mengandung senyawa: gliserin, propilen glikol dan akuades)
Flavonoid, Tanin, dan dan masing – masing senyawa kimia
Saponin yang memiliki tersebut tidak beraksi dengan senyawa
efek antibakteri aktif dalam ekstrak daun beluntas

Bakteri Staphylococcus Klindamisin

aureus (Antibiotik)

Gambar 3.1 Kerangka konsep penelitian

Daun beluntas (Pluchea indica L.f) memiliki banyak manfaat untuk
pengobatan, salah satunya digunakan sebagai antibakteri. Berdasarkan penelitian
sebelumnya yang dilakukan oleh Manu (2013) menunjukkan bahwa ekstrak etanol
daun beluntas mampu menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus,
karena mengandung senyawa aktif flavonoid, tanin, dan saponin yang dapat
menghambat pertumbuhan bakteri (Agoes, 2010). Staphylococcus aureus
merupakan bakteri patogen utama bagi manusia (Jawetz, 2007; Nasution, 2014).
Dalam penggunaan obat infeksi secara topikal, akan lebih mudah
diaplikasikan apabila dalam bentuk sediaan gel. Formulasi gel terdiri dari bahan
kimia meliputi CMC, gliserin, propilen glikol dan akuades. Masing – masing
senyawa kimia tersebut tidak akan bereaksi dengan senyawa aktif dalam ekstrak

33
 34

daun beluntas. Namun demikian, masih harus diteliti tentang kemampuan

antibakteri ekstrak daun beluntas apabila dalam bentuk sediaan gel. Salah satu
metode untuk membuktikan efek antibakteri adalah dengan menggunakan metode
difusi, yakni dengan melihat kemampuan gel dalam berdifusi dan menimbulkan
zona hamabatan. Sebagai perbandingan efek antibakteri terhadap Staphylococcus
aureus digunakan gel klindamisin yang memiliki mekanisme kerja sama dengan
senyawa dalam ekstrak daun beluntas.

3.2 Bahan
Bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah daun beluntas segar
sebanyak 5 kg digunakan untuk pembuatan simplisia, serbuk daun beluntas 500
gram dan etanol 70% 5.000 ml untuk pembuatan ekstrak. Ekstrak daun beluntas,
asam asetat glasial dan asam sulfat pekat untuk uji kadar etanol ekstrak, ekstrak
daun beluntas, magnesium (Mg), asam klorida (HCl), asam sulfat (H2SO4) pekat,
asam asetat anhidrat, dan larutan ferri klorida (FeCl3) 1% untuk skrining
fitokimia. Ekstrak daun beluntas 5%, 10%, 15%, CMC, gliserin, propilen glikol,
akuades untuk pembuatan gel. Kalium hidroksida, parafin cair, akuades,
fenolftalein untuk uji evaluasi salep. Nutrien agar, akuades, Nutrient broth,
manitol salt agar (MSA), Staphylococcus aureus, hidrogen peroksida, NaCl
fisiologis, Mc Farland, gel ekstrak daun beluntas dan gel klindamisin untuk uji
aktivitas antibakteri.

3.3 Alat
Alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah gunting, blender, ayakan
mesh 80, neraca analitik dan wadah simplisia untuk pembuatan simplisia. Alat
soxhletasi, kondensor, labu alas bulat 250 mL, selang penghubung, asbes, kaki
tiga, spirtus, oven, statif dan klem, sendok tanduk, kertas saring, tali, batang
pengaduk, gelas beker 250 ml, gelas beker 1000 ml, termometer, untuk pembuatan
ekstrak. Kaca arloji, sendok tanduk, oven, botol timbang, dan neraca analitik
untuk uji kadar air serta uji susut pengeringan. Tabung reaksi, pipet tetes, pipet
ukur 1 mL, cawan porselen dan kapas untuk uji kadar etanol ekstrak. Tabung
 35

reaksi, pipet ukur 5 mL, gelas beker 100 mL, pipet tetes, stop watch untuk
skrining fitokimia. Neraca analitik, sendok tanduk, mortir stamper, sudip, pipet
tetes untuk pembuatan [Link] beker, pH universal, sudip, gelas objek, lempeng
kaca, anak timbangan, neraca analitik, penggaris, stop watch, alat uji daya lekat,
kertas saring dan pipet tetes untuk uji evaluasi gel. Autoklaf (GEA YX2808),
cawan petri, kertas cakram, erlenmeyer, tabung reaksi, aluminium foil,
mikropipet, rak tabung reaksi, spirtus, Laminar Air Flow (ESCO EMC 600), ose,
bunsen, kapas, jangka sorong dan inkubator (model DNP Electro Thermal
Incubator) untuk uji aktivitas antibakteri.

3.4 Populasi Penelitian

Populasi dalam penelitian ini adalah daun beluntas (Pluchea indica) yang
terdapat di kabupaten Tulungagung, Jawa Timur.

3.5 Sampel Penelitian

Sampel yang digunakan dalam penelitian ini adalah gel ekstrak daun
beluntas (Pluchea indica L.)

3.6 Definisi Operasional

1. Daun Beluntas (Pluchea indica L.f) adalah daun dari tumbuhan
beluntas (Pluchea indica L.) yang diambil dari Desa Panjerejo,
Kecamatan Rejotangan, Kabupaten Tulungagung, Jawa Timur.
2. Bakteri Staphylococcus aureus adalah bakteri gram positif yang
diperoleh dari Laboratorium Mikrobiologi FKUB dan merupakan
isolat dari pasien.
3. Stabil adalah sediaan tidak mengalami perubahan berdasarkan
parameter kestabilan sediaan selama waktu 14 hari atau 2 minggu.

3.7 Variabel Penelitian

Variabel penelitian adalah segala sesuatu dalam bentuk apapun yang
ditetapkan oleh peneliti sebagai hal yang akan digunakan untuk dipelajari
 36

sehingga diperoleh informasi tentang hal tersebut untuk diambil kesimpulannya

(Sugiyono, 2013). Variabel yang digunakan dalam penelitian ini yaitu, variabel
bebas dan variabel terikat.
3.7.1 Variabel Bebas
Variabel bebas adaah variabel yang dapat menjadi penyebab atau yang
mempengaruhi perubahannya atau munculnya variabel dependen (terikat)
(Sugiyono, 2013). Variabel bebas yang digunakan dalam penelitian ini adalah
variasi konsentrasi ekstrak daun beluntas (Pluchea indica) yang dilakukan uji
aktivitas antibakteri terhadap Staphylococcus aureus.
3.7.2 Variabel Terikat
Variabel terikat adalah variabel yang menjadi akibat atau yang dipengaruhi
oleh adanya variabel bebas (Sugiyono, 2013). Variabel terikat yang digunakan
dalam penelitian ini adalah daya hambat sediaan gel ekstrak daun beluntas
(Pluche indica) terhadap pertumbuhan Staphylococcus aureus.

3.8 Prosedur Penelitian

3.8.1 Determinasi Tanaman
Sampel tanaman daun beluntas diidentifikasi di UPT Materia Medica Batu
Malang, Jawa Timur. Tujuan dari determinasi adalah untuk mengetahui kebenaran
jenis tanaman (Insaru et al., 2011).
3.8.2 Pembuatan Simplisia
Pembuatan simplisia daun beluntas dilakukan dengan mengumpulkan daun
beluntas yang masih segar dan hijau dengan cara dipetik, disortasi basah yang
bertujuan untuk membersihkan daun dari kotoran dan benda asing. Pencucian
dilakukan dengan air bersih yang berasal dari sumur untuk menghilangkan tanah
dan pengotor lainnya yang melekat pada bahan simplisia. Pencucian dilakukan
tiga kali, satu kali dapat menghilangkan 25% dari jumlah mikroba, bila pencucian
dilakukan sebanyak tiga kali, jumlah mikroba yang tertinggal hanya 42% dari
jumlah mikroba awal. Proses pengeringan simplisia dilakukan dengan cara
diangin – anginkan sampai kering atau tidak terkena cahaya matahari langsung
pada suhu kamar. Simplisia kering dipisahkan dari kotoran-kotoran atau bahan-
 37

bahan asing lainnya (Depkes RI, 1985). Daun beluntas yang sudah kering dan
disortasi selanjutnya akan dilakukan proses penghalusan dengan cara diblender
sampai didapatkan serbuk halus kemudian diayak dengan ayakan 80 mesh, hal ini
dikarenakan serbuk yang lebih halus akan lebih mudah diekstraksi karena
permukaan serbuk simplisia yang bersentuhan dengan cairan penyari makin luas.
Serbuk halus kemudian di uji kadar airnya. Simplisia yang sudah jadi disimpan
dalam wadah (Depkes RI, 1985)
3.8.3 Uji Kadar Air Serbuk Simplisia
Uji kadar air serbuk simplisia dilakukan dengan memasukkan kurang lebih
10 g simplisia dan ditimbang seksama dalam wadah yang telah ditara.
Dikeringkan pada suhu 105o C selama 5 jam dan ditimbang. Dilanjutkan
pengeringan dan ditimbang pada jarak 1 jam sampai perbedaan antara 2
penimbangan berturut – turut tidak lebih dari 0,25% (Depkes RI, 2000).
Kadar air (%) =

3.8.4 Pembuatan Ekstrak

Simplisia serbuk daun beluntas ditimbang sebanyak 50 g dimasukkan
dalam kertas saring, diletakkan pada timbel. Labu alas bulat diisi dengan pelarut
etanol 70% sebanyak 350 mL. Dilakukan ekstraksi kontinyu hingga ekstraksi
tercapai dengan ditandai dengan cairan pelarut yang menetes di atas timbel
menjadi jernih (Handa et al., 2008)

Rendemen ekstrak (%) =

3.8.5 Uji Bebas Etanol Ekstrak

Uji bebas etanol ekstrak dilakukan dengan memasukkan sejumlah esktrak
kedalam tabung reaksi, kemudian ditambahkan 1 mL asam asetat glasial, dan 1
mL asam sulfat pekat. Campuran dihomogenkan dan dipanaskan, kemudian
tabung ditutup dengan kapas, hasil positif bebas etanol jika tidak tercium bau ester
(Depkes RI, 1995).
 38

3.8.6 Skrining Fitokimia

[Link] Flavonoid
Sampel sebanyak kurang lebih 1 mL dicampur dengan 3 mL etanol 70%,
lalu dikocok, dipanaskan dan dikocok lagi kemudian disaring. Filtrat yang
diperoleh, kemudian ditambah Mg 0,1 g dan 2 tetes HCl pekat. Adanya flavonoid
ditandai dengan warna merah, orange, dan hijau pada lapisan etanol (Harborne,
2006).
[Link] Tanin
Sampel sebanyak 2 g ditambah etanol sampai sampel terendam semuanya.
Kemudian sebanyak 1 mL larutan sampel dipindahkan kedalam tabung reaksi dan
ditambahkan 2-3 tetes larutan FeCl3 1%. Hasil positif ditunjukkan dengan
terbentuknya warna hitam kebiruan atau hijau (Harborne, 2006).
[Link] Saponin
Sampel diambil sebanyak kurang lebih 1 mL dididihkan dengan 10 mL
akuades dalam penangas air. Filtrat dikocok dan didiamkan selama 15 menit.
Terbentuknya busa yang stabil (bertahan lama) menunjukkan positif terdapat
saponin (Harborne, 2006).
3.8.7 Sterilisasi Alat dan Bahan
Sterilisasi adalah suatu proses menghilangkan semua jenis organisme
hidup seperti protozoa, fungi, bakteri, mycoplasma atau virus yang terdapat pada
suatu benda. Sterilisasi alat dan bahan dilakukan menggunakan autoklaf pada suhu
121oC dengan tekanan 1 atm selama 15 menit. Sterilisasi larutan uji dan media
dilakukan dalam wadah yang sesuai seperti erlenmeyer dengan mulut ditutup
kapas dan dibungkus alumunium foil (Pratiwi, 2008).
3.8.8 Pembuatan Media
[Link] Pembuatan Media Nutrient Broth (NB)
Serbuk NB sebanyak 0,08 g dilarutkan dalam 10 mL akuades, kemudian
dipanaskan sampai mendidih sehingga semuanya larut. Media disterilkan dengan
autoklaf pada suhu 121oC selama 15 menit tekanan 15 psi. Media dituangkan ke
dalam tabung reaksi (Atlas, 2010).
 39

[Link] Pembuatan Media Manitol Salt Agar (MSA)

Serbuk MSA sebanyak 1,08 g dilarutkan dalam 10 mL akuades, kemudian
dipanaskan sampai mendidih sehingga semuanya larut. Media disterilkan dengan
autoklaf pada suhu 121oC selama 15 menit tekanan 15 psi. Media dituangkan
kedalam cawan petri dan dibiarkan mengeras (Atlas, 2010).
[Link] Pembuatan Median Nutrient Agar (NA)
Serbuk NA sebanyak 4,2 g dilarutkan dalam 210 mL akuades, kemudian
dipanaskan sampai mendidih sehingga semuanya larut. Media disterilkan dengan
autoklaf pada suhu 121oC selama 15 menit tekanan 15 psi. Media dituangkan
kedalam cawan petri dan dibiarkan mengeras (Atlas, 2010).
3.8.9 Uji identifikasi Staphylococcus aureus dengan media diferensial MSA
Suspensi Staphylococcus aureus diinokulasi pada permukaan media MSA,
kemudian diinkubasi pada suhu 37oC selama 24 jam (Radji, 2013). Koloni
Staphylococcus aureus memiliki ciri – ciri bundar, halus, menonjol dan berkilau
serta berwarna abu – abu sampai kuning emas tua (Dewi, 2013).
3.8.10 Pembuatan Suspensi Bakteri
Satu ose biakan bakteri Staphylococcus aureus disuspensikan ke dalam
tabung berisi 5 ml media NB dan diinkubasi selama 24 jam pada suhu 37ºC.
Suspensi bakteri tersebut diencerkan menggunakan NaCl 0,9% steril sampai
kekeruhannya setara dengan larutan standart 0,5 Mc. Farland (biakan cair yang
kekeruhannya setara dengan 0,5 Mc. Farland mempunyai populasi 1,5 x 108
CFU/mL (Forbes et al.,2007).
3.8.11 Formulasi Gel
[Link] Formulasi Standart
Tabel III.1 Formula standar Gel (Aponno et al.,2014)
Komponen % b/v
CMC 5 gram
Gliserin 10 mL
Propilenglikol 5 mL
Air ad 100
 40

[Link] Formulasi Gel Ekstrak Daun Beluntas

Tabel III.2 Formulasi Gel yang Dimodifikasi
Konsentrasi Gel
Bahan F.I [Link] [Link]
(% b/v) (% b/v) (%b/v)
Ekstrak Daun Beluntas 5 gram 10 gram 15 gram
CMC 5 gram 5 gram 5 gram
Gliserin 10 mL 10 mL 10 mL
Propilen glikol 5 mL 5 mL 5 mL
Air ad 100 mL 100 mL 100 mL

3.8.12 Pembuatan Gel

Cara pembuatan formulasi gel ialah disiapkan semua bahan yang akan
digunakan yaitu CMC, gliserin dan propilen glikol. Bahan ditimbang terlebih
dahulu sesuai dengan formulasi. Ekstrak dengan konsentrasi 5% dilarutkan dalam
sebagian air yang telah dipanaskan pada suhu 50º C. Ditambahkan CMC dan
diaduk sampai homogen. Ditambahkan gliserin, propilenglikol dan air dengan
pengadukan secara kontinyu hingga terbentuk gel. Gel yang telah terbentuk
kemudian disimpan pada suhu ruangan. Prosedur yang sama juga dilakukan pada
ekstrak dengan konsentrasi 10% dan 15% (Aponno, et al., 2014)
3.8.13 Evaluasi Gel
[Link] Uji Organoleptis
Uji organoleptis dilakukan secara visual dan dilihat secara langsung
bentuk, warna, dan bau dari sediaan gel. Gel biasanya jernih dengan konsistensi
setengah padat (Ansel, 2005).
[Link] Uji pH
Sediaan gel ditimbang sebanyak 1 gram dan dilarutkan dalam 100 mL
akuades dalam gelas beker. Larutan diukur pH-nya menggunakan pH indikator
universal sebanyak tiga kali replikasi dan dihitung nilai rata-rata pH (Kaur &
Guleri, 2013).
 41

[Link] Uji Homogenitas

Diambil sediaan gel secukupnya, dioleskan pada gelas objek kemudian
diraba dan digosok. Diamati susunan sediaan pada gelas objek. Massa gel
homogen ditunjukkan dengan tidak adanya bahan padat atau butiran pada kaca
(Dewantari & Sugihartini, 2015).
[Link] Uji Daya Sebar
Sediaan gel ditimbang sebanyak 500 mg, diletakkan ditengah kaca bulat
berskala dana diletakkan kaca bulat lainnya yang telah ditimbang di atas gel
selama 1 menit. Diukur diameter gel yang menyebar, kemudian ditambahkan
beban 50 g didiamkan selama 1 menit. Dicatat diameter gel yang menyebar dan
setelah penambah beban 100 g, 150 g, dan 200 g (Fujiastuti & Sugihartini, 2015).
[Link] Uji Daya Lekat
Sampel gel sebanyak 0,25 gram diletakkan diantara 2 objek glass pada alat
uji daya lekat, ditekan dengan beban 1 kg selama 5 menit, kemudian beban
diangkat daan pada alat uji dilepaskan beban 80 gram serta dicatat waktu
pelepasan gel (Dewantari & Sugihartini, 2015).
[Link] Uji Daya Proteksi
Sediaan gel dioleskan pada kertas saring yang sebelumnya telah ditetesi
fenolftalein. Kertas tersebut ditempelkan pada kertas saring lain dan kemudian
ditetsi larutan KOH 0,1 N. Diamati munculnya warna merah pada waktu detik ke
15, 30, 45, 60 serta menit ke 3 dan 5 (Widyantoro & Sugihartini, 2015).
[Link] Uji Stabilitas Fisik
Sediaan gel diamati perubahan bau, bentuk, warna, homogenitas, pH, daya
sebar dan viskositas selama penyimpanan pada suhu 40˚C. Diamati perubahannya
setiap 2 minggu sekali selama 8 minggu (Sayuti, 2015).
3.8.14 Uji Aktivitas Antibakteri Gel Ekstrak Daun Beluntas
Uji antibakteri dilakukan dengan metode difusi cakram (paper disc), yaitu
biakan murni bakteri Staphylococcus aureus diinokulasikan secara merata dengan
cara mencelupkan ujung cotton bud steril dalam medium nutrient cair, dan
mengoleskannya pada permukaan medium lempeng NA sampai rata. Kemudian
kertas cakram steril diresapi dengan ekstrak daun beluntas dari berbagai seri
 42

konsentrasi (5%, 10%, dan 15%) dibiarkan selama 25 menit. Selanjutnya

meletakkan kertas cakram yang mengandung gel ekstrak daun beluntas tersebut
pada permukaan medium yang telah diinokulasikan dengan Staphylococcus
aureus secara aseptik (dengan menggunakan pinset steril). Medium perlakuan ini
diinkubasi pada suhu 37oC selama 1x24 jam. Setelah 24 jam akan terbentuk zona
bening di sekitar cakram yang menunjukan kemampuan dari senyawa uji dalam
menghambat pertumbuhan bakteri (Setyowati dan Nugrahaningsih, 2015).
Sebagai kontrol positif digunakan antibiotik klindamisin.

3.9 Jalan penelitian

Kelompok I : kontrol negatif, yaitu gel tanpa ekstrak
Kelompok II : kontrol positif, yaitu gel klindamisin 1%
Kelompok III : kelompol uji, yaitu gel ekstrak daun beluntas 5%
Kelompok IV : kelompok uji, yaitu gel ekstrak daun beluntas 10%.
Kelompok V : kelompok uji, yaitu gelekstrak daun beluntas 15%.
Penelitian ini dimulai dengan determinasi tanaman beluntas yang dilakukan
di Materia Medica Batu Malang dan selanjutnya dilakukan pembuatan serbuk
simplisia dari 5 kg daun belntas segar. Serbuk simplisia tersebut dilakukan uji
kadar air dan susut pengeringan. Tahapan selanjutnya dilakukan ekstraksi, yaitu
serbuk simplisia sebanyak 500 gram diekstraksi menggunakan metode soxhletasi
dengan pelarut etanol 70% sebanyak 5000 mL yang kemudian diperoleh ekstrak
daun beluntas. Ekstrak daun beluntas kemudian dilakukan uji bebas etanol dan
skrining fitokimia (flavonoid, saponin, dan tanin). Ekstrak daun beluntas
selanjutnya dibuat dalam formulasi gel dengan variasi konsentrasi, yaitu 5%, 10%,
dan 15%. Gel tersebut kemudian dilakukan evaluasi sediaan meliputi uji
organoleptik, pH, homogenitas, daya sebar, daya lekat, daya proteksi, dan
stabilitas. Uji aktivitas antibakteri gel ekstrak daun beluntas terhadap bakteri
Staphylococcus aureus dilakukan menggunakan metode difusi cakram dan
diperoleh daya hambat.
 43

3.10 Replikasi Kelompok Penelitian

Jumlah replikasi perlakuan untuk tiap kelompok pada penelitian ni dapat
dihitung menggunakan rumus : p (n – 1) ≥ 15 dengandeskripsi p adalah jumlah
perlakuan dosis dan n adalah jumlah pengulangan (replikasi) tiap kelompok.
Penelitian ini menggunakan 5 jumlah perlakuan dosis (p). Berikut adalah
perhitungan replikasi yang diperlukan dalam penelitian :
5 (n – 1) ≥ 15
5n – 5 ≥ 15
n ≥ 20/5
n ≥4
hasil dari perhitungan replikasi, didapat n sebesar 4, sehingga replikasi
yang dilakukan adalah sebanyak 4 kali untuk tiap kelompok perlakuan dalam
penelitian.

3.11 Analisis Statistika

Data hasil penelitian aktivitas antibakteri gel ekstrak daun beluntas pada
Staphylococcus aureus dianalisis menggunakan program SPSS 16 untuk melihat
apakah ekstrak gel daun beluntas mampu menghambat Staphylococcus aureus.
Pengolahan data dapat dilakukan sebagai berikut :
1. Uji Normalitas Data
Uji normalitas adalah uji untuk mengukur apakah data mempunyai
distribusi normal, sehingga dapat digunakan dalam statistik parametrik. Penelitian
ini menggunakan uji Kolmogorov-smirnov sebagai uji normalitas data.
Perumusan hipotesis :
H0 : data berdistribusi normal
H1 : data berdistribusi tidak normal
Pengambilan keputusan :
1) Jika p > 0,05; maka H0 diterima
2) Jika p ≤ 0,05; maka H1 diterima
 44

2. Uji Homogenitas
Uji homogenitas bertujuan untuk menguji kesamaan (homogenitas)
beberapa sampel, yakni seragam tidaknya variasi sampel – sampel yang diambil
dari populasi yang sama (Ghazali, 2011). Pengujian homogenitas dilakukan
dengan menggunakan levene statistic.
Perumusan hipotesis :
H0 : data yang didapat memiliki variansi yang sama atau homogen
H1 : data yang didapat memiliki variansi yang tidak sama atau tidak
homogen
Pengambilan keputusan :
1) Jika p > 0,05; maka H0 diterima
Jika p ≤ 0,05; maka H1 diterima
3. Uji One Way Anova
Uji One Way Anova bertujuan untuk membedakan rata – rata sampel uji.
Dalam penelitian ini digunakan untuk membuktikan bahwa perlakuan gel dengan
variasi konsentrasi ekstrak berbeda dengan kontrol (gel tanpa ekstrak) terhadap
pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus.
Perumusan hipotesis :
H0 : Tidak ada pengaruh variasi konsentrasi ekstrak daun beluntas dalam
gel terhadap pertumbuhan Staphylococcus aureus
H1 : Ada pengaruh variasi konsentrasi ekstrak daun beluntas dalam gel
terhadap pertumbuhan Staphylococcus aureus
Pengambilan keputusan :
1) Jika p > 0,05; maka H0 diterima
2) Jika p ≤ 0,05; maka H1 diterima
4. Uji Korelasi
Uji korelasi ini digunakan untuk membuktikan hubungan yang signifikan
antara variasi konsentrasi ekstrak daun beluntas dalam sediaan gel terhadap efek
antibakteri yang dihasilkan. Pengujian korelasi ini menggunakan metode statistik
Spearman
.
 45

Perumusan hipotesis :
H0 : Tidak terdapat korelasi (hubungan) yang signifikan antara dosis
ekstrak daun beluntas dalam sediaan gel terhadap efek antibakteri
yang dihasilkan
H1 : Terdapat korelasi (hubungan) yang signifikan antara dosis ekstrak
daun beluntas dalam sediaan gel terhadap efek antibakteri yang
dihasilkan
Pengambilan keputusan :
1.) Jika p > 0,05; maka H0 diterima
2.)Jika p ≤ 0,05; maka H1 diterima
 BAB IV
HASIL PENELITIAN & PEMBAHASAN

4.1 Determinasi Tanaman

Determinasi tanaman beluntas dilakukan di Materia Medika, Batu. Hasil
determinasi menunjukkan bahwa sampel yang digunakan adalah tanaman beluntas
(Pluchea indica L.f) dengan kunci determinasi sebagai berikut 1b-2b-3b-4b-6b-
7b-9b-10b-11b-12b-13b-14b-16b-286b-288b-289b-1a-2b-3b-4b-5a-6b-8b-9b-10a.
Morfologi tanaman beluntas yaitu perdu kecil, tumbuh tegak, daun bulat telur,
hijau muda, panjang 2-9 cm, ujung lancip, letak berseling, berbau khas. Dalam
tanaman beluntas mengandung senyawa alkaloid, minyak atsiri saponin,
flavonoid, dan polifenol.

4.2 Pemeriksaan Karakteristik Ekstrak

4.2.1 Uji Kadar Air Simplisia
Tabel IV.1 Uji kadar air simplisia serbuk pluchea indica L.f
Sampel Bobot Awal Bobot Akhir % Hasil
Daun beluntas (Pluchea 10,012 g 9,1877 g 8,24%
indica L.f)
Rumus % Kadar Air = x 100% (Depkes, 2000)

Keterangan : bobot awal = bobot simplisia sebelum dioven

Bobot akhir = bobot simplisia sesudah dioven
Uji kadar air digunakan untuk menetepkan jumlah semua jenis bahan yang
mudah menguap selama kondisi tertentu atau selama proses pemanasan (Depkes
RI, 1995). Uji kadar air dapat digunakan sebagai salah satu parameter untuk
melihat kualitas simplisia daun beluntas yang digunakan. Menurut Menkes RI
(2009), kadar air yang dipersyaratkan yaitu tidak melebihi 10%. Jika kadar air
sesuai dengan yang dipersyaratkan maka dapat meminimalisir kandungan air
dalam simplisia yang dapat mencegah pertumbuhan dan aktivitas enzim

46
 47

mikroorganisme pada simplisia sehingga simplisia daun beluntas tahan lama serta
kandungan zat aktif didalamnya tidak berubah.
Uji kadar air serbuk simplisia dilakukan dengan memasukkan lebih kurang
10 g simplisia dan ditimbang seksama dalam wadah yang telah ditara.
Dikeringkan pada suhu 105oC selama 5 jam dan ditimbang. Hasil uji kadar air
dapat dilihat pada Tabel IV.1. Pada uji kadar air diperoleh hasil sebesar 8,24%.
Hasil yang diperoleh ini menunjukkan bahwa simplisia yang digunakan telah
memenuhi persyaratan yang telah ditetapkan.

4.2.2 Ekstrak Daun Beluntas

Tabel IV.2 Hasil uji susut pengeringan daun beluntas
Sampel Bobot Basah Bobot Kering Hasil
Daun beluntas (Pluchea 5 kg 1,05 kg 21%
indica L. f)
Uji susut pengeringan dilakukan untuk mengetahui seberapa besar
senyawa yang hilang akibat dari proses pengeringan (DepKes, 2000). Berdasarkan
tabel IV.2 diketahui susut pengeringan daun beluntas sebesar 21%.
Proses ekstraksi serbuk simplisia daun beluntas dilakukan menggunakan
metode soxhletasi. Metode soxhletasi dipilih karena proses yang mudah,
menggunakan pelarut yang relatif sedikit dan dihasilkan ekstrak yang lebih
sempurna akibat penyarian yang berulang-ulang. Pada soxhletasi ini digunakan
serbuk simplisia daun beluntas (Pluchea indica L. f) sebanyak 500 gram yang
dibagi menjadi 10 bagian dan selanjutnya dilakukan proses soxhletasi dengan
menggunakan pelarut etanol 70%. Etanol 70% dipilih karena merupakan pelarut
semi polar yang dapat menarik senyawa polar dan non polar yang terkandung
dalam simplisia. Setiap satu bagian simplisia di soxhletasi sampai 3 x sirkulasi.
Ekstrak yang diperoleh kemudian diuapkan dan diperoleh ekstrak kering.
Tabel IV.3 Hasil rendemen ekstrak
Bobot
Sampel Bobot ekstrak Hasil
simplisia
Daun beluntas (Pluchea
500 g 8,890 g 1,778 %
indica L. f)
 48

Rendemen ekstrak dihitung berdasarkan perbandingan berat akhir ekstrak

yang digunakan dengan berat awal ekstrak yang digunakan dikalikan 100%. Hasil
rendemen yang tinggi menunjukkan bahwa senyawa-senyawa kimia yang dapat
tersari dalam ekstrak juga cukup besar. Hasil penelitian menunjukkan rendemen
ekstrak daun beluntas sebesar 1,778%. Kecilnya nilai rendemen yang dihasilkan
dipengaruhi oleh ukuran partikel, waktu ekstraksi, serta jenis dan jumlah pelarut
(Maslukhah et al., 2016).
Dalam penelitian ini, ada beberapa kendala yang dialami oleh peneliti
yaitu terbatasnya waktu dan alat yang tersedia di dalam laboratorium sehingga
pada proses ekstraksi menjadi lebih lama dari sebagaimana mestinya.
4.2.3 Uji Bebas Etanol
Uji bebas etanol ekstrak daun beluntas bertujuan untuk memastikan bahwa
ekstrak yang dihasilkan bebas dari etanol karena pelarut tersebut dapat membunuh
bakteri sehingga dikhawatirkan mempengaruhi aktivitas antibakteri (Sumiati,
2014). Hasil uji bebas etanol ekstrak menunjukkan bahwa ekstrak tersebut positif
bebas etanol yang ditandai dengan tidak terciumnya bau ester pada ekstrak seperti
yang ditunjukkan pada tabel IV.4
Tabel IV.4 Hasil uji bebas etanol daun beluntas
Sampel Perlakuan Hasil Keterangan
Daun beluntas (Pluchea indica Asam asetat, asam + Bebas etanol
L. f) sulfat, dipanaskan

Keterangan: (+) Tidak tercium bau ester dan (-) Tercium bau ester

4.3 Skrining Fitokimia

Skrining fitokimia ekstrak daun beluntas bertujuan untuk memastikan
keberadaan senyawa metabolit sekunder yang terkandung didalamnya. Menurut
Widyawati et al. (2014), daun beluntas memiliki kandungan kimia antara lain
alkaloid, flavonoid, polifenol, tanin, monoterpen, sterol dan kuinon.
 49

Tabel IV.5 Hasil skrining fitokimia daun beluntas

Perubahan
Golongan Senyawa Pereaksi Hasil
Warna
Flavonoid Asam sulfat pekat Jingga orange +
Etanol 70% + FeCl3
Tanin Hitam kebiruan +
1%
Saponin Ekstrak + aquadest Terbentuk busa +
Keterangan: (+) terdapat senyawa dan (-) tidak terdapat senyawa

Uji Flavonoid Uji Tanin Uji Saponin

Gambar 4.1. (a) Uji Flavonoid; (b) Uji Tanin; (c) Uji Saponin
4.3.1 Uji Flavonoid
Uji flavonoid dilakukan untuk mengetahui adanya senyawa flavonid di
dalam ekstrak daun beluntas. Uji flavonoid ini dilakukan dengan mengambil
sampel ekstrak kering daun beluntas sebanyak kurang lebih 1 mg dicampur
dengan 3 mL etanol 70%, lalu dikocok, dipanaskan dan dikocok lagi kemudian
disaring. Pemanasan dilakukan karena sebagian besar golongan flavonoid dapat
larut dalam air panas (Ergina et al., 2014). Filtrat yang diperoleh, kemudian
ditambah Mg 0,1 g dan 2 tetes H2SO4 pekat. Adanya flavonoid ditandai dengan
warna merah, orange, dan hijau pada lapisan etanol (Harborne, 2006). Hasil uji
flavonoid ekstrak daun beluntas adalah positif ditunjukkan dengan terbentuknya
warna jingga orange. Berikut adalah reaksi yang terjadi
 50

Gambar 4.2 Reaksi flavonoid dengan H2SO4 (Kusnadi dan Devi, 2017)
4.3.2 Uji Tanin
Pengujian tanin bertujuan untuk mengetahui adanya senyawa tanin di
dalam ekstrak daun beluntas. Langkah awal dalam pengujian senyawa tanin pada
ekstrak daun beluntas yaitu dengan mengambil sampel sebanyak 2 g ditambah
etanol sampai sampel terendam semuanya. Kemudian sebanyak 1 mL larutan
sampel dipindahkan kedalam tabung reaksi dan ditambahkan 2-3 tetes larutan
FeCl3 1%. Hasil positif ditunjukkan dengan terbentuknya warna hitam kebiruan
atau hijau (Harborne, 2006). Pada pengujian ini, diperoleh hasil postif dimana
hasil yang didapatkan pada ekstrak daun beluntas terbentuk warna hitam kebiruan
yang menandakan terbentuknya senyawa kompleks antara tanin dan Fe3+ yang
memberikan indikasi perubahan warna hijau, merah, ungu, biru, atau hitam yang
kuat (Ergina et al., 2014).
Uji skrining fitokimia dengan menggunakan FeCl3 digunakan untuk
menentukan apakah sampel mengandung gugus fenol. Adanya gugus fenol
ditunjukkan dengan warna hijau kehitaman atau biru tua setelah ditambahkan
dengan FeCl3, sehingga apabila uji fitokimia dengan FeCl3 1% memberikan hasil
positif dimungkinkan dalam sampel terdapat senyawa fenol dan dimungkinkan
salah satunya adalah tanin karena tanin merupaka senyawa polifenol (Ergina et
al., 2014). Penambahan ekstrak dengan larutan FeCl3 1% dalam air menimbulkan
warna hijau, merah, ungu, biru atau hitam yang kuat. Terbentuknya warna hijau
kehitaman atau biru kehitaman pada ekstrak setelah ditambahkan dengan FeCl3
karena tanin akan membentuk senyawa kompleks dengan ion Fe3+, seperti yang
terlihat pada reaksi berikut
 51

Gambar 4.3 Reaksi tanin dengan FeCl3 (Ergina et al., 2014)

4.3.3 Uji Saponin
Pengujian saponin dilakukan untuk mengetahui adanya senyawa saponin
di dalam ekstrak daun beluntas. Saponin merupakan senyawa aktif permukaan dan
bersifat seperti sabun yang dapat dideteksi berdasarkan kemampuannya dalam
membentuk busa. Saponin termasuk golongan triterpenoid yang mempunyai
kerangka karbon berdasarkan isoprena (Bambang, et al, 2016)
Pertama-tama sampel diambil sebanyak kurang lebih 1 ml dididihkan
dengan 10 ml aquadestilata dalam penangas air. Filtrat dikocok dan didiamkan
selama 15 menit. Terbentuknya busa yang stabil (bertahan lama) menunjukkan
positif terdapat saponin (Harborne, 2006). Diperoleh hasil positif dengan
terbentuknya busa. Busa yang dihasilkan pada uji saponin disebabkan karena
adanya glikosia yang dapat membentuk busa dalam air dan terhidrolisis menjadi
glukosa dan senyawa lainnya (Ningsih et al., 2016).) Adapun reaksi kimia yang
terjadi adalah sebagai berikut :
 52

Gambar 4.4 Reaksi saponin dengan air (Illing et al., 2017)

4.4 Uji Identifikasi Bakteri Staphylococcus aureus

Pengujian bakteri ini bertujuan untuk mengetahui bakteri yang digunakan
adalah Staphylococcus aureus. Sampel bakteri yang digunakan dalam penelitian
ini adalah bakteri Staphylococcus aureus yang berasal dari Laboratorium
Mikrobiologi FKUB, Malang.
Tabel IV.6 Hasil uji identifikasi bakteri Staphylococcus aureus
No. Perlakuan Hasil Kesimpulan
1 Pewarnaan bakteri Kokus ungu +
2 Uji koagulase Terbentuk koagulasi +
3 Uji katalase Warna putih +
4 Identifikasi media MSA Berwarna kuning +
keemasan
Keterangan: (+)= teridentifikasi sebagai Staphylococcus aureus
4.4.1 Pewarnaan Gram Bakteri
Identifikasi awal yang perlu dilakukan adalah pewarnaan Gram bakteri.
Pewarnaan Gram bertujuan untuk mengaati morfologi sel Staphylococcus. Bakteri
dikelompokkan sebagai Gram positif apabila selnya terwarnai keunguan, dan
Gram negatif apabila selnya terwarnai merah. Bakteri Staphylococcus biasanya
berbentuk bulat, bergerombol yang tidak teratur seperti anggur (Jawetz, 2004).
Langkah awal pewarnaan ini dengan mengambil satu ose bakteri yang
kemudian diletakkan di atas gelas objek yang telah ditetesi dengan NaCl fisiologis
kemudian dibuat apus setipis mungkin, dikeringkan dan difiksasi di atas lampu
spiritus. Preparat apus ditetesi pewarna pertama dengan karbol gentian violet
 53

selamat 1 menit, warna dibuang, ditetesi lugol selama 1 menit, kemudian preparat
apus dilunturkan dengan alkohol 95% selama 1 menit. Selanjutnya alkohol
dibuang, preparat dicuci dengan akuades dan diberi larutan fuschine selama 2
menit. Warna kemudian dibuang dan dibersihkan dengan akuades, dikeringkan
dan diamati morfologi sel serta warnanya dibaawah mikroskop. Pada pewarnaan
ini diperoleh hasil berupa bakteri dengan bentuk coccus berwarna ungu seperti
terlihat pada Gambar 4.5.

Gambar 4.5 Hasil pewarnaan Gram Bakteri Staphylococcus aureus perbesaran

100x
4.4.2 Uji Koagulase
Uji koagulase bertujuan untuk mengetahui kemampuan bakteri
menghasilkan enzim koagulase. Reaski koagulase positif sangat penting untuk
membedakan Staphylococcus aureus dengan spesies staphylococcus lain. Uji
koagulase dilakukan dengan 2 metode, yaitu uji slide dan uji tabung. Pada uji ini
diakukan uji slide yang dikerjakan dengan cara setetes akuades atau NaCl
fisiologis steril diletakkan pada kaca benda, kemudian satu usa biakan yang diuji,
disuspensikan. Setetes plasma diletakkan di dekat suspensi biakan tersebut,
keduanya dicampur dengan menggunakan ose dan kemudian digoyangkan. Reaksi
positif terjadi apabila dalam waktu 2-3 menit terbentuk presipitat granuler
(Bruckler et al., 1994). Diperoleh hasil berupa gumpalan putih pada uji slide
koagulase ini seperti yang terilhat pada Gambar 4.6.
 54

Gambar 4.6 Hasil uji koagulase

4.4.3 Uji katalase
Uji katalase berfungsi untuk membedakan antara Staphylococcus atau
Streptococcus, dimana kelompok Staphylococcus bersifat katalase positif.
Katalase merupakan enzim yang mengkatalisan penguraian hidrogen peroksida
menjadi H2O2 dan O2. Hidrogen peroksida bersifat toksik terhadap sel karena
bahan ini menginaktifkan enzim dalam sel. Hidrogen peroksida terbentuk sewaktu
metabolisme aerob, sehingga mikroorganisme dalam lingkungan aerob pasti
menguraikan bahan tersebut (Amalia, 2013)

Gambar 4.7 Hasil uji katalase

4.4.4 Identifikasi Media MSA
Identifikasi Staphylococcus aureus dalam media MSA menunjukkan hasil
positif dengan berubahnya warna media MSA dari warna merah menjadi kuning
seperti yang ditunjukkan pada Gambar 4.8. Perubahan ini terjadi karena
fermentasi manitol menjadi asam. Produk yang dihasilkan bakteri ini adalah asam
organik yang mengubah indikator pH di MSA, merubah warna merah menjadi
kuning cerah (Tambayong, 2009)
 55

Gambar 4.8 Hasil pada MSA (a) Sebelum; (b) sesudah

4.5 Evaluasi Sediaan Gel

Evaluasi sediaan bertujuan untuk melihat kualitas suatu sediaan dan untuk
menjamin bahwa sediaan tersebut memiliki karakteristik sesuai dengan
karakteristik yang telah ditentukan. Evaluasi sediaan dilakukan pada hari ke-0
atau setelah sediaan jadi, hari ke-7 dan hari ke-14.
4.5.1 Organoleptis
Uji organoleptis dilakukan untuk melihat tampilan fisik suatu sediaan yang
dibuat. Dalam uji organolptis diamati secara langsung bentuk, warna dan bau dari
sediaan gel tanpa menggunakan alat bantu.

Gambar 4.9 Hasil uji organoleptis

 56

Tabel IV.7 Hasil uji organoleptis

Hari ke- Standart
Sampel
0 7 14
Gel Ekstrak 5%
- Bau Khas Khas Khas

- Bentuk Semi Solid Semi Solid Semi Solid

- Warna Coklat Coklat Coklat
Gel Ekstrak 10%
- Bau Khas Khas Khas

- Bentuk Semi Solid Semi Solid Semi Solid Bau : khas

(Stiani et al.,
- Warna Hitam Hitam Hitam
2016)
Gel Ekstrak 15%
Bentuk : semi
- Bau Khas Khas Khas solid (Astuti,
- Bentuk Semi Solid Semi Solid Semi Solid 2015)

- Warna Hitam Hitam Hitam

Gel tanpa
ekstrak
- Bau Khas Khas Khas

- Bentuk Semi Solid Semi Solid Semi Solid

- Warna Bening Bening Bening

Berdasarkan Tabel IV.7 ketiga formulasi gel mempunyai bau yang sama,
yaitu khas daun beluntas. Dimana semakin tinggi tingkat konsentrasi aroma dari
sediaan gel yang dibuat semakin meningkat. Warna dan bentuk yang dihasilkan
dari ketiga formulasi yaitu berbentuk semi solid berupa gel dengan warna coklat
dan hitam sedikit kehijauan, dimana semakin tinggi ekstrak yang digunakan
diperoleh warna yang semakin pekat dan bentuk yang semakin memadat. Menurut
Ansel (2005), gel biasanya jernih dengan konsistensi setengah padat, namun
berdasarkan hasil pengamatan gel memiliki warna coklat dan hitam sedikit
kehijauan yang merupakan pengaruh dari ekstrak yang digunakan. Berdasarkan
hasil penguian dari hari ke-0 sampai hari ke-14 dapat disimpulkan bahwa gel
 57

ekstrak daun beluntas tersebut stabil berdasarkan pengujian bentuk, bau dan
warna.
4.5.2 Uji Homogenitas
Uji homogenitas dilakukan secara visual dengan mengoleskan sediaan gel
ekstrak daun beluntas pada gelas obyek secara merata. Uji homogenitas bertujuan
untuk mengetahui tidak adanya butiran kasar pada sediaan (Sayuti, 2015).

Gambar 4.10 Hasil uji homogenitas

Tabel IV. 8 Uji Homogenitas
Formulasi I Formulasi II Formulasi III
Ekstrak 5% Ekstrak 10% Ekstrak 15%

0 7 14 0 7 14 0 7 14

Homogenitas √ √ √ √ √ √ √ √ √

Berdarkan tabel IV.8 diketahui bahwa sediaan gel yang dibuat sudah
homogen semua dan tetap stabil selama masa penyimpanan.
4.5.3 Pengujian pH
Uji pH bertujuan untuk mengetahui pH pada sediaan yang harus
disesuaikan dengan pH kulit (Naibaho et al., 2013). Uji pH dilakukan dengan
megoleskan sediaan ke dalam kertas pH universal kemudian diamati perubahan
 58

warnanya sesuai dengan indikator ph yang digunakan. Hasil dari pengujian pH

dapat dilihat pada Tabel IV.9
Tabel IV.9 Hasil uji pH
Hari ke- Standart
Sampel Rata - rata
0 7 14
Gel Ekstrak 5 5 5 5
5%
Gel Ekstrak 5 5 5 5 4,5 – 6,5
10%
(Naibaho et al.,
Gel Ekstrak 5 5 5 5 2013)
15%
Gel tanpa 5 5 5 5
ekstrak

Gambar 4.11 Hasil Uji pH

Berdasarkan hasil uji pH yang diperoleh, ketiga formulasi gel mempunyai
nilai pH yang sama selama 2 minggu pengujian yaitu pH 5. Hal ini berarti pH
sudah memenuhi kriteria pH kulit yaitu 4,5-6,5 (Mappa et al., 2013). Dapat
disimpulkan bahwa ketiga formulasi gel stabil selama dalam masa penyimpanan.
4.5.4 Uji Daya Sebar
Uji daya sebar dilakukan untuk mengetahui kemampuan penyebaran gel.
Pengujia daya sebar merupakan salah satu syarat dari suatu sediaan semisolid,
apabila sediaan semisolid memiliki daya sebar yang tinggi maka akan
memberikan daerah penyebaran yang luas pada kulit sehingga zat aktif yang
 59

terkandung dalam sediaan semisolid akan tersebar secara merata. Pengujian

dilakukan dengan mengambil sampel gel sebanyak 0,5 gram kemudian diletakkan
ditengah kaca bulat berkala. Diatas gel kemudian diletakkan kaca bulat lain dan
pemberat hingga 200 gram.
Tabel IV.10 Uji Daya Sebar
Hari ke-
Rata – rata
Sampel 0 7 14 Standart
(cm)
(cm) (cm) (cm)
Gel Ekstrak 4,8 4,7 4,7 4,73
5%
Gel Ekstrak 4,3 4,3 4,2 4,27 3-5 cm
10%
(Prastianto,
Gel Ekstrak 3,8 3,5 3,4 3,56 2016)
15%
Gel tanpa
5,8 5,3 5,2 5,43
ekstrak

Gambar 4.12 Uji daya sebar

Hasil uji daya sebar yang baik yaitu antara 3-5 cm (Pristianto, 2016).
Berdasarkan Tabel IV.8, pengujian daya sebar gel ekstrak daun beluntas dari hari
ke-0 sampai ke-14 memperlihatkan hasil yang sama dilihat dari penurunan dan
peningkatan luas yang tidak jauh berbeda, sehingga dapat disimpulkan bahwa gel
ekstrak daun beluntas memiliki daya sebar yang stabil selama penyimpanan.
4.5.5 Uji Daya Lekat
Uji daya lekat dilakukan untuk mengetahui kemampuan sediaan gel
melekat ketika dioleskan pada kulit. Semakin besar nilai daya lekat suatu sediaan
makan kemampuan melekat pada kulit semakin kuat dan absorbsi dikulit semakin
lama. Daya lekat suatu sediaan dipengaruhi oleh viskositas suatu sediaan tersebut.
 60

Semakin tinggi viskositas suatu sediaan maka daya lekat yang dihasilkan akan
semakin tinggi dan semakin rendah viskositas suatu sediaan maka daya lekat yang
dihasilkan akan semakin rendah. (Rahmawati et al., 2010). Pengujian daya lekat
dilakukan dengan menggunakan alat uji daya lekat dan stopwatch untuk
mengukur waktu. Daya lekat gel yang baik yaitu lebih dari 4 detik (Sugihartini,
2015).
Tabel IV.11 Hasil uji daya lekat
Hari ke-
Rata – rata
Sampel 0 7 14 Standart
(detik)
(detik) (detik) (detik)
Gel Ekstrak 98,88 110,12 118,08 107, 02
5%
Gel Ekstrak 149,25 164,87 177,88 164 ≥ 4 detik
10%
(Sugihartini,
Gel Ekstrak 186,07 198,65 208,54 197,75 2015)
15%
Gel tanpa
14,42 42,4 45,6 34,14
ekstrak

Gambar 4.13 Hasil uji daya lekat

4.5.6 Uji Daya Proteksi
Uji daya proteksi dilakukan dengan tujuan untuk mengetahui kemampuan
sediaan gel dalam memproteksi atau memberikan perlindungan kulit terhadap
pengaruh asing dari luar. Pengujian ini dilakukan dengan penambahan KOH.
Sediaan gel dapat memberikan proteksi bila tidak timbul noda merah pada bekas
tetesan KOH pada kertas saring. Munculnya noda merah pada kertas saring
disebabkan karena adanya suatu interaksi antara indikator PP dan KOH
(Rahmawati et al., 2010).
 61

Tabel IV.12 Hasil uji daya proteksi

Formulasi I Formulasi II Formulasi III
Ekstrak 5% Ekstrak 10% Ekstrak 15%

0 7 14 0 7 14 0 7 14

Daya
√ √ √ √ √ √ √ √ √
proteksi
Keterangan : √ = tidak timbul noda merah

Gambar 4.14 Hasil uji daya proteksi

Berdasarkan Tabel IV.10, dapat diketahui bahwa gel ekstrak daun beluntas
memberikan daya proteksi yang stabil selama masa penyimpanan 2 minggu.

4.6 Uji Aktivitas Antibakteri Gel Ekstrak Daun Beluntas (Pluchea indica
L.) terhadap Staphylococcus aureus
Uji aktivitas antibakteri gel ekstrak daun beluntas dilakukan untuk
mengetahui daya antibakteri gel ekstrak daun beluntas terhadap bakteri
Staphylococcus aureus yang dapat dilihat dengan adanya diameter zona hambat
pada kertas cakram. Pengukuran zona hambat dapat dilihat dengan terbentuknya
zona bening disekitar kertas cakram (Kurniawati, 2015).
Uji aktivitas antibakteri gel ekstrak daun beluntas terhadap Staphylococcus
aureus dilakukan dengan metode difusi menggunakan kertas cakram. Metode ini
dipilih karena proses pengerjaan yang mudah dilakukan dan tidak memerlukan
peralatan khusus (Rahmadani, 2015). Dimana prinsip metode difusi yaitu gel
ekstrak daun beluntas akan berdifusi kedalam media yang telah diinokulasi bakteri
 62

uji sehingga gel ekstrak daun beluntas akan menghambat pertumbuhan bakteri
Staphylococcus aureus.
Kontrol negatif yang diguanakan adalah gel kosong tanpa ekstrak untuk
melihat apakah basis gel yang digunakan mempunyai aktivitas sebagai antibakteri
yang nantinya dapat menyebabkan bias pada hasil penelitian, sedangkan kontrol
postif yang digunakan adalah gel klindamisin yang memiliki mekanisme kerja
menghambat pertumbuhan bakteri sama dengan senyawa aktif yang terdapat pada
ekstrak daun beluntas. Pada penilitian ini dibuat gel ekstrak daun beluntas ke
dalam beberapa konsentrasi, antara lain gel dengan ekstrak daun beluntas 5%,
10% dan 15%.
Pembuatan gel ekstrak daun beluntas menggunakan basis Na-CMC yang
berfungsi sebagi gelling agent pada sediaan. Selain itu juga untuk memperoleh gel
yang jernih, bersifat netral dan memiliki daya pengikat zat aktif yang kuat. Pada
pembuatan gel juga ditambahkan gliserin dan propilenglikol. Gliserin dan
propilenglikol berfungsi sebagai humektan atau penahan lembab yang
meningkatkan kelembutan dan daya sebar sediaan serta menghindari terjadinya
kekeringan pada sediaan (Aponno et al., 2014).
Hasil pengujian aktivitas antibakteri menunjukkan bahwa formula gel
memiliki aktivitas sebagai antibakteri yang ditandai dengan timbulnya zona
bening terhadap bakteri Staphylococcus aureus yang dapat dilihat pada Gambar
4.15.

Gambar 4.15 Hasil uji aktivitas antibakteri terhadap Staphylococcus aureus

 63

Tabel IV.13 Hasil zona hambat gel antibakteri ekstrak daun beluntas terhadap
Staphylococcus aureus
Diameter zona hambat Rata-
Standar
No. Sampel (mm) rata
Deviasi
I II III IV (mm)
1 Gel ekstrak daun
6 7 7 8 7 0,81
beluntas 5%
2 Gel ekstrak daun
9 10 9 10 9,5 0,57
beluntas 10%
3 Gel ekstrak daun
14 13 13 14 13,5 0,57
beluntas 15%
4 Kontrol positif 32 34 30 30 31,25 1,91
5 Kontrol negatif - - - - -
Keterangan : (-) = tidak ada zona hambat

rata-rata
40
Diameter Zona Hambat (mm)

35 31.5
30
25
20
13.5
15
9.5 rata-rata
10 7
5 0
0
gel ekstrak Gel Ekstrak Gel Ektrak klindamisin kontrol
5% 10% 15% negatif
Kelompok

Gambar 4.16 Grafik diameter zona hambat

Berdasarkan tabel IV.13 dapat dilihat bahwa hasil zona hambat kontrol
negatif adalah 0 mm. Hal ini menunjukkan bahwa basis gel yang digunakan tidak
memiliki aktivitas antibakteri dan tidak memengaruhi hasil uji antibakteri dari gel
yang mengandung ekstrak daun beluntas. Aktivitas antibakteri sendiri dibagi
menjadi beberapa golongan berdasarkan diameter zona hambat yang ditimbulkan,
yaitu golongan lemah (<5 mm), sedang (6-10 mm), kuat (11-20 mm), sangat kuat
(>21 mm) (Rachmawaty, 2016).
 64

Kontrol positif yang digunakan adalah gel klindamisin. Kindamisin

merupakan antibiotik yang digunakan untuk jenis bakteri Gram positif seperti
Staphylococcus aureus (Gaballah & Ghazal, 2018). Gel klindamisin memiliki
rata-rata zona hambat 31,25±1,91 mm yang artinya berada dalam rentang kategori
zona hambat sangat kuat.
Hasil diameter zona hambat gel ekstrak daun beluntas 5% memiliki rata-
rata sebesar 7±0,81 mm yang termasuk dalam kategori rentang sedang. Hasil
diameter zona hambat gel ekstrak daun beluntas 10% memiiki rata-rata sebesar
9,5±0,57 mm (sedang). Dan diameter zona hambat rata-rata gel ekstrak daun
beluntas 15% sebesar 13,5±0,57 mm (kuat). Peningkatan hasil diameter zona
hambat ini dikarenakan semakin besar konsentrasi ekstrak yang digunakan maka
zona hambat yang dihasilkan akan semakin besar.
Kontrol positif gel klindamisin memiliki zona hambat rata-rata yang lebih
besar dari pada diameter zona hambat rata-rata gel ekstrak dengan konsentrasi
5%, 10% dan 15%. Hal ini dikarenakan antibiotik klindamisin merupakan
senyawa murni sedangkan pada gel ekstrak daun beluntas masih terkandung
senyawa-senyawa lain yang masih belum diketahui khasiatnya. Sehingga aktivitas
antibakteri yang dihasilkan belum dapat semaksimal gel klindamisin namun gel
ekstrak daun beluntas masih memiliki aktivitas daun beluntas terhadap
Staphylococcus aureus.
Aktivitas antibakteri gel ekstrak daun beluntas terhadap Staphylococcus
aureus dimungkinkan karena adanya kandungan senyawa aktif seperti flavonoid,
tanin dan saponin yang terkadung dalam ekstrak daun beluntas. Flavonoid bekerja
dengan merusak permeabilitas dinding sel bakteri dan menghambat motilitas
bakteri (Darsana, 2012). Tanin bekerja dengan menyerang polipeptida dinding sel
sehingga menyebabkan kerusakan dinding sel pada bakteri (Ji Ys, 2012). Saponin
memiliki molekul yang dapat menarik air atau hidrofilik dan molekul yang dapat
melarutkan lemak atau lipofilik sehingga dapat menurunkan tegangan permukaan
sel yang akhirnya menyebabkan hancurnya bakteri (Ji Ys, 2012).
Hasil tersebut juga didukung oleh penelitian yang dilakukan oleh Manu
(2013) yang menyatakan bahwa ekstrak daun beluntas efektif untuk menghambat
 65

pertumbuhan Staphylococcus aureus. Selain itu, menurut Harbone (2006),

senyawa flavonoid, tanin dan saponin merupakan senyawa yang bersifat polar
yang menyebabkan senyawa polar tersebut dapat menembus barier membran sel
bakteri dengan mudah. Sehingga dapat dikatakan bahwa gel ekstrak daun beluntas
memiliki kemampuan daya hambat antibakteri terhadap bakteri Staphylococcus
aureus.

4.7 Analisis Statistika

Data hasil uji aktivitas antibakteri dari beberapa konsentrasi ekstrak daun
beluntas dalam gel selanjutnya dilakukan analisis data statistik menggunakan
program SPSS 16 dengan metode One Way Anova dan Spearman. Analisa data
menggunakan One Way Anova dapat dilakukan setelah data melalui uji normalitas
dan homogenitas, analisa ini digunakan untuk mengetahui bahwa terdapat
perbedaan efek antibakteri yang signifikan atau tidak antar kelompok perlakuan.
Sedangkan Uji Spearman dilakukan untuk mengetahui kekuatan hubungan antar
perlakuan terhadap daya antibakteri.
Tabel IV.14 Analisis hasil uji aktivitas antibakteri gel ekstrak daun beluntas
Analisa Data Metode Sig
Uji Normalitas Kolmogorov-smirnov 0,208
Uji Homogenitas Levene statistic 0,648
Analisa Hasil One-Way ANOVA 0,000
Uji Korelasi Spearman 0,974

4.7.1 Uji Normalitas Data

Dari hasil pengujian normalitas data daya hambat antibakteri dengan
menggunakan Uji Kolmogorov-smirnov didapatkan hasil nilai p = 0,208 (p >
0,05). Data berdistribusi normal bila nilai p > 0,05. Sehingga dapat dikatakan
bahwa data tersebut berdistribusi normal.
 66

Tabel IV.15 Hasil uji normalitas data

One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test

Daya_hambat Seri_konsentrasi
N 20 20
Normal Parametersa Mean 12.30 3.00
Std. Deviation 10.868 1.451
Most Extreme Absolute .238 .155
Differences Positive .238 .155
Negative -.148 -.155
Kolmogorov-Smirnov Z 1.064 .692
Asymp. Sig. (2-tailed) .208 .725

4.7.2 Uji Homogenitas Data

Dari hasil pengujian homogenitas data daya hambat antibakteri dengan
menggunakan Uji Levene-statistic didapatkan hasil nilai p < 0,05. Data memiliki
varian yang homogen bila nilai p > 0,05. Sehingga dapat dikatakan bahwa data
tersebut memiliki varian yang tidak homogen. Variasi sampel yang tidak
homogen memerlukan transformasi jenis data dependen variabel ke bentuk
logaritmik agar analisis parametrik dapat dilanjutkan (Sujarweni, 2012). Data
daya hambat yang telah ditransformasi menghasilkan nilai p = 0,648 (> 0,05) yang
berarti data memiliki varian yang homogen.
Tabel IV.15 Hasil uji homogenitas data
Test of Homogeneity of Variances

translog_daya

Levene Statistic df1 df2 Sig.

.566 3 12 .648
4.7.3 Uji One Way Anova
Dari penilaian distribusi data untuk daya hambat terhadap bakteri
Staphylococcus aureus didapatkan hasil bahwa data bersifat normal dan homogen.
Sehingga pengujian uji beda untuk data daya hambat terhadap bakteri
Staphylococcus aureus dilakukan dengan menggunakan uji one way anova. Hasil
 67

pengujian statistik dengan menggunakan One Way Anova, didapatkan nilai p =

0,000. Oleh karena nilai p<0,05, maka dapat diartikan bahwa terdapat perbedaan
efek antibakteri yang signifikan antar kelompok perlakuan.
Tabel IV.16 Hasil uji one Way Anova

translog_daya
Sum of
Squares df Mean Square F Sig.
Between
.959 3 .320 295.101 .000
Groups
Within Groups .013 12 .001
Total .972 15
Tabel IV.17 Homogeneous

translog_daya
Tukey HSD
Subset for alpha = 0.05
Seri_konsentrasi N 1 2 3 4
gel ekstrak 5% 4 .8429
gel ekstrak 10% 4 .9771
gel ekstrak 15% 4 1.1300
klindamisin 4 1.4977
Sig. 1.000 1.000 1.000 1.000

Tabel Post Hoc (Homogeneous) dalam penelitian ini digunakan untuk

mengetahui zona hambat yang dihasilkan oleh gel ekstrak daun beluntas dari
berbagai konsentrasi sudah setara (tidak berbeda) atau belum (berbeda) dengan
gel antibiotik pembanding yaitu klindamisin. Dari Tabel IV.17 menunjukkan
bahwa semua gel ekstrak daun beluntas yang diujikan, sampai dengan dosis 15%
belum setara dengan zona hambat gel klindamisin 1%, ditunjukkan dari tidak
adanya satupun perlakuan yang ada dalam satu kolom yang bersama klindamisin.
Hal ini dapat terjadi karena, untuk menyetarakan zona hambat dengan gel
klindamisin dibutuhkan konsentrasi ekstrak daun beluntas dalam gel yang lebih
 68

tinggi. Klindamisin merupakan senyawa sintetis yang dengan konsentrasi sedikit

sudah dapat menghasilkan zona hambat yang besar dan gel ekstrak daun beluntas
masih mengandung beberapa senyawa lain yang dapat mempengaruhi
kemampuan agen antibakterinya.
Untuk mengetahui konsentrasi ekstrak daun beluntas dalam sediaan gel
yang memiliki zona hambat setara (tidak berbeda) dengan kontrol positif
(Klindamisin), maka dapat dilakukan uji statistik regresi linear dengan rumus
regresi sebagai berikut Y = a+bX, dimana Y = diameter zona hambat klindamisin
dan X = konsentrasi gel ekstrak daun beluntas, sedangkan a dan b dapat diperoleh
dari nilai hasil uji regresi linier (Sentana, 2010).
4.7.4 Uji Korelasi
Untuk kelompok data yang terdistribusi normal dilakukan analisis korelasi
menggunakan Spearman. Hasil analisis uji Spearman yaitu nilai p = 0,000
(p<0,05), hal ini menunjukkan terdapat korelasi (hubungan) yang signifikan
antara dosis ekstrak daun beluntas dalam sediaan gel terhadap efek antibakteri
yang dihasilkan. Sedangkan nilai korelasi Spearman yang dihasilkan yaitu sebesar
0,974 yang berarti dosis ekstrak daun beluntas dalam gel berhubungan sangat kuat
secara positif dengan daya antibakteri yang dihasilkan, dapat dikatakan jika
semakin besar dosis ekstrak daun beluntas dalam gel maka semakin besar pula
daya antibakteri yang dihasilkan.
Tabel IV.17 Hasil uji korelasi

Correlations
Seri_konsentrasi translog_daya
Spearman's Seri_konsentrasi Correlation
1.000 .974**
rho Coefficient
Sig. (2-tailed) . .000
N 20 16
translog_daya Correlation
.974** 1.000
Coefficient
Sig. (2-tailed) .000 .
N 16 16
 BAB V
PENUTUP

5.1 Kesimpulan
Berdasarkan hasil dan pembahasan dalam penelitian ini dapat diambil
kesimpulan sebagai berikut:
1. Gel ekstrak daun beluntas (Pluchea indica L.f) mempunyai aktivitas
antibakteri Staphylococcus aureus secara in vitro yang ditandai dengan
adanya diameter zona hambat pada media, dimana semakin tinggi dosis
semakin luas zona hambat.
2. Gel ekstrak daun beluntas memiliki daya hambat yang lebih kecil
(berbeda) dibandingkan dengan gel klindamisin 1% dalam menghambat
pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus secara in vitro
3. Gel ekstrak daun beluntas (Pluchea indica L.f) memiliki stabilitas sediaan
yang baik selama masa penyimpanan.

5.2 Saran
Berdasarkan hasil penelitian dapat ditarik beberapa saran sebagai berikut :
1. Perlu dilakukan pengujian aktivitas antibakteri gel ekstrak daun beluntas
yang memiliki konsentrasi setara (tidak berbeda) dengan klindamisin.
2. Perlu dilakukan pengujian stabilitas gel ekstrak daun beluntas dengan
masa penyimpanan yang lebih lama.
3. Perlu dilakukan pengujian aktivitas antibakteri dengan metode pengujian
antibakeri yang lain.
4. Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut dengan bentuk sediaan yang
berbeda untuk mengetahui keefektifan daun beluntas sebagai bahan obat.

69
 DAFTAR PUSTAKA

Agoes, G. 2007. Teknologi Bahan Alam. Bandung : ITB. Hal : 21, 26-27.

Ahadi, M. R. 2003. Kandungan Tanin Terkondensasi dan Laju Dekomposisi pada

Serasah Daun Rhizospora mucronata lamk pada Ekosistem Tambak
Tumpangsari, Purwakarta, Jawa Barat. Skripsi. Bogor : Institut Pertanian
Bogor.

Ajizah, A. 2004. Sensitivitas Salmonella typhimurium terhadap Ekstrak Daun

Psidium guajava L., Bioscientiae, Vol.1, 31-38.

Amalia, F. 2012. Formulasi Gel Kurkuminoid Sebagai Anti Jerawat dan Aktivitas
Antibakteri Terhadap Staphylococcus aureus. Skripsi. Purwokerto :
Fakultas Farmasi, Universitas Muhammadiyah Purwokerto.

Amatullah, L., Cahyaningrum, T.N., Fidyaningsih, A.N. 2017. Efektifitas

Antioksi pada Formulasi Skin Lotion Ekstrak Mesocarp Buah Lontar
(Borassus Flabellifer) terhadap Tikus Putih Jantan Galur Wistar Secara In-
Situ. Akademi Farmasi Nasional Surakarta : Journal of Pharmaceutical
Science and Clinical Research. Vol.02, 25 – 34.

Andriyanto, Bambang E., Puji Ardiningsih, dan Nora Idiawati. 2016. Jurnal :
Skrining Fitokimia Ekstrak Daun Belimbing hutan (Baccaurea angulata
Merr.). Pontianak : Universitas Tanjungpura.

Ansel HC. 2008. Pengantar bentuk sediaan farmasi. Edisi Keempat. Jakarta : UI
Press.

Aponno, J. V., Yamlean, P. V. Y., Supriati,H. S. 2014. Uji Efektivitas Sediaan

GelEkstrak Etanol Daun Jambu Biji (Psidium guajava Linn) Terhadap
Penyembuhan Luka yang Terinfeksi Bakteri Staphylococcus aureus pada
Kelinci (Orytolagus cuniculus). PHARMACON Jurnal Ilmiah Farmasi –
[Link]. 3, 279-286.

Arsyad, M., Natsir. 2001. Kamus Kimia Arti dan Penjelasan Istilah. Jakarta :
Gramedia.

Atlas, R. M. 2010. Handbookof Microbiological Media 4th ed. Washington, D. C

: CRC Press.

Basri, S. 1996. Kamus Kimia. Jakarta : Rineka Cipta.

BPOM RI. 2015. Klindamisin. Tersedia online di

[Link] [diakses 29 Desember
2018].

70
BPOM. 2014. Peraturan Kepala Badan Pengawasan Obat dan Makanan Republik
Indonesia Nomor 12 Tahun 2014 Tentang Persyaratan Mutu Obat
Tradisional. Jakarta : BPOM RI.

Brooks G.F., J.S. Butel dan S.A. Morse. 2005. Medical Microbiology. New York :
Mc Graw Hill.

Brooks, G. F., J.S. Butel, Ornston, L.N. 2008, Jawetz, Melnick, Adelberg,.
Mikrobiologi Kedokteran (terjemahan). Jakarta : Penerbit Buku
Kedokteran EGC.

Brooks, G.F., Janet, S.B., Stephen A.M. 2007. Jawetz, Melnick and Adelbergs,
Mikrobiologi Kedokteran Edisi 23, Alih Bahasa oleh Mudihardi, E.,
Kuntaman, Wasito, E.B., Mertaniasih, N.M., Harsono, S., dan
Alimsardjono, L. Jakarta : Penerbit Buku Kedokteran EGC. pp. 163, 170,
225-31, 253.

Brucler, J., Schwarz, S. and F. Untermann, F. 1994. Staphylokken-infectionenund-

enterotoxine, band. II/1, In : Blobel, H. Und Schlier Marshal, M.S (1951)
Laboratory guide in elementary microbiology. McGraw-Hill Book
Company, Inc. Pp 86. er

Cartensen, Jens T. dan Christopher Rhodes. 2000. Drug Stability Principles

andPractices Third Edition. United State : CRC Press

Chastelyna, A.J. 2016. Uji Aktivitas Sabun Cair Ekstrak Daun Jati (Tectona
grandis L.f) sebagai Antibakteri terhadap Staphylococcus aureus dan
Escherichia coli. Skripsi. Semarang : Fakultas Matematika dan Ilmu
Pengetahuan Alam Universitas Negeri Semarang.

Darsana, I.G.O., Besung, I.N.K., Mahatmi, H. 2012. Potensi binahong (Anredera

cordifolia (Tenore) Steenis) dalam menghambat pertumbuhan bakteri
Escheria coli secara in vitro. Indonesia Medicus Vaterinus, Vol. 1, 337-
351.

Departemen Kesehatan RI. 1986. Sediaan Galenik, 2 & 10. Jakarta : Departemen
Kesehatan RI.

Departemen Kesehatan RI. 2006. Monografi Ekstrak Tumbuhan Obat Indonesia,

Vol.2, 124. Jakarta : Depkes RI.

Departemen Kesehatan RI. 2000. Parameter Standard Umum Ekstrak Tumbuhan

Obat. Jakarta : Direktorat Jendral Pengawasan Obat dan Makanan.

71
Dewi, Amalia K. 2013. Isolasi, Identifikasi dan Uji Sensitivitas Staphylococcus
aureus terhadap Amoxicillin dari Sampel Susu Kambing Peranakan Ettawa
(PE) Penderitas Mastitis Di Wilayah Girimulyo, Kulonprogo, Yogyakarta.
Yogyakarta : UGM. ISSN : 0126-0421

Dirjen POM. 1995. Farmakope Indonesia jilid IV. Departemen Kesehatan RI.
Jakarta.

Djajadisastra, J. 2004. Seminar Setengah Hari HIKI: Cosmetic Stability. Jakarta:

Departemen Farmasi FMIPA UI.

Djauhariya, E dan Hermani. 2004. Tanaman Herba Berkhasiat Obat. Di dalam:

Silaban, L. W.,Skrining Fitokimia dan Uji Aktivitas Antibakteria dari
Kulit buah Sentul (Sandoricum Koetjapa (burn. f.) Merr) Terhadap
beberapa bakteri secara invitro. Skripsi, Medan : Universitas Sumatra
Utara.

Ergina, Nuryanti, S. dan Puspitasari, I.D. 2014. Qualitative Test of Secondary

Metabolites Compounds in Palado Leaves (Agave Angustifolia) Extracted
With Water and Ethanol. Jurnal Akademika Kimia,Vol. 3, 165-72.

Faradisa, Maria. 2008. Uji Efektivitas Anti Mikroba Senyawa Saponin dari
Tanaman Belimbing Wuluh (Averrhoa bilimbi L.) Skripsi. Malang : UIN
Malang.

Fathurrachman, D.N. 2014. Pengaruh Konsentrasi Pelarut terhadap Aktivitas

Antioksidan Ekstrak Etanol Daun Sirsak (Annona muricata Linn) dengan
Metode Peredaman Radikal Bebas DPPH (Skripsi). Jakarta : UIN Syarif
Hidayatullah.

Forbes, B.A., Sahm, D.F.,Weissfeld, A.S. 2007. Bailey and Scott’s Diagnostic
Microbiology (12th ed.). Mosby : St Louis.

Gaballah, A. & Ghazal, A. 2018. Clindamycin Resistance among Staphylococcus

aureus Clinical Isolates in Alexandria. International Journal of Advance
Microbiology and Health Research, Vol. 2, 24-35

Ghazali, I. 2011. Aplikasi Analisa Multivariate dengan Program SPSS 19.

Semarang : BP Universitas Diponegoro.

Goldman E and LH Green. 2009. Practical Handbook of Microbiology Second

Edition. Amerika Serikat : Penerbit CRC

Guenther, E. 2006. Minyak Atsiri Jilid I. Diterjemahkan oleh S. ketaren. UI Press.

Hahlbrock, K. dan Grisebach, H. 1975. Dalam „The Flavonoids’ (J. B.
Harbone, T. J. Mabry dan H. Mabry, pny.). London : Chapman and Hall.

72
Hahlbrock, K. dan Grisebach, H. 1975. Dalam „The Flavonoids’ (J. B. Harbone,
T. J. Mabry dan H. Mabry, pny.). London : Chapman and Hall.

HAM Mulyono. 2006. Kamus Kimia. Jakarta : Bumi Aksara.

Handa, Khanuja, Longo & rakesh. 2008. Extraction Technologies for Medical and
Aromatic Plants. Italy: International Centre for Science and High
Technology. Vol. 22, 81-93.

Harborne, J.B. 2006. Metode Fitokimia Penuntun Cara Modern Menganalisis

Tumbuhan, Edisi ke-2. Bandung : ITB.

Hartono, Teguh. 2009. Saponin. [Link]

Herawati, D, Nuraida, L. , Sumarto. 2012. Cara Produksi Simplisia yang Baik, 10-
11. Bogor : Seafast Center IPB.

Hernani, Y. M., Mufrod., Sugiyono. 2012. Formulasi Salep Ekstrak Air Tokek
(Gekko gecko L.) Untuk Penyembuhan Luka, Majalah Farmasetik, 8 (1),
120-126.

Illing, I., Safitri, W., Erfiana. Uji Fitokimia Ekstrak Buah Dengen. Jurnal
Dinamika hal 66-84. P-ISSN: 2087-889. E-ISSN: 2503-4863.

Insanu, M., Ruslan, K., Fidrianny, I. & Wijaya, S. 2011. Isolasi Flavonoid dari
Daun Durian (Durio Zibethinus Murr., Bombacaceae). Acta
Pharmaceutica Indonesia, Vol.34, 6-10.

Jawetz, Melnick & Adelberg‟s, 2007. Mikrobiologi Kedokteran. Jawetz, Melnick,

& Adelberg. Ed.23. Translation of Jawetz, Melnick, & Adelberg’s.
Medical Microbiology. 23th [Link] Bahasa oleh Hartanto, H.,et al. Jakarta
: EGC.

Jawetz, Melnick & Adelberg‟s. 2005. Mikrobiologi Kedokteran. Jakarta :

Salemba Medika. Hal: 233, 235.

Ji YS., Lestari, N.D., Rinanda, T. 2012. Uji Aktivitas antibakteri ekstrak etanol
30% dan 96% kelopak bunga rosella ( Hibiscus sabdariffa) terhadap
bakteri Streptococcus pyogenes secara in vitro. Jurnal Kedokteran Syiah
Kuala, Vol.12, 31-36

Jones, D. 2008. Pharmaceutics Dosage Form and Design. London:

Pharmaceutical Press.

Joshita. 2008. Obat-obat Untuk Paramedis. Jakarta:UI Press.

73
Kadji, M.H., M.R.J. Runtuwene.,dan G. Citraningtyas. 2013. Uji Fitokimia dan
Aktivitas Antioksidan dari Ekstrak Etanol Daun Soyogik (Saurauia
bracteosaDC). Manado: FMIPAUNSRAT.

Kaur, L.P. and Guleri, T.K. 2013. Topical Gel: A Recent Approach for Novel
Drug delivery, [Link]. Vol. 3, 1-5.

Kristanti, A. N., N S. Aminah., M. Tanjung B. Kurniadi. 2008. Buku ajar

fitokimia jurusan kimia laboratorium kimia organik. Surabaya : FMIPA
Universitas Airlangga.

Kurniawati M. 2015. Kajian Ekstrak Tanaman Johar (Cassia siamea L) sebagai

Bioindikator Asam Basa.(Skripsi). Palu : Jurusan Kimia FMIPA UNTAD.

Lachman, L., Lieberman H. A., Kanig, J. L. 1994. Teori dan Praktek Farmasi
Industri, diterjemahkan oleh Siti Suyatmi, edisi III, 1091-1096. Jakarta :
Universitas Indonesia.

Lay, B. W. 1994. Analisis Mikroba di Laboratorium. Jakarta : PT Raja Grafindo

Persada.

Loden, Marie. 2009. Handbook of Cosmetics Science and Technology, 355-356,

New York : Marcel Dekker Inc.

Makiyah, S., Soedjono A., Marsetyawan. 2005. Intensitas Fluoresensi Neuron-

Neuron Dopaminergik di Area Ventralis Tegmenti Setelah Pemberian
Alkohol Secara Kronis Pada Tikus (Rattus norvegicus). Mutiara
Medikavolume 5 nomor 1. Yogyakarta: Fakultas Kedokteran Universitas
Muhammadiyah Yogyakarta.

Manu, R. 2013. Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Beluntas(Pluchea

indica.) Terhadap Staphylococcus aureus, Bacillussubtilis, Dan
Pseudomonas aeruginosa. Jurnal Ilmiah Mahasiswa Universitas Surabaya.
Vol.2,1-10.

Mappa, T., edy, HJ. & Kojong, N. 2013. Formulasi Gel Ekstrak Daun
Sasaladahan (Peperomia pellucida (L) H.B.K) Dan Uji Aefektifitasnya
Teradap Luka Bakar pada Kelinci. Pharmacon Jurnal Ilmiah Farmasi,
Vol. 2, 499-55.

Markham KR. 1988. Cara Mengidentifikasi Flavonoid. Bandung : Penerbit ITB.

Hal 58-60.

74
Martina, Maria, N. 2012. Ekstrak Etanol Daun Beluntas (Pluchea indica.L.) Dapat
Menghambat Pertumbuhan Bakteri Streptococcus mutans [Tesis].
Denpasar: Program Pascasarjana, Universitas UDAYANA.

Masters, S. 2002. Etanol. dalam Katzung. Farmakologi Dasar dan Klinikedisi 9.

Jakarta: Salemba Medika.
Maulida, D. dan Zulkarnaen, N. 2010. Ekstraksi Antioksidan (Likopen) Dari
Buah Tomat Dengan Menggunakan Solven Campuran n-Heksana,
Aseton dan Etanol, Skripsi. Fakultas Teknik. Universitas Dipenogoro

Mohammad, Nasir. 2010. Metode Penelitiaan. Jakarta: Erlangga.

Mukhriani. 2014. Ekstraksi, Pemisahan Senyawa, dan Identifikasi Senyawa Aktif.

Jurnal Kesehatan, Vol.7, 361-367.

Mulyani, Y. W. T., Dadan H., Isbiyantoro, dan Yeny F. 2017. Ekstrak Daun
Katuk (Sauropus androgynus(L) Merr) sebagai Antibakteri terhadap
Propionibacterium acnesdan Staphylococcus epidermidis. Lampung :
Jurnal Farmasi. Vol.6,46-54.

Naibaho, H. Olivia., Yamlean, Y. V. Paulina., dan Wiyono, W. 2013. Pengaruh

Basis Salep Terhadap Formulasi Sediaan Salep Ekstrak Daun Kemangi
(Ocimum sanctum L.) Pada Kulit Punggung Kelinci Yang Dibuat Infeksi
Staphylococcus aureus, Jurnal Ilmiah Farmasi. Vol.2, 27-33.

Naoumkina,M., Modolo, L.V., Huhman, D.V., Urbanzyk, W.E., Tang, Y. 2010.

Genomic and coexpression analyses predict multiple gene involved
triterpene saponin biosynthesis. Medicago truncatula Plant Cell, 22:3:850-
66.

Ningsih. D.R., Zusfahair, Dwi Kartika. 2016. Identifikasi Senyawa Metabolit

Sekunder Serta Uji Aktivitas Ekstrak Daun Sirsak Sebagai Antibakterki,
Molekul. Vol.11,101-111

Ningtyas, T. E. 2012. Inhibisi Ekstrak Daun Beluntas Pluchea indica (L.) Less
Terhadap Indeks Adhesi Streptococcus mutans Pada Neutrofil. Skripsi
(Fakultas Kedokteran Gigi). Jember : Universitas Jember.

Nurhalimah N. 2015. Efek Antidiare Ekstrak Daun Beluntas pada Mencit Jurnal
Pangan dan Agroindustri. Vol. 3, 1083-1094.

Panjaitan EN, A. Saragih, dan D. Purba. 2012. Formulasi gel dari ekstrak rimpang
jahe merah (ZingiberofficinaleRoscoe).Journal of Pharmaceutics and
Pharmacology. Vol.1: 9-20.

75
Permenkes R.I. No. 007/Menkes/VII/2012. Tentang Registrasi Obat Tradisional.
Jakarta: Depkes RI.

Prajitno A. 2007. Uji Sensitifitas Flavonoid Rumput Laut (Eucheuma Cottoni)

Sebagai Bioaktif Alami Terhadap Bakteri Vibrio Harveyi. Jurnal Protein
Vol.2

Prasetyo dan Entang. 2013. Pengelolaan Bududaya Tanaman Obat – Obatan

(Bahan Simplisia). Bengkulu : Badan Penerbitan Fakultas Pertanian UNIB.

Prastianto, B.A. 2016. Optimasi Gelling Agent Carbopol 940 dan Humektan
Sorbitol dalam Formulasi Sediaan Gel Ekstrak Etanol Daun Binahong
(Anredera cordifolia (Ten) Steenis). Skripsi. Yogyakarta: Fakultas Farmasi
Universitas Sanata Dharma.

Pratiwi, S. T. 2008. Mikrobiologi Farmasi. Yogyakarta: Erlangga.

Pratiwi, Sylvia. T. 2009. Mikrobiologi Farmasi. Jakarta. Penerbit Erlangga,

Pujowati, P. 2006. Pengenalan ragam tanaman lanskap asteraceae (Compositae).

Laporan Praktikum tanaman dan Sistem Ruang terbuka Hijau. Bandung :
Sekolah Pasca Sarjana Departemen Arsitektir Lanskap Fakultas Pertanian
IPB.

Pulio K.A.B., Christi M., dan Wowor P.M. 2012. Uji Efek Antipiretik Ekstrak
Daun Beluntas (Pluchea Indica (L.) Less.) Pada Tikus Wistar (Rattus
norvegicus) Jantan. Manado: Fakultas Kedokteran, Universitas Sam
Ratulangi.

Rahmadani F. 2015. Uji Aktivitas Antibakteri dari Ekstrak Etanol 96% Kulit
Batang Kayu Jawa (Lannea coromandelica) terhadap Bakteri
Staphylococcuc aureus, Escherichia coli, Helicobacter pylori,
Pseudomonas aeruginosa. Jakarta: Jurusan Farmasi. Fakultas Kedokteran
dan Ilmu Kesehatan UIN Syarif Hidayatullah

Rahmawati, D., Sukmawati, A., dan Indrayudha, P. 2010. Formulasi Krim

Minyak Atsiri Rimpang Temu Giring (Curcuma heyneana val & zijp): Uji
Sifat Fisik dan Daya Antijamur terhadap Candida albicans secara In Vitro.
Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta. Majalah Obat
Tradisional, 15(2), 56 – 63.

Rahmi, A.H. et al. 2015. Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Daun Beluntas (
Pluchea Indica (L.) Less. ) Terhadap Propionibacterium Acnes Penyebab
Jerawat [Skripsi], Bandung, Fakultas Sains dan Teknologi, UIN Sunan
Gunung Djati.

76
Rais, R.I., 2014. Ekstraksi Andrografolid DariAndrographis paniculata (Burm.f)
Ness Menggunakan Ekstraktor Soxhlet. Jurnal PharmacianaUniversitas
Ahmad Dahlan, Vol 4

Risnasari, I. 2002. Tanin. Digital Library Universitas Sumatera Utara.[terhubung

berkala]. [Link] [2 Okt
2012].

Robinson, T. 1995. Kandungan Organik Tumbuhan Tinggi. Edisi keempat.

Bandung : Penerbit ITB.

Rowe, Raymond C. 2009. Handbook of Pharmaceutical Excipients Sixth Edition.

London : Pharmaceutical Press.

Sa‟adah, l. 2010. Isolasi dan Identifikasi Senyawa Tanin dari Daun Belimbing
Wuluh (Averrhoa bilimbi L.). (Skripsi). Malang: Universitas Islam Negeri
(UIN) Maulana Malik Ibrahim Malang.

Saifudin A, Rahayu V, Teruna HY. 2011. Standardisasi bahan obat bahan alam.
Yogyakarta: Graha Ilmu

Santana, C.M., Z.S. Ferrera, M.E.T. Padron, and J.J.S. Rodriquez. 2009.
Methodologies for The Extraction of Phenolic Compounds from
Enviromental Samples : New Approaches. Molecules. Vol. 14. Hal. 298-
320.

Sapri, Fitriani, A., Narulita, R. 2014. Pengaruh Ukuran Serbuk Simplisia terhadap
Rendemen Ekstrak Etanol Daun Sirsak (Annona muricata l.) dengan
Metode Maserasi. Akademi Farmasi Samarinda. Prosiding Seminar
Nasional Kimia 2014 HKI-Kaltim ISBN: 978-602-19421-0-9

Scheflan, L., dan morris, B. J. 1983. The handbook of Solvents. D. Van Nostrand
Comp. Inc. New York.

Seidel V. 2006. Initial and ulkextraction. In: Sarker SD, Latif Z & Gray Al,
editors. Natural product Isolation, 2nd ed. Totowa Ney Jersey. Humana
Press Inc.

Sentana, O.M, Haryati, S., Mariyah, Y. 2011. Efek Anthelmintik Ekstrak Etanol
Daun Kemangi (Ocinum americanum) terhadap kematian Ascaris suum
secara in vitro. Biofarmasi. Vol. 9, No. 1, Hal. 1-6. ISSN: 1693-2242

Sharp, S. E. and Cidy, S. (2006) Comparison of mannitol salt Agar and blood agar
plates for identification and susceptibility testing of Staphylococcus aureus
in specimens from cystic fibrosis patients. J. Clin. Microbiol.
44(12):4545-4546

77
Sholih, M. G., Ahmad M., dan Siti S. 2015. Rasionalitas Penggunaan Antibiotik
di Salah Satu Rumah Sakit Umum di Bandung Tahun 2010. Bandung :
Jurnal Farmasi Klinik Indonesia. Vol. 4, 63-70.

Sibarani, Venty R., Pemsi M. W., dan Henoch A. 2013 Uji Efek Analgesik
Ekstrak Daun Beluntas (Pluchea indica (L.) Less.) Pada Mencit (Mus
musculus). Jurnal e-Biomedik (eBM), Vol. 1(1).

Sugihartini, N., Fujiastuti, T., 2015. Sifat Fisik dan Daya Iritasi Gel Ekstrak
Etanol Herba Pegagan (Centella asiatica L) dengan Variasi Jenis Gelling
Agent. Pharmacy. 12. Hal, 11-20.

Sugiyono. 2013. Metode Penelitian Kuantitatif Kualitatif dan R&D. Bandung:

Alfabeta. Hal: 60-64.

Syamsuhidayat dan Hutapea. 1991. Inventaris Tanaman Obat Indonesia(I).

Jakarta: Departemen Kesehatan Indonesia.

Syamsuni, H.A. 2006. Ilmu Resep. Penerbit Buku Kedokteran EGC. pp. 249-50.

Tambayong, J. 2009. Mikrobiologi untuk [Link] : Widya Medika.

Tiwari, P. 2011. Phytochemical Screening dan Extraction; A Review.

Internationale Pharmaceutica Sciencia, 1 (1), pp. 98-106

Vadas, E.B. 2010. Stability of Pharmaceutical Products. The Science and

Practiceof Phrmacy Vol.1 : 988-989

van Steenis, C. G. G. J. 2008. Flora Untuk Sekolah di Indonesia. Jakarta: PT

Pradnya Paramita.

Voight, R., 1971. Buku Pelajaran Teknologi Farmasi, Edisi V, 558-564, 570.
Yogyakarta : Gadjah Mada University Press.

Waluyo, L. 2004. Teknik dan Metode Dasar Dalam Mikrobiologi. Malang: UMM
Press, Hal : 130-131.

Widyawati, ,P.S, Budianta T.D, Kusuma F.A dan Wijaya. 2014. Difference of
Solvent PolarityTo Phytochemical Content and Antioxidant Activity of
Plucheaindicia Less Leaves Extracts. International Journal of
Pharmacognosy and Phytochemical Research (IJJPR). Vol 6(4): 850-855.

Winarno, F. G. 2002. Kimia Pangan dan Gizi. Jakarta: Gramedia.

78
Wong, E. 1976. Chemistry and Biochemistry of Plants Pigments (T. W. Goodwin,
pny.) halaman 464. Academic Press, London.

World Health Organization (WHO). 2012. Angka Kematian Bayi. Amerika:

WHO.

Wulandari V., Dirayah R.H., Sartini, dan Nur H., 2012, Pengujian Aktivitas
Antibakteri dari Ekstrak Etanol Daun Beluntas Pluchea indica Less.
Terhadap Staphylococcus aureus dan Pseudomonas aeroginosa. Jurnal
Ilmiah. Makassar: Universitas Hasanuddin.

Yenrina dan Sayuti. 2015. Antioksidan, Alami dan Sintetik. Padang: Andalas
University Press. Hal 7-15.

Yulianhar, P. G. 2009. Formulasi Gel Obat Jerawat Minyak Atsiri Daun Jeruk
Nipis (Citrus aurantifolia, S.) dan Uji Daya Antibakteri
(Propianibacterium acne) Secacra In Vitro. Skripsi. Surakarta: Universitas
Muhammadiyah Surakarta.

79
Lampiran 1. Hasil Determinasi Pluchea indicia

80
Lampiran 2. Dokumentasi Penelitian
1. Pluchea indica

Daun Pluchea indica L.

Tumbuhan Pluchea indica L.

2. Pembuatan Simplisia

Pengambilan Pluchea folium

81
 Pengeringan Sortasi Kering

Pengecilan ukuran partikel Simplisia Pluchea folium

Pengayakan serbuk simplisia Soxhletasi Pluchea folium

Ekstrak kering Pluchea folium

82
 3. Skrining Fitokimia

Uji Bebas Etanol Uji Flavonoid

Uji Tanin Uji Saponin

4. Pembuatan Suspensi Bakteri

0,5 Mc Farland Spektrofotometri suspensi

Staphylococcus aureus

83
5. Identifikasi Bakteri Staphylococcus aureus

Pewarnaan Bakteri Uji Koagulase

Uji Katalase Media MSA

6. Uji Aktivitas Antibakteri Gel Ekstrak Daun Beluntas (Pluchea indica)

terhadap Staphylococcus aureus

Replikasi I (kontrol) Replikasi I (Gel Ekstrak)

84
Replikasi II (kontrol) Replikasi II (Gel Ekstrak)

Replikasi III (kontrol) Replikasi III (Gel Ekstrak)

Replikasi IV (kontrol) Replikasi IV (Gel Ekstrak)

85
7. Evaluasi Gel Ekstrak Pluchea indica

Uji Organoleptis Uji Homogenitas

Uji pH Uji Daya Lekat

Uji Daya Sebar Uji Daya Proteksi

86
Lampiran 3. Kerangka Uji Aktivitas Antibakteri dengan Metode Difusi
Cakram

Suspensi Bakteri
Staphylococcus aureus

Gel Ekstrak 5%
Gel Ekstrak 10%
Kontrol + Kontrol -

Gel Ekstrak

Media NA

87
Lampiran 4. Perhitungan Pembuatan Media Pertumbuhan Bakteri

1. Pembuatan Media Nutrient Broth (NB)

Gram = x Volume

= x 10 ml

= 0,08 g

2. Pembuatan Media Manitol Salt Agar (MSA)

Gram = x Volume

= x 10 ml

= 1,08 g

3. Pembuatan Media Nutrient Agar (NA)

Gram = x Volume

= x 10 ml

= 0,2 g

88
Lampiran 5. Perhitungan Hasil
1. Penetapan Kadar Air Simplisia Daun Pluchea indica L.f
Sampel Bobot Awal Bobot Akhir % Hasil
Daun beluntas (Pluchea 10,012 g 9,1877 g 8,24%
indica L.f)

Rumus % Kadar Air = x 100%

Kadar air (%) = x 100%

= 8,24 %
2. Susut Pengeringan Daun Pluchea indica L.f
Sampel Bobot Basah Bobot Kering Hasil
Daun beluntas (Pluchea 5 kg 1,05 kg 21%
indica L.f)

d
Rumus % Susut pengeringan = x 100%
d

Susut pengeringan (%) = x 100%

= 21%

3. Rendemen Daun Pluchea indica L.f.

Sampel Bobot simplisia Bobot ekstrak Hasil
Daun beluntas (Pluchea 500 g 8,890 g 1,778 %
indica L.f)

Rumus % Rendemen = x 100%

Rendemen (%) = x 100%

= 1,778 %

89
Lampiran 6. Formulasi dan Perhitungan Bahan Sediaan Gel
1. Gel Ekstrak Daun Beluntas 5%

Ekstrak 5% = x 25 g

= 1,25 g

CMC Na = x 25 g

= 1,25 g

Gliserin = x 25 g

= 2,5 mL

Propilenglikol = x 25 g

= 1,25 g
Aquadestilata = 25 – (1,25+1,25+5+1,25)
= 18,75 mL

2. Gel Ekstrak Daun Beluntas 10%

Ekstrak 10% = x 25 g

= 2,5 g

CMC Na = x 25 g

= 1,25 g

Gliserin = x 25 g

= 2,5 mL

Propilenglikol = x 25 g

= 1,25 g
Aquadestilata = 25 – (2,5+1,25+5+1,25)
= 17,5 mL

90
3. Gel Esktrak Daun Beluntas 15%

Ekstrak 15% = x 25 g

= 3,75 g

CMC Na = x 25 g

= 1,25 g

Gliserin = x 25 g

= 2,5 mL

Propilenglikol = x 25 g

= 1,25 g
Aquadestilata = 25 – (3,75+1,25+5+1,25)
= 16,25 mL

91
Lampiran 7. Hasil Orientasi Gel Ekstrak Pluchea indica
1. Hasil Uji Antibakteri Gel Ekstrak Pluchea indica terhadap
Staphylococcus aureus
Diameter zona hambat (mm) Rata
No. Sampel
I II III IV -rata
1 Gel ekstrak daun beluntas 5% 6 7 7 8 7
2 Gel ekstrak daun beluntas 10% 9 10 9 10 9,5
3 Gel ekstrak daun beluntas 15% 14 13 13 14 13,5
4 Kontrol positif 32 34 30 30 31,25
5 Kontrol negatif - - - - -

2. Evaluasi Gel Ekstrak Pluchea indica

a. Ekstrak 5%
Parameter Hari ke- Standart
0 7 14
Organoleptik
Bau Khas Khas Khas Khas (Stiani et al,
luntas luntas luntas 2016)
Bentuk Semi solid Semi solid Semi solid Semi solid (Astuti,
2015)
Warna Coklat Coklat Coklat -
kehijauan kehijauan kehijauan
Homogenitas Homogen Homogen Homogen Homogen (Hernani
dkk., 2012)
pH 4,5 – 6,5 (Naibaho
5 5 5
dkk., 2013)
Daya sebar 3-5 cm (Prastianto,
4,8 cm 4,7 cm 4,7 cm
2016)
Daya lekat ≥ 4 detik (Sugihartini,
98,88 110,12 118,08
2015)
Daya Tidak Tidak Tidak Tidak terbentuk noda
proteksi noda noda noda merah (Erawati et al,
merah merah merah 2016)

92
 b. Ekstrak 10%
Parameter Hari ke- Standart
0 7 14
Organoleptik
Bau Khas Khas Khas Khas (Stiani et al,
2016)
Bentuk Semi solid Semi solid Semi solid Semi solid (Astuti,
2015)
Warna Hitam Hitam Hitam -
kehijauan kehijauan kehijauan
Homogenitas Homogen Homogen Homogen Homogen (Hernani
dkk., 2012)
pH 4,5 – 6,5 (Naibaho
5 5 5
dkk., 2013)
Daya sebar 3-5 cm (Prastianto,
4,3cm 4,3 cm 4,2 cm
2016)
Daya lekat ≥ 4 detik (Sugihartini,
149,25 164,87 177,88
2015)
Daya Tidak Tidak Tidak Tidak terbentuk noda
proteksi noda noda noda merah (Erawati et al,
merah merah merah 2016)

c. Ekstrak 15%
Parameter Hari ke- Standart
0 7 14
Organoleptik
Bau Khas Khas Khas Khas (Stiani et al,
2016)
Bentuk Semi solid Semi solid Semi solid Semi solid (Astuti,
2015)
Warna Hitam Hitam Hitam -
kehijauan kehijauan kehijauan
Homogenitas Homogen Homogen Homogen Homogen (Hernani
dkk., 2012)
pH 4,5 – 6,5 (Naibaho
5 5 5
dkk., 2013)
Daya sebar 3-5 cm (Prastianto,
3,8 cm 3,5 cm 3,4 cm
2016)
Daya lekat ≥ 4 detik (Sugihartini,
186,07 198,65 208,54
2015)
Daya Tidak Noda Tidak Tidak terbentuk noda
proteksi noda merah noda merah (Erawati et al,
merah merah 2016)

93
 d. Gel tanpa ekstrak
Parameter Hari ke- Standart
1 14 28
Organoleptik
Bau Khas Khas Khas Khas (Stiani et al, 2016)
Bentuk Semi solid Semi solid Semi Semi solid (Astuti,
solid 2015)
Warna Bening Bening Bening -
putih
Homogenitas Homogen Homogen Homogen Homogen (Hernani
dkk., 2012)
pH 5 5 5 4,5 – 6,5 (Naibaho dkk.,
2013)
Daya sebar 5,8 cm 5,3 cm 5,2 cm 3-5 cm (Prastianto,
2016)
Daya lekat 14,42 42,4 detik 45,6 detik ≥ 4 detik (Sugihartini,
detik 2015)
Daya Tidak Tidak Tidak Tidak terbentuk noda
proteksi terbentuk terbentuk noda merah (Erawati et al,
noda noda merah 2016)
merah merah

94
Lampiran 8. Hasil Analisis Data
1. Tabel Input Data Uji Aktivitas Antibakteri

2. Uji Normalitas

One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test

Seri_konsentr
Daya_hambat asi
N 20 20
a
Normal Parameters Mean 12.30 3.00
Std. Deviation 10.868 1.451
Most Extreme Absolute .238 .155
Differences Positive .238 .155
Negative -.148 -.155
Kolmogorov-Smirnov Z 1.064 .692
Asymp. Sig. (2-tailed) .208 .725
a. Test distribution is Normal.

95
 3. Uji Homogenitas

Test of Homogeneity of Variances

translog_daya
Levene Statistic df1 df2 Sig.
.566 3 12 .648

4. One Way Anova

ANOVA
translog_daya
Sum of
Squares df Mean Square F Sig.
Between
.959 3 .320 295.101 .000
Groups
Within Groups .013 12 .001
Total .972 15

Multiple Comparisons
translog_daya
Tukey HSD
95% Confidence
(I) (J) Mean Interval
Seri_konsentr Seri_konsentr Difference Std. Lower Upper
asi asi (I-J) Error Sig. Bound Bound
gel ekstrak gel ekstrak
-.13426* .02327 .000 -.2034 -.0652
5% 10%
gel ekstrak
-.28718* .02327 .000 -.3563 -.2181
15%
klindamisin -.65486* .02327 .000 -.7240 -.5858
gel ekstrak gel ekstrak
.13426* .02327 .000 .0652 .2034
10% 5%
gel ekstrak
-.15291* .02327 .000 -.2220 -.0838
15%

96
 klindamisin -.52060* .02327 .000 -.5897 -.4515
gel ekstrak gel ekstrak
.28718* .02327 .000 .2181 .3563
15% 5%
gel ekstrak
.15291* .02327 .000 .0838 .2220
10%
klindamisin -.36768* .02327 .000 -.4368 -.2986
klindamisin gel ekstrak
.65486* .02327 .000 .5858 .7240
5%
gel ekstrak
.52060* .02327 .000 .4515 .5897
10%
gel ekstrak
.36768* .02327 .000 .2986 .4368
15%
*. The mean difference is significant at the 0.05
level.

translog_daya
Tukey HSD
Subset for alpha = 0.05
Seri_konsentrasi N 1 2 3 4
gel ekstrak 5% 4 .8429
gel ekstrak 10%
4 .9771

gel ekstrak 15%

4 1.1300

klindamisin 4 1.4977
Sig. 1.000 1.000 1.000 1.000
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.

97
 5. Uji Korelasi

Correlations
Seri_konsent translog_day
rasi a
Spearman's Seri_konsentras Correlation
1.000 .974**
rho i Coefficient
Sig. (2-tailed) . .000
N 20 16
translog_daya Correlation
.974** 1.000
Coefficient
Sig. (2-tailed) .000 .
N 16 16
**. Correlation is significant at the 0.01 level (2-
tailed).

98
Lampiran 9. Alur Prosedur Kerja
1. Pembuatan Simplisia

Daun Beluntas

Diambil daun yang masih segar (tua ataupun muda)

Disortasi basah
Dicuci dengan air mengalir
Dirajang
Dikeringkan dengan cara diangin – anginkan
Disortasi kering
Disimpan

simplisia

2. Uji Kadar Air Serbuk Simplisia

Simplisia

Ditimbang sebanyak 10 gram

Dikeringkan dalam oven pada suhu 105oC selama 5 jam
Ditimbang
Dibandingkan bobot awal sebelum dan sesudah serbuk dioven,
syarat % kadar air serbuk tidak boleh >10%

Hasil

99
3. Pembuatan Ekstrak dengan soxhletasi

Simplisia

Dihaluskan dengan blender

Diayak dengan ayakan nomer 80 mesh

Ditimbang sebanyak 50 gram

Dibungkus dengan kertas saring menjadi pocongan

Dimasukkan ke dalam selongsong alat soxhlet

Di soxhletasi sebanyak 7-10x replikasi dengan etanol 70%

Hasil soxhletasi

Diuapkan / diove dengan suhu 75oC selama 7 hari

Ekstrak kering

100
4. Uji Kadar Etanol Ekstrak

Ekstrak daun
beluntas
Ditambahkan 1 ml asam asetat
Ditambahkan 1 ml asam sulfat pekat
Ditutup bagian atas tabung dengan kapas
Dihomogenkan dan dipanaskan
Diamati
Hasil
Keterangan: jika tidak tercium bau ester maka positif bebas etanol
5. Skrining Fitokimia
a. Flavonoid

Ekstrak daun
beluntas
Ditimbang sebanyak 0,5 gram
Ditambah 3 ml etanol 70%
Dipanaskan
Ditambah beberapa tetes asam sulfat pekat hingga terjadi
perubahan warna
Hasil
Ket: adanya flavonoid ditunjukkan dengan terbentuknya warna jingga.
b. Tanin
Ekstrak daun jati

Ditimbang sebanyak 0,5 gram

Ditambahkan etanol sampai semua ekstrak terendam
Diambil sebanyak 1 ml, dimasukkan tabung reaksi
Ditambahkan beberapa tetes larutan FeCl31% sampai terjadi
perubahan warna
Hasil
Ket: adanya tanin ditunjukkan terbentuknya warna hitam kebiruan / hijau.

101
 c. Saponin

Ekstrak daun
beluntas
Ditimbang sebanyak 0,5 gram
Dididihkan dengan 10 ml aquadestilata dalam penangas air
Dikocok dan didiamkan selama 15 menit
Diamati
Hasil
Ket: adanya saponin ditunjukkan dengan terbentuknya busa yang stabil
6. Pembuatan Gel

Ekstrak Daun CMC Na

Beluntas

Ditaburkan diatas air

Dilarutkan dalam panas dalam mortir,
dibiarkn hingga
sebagian air panas
mengembang.
Diaduk

Ditambahkan
gliserin,
propilenglikol

dicampur

Ditambahkan
akuades ad 100ml

Diaduk ad homogen

102
7. Sterilisasi Alat dan Bahan (Maradona, 2013)
Alat Bahan

Bahan karet Bahan kaca Larutan Uji Media

&stainless

direbus Dimasukkan Dimasukkan

tabung reaksi erlenmeyer

Hasil

Dibungkus aluminum foil

Disterilisasi dengan autoklaf pada

suhu 121oC selama 15 menit

8. Pembuatan Media Pertumbuhan Bakteri (Maradona, 2013)

NA
Ditimbang sebanyak 0,2 gram
Ditambahkan 10 ml aquades
Dipanaskan hingga larut
Disterilkan dengan autoklaf pada suhu 121⁰ C selama 15 menit
tekanan 1,5 atm
Dituang media kedalam cawan petri
Dibiarkan mengeras
Media NA

103
9. Pembuatan Media NB
Nutrient Broth (NB)
Ditimbang sebanyak 0,08 gram
Ditambahkan 10 ml aquades
Dipanaskan hingga mendidih
Disterilisasi dengan autoklaf pada suhu 121o C selama 15
menit
Dituang ke dalam tabung reaksi
Media NB

10. Pembuatan Media Identifikasi Staphylococcus aureus

Manitol Salt Agar (MSA)
Ditimbang sebanyak 1,08 gram
Ditambahkan 10 ml aquades
Dipanaskan hingga mendidih
Disterilisasi menggunakan autoklaf pada suhu 121oC selama
15 menit
Dituang ke cawan petri steril dan dibiarkan mengeras
Media MSA

11. Uji Identitas Bakteri Staphylococcus aureus (Media MSA)

Staphylococcus aureus
Diinokulasi ke dalam media MSA secara aseptis
Diinkubasi pada suhu 35-37 ± 0,5oC selama 24 ± 2 jam
Diamati
Hasil

104
12. Uji Identitas Bakteri Staphylococcus aureus (Pewarnaan Bakteri)
Staphylococcus aureus
Diambil 1 koloni dari media NA, diletakkan pada kaca objek
Difiksasi
Ditetesi kristal violet (1-3 menit) dibilas
Ditetesi lugol (1 menit) dibilas
Ditetesi alkohol (30 detik) dibilas
Ditetesi safranin (30 detik) dibilas
Diamati menggunakan mikroskop

Hasil

13. Uji Identitas Bakteri Staphylococcus aureus (Uji Koagulase)

Staphylococcus aureus
Diambil 1 koloni bakteri
Dimasukkan dalam larutan H2O2
Diamati
Hasil

14. Uji Identitas Bakteri Staphylococcus aureus (Uji Katalase)

Staphylococcus aureus
Diambil 1 koloni bakteri
Ditambahkan akuades steril dan plasma
Diamati
Hasil

15. Peremajaan Bakteri Uji

Staphylococcus aureus
Digoreskan 1 ose pada media NA secara aseptik
Diinkubasi pada suhu 37⁰C selama 24 jam
Hasil

105
16. Pembuatan Suspensi Bakteri
Staphylococcus aureus
Diambil sebanyak 1 ose
Disuspensikan dalam 5 ml media NB
Diukur kekeruhannya dengan standar 0,5 Mc. Farland
Hasil
17. Uji Aktivitas Antibakteri Krim

Suspensi Staphylococcus aureus

Diambil dengan swab steril

Digoreskan ke media NA secara merata

Dicelupkan kertas cakram steril ke dalam gel

Didiamkan cakram

Diletakkan cakram di atas permukaan media NA

Diinkubasi pada suhu 37oC selama 24 jam

Diukur diameter zona hambat dengan penggaris

Direplikasi 4x

Hasil

106
18. Uji Normalitas
Uji Normalitas

SPSS

Kolmogrov-Smilrnov

Sig > 0,05 Sig < 0,05

Distribusi Distribusi tidak

Normal normal

19. Uji Homogenitas

Data Diameter Zona Hambat

SPSS

Levene’s test of variance

Sig > Sig < 0,05

0,05

Variasi sampel Variasi sampel tidak

homogen homogen

ANOVA Transforamasi data

dalam bentuk logaritma

107
20. One Way Anova

Data Diameter Zona Hambat

SPSS

One-Way Anova

Sig > 0,05 Sig < 0,05

Tidak ada perbedaan Terdapat perbedaan

diameter zona diaeter zona hambat
hambat secara secara statistik
statistik

21. Korelasi Pearson

Data Diameter Zona Hambat

SPSS

Korelasi Pearson

Sig > 0,05 Sig < 0,05

Tidak ada Terdapat korelasi/hubungan konsentrasi ekstrak

korelasi/hubungan dengan diameter zona hambat secara statistik
konsentrasi ekstrak
dengan diameter zona Jika nilai Pearson Correlation mendekati 1
hambat secara statistik maka hubungan semakin kuat

108
Lampiran 10. Jadwal Penelitian
3.12 Jadwal Penelitian
Tahun
Tahun 2019
No. Jenis Kegiatan 2018
Nov Des Jan Feb Mar Apr Mei Jun Jul
1 Studi Pustaka
Persiapan Penelitian
a. Determinasi
tanaman
2
b. Pembuatan
simplisia
c. Pembuatan gel
Penelitian
Laboratorium
a. Evaluasi simplisia
b. Pembuatan
ekstrak
3 c. Evaluasi ekstrak
d. Skrining
fitokimia
e. Uji aktivitas
antibakteri gel
ekstrak daun
beluntas
Pengumpulan dan
4
Analisis Data
Penyusunan
5
Laporan

109