Diterjemahkan dari bahasa Inggris ke bahasa Indonesia - [Link].

com

Lihat diskusi, statistik, dan profil penulis untuk publikasi ini di:[Link]

Gugus sulfhidril esensial dalam situs aktif asam fosfatase biji jarak
(Ricinus communis)

Artikeldi dalamIlmu Tumbuhan · April 2003

DOI: 10.1016/S0168-9452(03)00016-5

KUTIPAN BACA
13 34

5 penulis, termasuk:

Paulo Granjeiro Alexandre Cavagis

Universitas Federal São João del-Rei Universidade Federal de São Carlos

74PUBLIKASI333KUTIPAN 44PUBLIKASI307KUTIPAN

LIHAT PROFIL LIHAT PROFIL

Jose Granjeiro Hiroshi Aoyama

Universitas Federal Fluminense Universitas Campinas
403PUBLIKASI9.847KUTIPAN 93PUBLIKASI1.924KUTIPAN

LIHAT PROFIL LIHAT PROFIL

Beberapa penulis publikasi ini juga mengerjakan proyek terkait berikut:

Pendidikan di BiokimiaLihat proyek

Tabung nano TiO2 diperkaya dengan kalsium, fosfor, dan seng: Permukaan fungsional bioselektif yang menjanjikan untuk implan titanium osseointegrasiLihat proyek

Semua konten yang mengikuti halaman ini diunggah olehPaulo Granjeiropada 31 Mei 2018.

Pengguna telah meminta peningkatan file yang diunduh.

 Ilmu Tumbuhan 164 (2003) 629#/633
[Link]/locate/plantsci

Gugus sulfhidril esensial dalam actiaye situs biji jarak

(Ricinus communis)fosfatase asam biji
Paulo Afonso Granjeiroa,1, Carmen Verı́ssima FerreiraA, Alexandre Donizeti
Martin CaayagisA, José Mauro GranjeiroB, Hiroshi AoyamaA,*
ADepartamento de Bioquı́mica, Instituto de Biologia, Uniayersidade Estadual de Campinas, Cidade Uniayersitária, CP 6109, 13083-970 Campinas, São
Paulo, Brasil
BDepartamento de Ciências Biológicas, Faculdade de Odontologia de Bauru, Uniayersidade de São Paulo, 17043-101 Bauru, São Paulo, Brasil

Penerimaanayed 25 Juli 2002; terimaayed in reayformulir ised 2 Januari 2003; diterima 2 Januari 2003

Abstrak

Untuk mengetahui asam amino apa saja yang ada di dalamnyaayolayed dalam pengikatan substrat, asam fosfatase biji jarak
diperlakukan dengan reagen pengubah asam amino, seperti fenilglioksal (PGO), asam iodoasetat (IAA), N-bromosuksinimida (NBS), N-
asetilmidazol (NAI), dietilpirokarbonat (DEPC) , N,N?-dicyclohexylcarbodiimide (DCCD) dan 1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)
carbodiimide (EDC), spesifik untuk arginin, sistein, triptofan, tirosin, histidin, dan asam aspartat dan glutamat, masing-masingayely.
Aksi enzimayditentukan dengan menggunakanP-nitrofenilfosfat (PPLTN) sebagai substrat. Penghambatan enzim diamatiayed dengan
IAA, NBS, EDC dan DCCD. Dengan adanya produk reaksi,P-nitrofenol (PNP) dan fosfat anorganik (Pi), yang bersaingaye inhibitor,
enzim dilindungi dari inaktivasiayasi oleh IAA, menunjukkan dalamayolayement aktivitas enzimaysitus. Penghambatan oleh IAA
bergantung pada waktu dan konsentrasi, dengan konstanta laju bimolekular 48!/10"4M"1S"1, dan dua molekul IAA terikat per actiay
situs. Hasil kami menunjukkan bahwa gugus sulfhidril sangat penting untuk katalisis enzim, dan terletak di atau dekat domain
pengikat substrat. Asam amino lain seperti triptofan, asam aspartat dan asam glutamat, juga penting untuk aktivitas enzimayity, tapi
mungkin terletak di luar actiaysitus.
# 2003 Lainayier Science Ireland Ltd. Semua hak dilindungi undang-undang.

Kata kunci:Asam fosfatase; Aksiaysitus; biji jarak; asam iodoasetat;Ricinus communis;Gugus sulfhidril

defisiensi fosfat[7,12], stres garam[13]dan defisit air[14].

1. Perkenalan
Banyak peran lain haaye dianggap berasal dari fosfatase
asam pada tanaman, termasuk partisipasi dalam transduksi
Acid phosphatases atau orthophosphoric-monoester
sinyal[15]dan regulasi metabolisme dengan defosforilasi
phosphohydrolases (EC [Link]) mengkatalisasi hidrolisis
protein[9,16#/18]. Howeayer, fungsi metabolisme enzim ini
berbagai monoester ortofosfat, dan biasanya
belum dipahami dengan baik, sebagian karena terjadinya
menunjukkan pH optimal di bawah 6,0. Enzim ini
banyak isoform, dan kurangnya spesifisitas substrat secara
tersebar luas di alam dan haaye telah dipelajari di
umum karena spesifisitas rendah dariayberbagai isoform
banyak organisme dan jaringan. Asam fosfatase haaye
asam fosfatase[19]. Kami haaye praayjeli mengamatiayed
telah dilaporkan di banyak jaringan tanaman, seperti biji
bahwa empat isoform asam fosfatase dimurnikan dari biji
[1# 4], akar[5# 7], leaayes[8], umbi[9]dan umbi[10,11].
/ /

kedelai[3]dapat memainkan peran penting dalam

Fosfatase asam tanaman ada diayolayed dalam metabolisme
metabolisme tanaman yang bekerja pada perantara
fosfat dan tampaknya berfungsi sebagai respons terhadap a
glikolitik utama, khususnya fosfoenolpiruaymakan[20], dan
bahwa salah satu isoform mungkin diatur oleh lektin
endogen
* Penulis yang sesuai. Faks: $/55-19-3788-6129.
[21]. Shinano et al.[11]Haaye baru-baru ini memurnikan
Alamat email:aoyama@[Link] ([Link]).
1Alamat sekarang: Faculdade de Farmácia, CREUPI, ES Pinhal, fosfatase tetramerik dariAllium cepadengan spesifisitas
SP tinggi untuk phosphoenolpyruaymakan.

0168-9452/03/$ - lihat materi depan # 2003 Elseayier Science Ireland Ltd. Semua hak dilindungi undang-
undang. doi:10.1016/S0168-9452(03)00016-5
630 PA Granjeiro dkk. / Ilmu Tumbuhan 164 (2003) 629#/633

Struktur kristal Fe(III)# /Zn(II) asam ungu amonium molibdat (dalam 200 mM buffer asetat, pH 4.0)
fosfatase dari kacang merah kembaliayealed bahwa dua ion diikuti dengan 0,1 ml asam askorbat 120 mM (dalam 200
logam terletak di actiaysitus e dan bahwa asam amino mM buffer asetat, pH 4.0). Absorbansi warna yang
mengikat ion logam dan yang ada di dalamnyaayolayed dihasilkan dibaca pada 700 nm, setelah 30 menit pada
dalam tindakanaySitus ini terletak di domain C-terminal / suhu kamar. Jumlah fosfat anorganik yang dilepaskan
[22#24]. Howeayeh, sedikit yang diketahui tentang sifat dihitung menggunakan koefisien kepunahan molar 4000
kimia dari tindakan tersebutaySitus asam fosfatase, M"1cm"1[25].
terutama yang berkaitan dengan residu asam aminoayolay Semua percobaan dilakukan dua kali, dan dilakukan dalam
ed dalam mekanisme katalitik, berdasarkan reaksi dengan rangkap tiga, dengan standar deayasi lebih rendah dari 5%.
reagen pengubah asam amino. Di praaykerja keras, kami
menggambarkan pemurnian dan sifat kinetik dari fosfatase
asam dari biji jarak (Ricinus communis) benih, yang sangat 2.2. Modifikasi asam fosfatase
dihambat olehP-kloromercuribenzoat dan Cu2$,
menunjukkan pentingnya gugus sulfhidril untuk reaksi Enzim diprainkubasi dengan reagen pengubah asam
katalitik[4]. Dalam karya ini, kami menentukan asam amino amino, termasuk PGO, NEM, IAA, NBS dan NAI, pada tahun
mana yang penting untuk aktivitas asam fosfatase asam biji 200Ml manitol 300 mM dan Hepes 20 mM#/Tris (pH 7,5)
jarakaymenggunakan reagen pengubah asam amino. (penyangga A) selama 30 menit pada suhu 25 dan 378C.
Prediksi asam amino esensial mana yang berpartisipasi Inkubasi dengan DEPC, DCCD dan EDC dilakukan pada
dalam aksi tersebutaySitus ini juga didasarkan pada studi tahun 200Ml dari 300 mM mannitol dan 20 mM MES#/NaOH
dengan produk reaksi sebagai pelindung aktivitas enzimay (pH 6.0) (penyangga B)[26]. Untuk DEPC dan DCCD, media
ity. inkubasi mengandung etanol dengan konsentrasi akhir
1,5% (v/v),praayditunjukkan dengan jelas, di laboratorium
kami, hingga haaye tidak berpengaruh pada fosfatase asam
2. Bahan dan metode biji jarak. Reaksi pra-inkubasi dihentikan dengan
mengencerkan campuran dalam buffer tanpa substrat. Aksi
Biji jarak (Ricinus communisL., IAC-80) benih ramah fosfatase residuayity kemudian diukur dengan
proayide oleh Dr Ângelo Saayim (Instituto menambahkanPPLTN.
Agronômico de Campinas-IAC).P-Nitrophenyl
phosphate, diethylpyrocarbonate (DEPC), N-
bromosuccinimide (NBS) dan N,N?-dicyclohexyl- 3. Hasil dan Pembahasan
carbodiimide (DCCD) berasal dari Sigma (St. Louis,
MO). Iodoacetic acid (IAA), N-acetylimidazole (NAI), 1- Identifikasi residu asam amino esensial dalam acti
ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl) carbodiimide (EDC) aye situs enzim memungkinkan eayaluasi yang
dan phenylglyoxal (PGO) berasal dari Fluka Chemie memainkan peran asam amino ini dalam pengikatan
AG (Swiss). Semua reagen lain yang digunakan adalah substrat dan dalam mekanisme katalitik.
kelas analitik. Untuk menentukan di mana residu asam amino beradaay
Asam fosfatase asam biji jarak dimurnikan menjadi homogen olayDalam mekanisme katalitik asam fosfatase asam biji
sebagai praaydijelaskan secara rinci oleh Granjeiro et al.[4]. jarak, enzim diprainkubasi pada 25 dan 378C dengan
reagen pengubah asam amino yang berbeda. Efek reagen
pengubah asam amino bergantung pada suhu karena
2.1. Uji asam fosfatase tingkat penghambatan lebih tinggi pada suhu pra-inkubasi
378C, dibandingkan dengan penghambatan pada 258C (
Untuk uji fosfatase standar, campuran reaksi di Tabel 1). Sebagian besar reagen pengubah asam amino
finalayolume 1 ml, berisi 100 mM buffer natrium yang diuji tidak berpengaruh pada 258C. Tidak ada
asetat (pH 5,0), 5 mMP-nitrofenilfosfat (PNPP) dan penghambatan yang signifikan pada 378C dengan PGO,
enzim. Setelah 10 menit inkubasi pada 378C, reaksi DEPC dan NAI, reagen pengubah asam amino khusus untuk
dihentikan dengan penambahan 1 ml NaOH 1 M. Aksi arginin, histidin, dan tirosin, masing-masingayely,
asam fosfataseayity diukur sebagai pelepasanP- menunjukkan bahwa asam amino ini tidak langsung masuk
nitrofenol (PNP) dipantau pada 405 nm, ayolayed dalam pengikatan substrat atau katalisis. Kondisi
menggunakan koefisien kepunahan molar 18.000 M"1 ini (30 menit pada 378C) telah terbukti memadai untuk
cm"1[4]. reaksi enzim yang efisien dengan reagen pengubah asam
Dalam studi perlindungan, aktivitas enzimayity diuji amino[26]. Howeayer pengaruh suhu yang lebih tinggi pada
dengan mengukur jumlah fosfat yang dilepaskan. Untuk reaksi enzim dengan reagen pengubah asam amino tidak
penentuan fosfat anorganik, kondisi pengujiannya sama dapat diabaikan.
seperti yang dijelaskanPNPP, kecuali bahwa reaksi Meskipun NBS, EDC dan DCCD gaaydan leayels
dihentikan dengan menambahkan 1 ml 3% (w/v) penghambatan sekitar 60, 30 dan 50% penghambatan (Meja
 PA Granjeiro dkk. / Ilmu Tumbuhan 164 (2003) 629#/633 631

Tabel 1 residu sistein penting untuk ulatayenom actiaypada

Pengaruh suhu terhadap kemampuan reagen pengubah asam faktor manusia V.
amino untuk menghambat fosfatase asam biji jarak
Modus aksi IAA, satu-satunya reagen yang
Memodifikasi reagen Relatiaye activ- mempengaruhi aksiaye situs residu, diperiksa secara
ini (%) lebih rinci.
258C 378C

Dietil-pirokarbonat (DEPC) 1-Etil-3-(3- 1009/2 1019/3 3.1. Tidak aktifayasi asam fosfatase dengan modifikasi
dimetilaminopropil) karbodiimida (EDC) 859/3 719/3 gugus sulfhidril

N,N?-disikloheksilkarbodiimida (DCCD) 829/2 519/2

Berbagai konsentrasi IAA dipreinkubasi dengan enzim
Asam iodoasetat (IAA) 989/3 499/2
N-Bromosuccinimide (NBS) 1029/1 409/2 untuk waktu yang berbeda pada 378C. Setelah
N-Acetylimidazole (NAI) 999/2 1009/3 menghentikan preinkubasi dengan mengencerkan
Phenylglyoxal (PGO) 1039/2 919/3 campuran reaksi dalam buffer tanpa substrat, sisa enzim
beraksiayity diukur setelah 40 menit inkubasi seperti yang
Enzim diprainkubasi dengan 10 mM reagen pengubah asam amino, selama
30 menit pada suhu 25 dan 378C. Aksi sisaayditentukan dengan menggunakan
dijelaskan dalamBagian 2.2. IAA menghasilkan inaktivasi
PPLTN sebagai substrat, seperti yang dijelaskan dalamSeksi 2. Dengan tidak yang bergantung pada waktu dan konsentrasiayasi enzim (
adanya reagen pengubah, tindakan tersebutayities dianggap sebagai 100%. Gambar 1). Tingkat inaktivasiayasi sebagai fungsi
Aktiayityaynilai mewakili rata-rata penentuan rangkap tiga (9/ konsentrasi IAA adalah linier, sangat menunjukkan bahwa
SD).
tidak ada reaykompleks ersible terbentuk antara enzim dan
1), menunjukkan bahwa asam triptofan, glutamat, dan reagen (Gambar 2). Hubungan serupa telah diamatiayed
aspartat dapat masukayolayed dalam pengikatan substrat, untuk enzim lain, (1 #/3)-B-sintase glukan dari ryegrass Italia
studi perlindungan dengan masing-masing 10 mMP- (Lolium multiflorum),tetapi menggunakan reagen untuk
memodifikasi residu asam amino terminal karboksi[28].
nitrofenol dan fosfat anorganik, keduanya berinteraksi pada
Kemiringan garis lurus diGambar 2 gaaye konstanta laju
aksiaye situs, tidak melakukan praayEnzim penghambatan,
bimolekular semu 48! 10"4M"1S"1di hadapan IAA. Konstanta /
kecuali untuk IAA (Meja 2). Temuan ini menunjukkan bahwa
ini dapat digunakan untuk membandingkan reaksiayities of
meskipun asam triptofan, glutamat dan aspartat penting
ayberbagai reagen, misalnya sebagai ukuran tingkat
untuk aktivitas enzimayity, residu ini tidak terletak di actiay
fasilitasi yang diperoleh dengan tindakanayreagen yang
situs.
diarahkan situs elektronik dibandingkan dengan reagen
Penghambatan asam fosfatase (50%) diperoleh
lainnya[29]. Urutan tidak aktifayasi
dengan IAA menunjukkan pentingnya gugus sulfhidril
sistein untuk aktivitas [Link]. Residu sistein
mungkin terletak di actiaye situs sejak perlindunganaye
senyawaP-nitrofenol dan fosfat anorganik memulihkan
aktivitas enzimayhingga 70% (Meja 2). López dkk.[27],
bekerja dengan reagen pengubah sufhidril yang
berbeda, termasuk IAA, menunjukkan adanya

Meja 2
Efek dariP-nitrofenol dan fosfat anorganik pada penghambatan
enzim oleh reagen pengubah asam amino

Memodifikasi reagen Relatiaye actiayini (%)

"/PNP"/Pi $/PNP$/Pi

N-Bromosuccinimide (NBS) 1-Ethyl-3- 389/3 419/4

(3-dimethylaminopropyl) 709/2 689/3
carbodiimide (EDC)
N,N?-disikloheksilkarbodiimida (DCCD) 489/2 519/2
Asam iodoasetat (IAA) 489/3 719/2

Enzim dan reagen pengubah asam amino dipreinkubasi pada 378C, selama
30 menit, dengan tidak adanya dan dengan adanya 10 mMPNP dan 10 mM Pi, Gambar 1. Inaktiayasi fosfatase asam biji jarak oleh IAA. Aksi enzim
dan aksi sisaayditentukan dengan menggunakanPPLTN sebagai substrat, residuayity diukur setelah preinkubasi untuk waktu yang berbeda,
seperti yang dijelaskan dalamSeksi 2. Dengan tidak adanya reagen pengubah, dengan tidak adanya (J)dan di hadapan 50 ('), 100 (%), 200 (")dan 300
tindakan tersebutayities dianggap sebagai 100%. Aktiayityaynilai mewakili mM (M)dari IAA. Setiap titik mewakili rata-rata penentuan rangkap
rata-rata penentuan rangkap tiga (9/SD). tiga (SDB/5%).
632 PA Granjeiro dkk. / Ilmu Tumbuhan 164 (2003) 629#/633

97/8853-8), Conselho Nacional de Desenayolayimento

Cientı́fico e Tecnológico (Proses 521.654/95-5), Fundo de
Apoio ao Ensino e à Pesquisa/Unicamp, dan beasiswa
pascasarjana FAPESP untuk PAG dan ADMC. Para penulis
berterima kasih kepada Dr Stephen Hyslop
(Departamento de Farmacologia, FCM/UNICAMP) untuk
membaca naskah secara kritis.

Referensi

[1] TK Biswas, C. Cundiff, Berbagai bentuk asam fosfatase dalam

benih berkecambahvigna sinenses,Fitokimia 30 (1991) 2119#/
2125.
[2] Y. Kawarasaki, H. Nakano, T. Yamane, Pemurnian dan beberapa
sifat fosfatase asam bibit gandum, Tanaman Sci. 119 (1996) 67#
/77.

[3] CV Ferreira, JM Granjeiro, EM Taga, H. Aoyama, Pemurnian dan

karakterisasi berbagai bentuk fosfatase asam biji kedelai, Plant
Physiol. Biokimia. 36 (1998) 487#/494.
[4] PA Granjeiro, CV Ferreira, JM Granjeiro, EM Taga, H. Aoyama,
Pemurnian dan sifat kinetik fosfatase asam biji jarak yang
Gambar 2. Ketergantungan laju inaktivasi fosfataseayasi (Kaplikasi) mengandung gugus sulfhidril, Physiol. Tanaman. 107 (1999)
pada konsentrasi IAA. Lereng curayes untuk fiaye konsentrasi IAA (K 151#/158.
aplikasi), diperoleh dariGambar 1, diplot terhadap konsentrasi IAA, [5] F. Panara, S. Pasqualini, M. Antonielli, Berbagai bentuk fosfatase
untuk menentukan konstanta pengikatan. Sisipan. Penentuan asam akar jelai: pemurnian dan beberapa karakteristik
urutan inaktivasi yang tampakayreaksi asi. Nilai logKaplikasidiplot isoenzim sitoplasma utama, Biochim. Biofisika. Akting 1037
terhadap log IAA, untuk mendapatkan urutan inactiayreaksi asi. (1990) 73#/80.
[6] AR Penheiter, SMG Duff, G. Sarath, bintil akar kedelai dan asam
fosfatase, Plant Physiol. 114 (1997) 597#/604.
reaksi ditentukan seperti yang dijelaskan oleh Leayy et al. [7] C. Zhang, MT McManus, Identifikasi dan karakterisasi dua
[30] dari sebidang logKaplikasiayS. log[IAA] (Gambar 2, inset). fosfatase asam yang berbeda pada dinding sel akar klo putihay
eh, Tumbuhan Physiol. Biokimia. 38 (2000) 259#/270.
Plot ini gaayea garis lurus dengan kemiringan 2,05,
[8] PE Staswick, C. Papa, J. Huang, Y. Rhee, Pemurnian fosfatase asam
menunjukkan bahwa urutan inaktiayreaksi asi adalah 2 dan daun kedelai utama yang ditingkatkan dengan biji-pod remoayal,
masing-masing inaktivasiaymolekul enzim yang Tumbuhan Physiol. 104 (1994) 49#/57.
mengandung dua molekul IAA terikat per aksiaysitus[30]. [9] K. Gellatly, GBG Moorhead, SMG Duff, DD Lefebayulang,
Tidak ada ketergantungan pH pada inactiaytingkat asi WC Plaxton, Pemurnian fosfatase asam umbi kentang haay
karakteristik protein tirosin fosfatase, Plant Physiol. 106 (1994)
asam fosfatase asam biji jarak (data tidak ditampilkan),
223#/232.
menunjukkan bahwa tidak adaayolayement biaya dalam [10] J. Guo, JC Pesacreta, Pemurnian dan karakterisasi asam
inactiayasi enzim oleh IAA. Di sisi lain, tidak aktifayreaksi fosfatase dari umbiAllium [Link]. spanyol manis, J. Plant
asi dari (1# 3)-B-sintase glukan dengan EDC[28], dan
/ Physiol. 151 (1997) 520#/527.
isoprenylcysteine methyltransferase dengan PGO[26] [11] T. Shinano, R. Yonetani, N. Ushihara, H. Adachi, J. Wasaki, H. Matsui,
M. Osaki, Karakteristik fosfoenolpiruaymakan fosfatase yang
tergantung pada pH.
dimurnikan dariAllium cepa,Tanaman Sci. 161 (2001) 861#/869.
Fosfatase asam tanaman biasanya tidak sensitifaye ke [12] SMG Duff, DD Lefebayre, WC Plaxton, Pemurnian, karakterisasi
penghambat gugus sulfhidril, sepertiP-kloromercuribenzoat dan lokalisasi subselular dan fosfatase asam dariBrassica nigra
dan Cu2$, berbeda dengan fosfatase asam dengan berat sel suspensi. Dibandingkan dengan fosfoenolpirusaymakan
molekul rendah mamalia yang berpotensi dihambat oleh fosfatase, Arch. Biokimia. Biofisika. 286 (1991) 226#/232.

agen ini[31#/33]. PraayKarya ilmiah telah menunjukkan

[13] S. Pan, Karakterisasi beberapa asam fosfatase dalam daun bayam yang
pemurnian dan karakterisasi asam fosfatase asam biji jarak diberi garamayes, Aust. J. Tumbuhan Physiol. 14 (1987) 117#/124.
yang mengandung gugus sulfhidril.[4]. Pekerjaan ini [14] EG Barrett-Lennard, AD Robson, H. Greenway, Efek defisiensi
menunjukkan bahwa residu sistein sangat penting untuk fosfor dan defisit air pada aktivitas fosfataseayities dari lea
mekanisme katalitik enzim dan mungkin terletak di aktiay gandumayes, [Link]. Bot. 33 (1982) 682#/693.
[15] WC Plaxton, Metabolisme tumbuhan, Annu. [Link] Tumbuhan.
situs.
Tanam Mol. Biol. 47 (1996) 185#/214.
[16] OS Awotunde, E. Sugajska, S. Zolnierowicz, G. Muszynska,
Karakterisasi dua holoenzim protein fosfatase 2A dari bibit
jagung, Biochim. Biofisika. Akting 1480 (2000) 65#/76.
Terima kasih
[17] A. Perjuangan, KM Fredlund, YM Konstantinov,JF Allen,
IM Møller, Fosforilasi/defosforilasi protein pada membran
Pekerjaan ini didukung oleh hibah dari Fundação de dalam mitokondria umbi kentang, FEBS Lett. 475 (2000) 213#/
Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (Proses 217.
 PA Granjeiro dkk. / Ilmu Tumbuhan 164 (2003) 629#/633 633

[18] MD Stubbs, HT Tran, AJ Atwell, CS Smith, D. Olson, GB [26] [Link], W. Lin, R. Béliayeau, Residu arginin esensial dalam protein
Moorhead, Pemurnian dan sifat-sifatArabidopsis thaliana tipe 1 isoprenylcysteine carboxyl methyltransferase, Biochem.
protein fosfatase (PP1), Biochim. Biofisika. Acta 1550 (2001) 52# Bio Sel. 75 (1997) 63#/69.
/63. [27] M. López, A. Gil, CL Arocha-Piñango, Aksiayasi dari Lanomia
[19] SMG Duff, G. Sarath, WC Plaxton, Peran fosfatase asam dalam achelusulatayenom pada faktor Manusia V, Thrombosis Res. 98
metabolisme fosfor tanaman, Physiol. Tanaman. (2000) 103#/110.
90 (1994) 791#/800. [28] V. Bulone, B. Lam, BA Stone, Efek reagen pengubah asam
[20] CV Ferreira, EM Taga, H. Aoyama, intermediet Glikolitik sebagai amino pada aktivitasaydari (1#/3)-B-sintase glukan dari ryegrass
substrat isoform fosfatase asam kedelai, Plant Sci. 147 (1999) Italia (Lolium multiflorum)endosperma, Fitokimia 50 (1999) 9#/
49#/54. 15.
[21] H. Aoyama, ADM Caayagis, EM Taga, CV Ferreira, Lektin [29] BB Plapp, Penerapan pelabelan afinitas untuk mempelajari
endogen sebagai pengatur hidrolisis substrat fisiologis oleh
struktur dan fungsi enzim, Metode Enzymol. 87 (1982) 469#/
fosfatase asam biji kedelai, Fitokimia 58 (2001) 221#/225.
499.
[30] HM Leayy, PD Leber, EM Ryan, Inactiayasi miosin oleh
[22] T. Klabunde, N. Strater, B. Krebs, H. Witzel, Hubungan struktural
2,4-dinitrofenol dan perlindungan oleh adenosin trifosfat dan
antara mamalia Fe(III)#/Fe(II) dan Fe(III)#/
senyawa fosfat lainnya, J. Biol. kimia 238 (1963) 3654#/
Zn(II) tanaman fosfatase asam ungu, FEBS Lett. 367 (1995) 56#/
3659.
60.
[31] HMS Bittencourt, H. Chaimoayich, Pentingnya gugus SH dalam
[23] G. Schenk, LW Guddat, Y. Ge, LE Carrington, DA Hume, S.
Hamilton, J. de Jersey, Identifikasi fosfatase asam ungu seperti katalisis oleh boayine brain acid phosphatase, Biochim. Biofisika. UU
mamalia dalam berbagai tumbuhan, Gen 250 (2000) 117 #/125. 438 (1975) 153#/158.
[32] EM Taga, RL Van Etten, Manusia liayer acid phosphatase:
[24] AG Cashikar, NM Rao, Peran ikatan disulfida intersubunit dalam pemurnian dan sifat isoenzim dengan berat molekul rendah,
jalur terungkapnya fosfatase asam ungu kacang merah dimer Arch. Biokimia. Biofisika. 214 (1982) 505#/515.
merah, Biochim. Biofisika. Akting 1296 (1996) 76#/84. [33] JM Granjeiro, EM Taga, H. Aoyama, Pemurnian dan karakterisasi
[25] OH Lowry, JA Lopez, Penentuan fosfat anorganik dengan bo berat molekul rendahaydalam fosfatase asam ginjal, Ann.
adanya ester fosfat labil, J. Biol. kimia 162 (1945) 421#/424. Acad. Bra. Ci. 69 (1997) 451#/460.

Lihat statistik publikasi