2

BAB 1

PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang Masalah

Serum merupakan bagian dari darah yang didapatkan setelah proses

pembekuan darah dan hampir secara umum digunakan untuk bahan dalam

pemeriksaan kimiawi. Sampel pemeriksaan berupa serum yang memenuhi

persyaratan uji laboratorium sebaiknya tidak tampak merah (hemolisis), ikterus,

atau keruh (lipemik). Hemolisis, ikterus, dan lipemik merupakan penyebab

gangguan pada pra analisis yang dapat mempengaruhi hasil uji fotometrik di

laboratorium (Hasan, 2017). Serum lipemik adalah serum yang menjadi keruh

akibat peningkatan kadar lipoprotein dan akumulasi partikel lipoprotein.

Kilomikron yang memiliki partikel lipoprotein terbesar dengan ukuran 70-100 nm,

merupakan penyebab utama dari kekeruhan serum (Nicolac, 2013). Serum lipemik

juga dapat disebabkan karena adanya beberapa penyakit seperti

hipertrigliseridemia, gagal ginjal kronis, diabetes mellitus, hipertiroidisme, sirosis

bilier primer (PBC), multiple myeloma, pankreatitis, nutrisi parental total, estrogen,

obat-obatan seperti protease inhibitor (infeksi HIV), lupus eritematosus,

kontrasepsi oral, dan lain-lain (Calmarza and J. Cordero 2011).

Lipemik dapat mengganggu pada parameter pemeriksaan yang memerlukan

transmisi cahaya. Kekeruhan pada serum lipemik dapat mempengaruhi absorbansi

spektrofotometri pada hampir semua panjang gelombang, sehingga dapat

menyebabkan hasil analisis yang tidak akurat (Pambudi, 2017). Salah satu

pemeriksaan yang dilakukan di laboratorium klinik dengan menggunakan

2
 3

spektrofotometri adalah total protein. Pemeriksaan total protein dilakukan dengan

menggunakan metode biuret. Apabila sampel yang digunakan adalah sampel

lipemik, tentunya akan mempengaruhi hasil pemeriksaan dan dapat menyebabkan

kesalahan diagnosis (Sujono, 2016)

Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) dalam pedoman

interferensi uji telah merekomendasikan penggunaan metode ultrasentrifugasi

sebagai standar prosedur baku untuk penanganan sampel serum lipemik (Gabaj,

2014). Namun, tidak semua laboratorium mampu atau dilengkapi dengan alat

ultrasentrifugasi karena jumlah sampel lipemik yang sangat kecil yang mungkin

diterima per tahunnya (Dimeski and Jones 2011). Menurut penelitan Castro (2018),

yaitu mengenai perbandingan perlakuan serum lipemik dengan ultrasentrifugasi

dan high speed sentrifugasi, ultrasentrifugasi dengan volume 1,5 mL dan kecepatan

108.200 xg selama 20 menit tidak memiliki perbedaan yang bermakna dengan high

speed sentrifugasi pada volume 1 mL dan dengan kecepatan 10.000 xg selama 15

menit. Dari hasil penelitian tersebut dapat disimpulkan bahwa high speed

sentrifugasi dapat menggantikan ultrasentrifugasi untuk menghilangkan lipemik

pada serum pasien. Penelitian tersebut sejalan dengan penelitian yang dilakukan

oleh Goce dan Brock (2011), dengan perbedaan rata-rata sampel yang

menggunakan ultrasentrifugasi dengan high speed sentrifugasi diantaranya: pada

kadar kolesterol 4,9 mmol/L dan 3,1 mmol/L; sedangkan pada kadar trigliserida

masing-masing 17,4 mmol/L dan 15,0 mmol/L. Data penelitian tersebut

menegaskan bahwa high speed sentrifugasi hampir sama efektifnya dengan

ultrasentrifugasi dalam pengurangan lipid pada serum.

3
 4

Penanganan sampel lipemik dapat juga dilakukan dengan metode

presipitasi. Polietilen glikol atau siklodekstrin seringkali digunakan pada metode

presipitasi untuk mengikat lemak dalam serum yang akan disentrifugasi, kemudian

serum yang telah disentrifugasi akan menghasilkan serum yang jernih karena terjadi

pengendapan lemak (Nikolac, 2014). Siklodekstrin adalah senyawa alami yang

tidak berbahaya dan efektif dalam mengatasi gangguan partikel lipid pada serum

yang lipemik. Siklodekstrin bersifat larut dalam air dan dapat membentuk kompleks

dengan molekul lain baik dalam bentuk padat maupun larutan. Berdasarkan

monomer glukosa penyusunnya, siklodekstrin dibagi menjadi alfa-siklodekstrin (6

unit), beta-siklodekstrin (7 unit), dan gamma-siklodekstrin (8 unit) (Noor, 2011).

Gamma siklodekstrin memiliki kemampuan membentuk kompleks inklusi

dengan molekul yang terkandung dalam rongga molekul siklodekstrin. Gamma

siklodekstrin memiliki rongga yang lebih besar dengan kelarutan tertinggi dalam

air, sehingga dapat menerima lebih banyak molekul jika dibandingkan dengan alfa

siklodekstrin dan beta siklodekstrin (Niranata, 2017). Penerapan metode flokulasi

dengan penambahan gamma siklodekstrin yang diinkubasi pada 23° C dapat

digunakan untuk mengurangi kekeruhan pada serum lipemik. Penggunaan gamma

siklodekstrin juga mudah diterapkan di laboratorium klinis karena metode ini

sangat sederhana dan tidak berbahaya (Maulana, 2017).

Di sisi lain, alfa-siklodekstrin juga memiliki kemampuan mengendapkan

lipoprotein yang lebih unggul daripada gamma-siklodekstrin, karena alfa-

siklodekstrin memiliki permukaan luar dengan sifat hidrofilik dengan bagian dalam

rongga yang bersifat hidrofobik. Alfa-siklodekstrin juga memiliki berat jenis paling

rendah jika dibandingkan dengan beta-siklodekstrin dan gamma-siklodekstrin. oleh

4
 5

karena itu, alfa siklodekstrin dapat mengikat lemak lebih banyak pada serum

lipemik (de Miranda et al. 2011). Flokulan beta siklodesktrin tidak digunakan dalam

penanganan serum lipid karena kelarutannya dalam air tidak baik (Pambudi, 2017).

Berdasarkan hasil survei di beberapa laboratorium maupun rumah sakit,

apabila menerima sampel serum lipemik, dilakukan beberapa penanganan untuk

mengatasi sampel tersebut antara lain adalah dilakukan dengan pengambilan

sampel ulang dari pasien, dengan persyaratan bahwa pasien harus melakukan puasa

terlebih dahulu. Kemudian penanganan lainnya adalah dengan melakukan

pengenceran, serta dilakukan penanganan dengan sentrifus pada sampel serum

lipemik, setelah itu supernatan yang jernih diambil untuk dilakukan pemeriksaan.

Berdasarkan penelitian yang dilakukan Sujono (2017) mengenai kadar

protein total dan ureum dengan dan tanpa penambahan gamma siklodekstrin pada

serum lipemik, didapatkan bahwa kadar total protein dan ureum cenderung lebih

rendah dengan penambahan gamma siklodekstrin, dan terdapat perbedaan yang

bermakna antara serum lipemik yang diberi penambahan gamma siklodesktrin

dengan serum lipemik tanpa penambahan gamma siklodeskrin. Pada penelitian

yang dilakukan oleh Dini (2019) didapatkan hasil adanya perbedaan kadar

trigliserida pada serum lipemik yang diolah dengan alfa siklodesktrin dengan high

speed sentrifugasi. Selisih rata-rata kadar trigliserida pada serum lipemik yang

diolah dengan alfa siklodesktrin adalah 273 mg/dL sedangkan yang diolah dengan

high speed sentrifugasi adalah 461 mg/dL.

Penelitian ini bertujuan untuk meninjau penelitian yang telah dilakukan

sebelumnya mengenai perbedaan kadar trigliserida pada serum lipemik yang diolah

dengan alfa siklodesktrin dan high speed sentrifugasi, serta penelitian lainnya

5
 6

mengenai kadar protein total dan ureum dengan dan tanpa penambahan gamma

siklodekstrin pada serum lipemik. Pada penelitian ini, sampel serum lipemik akan

dibandingkan kadar total proteinnya dengan tiga perlakuan yang berbeda,

diantaranya adalah serum yang diberi penambahan flokulan alfa siklodekstrin,

penambahan flokulan gamma siklodekstrin, serta serum yang diolah dengan high

speed sentrifugasi. Dengan demikian, akan diketahui perlakuan mana yang lebih

efektif untuk mengatasi serum lipemik, sehingga dapat digunakan sebagai alternatif

untuk penanganan serum lipemik pada pemeriksaan laboratorium.

1.2 Rumusan Masalah

Berdasarkan latar belakang tersebut, dapat dibuat rumusan masalah sebagai

berikut :

Apakah ada perbedaan kadar total protein pada serum lipemik yang

ditambahakan flokulan alfa siklodesktrin, flokulan gamma siklodekstrin dan yang

diberi perlakuan dengan high speed sentrifugasi?

1.3 Batasan Masalah

1. Penelitian ini menggunakan flokulan alfa siklodesktrin dengan konsentrasi

20% dalam penanganan serum lipemik

2. Penelitian ini menggunakan flokulan gamma siklodesktrin dengan konsentrasi

20% dalam penanganan serum lipemik

3. Penelitian ini menggunakan metode high speed sentrifugasi dalam penanganan

serum lipemik

6
 7

4. Pemeriksaan kadar total protein pada serum lipemik dilakukan dengan

menggunakan metode Biuret.

1.4 Tujuan Penelitian

1.4.1 Tujuan Umum

Untuk mengetahui perbandingan kadar total protein dengan penambahan

perlakuan menggunakan flokulan alfa siklodesktrin, flokukan gamma siklodekstrin,

dan dengan perlakuan high speed sentrifugasi pada serum lipemik

1.4.2 Tujuan Khusus

1. Menganalisa kadar total protein pada serum lipemik sebelum dan sesudah

diberi penanganan dengan penambahan alfa siklodekstrin, gamma

siklodesktrin, dan dengan high speed sentrifugasi

2. Menganalisa presentase penurunan kadar total protein pada serum lipemik

setelah ditambahkan alfa siklodekstrin

3. Menganalisa presentase penurunan kadar total protein pada serum lipemik

setelah ditambahkan gamma siklodekstrin

4. Menganalisa presentase penurunan kadar total protein pada serum lipemik

setelah dilakukan proses high speed sentrifugasi

5. Menganalisa perbedaan kadar total protein pada serum lipemik yang diberi

penanganan dengan alfa siklodekstrin, gamma siklodekstrin, dan dengan high

speed sentrifugasi.

7
 8

1.5 Manfaat Penelitian

1.5.1 Manfaat Teoritis

Penambahan alfa siklodekstrin, gamma siklodektrin dan perlakuan high

speed sentrifugasi dilakukan untuk mengurangi kekeruhan pada sampel lipemik

sehingga tidak mengganggu pemeriksaan yang menggunakan transmisi cahaya,

salah satunya adalah pemeriksaan total protein.

1.5.2 Manfaat Aplikatif

Dengan adanya penelitian ini, diharapkan tenaga laboratorium medis dapat

menjadikan penambahan alfa siklodekstrin, penambahan gamma siklodekstrin

maupun perlakuan high speed sentrifugasi sebagai metode yang lebih efektif untuk

menangani serum lipemik.

1.5.3 Manfaat Akademis

Dapat mengaplikasikan ilmu pengetahuan dibidang kimia klinik kepada

tenaga laboratorium medis mengenai analisa kadar total protein pada serum lipemik

yang telah diberi penambahan alfa siklodekstrin, penambahan gamma

siklodekstrin, dan yang telah diberi perlakuan dengan high speed sentrifugasi