FORMULASI DAN UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI Stapylococcus epidermidis

SEDIAAN MIKROEMULSI EKSTRAK DAUN KERSEN (Muntingia

calabura Linn.) DENGAN FASE MINYAK
ISOPROPIL MIRYSTATE

SKRIPSI

Oleh:
Shinta Aprilia Rizky Wulandari
NIM. 13670002

JURUSAN FARMASI
FAKULTAS KEDOKTERAN DAN ILMU-ILMU KESEHATAN
UNIVERSITAS ISLAM NEGERI MAULANA MALIK IBRAHIM MALANG
2017
FORMULASI DAN UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI Stapylococcus epidermidis
SEDIAAN MIKROEMULSI EKSTRAK DAUN KERSEN (Muntingia
calabura Linn.) DENGAN FASE MINYAK
ISOPROPIL MIRYSTATE

SKRIPSI

Diajukan Kepada Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan

Universitas Islam Negeri Maulana Malik Ibrahim Malang
untuk Memenuhi Salah Satu Persyaratan dalam
Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi ([Link])

Oleh:
Shinta Aprilia Rizky Wulandari
NIM. 13670002

JURUSAN FARMASI
FAKULTAS KEDOKTERAN DAN ILMU-ILMU KESEHATAN
UNIVERSITAS ISLAM NEGERI MAULANA MALIK IBRAHIM MALANG
2017

i
ii
iii
iv
 PERSEMBAHAN

Tugas akhir ini saya persembahkan terkhusus

kepada kedua orang tua saya Papa dan

Mama yang selalu senantiasa memberikan

restu, doa serta kasih sayang yang tak henti-

hentinya dan juga teruntuk Adik tersayang

yang selalu memberikan semangat dan

sumber inspirasi disetiap keletihan saat

menyelesaikan tugas akhir ini.

1
v
 2

KATA PENGANTAR

Segala puji syukur dan terimakasih penulis kepada Allah SWT Yang Maha
Esa atas segala limpahan rahmat, karunia dan kekuatan yang diberikan sehingga
penulis menyelesaikan penelitian dan penyusunan skripsi ini dengan judul
“Formulasi dan Uji Aktivitas Antibakteri Staphylococcus epidermidis Sediaan
Mikroemulsi Ekstrak Daun Kersen (Muntingia calabura L.) dengan
Menggunakan Fase Minyak Isopropyl Myristate (IPM)”. Penulisan skripsi ini
dapat diselesaikan sebagai prasyarat untuk memperoleh gelar sarjana farmasi
([Link]) pada Fakultas Kedokteran dan Ilmu-ilmu Kesehatan Universitas Islam
Negeri (UIN) Maulana Malik Ibrahim Malang dengan semaksimal mungkin,
walaupun masih jauh dari kesempurnaan. Penulis mengucapkan rasa hormat dan
terimakasih kepada :

1. Bapak Prof. Dr. H. Abdul Haris, [Link] selaku Rektor Universitas Islam
Negeri Maulana Malik Ibrahim Malang.
2. Bapak Bambang Pardjianto, Sp.B., [Link]-RE (K), selaku dekan Fakultas
kedokteran dan Ilmu Kesehatan Universitas Islam Negeri Maulana Malik
Ibrahim Malang.
3. Ibu Dr. Roihatul Munti’ah, [Link], Apt selaku Ketua Program Studi
Farmasi Fakultas kedokteran dan Ilmu Kesehatan Universitas Islam Negeri
Maulana Malik Ibrahim Malang.
4. Ibu Rahmi Annisa, [Link]., Apt. selaku dosen pembimbing I yang selalu
luar biasa sabar membimbing, memberikan masukan dan saran selama
penelitian dan penyusunan tugas akhir ini.
5. Bapak Weka Sidha Bhagawan, [Link]., Apt selaku pembimbing II yang
telah banyak meluangkan waktu serta bimbingan selama penelitian dan
penyusunan tugas akhir ini.

vi
 3

6. Ibu Sinta Megawati, [Link]., selaku dosen pembimbing agama yang telah
meluangkan waktunya serta bimbingannya sehingga penyusunan tugas
akhir ini dapat terselesaikan.
7. Ibu Siti Maimunah, [Link]., Apt selaku ketua penguji tugas akhir yang
telah bersedia menguji dan memberikan masukan dan saran.
8. Seluruh dosen, staf administrasi Jurusan Farmasi UIN Maliki Malang atas
segala bantuan yang diberikan, terutama pada saat penelitian berlangsung.
9. Ibu Prilya Dewi selaku laboran mikrobiologi jurusan biologi yang turut
membantu dan selalu memberi motivasi kepada penulis
10. Keluarga tercinta, papa Fathul Hasan dan mama Tatik Dwi Wahyuni, serta
adik Hildan atas segala dukungan moral maupun materil, semangat, kasih
sayang dan doa yang selalu diberikan.
11. Teman-teman Farmasi angkatan 2013 khususnya Keluarga Transdermal
(Alfi, Ayun, Zahra, Jauhar, Caca, Delvi, Atiza, Novenda, Yola dan Atiqah)
yang telah berjuang bersama-sama serta berbagi suka dan duka
12. Semua pihak yang tidak dapat disebutkan satu persatu yang telah
memberikan bantuan selama masa penelitian dan penyusunan tugas akhir.

Penulis menyadari bahwa penelitian dan penulisan skripsi ini masih jauh dari
sempurna, sehingga saran dan kritik yang membangun sangat diperlukan. Semoga
skripsi ini dapat bermanfaat bagi pengembangan ilmu dan bagi setiap orang yang
membacanya.

Waassalamu’alaikum Wr. Wb.

Malang, September 2017

Penulis

vii
 4

DAFTAR ISI

HALAMAN JUDUL ...................................................................................... i

HALAMAN PENGAJUAN ........................................................................... ii
HALAMAN PERSETUJUAN ...................................................................... iii
HALAMAN PENGESAHAN ........................................................................ iv
HALAMAN PERNYATAAN ........................................................................ v
HALAMAN PERSEMBAHAN .................................................................... vi
KATA PENGANTAR .................................................................................... ix
DAFTAR ISI ................................................................................................... viii
DAFTAR GAMBAR ...................................................................................... xi
DAFTAR TABEL .......................................................................................... xii
DAFTAR SINGKATAN ............................................................................... xiii
DAFTAR LAMPIRAN .................................................................................. xiv
ABSTRAK ...................................................................................................... xv
ABSTRAC....................................................................................................... xvi
‫…………………………………………………………………الملخص‬............ xvii

BAB I PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang ........................................................................................... 1
1.2 Rumusan Masalah ...................................................................................... 8
1.3 Tujuan ........................................................................................................ 8
1.3.1 Tujuan Umum ................................................................................... 8
1.3.2 Tujuan Khusus .................................................................................. 8
1.4 Manfaat Penelitian ..................................................................................... 8
1.5 Batasan Masalah......................................................................................... 9
BAB II TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Tumbuhan Kersen (Muntingia Calabura L.) ............................................. 10
2.1.1 Deskripsi Tumbuhan Kersen ............................................................ 10
2.1.2 Taksonomi Tumbuhan Kersen ......................................................... 10
2.2 Kandungan Kimia Daun Kersen ................................................................ 11
2.2.1 Flavonoid ......................................................................................... 12
2.2.2 Tanin ................................................................................................ 13
2.2.3 Saponin............................................................................................. 14
2.3 Nama Daerah .............................................................................................. 15
2.4 Deskripsi Tumbuhan .................................................................................. 15
2.5 Habitat Tumbuhan Kersen ......................................................................... 16
2.6 Kegunaan/Khasiat Tumbuhan Kersen........................................................ 16
2.7 Kulit ........................................................................................................... 16
2.7.1 Struktur Kulit .................................................................................... 17
2.8 Ekstraksi Daun Kersen ............................................................................... 18
2.9 Mikroemulsi ............................................................................................... 19
2.9.1 Komponen Mikroemulsi ................................................................... 22
2.10 Komponen Bahan Pembentuk Mikroemulsi ............................................ 24
2.10.1 Pelarut Etanol 96%........................................................................ 24

viii
 5

2.10.2 Tween 80 ....................................................................................... 25

2.10.3 Span 80 .......................................................................................... 26
2.10.4 Isopropil Miristat ........................................................................... 27
2.10.5 PEG 400 ......................................................................................... 28
2.11 Pengukuran Ukuran Partikel .................................................................... 28
2.12 Bakteri (Staphylococcus epidermidis)...................................................... 29
2.13 Uji Antibakteri Staphylococcus epidermidis ............................................ 30
2.14 Pengukuran Zona Hambat ........................................................................ 31
2.15 Neomycin ................................................................................................. 32
2.16 Analisis Data Statistika ............................................................................ 32
BAB III KERANGKA KONSEPTUAL
3.1 Kerangka Konseptual ................................................................................. 34
3.2 Hipotesis Penelitian.................................................................................... 37
BAB IV METODOLOGI PENELITIAN
4.1 Jenis dan Rancangan Penelitian ................................................................. 38
4.2 Waktu dan Tempat Penelitian .................................................................... 40
4.3 Variabel dan Definisi Operasional ............................................................. 40
4.4 Alat dan Bahan Penelitian .......................................................................... 42
4.5 Prosedur pengumpulan data ....................................................................... 43
4.5.1 Pembuatan Ekstrak Daun Kersen ...................................................... 43
4.5.2 Uji Bebas Etanol ............................................................................... 43
4.5.3 Penapisan Fitokimia .......................................................................... 44
4.5.3 Pembuatan Sistem Mikroemulsi ....................................................... 45
4.6 Evaluasi Karakteristik Mikroemulsi ......................................................... 47
4.6.1 Pengukuran Ukuran Partikel ............................................................. 47
4.6.2 Uji Organoleptik................................................................................ 47
4.6.3 Uji pH ................................................................................................ 48
4.6.4 Uji Tipe Emulsi ................................................................................. 48
4.6.5 Freeze-thaw ....................................................................................... 49
4.7 Uji Aktivitas Bakteri Staphylococcus epidermidis .................................... 49
4.7.1 Penyiapan Alat dan sterilisasi .......................................................... 50
4.7.2 Pembuatan Media ............................................................................. 50
4.7.3 Peremajaan Bakteri Uji .................................................................... 51
4.7.4 Pembuatan Media Uji Bakteri ......................................................... 51
4.7.5 Pembuatan Media Uji Aktivitas Bakteri .......................................... 50
4.8 Analisis Data Statistika .............................................................................. 52
BAB V HASIL DAN PEMBAHASAN
5.1 Preparasi Sampel ......................................................................................... 53
5.2 Uji Kadar Air Daun Kersen ......................................................................... 53
5.3 Pembuatan Ekstrak Etanol dengan Metode Ultrasonik ............................... 54
5.4 Uji Bebas Etanol dan Identifikasi Senyawa Aktif Daun Kersen ................. 59
5.4.1 Uji Flavonoid ...................................................................................... 59
5.4.2 Uji Tanin ............................................................................................. 60
5.4.3 Uji Saponin ...................................................................................... 61

ix
 6

5.5 Pembuatan Sediaan Mikroemulsi Ekstrak Daun Kersen ........................... 62

5.6 Evaluasi Fisik Mikroemulsi ....................................................................... 65
5.6.1 Penentuan Organoleptis ................................................................... 65
5.6.2 Uji pH ............................................................................................... 68
5.6.3 Uji Stabilitas Freeze-thaw ................................................................ 69
5.6.4 Penentuan Tipe Mikroemulsi ........................................................... 74
5.6.5 Uji Kelembapan Mikroemulsi .......................................................... 75
5.7 Uji Aktivitas Antibakteri ............................................................................ 76
5.8 Pemeriksaan Ukuran Partikel Mikroemulsi ............................................... 85
BAB VI PENUTUP
6.1 Kesimpulan .................................................................................................. 88
6.2 Saran……………………………………………………………………… 89
DAFTAR PUSTAKA ...................................................................................... 90
LAMPIRAN ..................................................................................................... 98

x
 7

DAFTAR GAMBAR

Gambar 2.1 Tanaman Kersen (Muntingia Calabura L.) ................................ 11

Gambar 2.2 Struktur Flavonoid ...................................................................... 13
Gambar 2.3 Struktur Tanin ............................................................................. 14
Gambar 2.4 Struktur Saponin ......................................................................... 15
Gambar 2.5 Struktur Kulit .............................................................................. 17
Gambar 2.6 Struktur Kimia Etanol 96% ........................................................ 25
Gambar 2.7 Struktur Kimia Tween 80 ........................................................... 25
Gambar 2.8 Struktur Kimia Span 80 .............................................................. 26
Gambar 2.9 Struktur kimia Isopropil Miristat ................................................ 27
Gambar 2.10 Struktur Kimia Polietilen glikol 400......................................... 28
Gambar 5.3 Mekanisme Reaksi Pembentukan Garam Flavilium .................. 60
Gambar 5.4 Mekanisme Reaksi Tanin dan FeCl3 .......................................... 61
Gambar 5.5 Mekanisme Reaksi Hidrolisis Saponin Dalam Air ..................... 62
Gambar 5.6 Grafik Pemeriksaan nilai pH Pengujian Sebelum
Stabilitas ...................................................................................... 68
Gambar 5.7 Grafik Pemeriksaan nilai pH Pengujian Sesudah
Stabilitas ....................................................................................... 71
Gambar 5.8 Grafik Pemeriksaan nilai pH Pengujian pH Sebelum
dan Sesudah Stabilitas Freeze-thaw ............................................ 73
Gambar 5.9 Hasil Penentuan Tipe Mikroemulsi dengan Menggunakan
Mikroskop Elektron…………………...………………..………...75
Gambar 5.10 Hasil Zona hambat Ekstrk Daun Kersen
(Muntingia calabur L.)……………………………………..…...78

xi
 8

DAFTAR TABEL

Tabel 2.1 Kategori Diameter Zona Hambat ................................................... 31

Tabel 4.1 Rancangan Formula Sediaan Mikroemulsi ..................................... 45
Tabel 5.1 Hasil Ekstraksi Ultrasonik Ekstrak Etanol 96% daun
Muntingia Calabur. L ...................................................................... 56
Tabel 5.2 Hasil uji bebas etanol ...................................................................... 57
Tabel 5.3 Hasil Identifikasi senyawa aktif ekstrak daun Muntingia
calabura L ...................................................................................... 59
Tabel 5.3 Hasil Pemeriksaan Organoleptis Mikroemulsi Ekstrak
Muntingia calabura L...................................................................... 66
Tabel 5.4 Hasil Pemeriksaan nilai pH Pengujian Sebelum Stabilitas ............. 67
Tabel 5.5 Hasil Pengamatan Uji Freeze-thaw selama 6 siklus........................ 70
Tabel 5.6 Hasil Pengujian pH setelah Stabilitas Freeze-thaw ......................... 70
Tabel 5.7 Hasil Pengujian pH Sebelum dan Sesudah Stabilitas
Freeze-thaw .................................................................................... 73
Tabel 5.8 Rata-rata Diameter Zona Hambat Mikroemulsi Ekstrak
Etanol Daun Muntingia calabura L................................................. 79
Tabel 5.9 Hasil Statistik Tukey HSD .............................................................. 83

xii
 9

DAFTAR SINGKATAN

ATP : Adenosina trifosfat

DMSO : Dimethyl Sulfoxide
GyrB : Gyrase subunit B
HLB : Hydrophylic-Lipophylic Balance
M. calabura : Muntingia calabura
IPM : Isopropil Miristat
NA : Nutrient Agar
O/W : Oil in water
PEG 400 : Polietilen glikol 400
pH : Power of hydrogen
ppm : Parts per million
rpm : Rotation per minutes
S. epidermidis : Staphylococcus epidermidis
UV : Ultraviolet
W/O : Water in oil

xiii
 10

LAMPIRAN

Lampiran 1 Skema Kerja................................................................................ 98

Lampiran 2 Perhitungan ................................................................................. 101
Lampiran 3 Gambar Proses Penelitian ........................................................... 103
Lampiran 4 Data Hasil Tabel ......................................................................... 109
Lampiran 5 Perhitungan Statistik SPSS ......................................................... 112
Lampiran 6 Lembar Rentang Uji Organoleptik ............................................. 120
Lampiran 7 Hasil Uji Moisture Analyzer Simplisia Daun Kersen ................ 122
Lampiran 8 Hasil Uji Moisture Analyzer Mikroemulsi Ekstrak Daun
kersen ......................................................................................... 125
Lapiran 9 Certificate of Analysis Tween 80 ................................................... 128
Lapiran 10 Certificate of Analysis Span 80.................................................... 129
Lapiran 11 Certificate of Analysis IPM ......................................................... 130

xiv
 11

ABSTRAK

Wulandari, S. A. R. 2017. Formulasi dan Uji Aktivitas Antibakteri Staphylococcus

epidermidis sediaan mikroemulsi ekstrak daun kersen (Muntingia calabura
L.) dengan menggunakan fase minyak Isopropyl Myristate (IPM)

Pembimbing: (I) Rahmi Annisa, [Link]

(II) Weka Sidha Bhagawan, [Link]

Daun kersen (Muntingia calabura L.) merupakan salah satu tanaman yang
berpotensi dalam bidang pengobatan, salah satunya sebagai antibakteri dalam pengobatan
antijerawat. Daun kersen mengandung senyawa flavonoid, saponin dan tanin. Pada
penelitian ini dilakukan pengembangan formulasi berupa mikroemulsi ekstrak daun
kersen dalam meningkatkan kemampuan obat penetrasi kedalam kulit. Tujuan penelitian
ini adalah untuk mengetahui karakteristik fisik mikroemulsi ekstrak daun kersen serta
untuk mengetahui formula yang baik dalam pengujian aktivitas antibakteri mikroemulsi
ekstrak daun kersen terhadap Staphylococcus epidermidis.
Pembuatan mikroemulsi dilakukan dengan menggunakan kombinasi surfaktan
tween 80 dan span 80, PEG 400, IPM, air bebas CO2, serta ekstrak daun kersen dengan
konsentrasi 5%, 10% dan 15% dengan kecepatan pengadukan ±1000 rpm pada suhu 50oC
selama 30 menit. Kemudian dilakukan evaluasi karakteristik terhadap mikroemulsi
meliputi uji organoleptik, pH, pemeriksaan tipe emulsi, pemeriksaan ukuran partikel,
stabilitas freeze-thaw pada suhu 4oC dan 40oC dan uji kelembapan sediaan. Selanjutnya
uji aktivitas antibakteri dilakukan secara in-vitro menggunakan metode difusi sumuran.
Analisis data dilakukan dengan menggunakan One-Way ANOVA pada taraf kepercayaan
95%.
Hasil penelitian iniditunjukkan bahwa mikroemulsi ekstrak daun kersen memiliki
karakteristik yang baik pada F2 dengan konsentrasi ekstrak daun kersen 10% dengan
warna kuning jernih kecoklatan, bau khas daun kersen, memiliki nilai pH 5,94 dibuat
dengan tipe minyak dalam air (m/a), memiliki ukuran partikel 15,01 nm dengan nilai
polidispersitas indeks 0,22<0,5, uji kelebapan kadar air 59,13%. Serta dapat menghambat
pertumbuhan Staphylococcus epidermidis dengan aktivitas antibakteri sebesar 8,34 ± 0,13
maka dapat dikategorikan sedang serta pengujian aktivitas antibakteri menggunakan
cendro xitrol sebagai kontrol positif memiliki aktivitas sebesar 16,9 ± 0,51 dengan
kategori kuat.

Kata Kunci: Mikroemulsi, Ekstrak Daun Kersen (Muntingia calabura L.),

Antibakteri, Staphylococcus epidermidis,

xv
 12

ABSTRACT

Wulandari, S. A. R. 2017. Formulation and Antibacterial Activity Test Staphylococcus

epidermidis as microemulsion preparation of cherry leaf extract (Muntingia
calabura L.) using the oil phase Isopropyl Myristate (IPM).
Advisor : (I) RahmiAnnisa, [Link]
(II)WekaSidhaBhagawan, [Link]

Cherry leaf (Muntingia calabura L.) is one of the potential plants in the field of
treatment, one of them as antibacterial in the treatment of anti-acne. Cherry leaves contain
flavonoid compounds, saponins and tannins. This research is about the formulation of
microemulsion of cottage leaf extract in improving penetration drug capability into skin.
The purpose of this research is to know microemulsion physic characteristic of cherry leaf
extract and to know good formula in testing of microbial activity of cherry leaf extract to
Staphylococcus epidermidis.
The preparation of microemulsion was done by using combination of surfactant
tween 80 and span 80, PEG 400, IPM, CO2 free water, and cherry leaf extract with
concentration of 5%, 10% and 15% with stirring speed ± 1000 rpm at 50 oC for 30
minutes. Then the characteristic evaluation of microemulsion includes organoleptic test,
pH, emulsion type examination, particle size examination, freeze-thaw stability at 4oC
and 40oC and moisture test. Furthermore, the antibacterial activity test was performed in-
vitro using the diffusion method of wells. Data analysis was performed using One-Way
ANOVA at 95% confidence level.
The results of this study showed that the microemulsion of cherry leaf extract had
good characteristic on F2 with the concentration of 10% cherry leaf extract with clear
brownish yellow color, peculiar leaf of cherry leaf, has pH value 5,94 made with type of
oil in water (m/a) has a particle size of 15.01 nm with an index polydispersity value of
0.22 <0.5, moisture content test of 59.13% and can inhibit the growth of Staphylococcus
epidermidis with antibacterial activity of 8.34 ± 0.13. The microbial activity using cendo
xitrol as a positive control has an activity of 16.9 ± 0.51 with strong category.

Keywords: Microemulsion, Cherry Leaf Extract (Muntingia calaburaL.), Antibacterial,

Staphylococcus epidermidis,

xvi
 ‫‪13‬‬

‫الملخص‬

‫ووالندر‪ ,‬س‪ .‬أ‪ .‬ر‪ .7102 .‬صياغة ومضاد للبكرتيا النشاط اختبار املكورات العنقودية البشروية كما إعداد مستحلب من استخراج‬
‫أوراق الكرز (منتينغيا كاالبورا)باستخدام ايزوبروبيل مرييستات مرحلة النفط‪.‬‬
‫املسرف ‪ )0( :‬رمحي النساء املاجستري‬
‫(‪ )7‬ويكا صيدا باغوان املاجستري‬
‫ورقة الكرز) منتينغيا كاالبورا ( هي واحدة من النباتات احملتملة يف جمال العالج‪ ،‬واحد منهم كما مضاد للجراثيم يف عالج مكافحة‬
‫حب الشباب‪ .‬أوراق الكرز حتتوي على مركبات الفالفونويد‪ ،‬الصابونني والعفص‪ .‬يف هذا البحث‪ ،‬صياغة ميكروكولسيون من‬
‫مستخلص أوراق الكوخ يف حتس ني القدرة على اخرتاق املخدرات يف اجللد‪ .‬والغرض من هذا البحث هو معرفة علم الكيمياء‬
‫الكهرومغناطيسية من مستخلص نبات الكرز ومعرفة صيغة جيدة يف اختبار النشاط امليكرويب ملستخلص نبات الكرز إىل املكورات‬
‫العنقودية البشروية‪.‬‬
‫مت حتضري املستحضر الدقيق باستخدام مزيج من السطحي توين ‪ 01‬و ‪ 01‬و بيج ‪ 011‬و إيب و ‪ CO2‬جمانا و مستخرج أوراق‬
‫الكرز مع تركيز ‪ ٪5‬و ‪ ٪01‬و ‪ ٪05‬مع سرعة التحريك ‪ 0111 ±‬دورة يف الدقيقة عند ‪oC51‬ل ‪ 01‬دقيقة‪ .‬مث تقييم مميزة من‬
‫ميكروولزيون يشمل اختبار احلسية‪ ،‬ودرجة احلموضة‪ ،‬نوع مستحلب الفحص‪ ،‬فحص حجم اجلسيمات‪ ،‬جتميد ذوبان اجلليد‬
‫االستقرار يف ‪oC0‬و ‪ oC01‬واختبار الرطوبة‪ .‬وعالوة على ذلك‪ ،‬مت إجراء اختبار النشاط املضاد للبكترييا يف املخترب باستخدام‬
‫طريقة انتشار اآلبار‪ .‬مت إجراء حتليل البيانات باستخدام أنوفا يف اجتاه واحد عند مستوى الثقة ‪.٪55‬‬
‫وأظهرت نتائج هذه الدراسة أن مستحلب مستخلص نبات كريسني كان له خاصية جيدة على ‪ F2‬مع تركيز مستخلص أوراق الكرز‬
‫بنسبة ‪ ٪01‬مع لون أصفر بين غامق‪ ،‬ورقة غريبة من أوراق كريسني‪ ،‬وقد قيمته الرقم اهليدروجيين ‪ 5،50‬مصنوع من نوع الزيت يف‬
‫املاء (م ‪ /‬أ) لديه حجم اجلسيمات من ‪ 05.10‬نانومرت مع قيمة بوليديسبريزييت مؤشر ‪ ،1.5< 1.77‬اختبار حمتوى الرطوبة من‬
‫‪ . ٪55.00‬وميكن أن متنع منو املكورات العنقودية البشروية مع النشاط املضاد للبكترييا من ‪ 1.00 ± 0.00‬مث ميكن تصنيفها‬
‫فضال عن اختبار النشاط املضاد للبكترييا باستخدام زيرتول سيندرو كسيطرة إجيابية لديها نشاط ‪ 1.50 ± 0..5‬مع فئة قوية‪.‬‬

‫الكلمات املفتاح‪ :‬ميكرومولزيس‪ ،‬كريسني ليف مقتطف (منتينغيا كاالبورا)‪ ، L.‬مضاد للجراثيم‪ ،‬املكورات العنقودية البشروية‪،‬‬

‫‪xvii‬‬
 BAB I

PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Indonesia merupakan negara yang kaya akan berbagai jenis tumbuhan

serta warisan dari nenek moyang berupa kemampuan untuk memanfaatkannya

menjadi tumbuhan obat. Obat tradisional yang berasal dari tumbuhan memiliki

efek samping yang lebih rendah di bandingkan dengan obat-obatan kimia.

Kecenderungan gaya hidup yang “back to nature” saat ini membuktikan bahwa

hal yang tradisional bukanlah sesuatu yang ketinggalan zaman. Banyak penelitian

tentang tumbuhan yang berkhasiat sebagai obat, telah dilakukan dalam dunia

kedokteran modern (Muhlisah, 2000). Salah satu tumbuhan yang dapat

dimanfaatkan di bidang pengobatan adalah daun kersen (Muntingia calabura L).

Tumbuhan kersen adalah jenis tumbuhan neotropik yaitu suatu jenis tumbuhan

yang tumbuh baik didaerah tropis, seperti Indonesia yang memiliki curah hujan

yang cukup tinggi, serta didukung dengan adanya sinar matahari disepanjang

tahun yang menyebabkan proses fotosintesis berlangsung dengan baik. Hal ini

sesuai dengan Firman Allah SWT dalam Surat Thaha (20): 53

‫ك لَ ُكمأ فِيهَا ُسب ُٗٗل َوأَن َز َل ِمنَ ٱل َّس َمآ ِء َمآءٗ فَأ َ أخ َر أجنَا‬ َ ‫ٱلَّ ِذي َج َع َل لَ ُك ُم أٱۡلَ أر‬
َ َ‫ض َم أه ٗدا َو َسل‬

ٖ َ‫بِ ِٓهۦ أَ أز َٰ َو ٗجا ِّمن نَّب‬

٣٥ ‫ات َشتَّ َٰى‬

Allah SWT menurunkan air hujan dan menumbuhkan berjenis-jenis dari

tumbuh-tumbuhan yang bermacam-macam. Setiap tumbuh-tumbuhan yang

diciptakan oleh Allah segalanya diguanakan untuk kemaslahatan umat manusia

1
 2

serta dapat dimanfaatkan hasilnya untuk memenuhi kebutuhan manusia serta

lingkungan.

ٍ ‫ (أَ ْز َواجً ا ِم ْن نَبَا‬memiliki makna jenis yang bermacam-macam

Lafadz )‫ت َشتَّ َٰى‬

dari tumbuhan. Kata ‫ أَ ْز َواجً ا‬tersebut mengandung arti tumbuhan yang baik dari

berbagai jenis tumbuhan. Lafadz (‫“ ) َشتَّ َٰى‬bermacam-macam” ia adalah sifat (na’ad)

untuk lafadz (‫“ )أَ ْز َواجًا‬berjenis-jenis”. Pengertian dari firman Allah SWT (‫ت َشتَّ َٰى‬
ٍ ‫)نَبَا‬

adalah jenis yang bermacam-macam bentuk, ukuran, manfaat, warna, bau, dan

rasanya (Asy-Syanqithi, 2007). Tumbuh-tumbuhan yang hidup di dalam bumi ini

sangat beranekaragam jenisnya bahkan bentuk, ukuran, warna, bau, rasa dan

manfaatnya dengan diperantara air hujan. Dari air hujan tersebut mengurai jenis

tumbuhan dengan beberapa tingkatan mulai dari tingkat rendah yaitu tumbuhan

yang tidak jelas bagian akar, batang, daunnya sampai ketingkat tinggi yaitu

tumbuhan yang dapat dibedakan secara jelas bagian daun, batang, dan akarnya

(Savitri, 2008).

Pengobatan dari Nabi Muhammad SAW memang berbeda dengan ilmu

medis para dokter pada umumnya, Rosulullah SAW pernah menyebutkan bahwa

tumbuhan herbal baik untuk digunakan sebagai obat. Beberapa tumbuhan herbal

yang sering digunakan Rosululloh SAW untuk menyembuhkan beberapa penyakit

antara lain jintan hitam, delima, kurma, bawang putih dan berbagai jenis makanan

lainnya (Barazing, 2007).

Tumbuhan yang dapat digunakan sebagai obat berbagai penyakit

merupakan anugerah dari Allah SWT yang harus dipelajari dan dimanfaatkan

seperti halnya sabda Nabi Muhammad SAW dalam HR. Ibnu Majah:
 3

‫ِا‬ ‫ول اللا ِه َ ا ا ِ ا‬

ً‫صلى اللهُ َعلَْيه َو َسل َم َما أَنْ َزَل اهللُ َداءً إال أَنْ َزَل لَهُ َش َفاء‬ َ ‫ال َر ُس‬
َ َ‫ق‬

“Rasulullah SAW bersabda: “Allah tidak menurunkan suatu penyakit kecuali

menurunkan obat baginya” (HR. Ibnu Majah – 3430)

Hadis yang sama juga di riwayatkan oleh Imam Muslim dalam kitab

shohihnyab dari hadits Abu Zubair yang diriwayatkan dari Jabir bin Abdullah

bahwa Nabi Muhammad SWA bersabda:

ِ ‫ ب رأَ بِِإ ْذ ِن‬،‫ فَِإ َذا أَصاب الداواء الدااء‬،‫لِ ُك ِّل د ٍاء دواء‬
‫اهلل َعاز َو َج ال‬ ََ َ ُ َ َ َ ٌ ََ َ

Atinya: “Setiap penyakit ada obatnya. Jika obat yang tepat diberikan, dengan

izin allah penyakit itu akan sembuh” (HR. Ahmad bin Hakim) (Al-Jauziyah,

2008).

Kedua hadist tersebut menerangkan bahwa Allah menciptakan penyakit

(‫ )دَا ٍء‬beserta obatnya (‫)د ََواء‬. Sakit yang diderita manusia, datangnya dari Allah

SWT dan Allah pula yang akan memberikan kesembuhan bagi orang yang sakit.

Hadist tersebut juga memberikan pelajaran agar kita selalu memiliki keyakinan

tentang segala penyakit yang kita derita pastilah ada obatnya. Oleh karena itu

tergantung bagaimana usaha manusia untuk sembuh dari suatu penyakit, sehingga

tugas kita adalah mencari alternatif pengobatan yang dapat digunakan untuk

menyembuhkan penyakit, salah satunya dengan menggunakan alternatif

pengobatan herbal. Allah telah menciptakan bumi beserta isinya untuk

dimanfaatkan, salah satunya yaitu dengan memanfaatkan bahan alam untuk diteliti

sehingga dapat memberikan manfaat.

 4

Bahan alam saat ini semakin marak digunakan dalam pengobatan karena

bahan alam dinilai memiliki efek samping yang lebih rendah dibanding obat

sintesis atau kimia, harganya lebih terjangkau, dan bahan bakunya mudah

diperoleh. Apabila dipandang dari dari sisi bahan alam, kini banyak kosmetik

maupun obat-obatan yang menggunakan bahan alam sebagai bahan aktif dari

produk yang akan dibuat, hal ini terus berkembang dengan seiringnya konsep

“back to nature” yang mana memanfaatkan tumbuhan kearifan lokal khususnya di

Indonesia yang memiliki tumbuhan berpotensi dalam pengobatan dan kosmetik

(Muhlisah, 2000).

Salah satu tumbuhan yang memiliki potensi dalam hal pengobatan yakni

kersen (Muntingia calabura L.) Daun kersen diketahui mengandung senyawa

flavonoid, saponin, steroid, triterpenoid dan tanin Redhamahsya (2011).

Berdasarkan penelitian sebelumnya menurut Zakaria et al., 2006 daun kersen

memiliki aktivitas antibakteri, antioksidan dan antipoliferatif.

Jerawat atau acne vulgaris merupakan suatu penyakit kulit yang ada pada

permukaan kulit, wajah, leher, dada dan punggung. Terjadi peradangan di kulit

akibat kelenjar minyak pada kulit terlalu aktif sehingga pori-pori kulit akan

tersumbat oleh timbunan lemak yang berlebihan. Jika timbunan tersebut

bercampur dengan keringat, debu, dan kotoran lain, maka akan menyebabkan

timbunan lemak dengan bintik hitam di atasnya yang disebut komedo. Jika pada

komedo itu terdapat infeksi bakteri, maka terjadilah peradangan yang dikenal

dengan jerawat yang ukurannya bervariasi mulai dari ukuran kecil sampai ukuran

besar serta berwarna merah, kadang-kadang bernanah serta menimbulkan rasa

 5

nyeri (Djajadisastra, 2009). Peradangan jerawat dipicu oleh bakteri

Propionibacterium acnes, Staphylococcus epidermis dan S. aureus (Mitsui, 1997;

Wasitaatmadja, 1997).

Pengobatan jerawat di klinik kulit biasanya menggunakan antibiotik yang

dapat menghambat inflamasi dan membunuh bakteri, contohnya neomisin,

eritromisin, doksisiklin, dan klindamisin. Namun obat-obat ini memiliki efek

samping dalam penggunaaannya sebagai anti jerawat antara lain iritasi, sementara

penggunaan antibiotika jangka panjang selain dapat menimbulkan resistensi juga

dapat menimbulkan kerusakan organ dan imuno hipersensitivitas (Djajadisastra,

2009). Sehingga perlu dilakukan pengobatan dengan menggunakan bahan alam

yang relatif aman serta harganya terjangkau, salah satunya tumbuhan kersen.

Berdasarkan penelitian Handayani (2016) ekstrak etanol daun kersen

memiliki aktivitas untuk menghambat pertumbuhan bakteri S. epidermidis sebagai

anti jerawat pada konsentrasi 1ppm, 3ppm, 5ppm, 9ppm. Berdasarkan penelitian

tersebut dapat dilihat bahwa ekstrak etanol daun kersen lebih efektif dalam

menghambat bakteri S. epidermidis pada konsentrasi 9ppm dengan memiliki

diameter hambat yang besar 14,00 mm.

Salah satu pengembangan sediaan antibakteri dari daun kersen yang

diharapkan dapat memudahkan masyarakat dalam penggunaanya yakni dalam

bentuk sediaan topikal yang saat ini banyak dikembangkan dalam industri farmasi,

kosmetik, serta pengembangan dalam sistem penghantaran obat secara

transdermal yang dapat menjaga kestabilan dan aktivitas daun kersen dalam

sediaan antibakteri yakni mikroemulsi. Mikroemulsi dalam penggunaan secara

 6

topikal lebih mudah menembus ke dalam kulit karena memiliki ukuran droplet

yang kecil dan kestabilan lebih baik dibandingkan emulsi (Candra & Sharma,

2008).

Mikroemulsi merupakan salah satu sistem penghantaran obat yang

berpotensi untuk meningkatkan penetrasi obat dalam menembus lapisan epidermis

kulit, mikroemulsi tersusun atas fase minyak, fase air yang dapat disatukan oleh

surfaktan dan kosurfaktan. Surfaktan dan kosurfaktan digunakan sebagai

pembawa atau pelarut sehingga dapat meningkatkan stabilitas dan kelarutannya

(Arikunto et al., 1996). Karakteristik mikroemulsi antara lain stabil secara

termodinamik yang distabilkan oleh antarmuka dari molekul surfaktan dan

kosurfaktan, jernih, transparan atau translucent, serta memiliki viskositasnya

rendah, penghantaran transdermal, kontak mikroemulsi dengan kulit lebih lama,

bahan-bahan tambahan dapat disesuaikan dengan target obat sehingga tingkat

permeasi obat dapat ditingkatkan, karena surfaktan dan kosurfaktan dapat dengan

mudah disesuaikan dalam mikroemulsi sehingga dapat mengurangi barrier difusi

stratum corneum yang berperan sebagai enhancer (Kogan, 2007)

Fase minyak yang digunakan adalah Isopropil myristate (IPM), dalam

sediaan sistem mikroemulsi, IPM dipilih karena merupakan sediaan topikal

sebagai peningkat penetrasi dalam formulasi transdermal, bahan yang tidak toksik

dan tidak mengiritasi kulit sehingga digunakan secara luas pada bahan-bahan

kosmetik sehingga dalam penghantar obat pada sediaan transdermal dibutukan

sebagai bahan pembawa sediaan obat diantaranya sebagai peningkat penetrasi

(Nandi, 2013).
 7

Tujuan akhir penelitian ini dilakukan untuk mengetahui sediaan

mikroemulsi ekstrak daun kersen menggunakan kombinasi surfaktan tween 80 dan

span 80, kosurfaktan PEG 400 dan fase minyak isopropyl mirystate. Diharapkan

dapat mengoptimalkan pengaruh ekstrak daun kersen (Muntingia calabura L.)

dalam menghambat bakteri, salah satunya dengan bakteri Staphylococcus

epidermidis agar memenuhi kualitas fisik yang baik sehingga dapat diterima oleh

masyarakat dan berpotensi sebagai bahan pembawa sediaan obat.

1.2 Rumusan Masalah

Berdasarkan latar belakang di atas, maka dapat diperoleh rumusan

masalah sebagai berikut:

1. Bagaimana karakteristik fisik sediaan mikroemulsi ekstrak daun kersen

(Muntingia calabura) ?

2. Bagaimana pengaruh sediaan mikroemulsi ekstrak daun kersen dengan

konsentrasi 5%, 10%, 15% terhadap aktivitas bakteri Staphylococcus

epidermidis ?

3. Berapa konsentrasi konsentrasi terbaik sediaan mikroemulsi ekstrak daun

kersen yang memberikan karakteristik fisik dan aktivitas antibakteri

Staphylococcus epidermidis.
 8

1.3 Tujuan

1.3.1 Tujuan Umum

Secara umum penelitian ini bertujuan untuk mengetahui aktivitas anti

bakteri mikroemulsi ekstrak etanol 96% daun kersen (Muntingia calabura)

terhadap bakteri Staphylococcus epidermidis sebagai anti jerawat

1.3.2 Tujuan Khusus

1. Mengetahui karakteristik fisik sediaan mikroemulsi ekstrak daun kersen

(Muntingia calabura) sebagai anti jerawat.

2. Mengetahui pengaruh sediaan mikroemulsi ekstrak daun kersen terhadap

aktivitas bakteri Staphylococcus epidermidis

3. Mengetahui berapa konsentrasi terbaik dari sediaan mikroemulsi ekstrak

daun kersen (5%, 10%, 15%)

1.4 Manfaat Penelitian

Penelitian ini diharapkan dapat memberikan manfaat secara akademik

maupun manfaat praktis:

1. Dapat memberikan wawasan dan pengetahuan serta memberikan

pengalaman langsung pada peneliti dalam melakukan penelitian.

2. Dapat dijadikan acuan untuk pengembangan sediaan farmasi dengan

sistem mikroemulsi selanjutnya.

3. Dapat memberikan informasi tentang sediaan mikroemulsi ekstrak daun

kersen (Muntingia calabura) sebagai anti jerawat terhadap bakteri

Staphylococcus epidermidis.
 9

4. Sebagai sarana aplikasi dan penerapaan didiplin ilmu dalam bidang

farmasetika khususnya dalam alternatif pembuatan formula sistem

mikroemulsi

1.5 Batasan masalah

Batasan masalah pada penelitian ini adalah :

1. Serbuk simplisia daun kersen (Muntingia calabura L.) di beli dari Balai

Tanaman Materia Medika Batu

2. Penelitian ini membahas tentang karateristik fisik dari sistem mikroemulsi

yang meliputi uji fisik (organoleptis, pH, pemeriksaan tipe emulsi, ukuran

partikel, uji kelembapan, uji stabilitas Freeze-thaw)

3. Melakukan uji aktivitas bakteri terhadap Staphylococcus epidermidis

dengan menggunakan metode difusi sumuran

 10

BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Tumbuhan Kersen (Muntingia calabura L.)

2.1.1 Deskripsi Tumbuhan Kersen

Tumbuhan kersen (Muntingia calabura) adalah pohon asli Amerika

Tengah. Kersen dapat tumbuh baik di tanah yang buruk serta dapat dijumpai

disamping-samping jalan. Banyak sekali tersebar Tumbuhan ini khususnya di

Indonesia tetapi kersen dapat tahan oleh kekeringan tetapi tidak toleran terhadap

kondisi garam (Chin, 1989 dalam Pradeepkumar et al., 2011).

2.1.2 Taksonomi Kersen (Muntingia calabura) :

Taksonomi kersen (Muntingia calabura) adalah sebagai berikut (Steenis,

2003):

Kingdom : Plantae

Sub Kingdom : Tracheobionta

Super Devisi : Spermatophyta

Divisi : Magnoliophyta

Kelas : Magnoliopsida

Sub Kelas : Dilleniidae

Bangsa : Malvales

Suku : Elaeocarpaceae

Marga : Muntingia

Jenis : Muntingia calabura L.

10
 11

(A) (B) (C)

Gambar 2.1 Gambar Tanaman Kersen (Muntingia calabura L.); daun (A), bunga
(B), buah (C) ([Link])

2.2 Kandungan Kimia daun Kersen

Kandungan kimia daun kersen yang merupakan butir-butir kecil yang

tumbuh dalam sistem jaringan tumbuhan, ternyata sudah diterangkan dalam Al-

Quran surat An-Nahl (16): 13

‫ك َآليَةً لَِق ْوٍم يَ اذ اك ُرو َن‬ ِ ِ ِ ‫وما َذرأَ لَ ُكم ِيف ْاْلَر‬
َ ‫ض ُمُْتَل ًفا أَلْ َوانُهُ ۗ إِ ان ِيف ََٰذل‬ ْ ْ َ ََ

Artinya:“Dan Dia (menundukkan pula) apa yang Dia ciptakan untuk kamu

dibumi ini dengan berlain-lain macamnya. Sesungguhnya pada yang demikian itu

benar-benar terdapat tanda (kekuasaan Allah) bagi kaum yang mengambil

pelajaran”

Menurut Al Qurthubi (2009) makna dari kata menundukkan adalah Allah

SWT mengendalikan semua yang telah diciptakannya, baik manusia, hewan dan

tumbuh-tumbuhan. Ayat tersebut menjelaskan bahwa semua ciptaan Allah SWT

memiliki berbagai macam bentuk dan ragam serta masing-masing memiliki

manfaat yang bermacam-macam. Hal ini menunjukkan bahwa tumbuhan-

tumbuhan yang diciptakan oleh Allah dibumi ini dapat dimanfaatkan oleh

manusia melalui pengamatan dan penelitian terhadap manfaat yang terkandung

 12

didalam berbagai macam tumbuhan yang dapat berguna bagi manusia khususnya

sebagai pengobatan. Kandungan senyawa kimia dalam tumbuh-tumbuhan salah

satunya kandungan senyawa kimia dari daun kersen menurut penelitian yang

dilakukan oleh (Redhamahsya, 2011) menjelaskan bahwa simplisia daun kersen

positif mengandung polifenol, tanin, flavonoid, monoterpenoid-seskuiterpenoid,

steroid-triterpenoid, dan saponin. Sedangkan setelah dilakukan ekstraksi daun

kersen positif mengandung alkaloid, polifenol, kuinon, tanin, flavonoid,

monoterpenoid, seskuiterpenoid, steroid-triterpenoid, dan saponin pada saat uji

penapisan fitokimia. Hasil penelitian sebelumnya pada pengujian fitokimia

menurut Arum et al., (2012) didalam daun kersen terdapat adanya flavonoid,

triterpenoid, alkaloid, saponin, dan tanin. Berdasarkan uji fitokimia yang telah

dilakukan tersebut menandakan adanya flavonoid, tannin mampu menghambat

aktivitas bakteri.

2.2.1 Flavonoid

Flavonoid merupakan senyawa polifenol yang umum ditemukan di alam

dan dikategorikan, menurut struktur kimianya, anatara lain flavonols, flavon,

flavanone, isoflavon, katekin, antosianidin dan chalcones. Manfaatnya berfungsi

menjaga pertumbuhan normal, pengaruh infeksi dan kerusakan. Flavonoid telah

dikenalkan sebagai anti bakteri, anti karsinogenik, anti alergi, anti tumor serta

digunakan untuk pengobatan tradisional (Harbone, 1998). Flavonoid termasuk

senyawa polar, maka flavonoid umumnya larut dalam pelarut etanol, metanol,

butanol, aseton, dimetilformamida, air dan lain-lain. Adanya gula yang terikat

pada flavonoid cenderung menyebabkan flavonoid lebih mudah larut dalam air.
 13

OH

OH

HO
O

OH

OH O

Gambar 2.2 Struktur kimia flavonoid

Mekanisme yang dimiliki oleh flavonoid dalam memberikan efek

antibakteri, bekerja dengan cara merusak dinding sel bakteri. Gunawan, dkk

(2008) mekanisme kerja flavonoid terjadi akibat reaksi antara senyawa lipid dan

asam amino dengan gugus alkohol pada flavonoid, sehingga dinding sel

mengalami kerusakan dan mengakibatkan senyawa tersebut dapat masuk kedalam

inti selbakteri. Senyawa ini kemudian akan bereaksi dengan DNA pada inti sel

bakteri. Akibat perbedaan kepolaran antara lipid dan penyusun DNA dengan

gugus alkohol pada senyawa flavonoid akan terjadi reaksi sehingga struktur lipid

dari DNA bakteri sebagai inti sel bakteri akan mengalami kerusakan dan lisis

(Cushnie et al., 2005).

Senyawa flavonoid yang terdapat didalam kandungan daun kersen dapat

berikatan dengan subunit GyrB (DNA gyrase subunit B) pada DNA gyrase

Staphylococcus dan menghambat aktivitas enzim ATPase. Ikatan dengan enzyme

dibuktikan dengan mengisolasi DNA gyrase Staphylococcus (Cushnie et al.,

2005).

2.2.2 Tanin

Tanin adalah senyawa metabolit sekunder yang terdapat pada beberapa

[Link] merupakan senyawa turunan polifenol yang dapat membentuk

 14

senyawa kompleks dengan makromolekul lain, pada umumnya senyawa tanin

larut dalam air karena bersifat polar. Mekanisme kerja tanin sebagai antibakteri

dapat mengganggu permeabilitas sel karena kemampuannya dapat mengkerutkan

dinding sel atau membran sel. Tanin mampu menginaktivasi enzim, dan protein

transport pada membran sel. Beberapa enzim yang dihasilkan mikroba mampu

diinhibisi oleh astrigent yang dimiliki oleh tanin (Adi, Winarsih dan Hilmi, 2010).

Gambar 2.3 Struktur kimia tanin

2.2.3 Saponin

Saponin adalah glikosida triterpen yang merupakan senyawa aktif

permukaan dan bersifat seperti sabun yang apabila dikocok kuat-kuat akan

menimbulkan busa (Harbone, 1987), pada umunya, saponin bereaksi netral (larut

dalam air), beberapa ada yang bereaksi dengan asam (sukar larut dalam air) dan

sebagian kecil ada yang bereaksi dengan basa. Mekanisme kerja saponin dalam

menghambat antibakteri adalah mekanisme penghambatan dengan cara

membentuk senyawa kompleks dengan membrane sel melalui ikatan hydrogen

(Cannell, 1998), sehingga dapat merusak permeabilitas dinding sel serta sel

mengakibatkan kematian (Noer, dkk 2006).

 15

Gambar 2.4 Struktur kimia saponin

2.3 Nama Daerah

Jawa: talok, kersem, keres, kersen (sunda). Jakarta: ceri. Lumajang: baleci.

Nama-nama lainnya dibeberapa negara adalah: Cpaulin, Jamaica, Cherry

(inggris), Datiles, Aratiles, Manzanitas (Filipina), Mat sam (Vietnam), Khoom

somz, Takhob (Laos), Takhob farang (Thailand), Krakhob barang (kamboja), dan

kerukup siam (Malaysia).

2.4 Deskripsi Tumbuhan

Pada umunya, buah tumbuhan kersen ini tunggal, berseling, bulat telur

bentuk lanset, panjang 6-10 cm, ujung dan pangkal runcing, tepinya bergerigi,

berbulu, sistem pertulangan menyirip, tidak simetris, hijau, mudah layu.

Bunganya berisi 1-3-5 kuntum, terletak di ketiak agak disebelah atas tumbuhnya

daun, bertangkai panjang, berkelamin dua dan berbilangan 5, kelopak berbagi

dalam, taju meruncing bentuk benang, berambut halus, mahkota bertepi rata,

bundar telur terbalik dan putih tipis. Benang sari berjumlah banyak, 10 sampai

lebih dari 100 helai.

 16

2.5 Habitat Tumbuhan Kersen

Kersen merupakan spesies yang dapat hidup ditanah tandus, dapat

bertahan pada kondisi asam, basa, maupun kekeringan, namun tidak tahan

terhadap garam, serta tumbuh baik pada pH 5,5-6,5 dan dapat hidup sampai

ketinggian 1000m diatas permukaan laut. Sebagai tumbuhan perintis, kersen dapat

memperbaiki kondisi tanah dan menjadikannya dapat ditumbuhi oleh tumbuhan

lain. Di Asia Tenggara, kersen merupakan pohon yang kebanyakan tumbuh

disamping-samping jalan, terutama di daerah kering seperti Jawa Timur (Verheij,

1992)

2.6 Kegunaan/Khasiat Tumbuhan Kersen

Daun kersen dalam pengobatan dapat berkhasiat sebagai obat batuk,

antitumor, antibakteri, antioksidan, antiproliferatif, antihiperglikemik, antiseptik

dan dapat mengatasi penyakit gula darah (Zakaria et al., 2011). Buah kersen dapat

dimanfaatkan sebagai obat sakit kuning (Perry, 1980). Bagian tumbuhan ini telah

digunakan sebagai obat-obatan didaerah Asia Tenggara dan didaerah bagian tropis

benua Amerika. bunga kersen dapat digunakan untuk mengobati sakit kepala,

antiseptik, antikejang dan diaporetik. (Arbealaez, 1975).

2.7 Kulit

Kulit sebagai lapisan pembungkus tubuh senantiasa mengalami pngaruh

lingkungan luar, baik berupa sinar matahari, iklim maupun faktor-faktor kimiawi

(Rostamailis, 2005). Struktur kulit terdiri dari tiga lapisan yaitu kulit ari
 17

(epidermis), sebagai lapisan yang paling luar, kulit jangat (dermis) dan jaringan

penyambung di bawah kulit. Sebagai gambaran, penampang lintang dan

visualisasi struktur lapisan kulit tersebut.

2.7.1 Struktur Kulit

Kulit memiki beberapa lapisan. Lapisan terluar disebut epidermis, lapisan

dibawah epidermis disebut dermis. Lapisan ini mengandung pembuluh darah,

folikel rambut, kelenjar keringat, dan kelenjar sebaseus.

Gambar 2.3 Struktur Kulit (Shailesh, 2008)

a. Epidermis

Epidermis merupakan lapisan terluar kulit yang kira-kira memiliki

ketebalan hingga 150 mm. Sel dari lapisan bawah akan menuju epidermis

selama siklus hidup dan menjadi kulit mati pada korneum (Shailesh, 2008)

b. Dermis

Dermis merupakan lapisan kedua dari kulit. Dermis terdiri dari dua

lapisan yaitu bagian atas, pars papilaris dan bagian bawah retikularis. Baik

pars papilaris maupun pars retikularis terdirdari serabut-serabut yaitu

 18

serabut kolagen, serabut elastis dan serabut retikulus (Tranggono dan

Latifah, 2007)

c. Subkutan (Hypodermis)

Hypodermis atau lapisan lemak subkutan merupakan lapisan kulit

yang terletak paling dalam. Lapisan ini merupakan kumpulan dari sel

lemak yang berfungsi dalam penyimpanan energi, pengaturan temperatur,

dan pelindung mekanik tubuh (Lund, 1994).

2.7.2 Mekanisme Absorbsi Perkutan

Absorbsi perkutan adalah absorbsi obat yang dimasukkan ke dalam kulit

yakni dalam stratum korneum berlanjut dengan obat menembus lapisan

dibawahnya sehingga obat tersebut masuk dan disirkulasikan dalam aliran darah.

Mekanisme yang terjadi dalam absorbsi melalui stratum korneum antara lain;

a. Mekanisme Transepidermal

Mekanisme ini terjadi pada jalur pertama penetrasi obat dalam permukaan

epidermis, karena permukaan epidermis lebih luas dibandingkan lapisan kelenjar

keringat. Proses dalam lapisan stratum korneum memiliki dua jalur yakni, jalur

transeluler dan jalur intraseluler

b. Mekanisme Transapendageal

Mekanisme ini terjadi pada jalur penetrasi dari obat melalui folikel rambut

dan kelenjar keringat karena terdapat pori-pori diantaranya sehingga obat tersebut

dapat berpenetrasi
 19

2.8 Ekstraksi Daun Kersen

Ekstraksi merupakan pemisahan senyawa aktif dari tumbuhan ataupun

jaringan hewan dengan menggunakan pelarut yang selektif sesuai prosedur

ekstraksi (Depkes RI, 1995). Metode ekstraksi yang biasa digunakan adalah

maserasi, perkolasi dan soxhlet (Peres et al., 2006; Teddy, 2011). Selain metode

tersebut, terdapat metode ekstraksi baru yang lebih efisien, diantaranya adalah

metode ekstraksi ultrasonik.

Ultrasonik merupakan energi yang dihasilkan gelombang suara dengan

frekuensi di atas deteksi telinga manusia, yaitu 20 kHz sampai 500 MHz

(Thompson & Doraiswamy, 1999 dalam Teddy, 2011). Ekstraksi dengan

menggunakan gelombang ultrasonik dapat menyebabkan gangguan fisik pada

dinding maupun membran sel biologis serta penurunan ukuran partikel. Efek

tersebut menyebabkan penetrasi pelarut lebih baik ke dalam sel dan meningkatkan

laju perpindahan massa pada jaringan serta menfasilitasi perpindaan senyawa aktif

ke pelarut (Novak et al., 2008; Teddy, 2011). Pemilihan pelarut merupakan salah

satu faktor yang penting dalam proses ekstraksi. Jenis pelarut yang digunakan

dalam proses ekstraksi mempengaruhi jenis komponen aktif bahan yang terekstrak

karena masing-masing pelarut mempunyai selektifitas yang berbeda untuk

melarutkan komponen aktif dalam bahan.

Pelarut yang digunakan dalam proses ekstraksi daun kersen (Muntingia

calabura L.) adalah pelarut etanol. Pelarut etanol merupakan pelarut universal

golongan alkohol yang mudah melarutkan senyawaan yang sesuai dengan cukup

cepat karena sifat kepolarannya yang tinggi, memiliki titik didih yang cukup
 20

rendah sehingga dapat mudah diuapkan tanpa menggunakan suhu yang tinggi,

bersifat inert, serta memiliki harga yang terjangkau. Selain itu, ketoksikannya

rendah daripada pelarut alkohol lainnya yakni memiliki nilai LC50 7060 mg/kg

(Guenther, 2006).

Berdasarkan penelitian Rina et al., (2013) menunjukkan bahwa ekstrak

etanol daun kersen pada konsentrasi 10% mengandung senyawa tanin, flavonoid,

serta senyawa polifenol yang dipercaya memiliki kemampuan sebagai antibakteri.

Salah satu bakteri utama penyebab karies gigi adalah Streptococcus mutans yang

memiliki enzim glukosiltransferase (GTF) yang mampu mengatalisis sintesis

glukan dalam proses terjadinya karies gigi.

2.9 Mikroemulsi

Mikroemulsi merupakan campuran dua fase air dan minyak yang

disatukan dengan surfaktan dan kosurfaktan membentuk campuran homogen yang

transparan. Penggunaan penambahan surfaktan dan kosurfaktan pada mikroemulsi

menyebabkan tegangan permukaan menjadi sangat rendah sehingga menghasilkan

fase spontan dengan ukuran mikroemulsi berada pada rentang 0,1-100 µm. Hal ini

diilhami dalam surat al-Hijr (15): 21 sebagaimana berikut:

ٍ ُ‫َر َّم ْعل‬

‫وم‬ ٍ ‫َوإِن ِّمن َش ْي ٍء إِالَّ ِعن َدنَا َخ َزائِنُهُ َو َما نُنَ ِّزلُهُ إِالَّ بِقَد‬
Artinya :

“Dan tidak ada sesuatu pun melainkan pada sisi Kamilah khazanahnya; dan

Kami tidak menurunkannya melainkan dengan ukuran yang tertentu.”

 21

Shihab (2003) menafsirkan bahwa Allah SWT yang memiliki segala

sesuatu dan Dia-lah yang memiliki perbedaan sesuatu yang terdiri atas berbagai

macam jenis dan raganya. Maka jelaslah bahwa Allah SWT telah menentukan

segala ciptaan-Nya berdasarkan ukuran yang telah ditetapkan. Setiap ciptaan pasti

memiliki perbedaan antara satu dengan yang lain. Hal tersebut apabila

dihubungkan dengan hasil penelitian tentang sediaan mikroemulsi, maka hal

tersebut memiliki ukuran kemampuan tersendiri sebagai sediaan yang

transdermal.

Penggunaan mikroemulsi dalam formulasi farmasetik memiliki banyak

keuntungan dibandingkan sistem emulsi dan larutan kristalin. Fase dispersi pada

mikroemulsi dapat bertindak sebagai reservoir untuk obat hidrofilik atau lipofilik

tergantung dari sistem mana yang digunakan antara O/W atau W/O. Kontak

dengan membran semi permeable, seperti kulit atau membran mukosa, obat dapat

diangkut melewati barrier. Baik obat lipofilik maupun hidrofilik dapat

teradministrasi bersama tergantung dari kekuatan mikroemulsi untuk melarutkan

tipe tersebut. Berbeda dengan emulsi, mikroemulsi menyebabkan reaksi imun atau

metabolisme lemak minimum. Protein tidak terdenaturasi pada mikroemulsi

meskipun tidak stabil pada suhu tinggi atau rendah. Total dosis pada obat dapat

berkurang ketika diaplikasikan melalui rute mikroemulsi sehingga efek samping

dapat minimal. Mikroemulsi merupakan sistem penghantar yang mendukung

penghantaran obat melalui administrasi perkutan, topikal, transdermal, okukar,

dan parenteral. Peningkatan adsorbsi obat, modulasi kinetik pelepasan obat dan
 22

penurunan toksisitas adalah beberapa keuntungan dari penggunaan mikroemulsi

dalam proses penghantaran (McEvoy, 2008)

Kemampuan mikroemulsi menghantarkan obat untuk menembus barier

kulit dipengaruhi oleh struktur internal dan tipe mikroemulsi yang diformulasikan,

selain itu dipengaruhi oleh komposisi dan konsentrasi komponen-komponen

dalam mikroemulsi. Secara umum mikroemulsi terdiri dari komponen fase

minyak, surfaktan, kosurfaktan, dan fase air. Penggunaan fase minyak, surfaktan

dan kosrfaktan tertentu akan menghasilkan mikroemulsi dengan karakteristik yang

berbeda-beda. Dalam formulasi mikroemulsi komponen yang digunakan harus

disesuaikan dengan sifat fisika kimia bahan aktif obat untuk menghasilkan sistem

pembawa obat yang optimal.

Pada pembuatan sediaan topikal, O/W mikroemulsi terpilih sebagai sistem

transparan yang memiliki jumlah fase lipid untuk melarutkan lipofilik. Selain itu,

mikroemulsi tipe O/W memiliki keuntungan tahan air, tidak lengket, dan

penyebarannya mudah pada kulit.

2.9.1 Komponen Pembentukan Mikroemulsi

[Link] Fase Minyak

Fase minyak merupakan komponen penting dalam formulasi mikroemulsi,

tidak hanya sebagai pelarut bahan obat bersifat lipofilik melainkan juga dapat

meningkatkan fraksi dari obat lipofilik yang diabsorbsi dan ditransportasikan

melalui saluran limfatik, penyerapan pada saluran gastrointestinal, maupun

penetrasi transdermal (Muzaffar et al., 2013). Pemilihan jenis fase minyak yang

digunakan dalam formulasi mikroemulsi akan mempengaruhi tiga parameter,

 23

yaitu profil pelepasan obat, stabilitas mikroemulsi, dan permeabilitas kulit.

Berbagai jenis asam lemak jenuh maupun tak jenuh dapat digunakan untuk

meningkatkan penetrasi obat menembus kulit (contohnya: nalokson,

hidrokortison, dan estradiol). Asam lemak ester banyak digunakan untuk

melarutkan bahan aktif obat bersifat lipofilik untuk formulasi mikroemulsi M/A.

Lapisan bilayer stratum korneum memiliki ekor yang bersifat hidrofobik

menyebabkan asam lemak dapat melewatinya dengan membentuk domain

pemisah sehingga dapat meningkatkan permeabilitas obat menembus kulit (Kogan

et al., 2007). Beberapa jenis fase minyak yang dapat digunakan dalam formulasi

mikroemulsi, yaitu asam lemak jenuh (contoh: asam laurat, asam miristat, asam

kaprik), asam lemak tidak jenuh (contoh: asam oleat, asam linoleat, asam

linolenik) dan asam lemak ester (contoh: etil atau metil ester dari miristik, laurik,

dan oleat) (Muzaffar et al., 2013).

[Link] Surfaktan

Pada formulasi mikroemulsi surfaktan berfungsi untuk menurunkan

tegangan permukaan hingga mencapai angka minimal yang akan memfasilitasi

proses dispersi molekul selama formulasi mikroemulsi dan menghasilkan lapisan

film fleksibel yang dapat dengan mudah membentuk lapisan pada droplet

sehingga memiliki karakteristik lipofilik yang sesuai (Muzaffar et al., 2013). Jenis

dan konsentrasi surfaktan, kosurfaktan, dan rasio keduanya yang digunakan akan

mempengaruhi formula mikroemulsi, ukuran partikel, bentuk agregat yang

terbentuk, dan kelarutan teradap air. Karakter lipofilisitas dan struktur surfaktan

memerankan peran penting dalam menentukan kemampuan mikroemulsi

 24

melepaskan bahan aktif dengan mempengaruhi lapisan permukaan mikroemulsi

(Lopes, 2014).

Berdasarkan muatannya surfaktan dibedakan menjadi 4 jenis yaitu

surfaktan nonionik, kationik, anionik. Surfaktan nonionik merupakan surfaktan

yang gugus hidrofilnya tidak bermuatan contohnya tween 80, lesitin, labrasol,

labrafil, dan span 80. Surfaktan kationik merupakan surfaktan yang memiliki

gugus hidrofil kation atau bermuatan positif, contohnya garam alkil trimethil

ammonium, garam dialkil-dimethil ammonium dan garam alkil dimethil benzil

ammonium. Surfaktan anionik merupakan surfaktan yang memiliki gugus hidrofil

anion atau bermuatan negatif, contohnya garam alkana sulfonat, garam olefin

sulfonat, garam sulfonat asam lemak rantai panjang. (Muzaffar et al., 2013).

[Link] Kosurfaktan

Kosurfaktan merupakan komponen yang sangat penting dalam

pembentukan sistem mikroemulsi, sehingga mengubah jenis kosurfaktan yang

dipakai dapat mengubah selektivitasnya pada sediaan (Malenovic, 2006).

Peningkatan konsentrasi kosurfaktan pada sistem meningkatkan proporsi dari fase

organik pada mikroemulsi dan menurunkan waktu retensi larutan. Konsentrasi

tinggi pada kosurfaktan menyebabkan droplet mikroemulsi menjadi tersaturasi

dengan molekul tersebut dan konsentrasi fase cairan surfaktan meningkat,

sehingga menghasilkan elusi yang lebih cepat pada larutan hidrofobik.

Menggunakan konsentrasi kosurfaktan sangat tinggi dapat menyebabkan

ketidakstabilan mikroemulsi sehingga sebaiknya dihindari (McEvoy, 2008).

 25

2.10 Komponen Bahan Pembentuk Mikroemulsi

2.10.1 Pelarut Etanol 96%

Pada proses ekstraksi maserasi digunakan pelarut etanol 96% untuk

melarutkan Muntingia calabura L. Pemerian etanol adalah jernih, tidak berwarna,

mudah menguap, memiliki titik didih 78,29, berbau karakteristik dan rasa terbakar

dengan rumus molekul C2H6OH dengan berat molekul 46,07. Etanol merupakan

pelarut yang bersifat polar dan inert, serta mampu mempenetrasi sel dan

menyaring semua senyawa yang terdapat dalam sel. Etanol dapat bercampur

dengan kloroform, gliserin, eter, dan air. Etanol memiliki fungsi sebagai pengawet

antibakteri, desinfektan, peningkat penetrasi kulit, dan pelarut (Wade, 1994).

Gambar 2.4. Struktur kimia Etanol 96%

2.10.2 Tween 80

Tween 80 atau Polysorbate 80 merupakan ester oleat dari sorbitol di mana

tiap molekul anhidrida sorbitolnya berkopolimerisasi dengan 20 molekul

etilenoksida. Tween 80 berupa cairan kental berwarna kuning dan agak pahit

(Rowe et al., 2009). Polysorbate digunakan sebagai emulsifying agent pada

emulsi topikal tipe minyak dalam air, dikombinasikan dengan emulsifier hidrofilik

pada emulsi minyak dalam air, dan untuk menaikkan kemampuan menahan air

pada salep, dengan konsentrasi 1-15% sebagai solubil izer. Tween 80 digunakan
 26

secara luas pada kosmetik sebagai emulsifying agent (Smolinske, 1992). Tween

80 larut dalam air dan etanol (95%), namun tidak larut dalam mineral oil dan

vegetable oil. Aktivitas antimikroba dari pengawet golongan paraben dapat

mengurangi jumlah polysorbate (Rowe et al., 2009).

HO(C2H4O)w

O CH(OC2H4O)yOH

H2C(PC2H4O)zR
Gambar 2.5. Struktur kimia Tween 80

2.10.3 Span 80

Span 80 mempunyai nama lain sorbitan monooleat. Pemeriannya berupa

warna kuning gading, cairan seperti minyak kental, span merupakan ester sorbitan

yang memiliki bau khas, terasa lunak dan dengan pH 8. Kelarutannya tidak larut

tetapi terdispersi dalam air, bercampur dengan alkohol, tidak larut dalam propilen

glikol, larut dalam hampir semua minyak mineral dan nabati, sedikit larut dalam

eter. Berat jenis pada 20oC adalah 1 gram. Nilai HLB 4,3. Viskositas pada 25o

Ester sorbitan secara luas digunakan dalam kosmetik, produk makanan, dan

formulasi sebagai surfaktan nonionik lipofilik. Ester sorbitan secara umum dalam

formulasi berfungsi sebagai emulsifying agent dalam pembuatan krim, emulsi, dan

salep untuk penggunaan topikal. Viskositas pada 25oC adalah 1000 cps

(Smolinske, 1992)

Ester sorbitan secara luas digunakan dalam kosmetik, produk makanan,

dan formulasi sebagai surfaktan nonionik lipofilik. Ester sorbitan secara umum
 27

dalam formulasi berfungsi sebagai emulsifying agent dalam pembuatan krim,

emulsi, dan salep untuk penggunaan topikal. Ketika digunakan sebagai

emulsifying agent tunggal, ester sorbitan menghasilkan emulsi air dalam minyak

yang stabil dan mikroemulsi, namun ester sorbitan lebih sering digunakan dalam

kombinasi bersama bermacam-macam proporsi polysorbate untuk menghasilkan

emulsi atau krim, baik tipe M/A atau A/M (Rowe et al., 2009).
HO OH

O
CH3(CH2)7CH-CH(CH2)7COCH2CH

OH
Gambar 2.6. Struktur kimia Span 80

2.10.4 Isopropil Miristat (IPM)

Isopropil miristat (IPM) adalah salah satu derivat asam lemak dengan

kenampaan cairan jernih, tidak berwarna, tidak berbau, viskositas rendah dan

tidak berasa dengan rumus molekul C17H34O2 dan bobot molekul 270,51. IPM

memiliki viskositas antara 5-7 mPas (5-7 cP) pada suhu 25 ᵒC dan kurang

berminyak sehingga nyaman digunakan (Billany, 2005) selain itu IPM tahan

terhadap oksidasi, hidrolisis, dan tidak menjadi tengik (Rowe et al., 2009). IPM

dapat larut dengan aseton, kloroform, etanol 95%, etil asetat, lemak; praktis tidak

larut dalam gliserin, propilen glikol dan air. (Rowe et al., 2009).

Berdasarkan gugus fungsinya, IPM digolongkan dalam senyawa peningkat

penetrasi golongan asam lemak ester. IPM digunakan sebagai peningkat penetrasi

sediaan transdermal, telah digunakan dalam gel emulsi o/w dan berbagai

mikroemulsi dan dapat meningkatkan bioavailabilitas sediaan topikal (Rowe et

 28

al., 2009). Sebagai peningkat penetrasi, IPM bekerja dengan berpenetrasi ke

dalam stratum corneum dan mengganggu kekakuan lipid pada stratum corneum

sehingga terjadi ketidakstabilan lipid. Adanya ketidakstabilan lipid memudahkan

bahan obat melewati lapisan stratum corneum secara intraseluler (Walker dan

Smith, 1996). IPM digunakan secara topikal dalam konsentrasi 1,0-10,0% (Rowe

et al., 2009).

Gambar 2.7. Struktur kimia Isopropil Miristat

2.10.5 Polietilen Glikol 400 (PEG 400)

Polietilen glikol 400 berwujud cair kental, tidak berwarna atau berwarna

sedikit kuning. PEG 400 sedikit berbau dan berasa pahit. Memiliki berat molekul

380-420, titik leleh 6-8oC. PEG 400 larut dalam air, aseton, alkohol, benzene,

gliserin dan glikol. Stabil secara kimia dalam udara dan dalam larutan. PEG 400

inkompatibel dengan beberapa agen pewarna. Aktivitas antibakteri dari antibiotik

dikurangi dalam basis polietilenglikol (penisilin dan basitrasin). PEG 400 dapat

berinteraksi dalam golongan sulfonamide dan sorbitol. Sulfonamide dapat

mengalami kehilangan warna sedangkan sorbitol dapat diendapkan dari

campurannya (Rowe, 2006).

 29

H
H

HO C (CH2-0-CH2)m C OH

H H
Gambar 2.8. Struktur kimia PEG 400

2.11 Pengukuran Ukuran Partikel

Pengukuran ukuran partikel dilakukan terhadap mikroemulsi formula yang

stabil secara fisik. Tujuannya adalah untuk mengetahui ukuran partikel pada

sediaan mikroemulsi. Ukuran partikel diukur dengan alat Particle Size Analyzer

(PSA). Dilakukan dengan cara mengukur distribusi ukuran globul dengan memilih

alignment (untuk menyiapkan dan mengatur background), measuring loading

(untuk pengukuran sampel). Setelah alat PSA sudah siap kemudian dimasukan

sampel ke dalam kuvet, kuvet yang digunakan harus bebas dari busa (foam)

kemudian dimasukkan hingga layar monitor menunjukkan keterangan OK

ataupun High yang artinya bahwa sampel siap diukur. Pengukuran berlangsung

hingga monitor keluar grafik hubungan antara diameter globul (µm) dengan

volume % (Purnamasari, 2012).

2.12 Bakteri (Staphylococcus epidermidis)

Staphylococcus epidermidis merupakan bakteri gram positif, aerob atau

anaerob fakultatif berbentuk bola atau kokus berkelompok, tidak teratur, diameter

0,8-1,0µm tidak membentuk spora dan tidak bergerak, koloni berwarna putih dan

tumbuh cepat pada suhu 37oC. Salah satu 40 spesies yang termasuk genus
 30

Staphylococcus. S epidermidis termasuk flora manusia normal, umumnya terdapat

pada flora kulit, dan sedikit jumlahnya pada flora mukosa. Bakteri ini juga

berperan dalam pelepasan asam oleat, hasil hidrolisisnya oleh lipase yang diduga

berpengaruh terhadap perkembangan jerawat (Saising et al., 2008). Klasifikasi

Staphylococcus epidermidis menurut (Bergey, 2009)

Kingdom : Bacteria

Phylum : Firmicutes

Class : Bacilli

Ordo : Bacillales

Family : Staphylococcaceae

Genus : Staphylococcus

Species : Staphylococcus epidermidis

2.13 Uji Antibakteri Staphylococcus epidermidis

Uji aktivitas bakteri dari bahan alam dapat dilakukan secara in vitro.

Berikut ini merupakan uji aktivitas bakteri dari bahan alam secara in vitro (ICMR,

2009). Pengujian aktivitas antibakteri dilakukan setelah mendapatkan formulasi

sediaan mikroemulsil yang paling stabil dengan kontrol positif dan kontrol negatif

dilakukan dengan metode difusi sumuran.

2.13.2 Metode Uji Aktivitas Antibakteri.

a. Metode Difusi Padat

Metode ini bertujuan untuk mengetahui aktivitas antibakteri suatu senyawa

uji. Berdasarkan Hugo & Russels (1998), uji difusi dapat dilakukan dengan
 31

beberapa metode antara lain metode Kirby and Bauer, E-Test, Ditch-Plate

Technique dan Cup-Plate Technique. Pada metode Kirby and Bauer digunakan

kertas cakram berisi substansi antibakteri yang diletakkan pada media agar yang

telah ditanami bakteri. Prinsip metode difusi padat adalah uji potensi berdasarkan

pengamatan diameter zona hambatan pertumbuhan bakteri akibat berdifusinya

senyawa antibakteri dari titik awal pemberian ke daerah difusi.

a. Metode Dilusi

Pada prinsipnya antibakteri diencerkan sampai diperoleh beberapa

konsentrasi. Pada dilusi cair, masing-masing konsentrasi obat ditambah suspensi

bakteri dalam media. Sedangkan pada dilusi padat setiap konsentrasi obat

dicampur media agar lalu ditanami bakteri. Larutan uji senyawa antibakteri pada

kadar terkecil yang terlihat jernih atau dengan tingkat kekeruhan terendah

ditetapkan sebagai Kadar Hambat Minimum (KHM) atau Minimal Inhibitory

Concentration (MIC). Kemudian larutan tersebut dituang pada media

pertumbuhan padat. Jika pada media padat tersebut tidak ada pertumbuhan

bakteri, maka kadar larutan uji tersebut ditetapkan sebagai Kadar Bunuh

Minimum (KBM) atau Minimal Bactericidal Concentration (MBC) (Akiyama et

al., 2001).

2.14 Pengukuran Zona Hambat

Aktivitas antibakteri dapat dikatakan positif apabila terbentuk zona hambat

berupa zona bening disekeliling lubang sumuran. Bagian yang dihitung dengan

jangka sorong ataupun penggaris adalah diameter dari zona hambat yang

terbentuk.
 32

Tabel.2.1 Kategori Diameter Zona Hambat

Diameter Zona Hambat Daya Hambat Pertumbuhan
>20 mm Sangat kuat
10-20 mm Kuat
5-10 mm Sedang
<5 mm Lemah

Menurut (Davis dan Stout, 1971) kriteria kekuatan daya antibakteri

sebagai berikut: diameter zona hambat 5 mm atau kurang maka aktivitas

penghambatan dikategorikan lemah, diameter zona hambat sebesar 5-10 mm

maka dikategorikan sedang, diameter zona hambat sebesar 10-20 mm

dikategorikan kuat dan jika diameter 20 mm atau lebih maka aktivitas

penghambatan dikategorikan sangat kuat. Terbentuknya zona hambat pada uji

aktivitas antibakteri dipengaruhi oleh beberapa faktor antara lain konsentrasi

ekstrak, kandungan senyawa antibakteri dan jenis bakteri (Jawetz et al., 2005).

2.15 Neomycin

Neomycin merupakan antibiotik bakteriostatik berspektrum luas yang aktif

terhadap organism-organisme aerob dan anerob Gram positif maupun negatif.

Pemerian :Serbuk putih atau agak kuning atau padatan kering

mirip es , tidak berbau, higroskopik

Kelarutan : Mudah larut dalam air, sangat sukar larut dalam etanol,

tidak larut dalam aseton, dalam kloroform dan dalam

eter

Mekanisme :Neomycin bekerja menghambat bakteri dengan

berkumpul pada subunit-subunit ribosom, sehingga

dapat menghambat sintesa protein pada bakteri yang

 33

pada akhirnya bakteri tersebut menjadi terganggu,

sehingga dapat mengakibatkan kematian sel pada

bakteri (Katzung, 2004).

Penggunaan : Antibiotik (Farmakope IV, 1995)

2.16 Analisa Data Statistika

Membandingkan satu rata-rata populasi dengan satu rata-rata populasi yang

lain, selain memakan waktu, juga beresiko mengandung kesalahan yang besar.

Untuk itu, kita memerlukan sebuah metode yang cepat dan beresiko mengandung

kesalahan lebih kecil. Metode analisis data Anova (Analysis of variance)

digunakan untuk pengujian lebih dari dua kategori pada variabel independen

(Subiyakto & Haryono, 1994). Sebelum melakukan uji ANOVA dengan software

Statistical Product Services Solutions (SPSS 23) dengan 95% atau α 0,05 taraf

kepercayaan terdapat asumsi yang harus dipenuhi antara lain;

1. Data pengamatan berdistribusi normal

2. Sampel bersal dari kelompok yang saling independen

3. Varian antar kelompok adalah homogen

Pengujian analisis yang kedua yaitu menggunakan paired t-test untuk

membandingkan hasil penelitian yang dilakukan yaitu nilai pH sebelum dan

sesudah sediaan mikroemulsi ekstrak daun kersen dan uji zona hambat aktivitas

antibakteri Staphylococcus epidermidis. Syarat uji paired t-test pada pengujian pH

yang digunakan sebaran data harus normal sedangkan untuk varians data yang

tidak perlu diuji karena kelompok data berpasangan.

 34

BAB III

KERANGKA KONSEPTUAL

3.1 Kerangka Konseptual

Daun Kersen (Muntingia
calabura L.) Mikroemulsi

Saponin Tanin Flavonoid

Keuntungan
mikroemulsi:
Kebocoran Membentuk komplek - Stabil secara
Denaturasi Merusak
protein dan termodinamik
protein sel membran
enzim - Homogen
Protein polipeptida bakteri sel bakteri
didalam sel - Memiliki ukuran
dinding sel
partikel 0,1-100 nm

Bertanggung jawab
sebagai antibakteri

Ekstrak daun
kersen

Mikroemulsi ekstrak etanol daun kersen

dengan konsentrasi 5%, 10% dan 15%

HIPOTESIS
Karakteristik Sediaan
Memiliki karakteristik fisika kimia
sediaan mikroemulsi yang baik
ekstrak daun kersen (Muntingia
calabura)
Uji aktivitas bakteri Freeze- Karakteristik:
Staphylococcus thaw - Ukran partikel
epidermidis - Organoleptik
menggunakan metode - pH Memiliki aktivitas bakteri
difusi agar sumuran - Uji kelembapan Staphylococcus epidermidis dalam
- Pemeriksaan tipe sediaan mikroemulsi ekstrak daun
emulsi kersen

Analisis Data

34

35
 35

Tumbuhan kersen (Muntingia calabura L.) memiliki banyak sekali

manfaat, salah satunya untuk pengobatan anti jerawat. Timbulnya jerawat dapat

disebabkan oleh banyak faktor dan salah satunya faktor yang paling berpengaruh

adalah bakteri Staphylococcus epidermidis (Wasitaadmadja, 1997). Bakteri S.

epidermidis merupakan bakteri penyebab timbulnya jerawat yang ada diflora

kulit. Pengobatan jerawat hingga saat ini masih dikembangkan, salah satunya

upaya dalam mengobati penyakit jerawat yakni menggunakan antibiotik

klindamisin, neomisin dan tetrasiklin. Utami (2005) mengutarakan bahwa

penggunaan antibiotik dalam jangka waktu pajang dapat menyebabkan mikroba

menjadi resistensi atau kebal terhadap antibiotik. Sehingga diperlukan alternatif

lain dalam pengobatan antibakteri dari bahan alami salah satunya tumbuhan

kersen. Didalam daun kersen terdapat banyak sekali kandungan senyawa

didalamnya yaitu flavonoid, tannin, saponin.

Pada penelitian sebelumnya yang dilakukan oleh Redhamahsya (2011)

menunjukkan bahwa simplisia daun kersen dan ekstrak etanol daun kersen

mengandung senyawa golongan flavonoid, kuinon, polifenolat, saponin, steroid

dan triterpenoid, monoterpenoid dan seskuiterpenoid. Pada pengobatan jerawat

biasanya dapat digunakan antibiotik, tetapi penggunaan antibiotik dalam jangka

waktu panjang saat ini banyak diketahui memiliki efek samping berupa

karsinogik. Sehingga dapat digunakan alternative pengobatan dari bahan alam,

yakni salah satunya daun kersen. Daun kersen dapat digunakan untuk mengganti

bahan sintesis antibakteri, teknik solubilisasi dalam sistem penghantaran obat

(drug delivery system) telah banyak diteliti sebagai peningkat bioavabilitas obat
 36

dan salah satu teknik solubilisasi dapat dilakukan dengan cara membuat sediaan

mikroemulsi (Nandi, 2013).

Dalam pembuatan sediaan topikal pembentukan sistem mikroemulsi

karena homogen, memiliki ukuran partikel yang kecil, bentuk sediaan cair dan

jernih serta memiliki stabilitas tinggi dalam sistem pangan sangat komplek yang

dipengaruhi oleh fase minyak dan jenis surfaktan, suhu, pH dan pengenceran (Cho

dkk., 2008; Cui dkk., 2009). Mikroemulsi o/w dipengaruhi oleh campuran

kombinasi jenis surfaktan hidrofilik dan lipofilik, dan minyak. Mikroemulsi o/w

mempunyai stabililitas dan kelarutan tinggi apabila diperoleh campuran dengan

perbandingan tepat dapat digunakan sebagai pembawa senyawa aktif daun kersen.

Keseimbangan hidrofilik lipofilik (HLB) adalah konsep yang mendasari metode

semi empirik untuk memilih pengemulsi yang tepat atau kombinasi pengemulsi

pada stabilitas emulsi (Hiemenz dan Rejogopolan, 1997).

Formulasi pada sediaan mikroemulsi memiliki peran penting dalam

penghantaran zat aktif untuk memunculkan efek. Setelah pembuatan sediaan

mikroemulsi ekstrak daun kersen terbentuk maka perlu dilakukan uji karakteristik

sediaan antara lain mencakup: organoleptik, pH, pemeriksaan tipe emulsi, uji

freeze-thaw dan uji ukuran partikel. Sehingga dapat diketahui hasil uji

karakteristik sediaan mikroemulsi tersebut. Setelah didapatkan sediaan

mikroemulsi yang baik kemudian dilakukan uji aktivitas antibakteri

Staphylococcus epidermidis dengan menggunakan metode defusi sumuran. Untuk

mengetahui luas zona hambat pada aktivitas antibakteri dapat dinyatakan positif

apabila terbentuk zona hambat berupa zona bening disekeliling lubang sumuran.
 37

Bagian yang dihitung dengan jangka sorong adalah diameter dari zona hambat

yang terbentuk (Pratiwi, 2008).

Menurut penelitian Uryawiria (1978) dalam Pradana (2013), berdasarkan

zona hambat yang terbentuk maka aktivitas antibakteri dapat digolongkan menjadi

beberapa golongan yaitu antibakteri yang tergolong lemah (zonahambat < 5 mm),

sedang (zona hambat antara 5-10 mm), kuat (zona hambat antara 10-20 mm), dan

tergolong sangat kuat (zona hambat >20 mm). Tujuannya untuk mengetahui

pengaruh aktivitas antibakteri ekstrak daun kersen dalam sediaan mikroemulsi

dengan menggunakan metode difusi sumuran. Kemudian hasil yang didapat

dianalisis sesuai dengan literatur dengan menggunakan One Way Anova dengan

taraf kepercayaan 95%.

3.2 Hipotesis Penelitian

1. Memiliki karakteristik fisika kimia sediaan mikroemulsi yang baik dari

ekstrak daun kersen (Muntingia calabura L.)

2. Terdapat pengaruh sediaan mikroemulsi ekstrak daun kersen terhadap

aktivitas bakteri Staphylococcus epidermidis.

 38

BAB IV

METODOLOGI PENELITIAN

4.1 Jenis dan Rancangan Penelitian

Rancangan penelitian yang akan digunakan dalam penelitian ini

menggunakan desain eksperimen sesungguhnya (True experimental

laboratory), dengan tahapan sebagai berikut:

a. Membuat ekstrak daun kersen dengan metode ekstraksi ultrasonik.

b. Membuat sistem mikroemulsi ekstrak daun kersen dengan konsentrasi

ekstrak 5%, 10% dan 15%

c. Karakterisasi sistem mikroemulsi ekstrak daun kersen meliputi uji

organoleptik, uji pH, uji ukuran partikel, tipe emulsi, stabilitas freeze-thaw

d. Melakukan uji aktivitas bakteri Staphylococcus epidermidis dengan

metode difusi sumuran

e. Menganalisis data evaluasi karakteristik fisika kimia sistem mikroemulsi

dan menganalisis hasil uji aktivitas antibakteri dalam sistem mikroemulsi

3938
 39

Formulasi sistem mikroemulsi

ekstrak daun kersen

F1 5% F2 10% F3 15%

Karakteristik fisik Uji aktivitas antibakteri

sediaan mirkoemulsi Staphylococcus epidermisdis
dengan menggunakan
metode agar sumuran
Uji organoleptik

Kontrol positif
Uji ukuran
partikel
Kontrol negatif
Uji pH

Kontrol
Uji tipe emulsi pembanding

Kelompok uji formula

Uji stabilitas
mikroemulsi ekstrak
freeze-thaw
daun kersen
Uji kelembapan
Analisa data one
way ANOVA
dengan SPSS
 40

4.2 Waktu dan Tempat Penelitian

4.2.1 Waktu Penelitian

Penelitian ini akan dilakukan pada bulan Februari - Juni 2017

4.2.2 Tempat Penelitian

Tempat penelitian ini akan dilakukan di Laboratorium Kimia Farmasi

untuk proses ekstraksi ultrasonik, Laboratorium Teknologi Farmasi Semisolid

untuk pembuatan sistem mikroemulsi dan untuk pengujiannya meliputi uji pH, uji

organoleptik, tipe emulsi. Di Laboratorium Mikrobiologi jurusan Biologi UIN

Maliki Malang untuk uji aktivitas antibakteri dan di Laboratorium Zat Padat

Jurusan Fisika Institute Teknologi Sepuluh November Surabaya untuk melakukan

pengukuran partikel mikroemulsi menggunakan Particle Size Analyzer (PSA).

4.3 Variabel Penelitian dan Definisi Operasional

4.3.1 Variabel Penelitian

Variabel dalam penelitian ini, meliputi:

1. Variabel bebas : variabel bebas pada penelitian ini adalah variasi konsentrasi

ekstrak daun kersen dalam sistem mikroemulsi (5%, 10%, 15%).

2. Variabel terikat : variabel terikat pada penelitian ini adalah hasil uji

karakterisasi, uji Freeze-thaw, dan uji aktivitas bakteri S. epidermidis sediaan

mikroemulsi ekstrak daun kersen.

3. Variabel terkontrol : variabel terkontrol pada penelitian ini adalah bahan

penyusun mikroemulsi ekstrak daun kersen (Muntingia calabura L.),

temperatur, lama waktu pengadukan, dan kecepatan pengadukan

 41

4.3.2 Definisi Operasional

1. Sistem Mikroemulsi merupakan sediaan yang stabil secara termodinamika

dengan sistem pembawa obat koloidal yang tersusun atas fase minyak, fase

air, surfaktan dan kosurfaktan.

2. Variasi konsentrasi ekstrak daun kersen dalam sediaan mikroemulsi,

konsentrasi yang digunakan dalam formula sistem mikroemulsi (5%, 10%,

15%)

3. Karakteristik mikroemulsi merupakan sifat dari sediaan sistem mikroemulsi

yang dibuat dengan mempertimbangkan evaluasi organoleptis, pengujian pH,

tipe emulsi dan pengukuran ukuran partikel sediaan yang relevan dimiliki oleh

subjek yang diteliti. Proses ini juga melibatkan proses penentuan (definisi) dan

pengamatan. Pengamatan yang dimaksud seringkali memerlukan pengukuran

atau perhitungan yang cermat.

4. Stabilitas fisik merupakan kemampuan suatu produk untuk bertahan

kualitasnya sesuai spesifikasi kualitas yang ditetapkan sepanjang periode

waktu penggunaan dan penyimpanan. Uji stabilitas fisik yang dilakukan dalam

penelitian ini menggunakan freeze-thaw

5. Pengujian aktivitas antibakteri merupakan teknik untuk mengukur beberapa

besar potensi atau konsentrasi suatu senyawa dapat memberikan efek bagi

mikroorganisme.
 42

4.4 Alat dan bahan penelitian

4.4.1 Alat penelitian

Alat yang akan digunakan pada penelitian ini terdiri dari, Timbangan

digital (Shimadzu Uni Bloc), Gelas ukur 100 mL (pyrex), Batang pengaduk,

Rotary evaporator (IKA RV 10 Basic), Sonica® Ultrasonic Cleaner, beaker glass

100 mL (pyrex), Erlenmeyer 500mL (pyrex), Particle Size Analyzer (PSA),

alumunium foil, Laminar Air Flow (Minihelix II), Cawan petri, Pipet tetes,

Hotplate, Mikropipet 10mL, jarum ose, Autoclave, Inkubator, Bunsen, Tabung

reaksi (pyrex), pH meter tipe 510 (Eutech Instrument), Oven (Memmert UN 55),

tabung reaksi (pyrex), plastik wrap, botol semprot, lemari Pendingin (LG),

Magnetik stirrer (IKA RW 20 Digital), jangka sorong, kertas saring whatman,

gelas ukur 100mL, vial 20mL dan blue-tipe

4.4.2 Bahan penelitian

Bahan yang akan digunakan pada penelitian ini terdiri dari, Daun kersen

(Muntingia calabura) yang didapat di Materia Medika Batu, media Nutrient Agar

(NA), media Luria Bertani Broth (LBB), Pelarut Etanol 96% (PT. Bratachem),

PEG 400 (PT. Bratachem), Tween 80 (PT. Bratachem) Span 80, Isopropil

miristat, Cendo xitrol tetes mata, Metilen red, asam sulfat, asam asetat, kalium

dikromat, Magnesium (Mg), HCL pekat, FeCl3, DMSO, NaCl, Aquadest.

 43

4.5 Prosedur Pengumpulan Data

4.5.1 Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Kersen (Muntingia calabura L.)

Pembuatan ekstrak kersen dimulai dengan persiapan simplisia daun kersen

(Muntingia calabura L). Simplisia daun kersen sebanyak 1kg dicuci, dipotong

kecil-kecil dan dikeringkan dengan menggunakan oven pada suhu 30-37oC selama

± 5 jam. Ekstraksi serbuk simplisia daun kersen dilakukan dengan menggunakan

etanol 96% sebagai pelarut. Metode ekstraksi yang digunakan adalah ekstraksi

ultrasonik dengan lama ekstraksi 20 menit (Handayani et al., 2016). Setelah

selesai diekstraksi, difiltrasi dengan menggunakan kertas saring dan filtrat

dikumpulkan. Filtrat dievaporasi menggunakan rotary evaporator dengan suhu

30-40oC, suhu rendah digunakan untuk menjaga agar senyawa aktif tidak

mengalami kerusakan sampai diperoleh ekstrak pekat. Proses evaporasi dihentikan

sampai pelarut habis dengan ditandai tidak adanya penetesan pelarut pada labu

pelarut (Saman, 2013). Untuk menghilangkan pelarut yaitu dengan melakukan uji

bebas etanol pada ekstrak etanol daun kersen (Muntingia calabura L.) agar dapat

dilakukan uji aktivitas antibakteri Staphylococcus epidermidis.

4.5.2 Uji Bebas Etanol Ekstrak Daun Kersen

Uji bebas etanol ekstrak daun kersen (Muntingia calabura L.) dilakukan

dengan cara esterifikasi etanol dengan penambahan asam asetat dan asam sulfat

pekat serta dibantu dengan pemanasan (Preparandi, 1979). Esterifikasi adalah

perubahan reaksi dari asam karboksilat dan alkohol menjadi suatu ester dengan

menggunakan katalis asam, reaksi esterifikasi bersifat reversible (Fessenden,

1999) dengan cara diambil satu gram ekstrak daun kersen lalu dimasukkan
 44

kedalam tabung reaksi ditambahkan 1ml asam asetat dan 1ml asam sulfat pekat

kemudian dihomogenkan dan dipanaskan diatas bunsen, atas tabung ditutup

dengan kapas.

4.5.3 Penapisan Fitokimia Ekstrak Daun Kersen (Muntingia calabura L.)

Uji fitokimia dengan reagen untuk mengetahui kandungan senyawa aktif

yang ada didalam ekstrak etanol 96% daun kersen. Uji kandungan senyawa aktif

dilarutkan dalam masing-masing reagen selanjutnya dilakukan pengujian

flavonoid, tanin dan saponin. Pada penelitian sebelumnya, telah dilakukan oleh

Nenden (2012). Pada ekstrak daun kersen, hasil penapisan fitokimia positif

mengandung alkaloid, polifenol, kuinon, tanin, flavonoid, monoterpenoid,

seskuiterpenoid, steroid-triterpenoid, dan saponin.

[Link] Uji Flavonoid

Ekstrak kental daun kersen sebanyak 1 mg dimasukan ke dalam tabung

reaksi, setelah itu ditambahkan logam Mg dan 4-5 tetes HCl pekat. Larutan

berwarna merah atau jingga yang terbentuk menunjukan adanya flavonoid

(Indrayani dkk, 2006).

[Link] Uji Saponin

Ekstrak kental daun kersen dimasukan ke dalam tabung reaksi dan

ditambah air (1:1) sambil dikocok dengan cara ekstrak etanol daun kersen

ditambahkan 5 mL aquadest lalu dikocok kuat-kuat selama 10 menit. Hasil positif

uji saponin ditunjukkan dengan terbentuknya busa, apabila menimbulkan busa

ditambahakan HCl 1 N sebanyak 1-2 tetes, apabila busa yang terbentuk dapat
 45

bertahan selama 10 menit dengan ketinggian 1-3 cm, menunjukan ekstrak positif

mengandung saponin (Hayati, 2010).

[Link] Uji Tanin

Ekstrak kental daun kersen 1 gram dilarutkan dalam 5 mL FeCl3 1%. Jika

terbentuk warna biru kehitaman, coklat kehitaman menunjukan ekstrak positif

mengandung tanin katekol (Pratiwi, 2008).

4.5.3 Pembuatan Sistem Mikroemulsi Ekstrak Daun Kersen

[Link] Rancangan Formula Sistem Mikroemulsi Ekstrak Daun Kersen

(Muntingia calabura L.)

Masing-masing formula sediaan dibuat sebanyak tiga replikasi kecuali

kontrol pembanding. Pada formula ini dilakukan perbedaan konsentrasi bahan

aktif 5%, 10% dan 15%.

Karakteristik sistem mikroemulsi yang diharapkan memiliki karakteristik

pH 4,5-7, Organoleptis yang stabil secara fisik, ukuran partikel dengan ukuran

0,1-100 µm, dan uji stabilitas sediaan yang stabil dalam kondisi freeze-thaw.

Tabel 4.1 Rancangan Formula Sistem Mikroemulsi

Konsentrasi Formula (b/v)

No Bahan Fungsi Formula

Formula Formula Formula 4
1 2 3

Ekstrak daun
1 Bahan aktif 5% 10% 15% -
kersen
2 IPM Fase minyak 5% 5% 5% 5%
3 Tween 80 Surfaktan 33,5% 33,5% 33,5% 33,5%
4 Span 80 Surfaktan 16,5% 16,5% 16,5% 16,5%
5 PEG 400 Kosurfaktan 5% 5% 5% 5%
6 Aquadest add Pelarut 100% 100% 100% 100%
 46

Keterangan :
a. Formula 1 (R1, R2, R3) : sistem mikroemulsi dengan konsentrasi ekstrak daun
kersen 5% dengan replikasi sebanyak 3 kali
b. Formula 2 (R1, R2, R3) : sistem mikroemulsi dengan konsentrasi ekstrak daun
kersen 10% dengan replikasi sebanyak 3 kali
c. Formula 3 (R1, R2, R3) : sistem mikroemulsi dengan konsentrasi ekstrak daun
kersen 15% dengan replikasi sebanyak 3 kali
d. Formula 4 : sistem mikroemulsi tanpa bahan aktif (kontrol pembanding)

[Link] Pembuatan Sistem Mikroemulsi Ekstrak Daun Kersen

Mikroemulsi merupakan sediaan yang stabil secara termodinamika dengan

sistem pembawa obat koloidal yang tersusun atas fase minyak, fase air, dan

surfaktan atau kosurfaktan (Schwarz et al., 2012). Pembuatan sistem mikroemulsi

yang perlu diperhatikan mulai dari formulasi dan kondisi pembuatan. Surfaktan

dan kosurfaktan digunakan sebagai pembawa atau pelarut sehingga dapat

meningkatkan stabilitas dan kelarutannya (Suharsimi et al., 1996).

Mikroemulsi ini dibuat dengan membuat fase air dan fase minyak secara

terpisah. Fase air adalah aquadest dan tween 80. Aquadest dan tween 80

dipanaskan diatas hotplate sampai suhu 50oC kemudian diaduk dengan

menggunakan magnetic stirer sampai tercampur. kemudian fase minyak yaitu

Isopropil miristat dan span 80 dihomogenkan lalu tambahkan ke dalam campuran

PEG 400 sebagai kosurfaktan dan tambahkan ekstrak etanol daun kersen sambil

tetap dihomogenisasi dengan magnetic stirer menggunakan kecepatan 500 rpm

setelah sediaan mikroemulsi ekstrak daun kersen homogen, selanjutnya didiamkan

selama 24 jam sampai terbentuk mikroemulsi yang jernih serta untuk mengetahui

ada pemisahan atau tidak.

 47

4.6 Evaluasi Karakteristik Fisik Mikroemulsi Ekstrak Daun Kersen

Sediaan mikroemulsi ekstrak daun kersen yang telah berhasil kemudian

dilakukan serangkaian uji antara lain: ukuran partikel, uji Organoleptik, tipe

emulsi, uji pH dan uji freeze-thaw

4.6.1 Pengukuran Ukuran Partikel

Pengukuran ukuran partikel sediaan mikroemulsi ekstrak daun kersen

dilakukan dengan penambahan 1 gram mikroemulsi dilarutkan dalam 100 gram

aquadest di dalam baker glass atau labu ukur. Sejumlah 10 ml larutan tersebut

diambil dan dimasukkan ke dalam kuvet. Kuvet yang digunakan harus bebas dari

busa (foam). Kuvet yang berisi sampel kemudian diamsukkan ke dalam sampel

holder. Alat dinyalakan dan dipilih menu particle size. Diukur selama 15 menit

dan akan menghasilkan ukuran partikel dan kurva distribusi (Malvern, 2004).

Interpretasi hasil dari pengukuran distribusi ukuran partikel yaitu distribusi ukuran

partikel yang disertai dengan jumlah atau volume dari ukuran-ukuran partikel

tersebut mulai dari 0,1-100 nm.

4.6.2 Uji Organoleptik

Tujuan untuk mengetahui dan mengidentifikasi karakteristik sediaan

berupa warna, bau dan konsistensi sistem. Metode uji organoleptik dilakukan

dengan cara identifikasi aroma, warna, dan konsentrasi sediaan yang diamati

secara deskriptif (Swastika, 2013). Interpretasi hasil dari uji organoleptis yaitu

didapatkan sediaan sistem berwarna hijau jernih, tidak berbau dan larutan kental

sesuai dengan spesifikasi mikroemulsi.

 48

4.6.3 Uji pH

Tujuan untuk mengetahui nilai pH sistem, apakah masuk ke dalam rentang

pH yang masih bisa diterima oleh kulit. Metode pengukuran pertama-tama

elektroda dikalibrasi dengan dapar standar pH 4 dan pH 7. Selanjutnya elektroda

dicelupkan ke dalam sistem mikroemulsi. Nilai pH muncul di layar kemudian

dicatat, kemudian pengukuran dilakukan pada suhu ruang 25±2oC. Pengukuran

pH mikroemulsi dilakukan dua kali, yaitu 48 jam setelah formulasi dan 6 hari

(akhir 3 siklus uji stabilitas dipercepat) setelah formulasi. Interpretasi hasil dari

pengukuran pH yaitu didapatkan nilai pH yang dipersyaratkan untuk sediaan

topikal dan sesuai untuk kulit yaitu 4,5-6,5.

4.6.4 Pemeriksaan Tipe Mikroemulsi

Pemeriksaan tipe mikroemulsi bertujuan untuk mengetahui tipe emulsi yang

terbentuk. Pemeriksaan tipe mikroemulsi dilakukan dengan menaburkan zat warna

larut air, yaitu metilen red dengan menambahkan metilen red kedalam

mikroemulsi dengan cara diambil 1 gram pada masing-masing formula

mikroemulsi yaitu, F1, F2, F3 dan (blanko) lalu ditetesi dengan menggunakan

metilen red sebanyak 0,5 ml diatas kaca arloji kemudian diaduk dengan batang

pengaduk. Jika mikroemulsi merupakan tipe minyak dalam air maka zat warna

metilen red akan melarut di dalamnya dan berdifusi merata ke seluruh bagian dari

air. Jika mikroemulsi merupakan tipe air dalam minyak maka partikel zat warna

metilen red akan bergerombol pada permukaan (Utami, 2012).

 49

4.6.5 Uji Stabilitas Freeze-thaw

Pengujian freeze-thaw bertujuan untuk mengetahui stabilitas sediaan pada

saat penyimpanan dari waktu ke waktu dan memastikan sediaan tidak akan

mengalami perubahan selama penyimpanan dalam jangka 1 tahun. Proses ini

dilakukan dengan meletakkan mikroemulsi kedalam vial kemudian diletakkan

pada lemari pendingin yang telah diatur suhunya 4oC. Setelah itu masing-masing

sediaan dilanjutkan diletakkan didalam oven dengan suhu 40oC. Pengujian ini

dilakukan selama 6 siklus, setiap pergantian siklus dilakukan pengamatan

terhadap sediaan mikroemulsi setelah siklus berakhir.

4.6.6 Uji Kelembapan Sediaan Mikroemulsi Ekstrak Daun Kersen

Pengujian kelembapan sediaan dilakukan untuk mengetahui kandungan air

yang ada didalam sediaan mikroemulsi dengan menggunakan alat Moisture

Analyzer. Dilakukan dengan cara diletakkan sediaan mikroemulsi ekstrak daun

kersen sebanyak ± 5 gram pada sample-pan lalu diratakan agar didapatkan

pemanasan yang merata kemudian penutup alat diturunkan. Secara otomatis, alat

akan memulai pengukuran hingga terbaca hasil pengukuran %MC pada layar,

dilakukan pengulangan sebanyak sebanyak tiga kali.

4.7 Aktivitas Bakteri Staphylococcus epidermidis

Pada pengujian aktivitas antibakteri sediaan mikroemulsi ekstrak daun

kersen (Muntingia calabura L.) terhadap bakteri S. epidermidis dilakukan dengan

metode Rancangan Acak Lengkap (RAL) dan 6 perlakuan;

1. Kontrol positif : Kontrol positif dari sediaan antibiotik cendo xitrol

 50

2. Kontrol negatif : Kontrol negatif yang digunakan air steril

3. Kontrol pembanding : Kontrol pembanding yang digunakan mikroemulsi

tanpa menggunakan ekstrak daun kersen (Blanko)

4. Formula 1 mikroemulsi ekstrak daun kersen dengan konsentrasi 5%

5. Formula 2 mikroemulsi ekstrak daun kersen dengan konsentrasi 10%

6. Formula 3 mikroemulsi ekstrak daun kersen dengan konsentrasi 15%

4.7.1 Penyiapan Alat dan Sterilisasi

Alat-alat yang digunakan dalam penelitian aktivitas antibakteri ini

disterilkan terlebih dahulu. Alat-alat seperti beaker glass, gelas ukur, erlenmeyer

dan karet pipet yang sudah dibungkus, disterilkan terlebih dahulu di dalam

autoklaf pada suhu 121oC selama 15 menit dan alat-alat seperti batang pengaduk,

pinset, spatula, gelas arloji yang sudah dibungkus dimasukkan dalam oven pada

suhu 160-170oC selama ± 2 jam, jarum ose dan pinset dibakar dengan

pembakaran diatas api bunsen (Lay, 1994).

4.7.2 Pembuatan Media

[Link] Media Nutrient Agar (NA)

Sebanyak 1 gram serbuk media NA ditimbang lalu dimasukkan ke dalam

tabung erlenmeyer, ditambahkan aquadest sebanyak 50 mL dan dipanaskan

hingga larut. Setelah itu dihomogenkan menggunakan magnetik stirrer lalu

dipanaskan diatas hotplate sampai mendidih. Setelah homogen larutan disterilkan

dalam autoklaf pada suhu 121oC dengan tekanan 1 atm selama 15 menit.
 51

[Link] Media Luria Bertani Broth (LBB)

Sebanyak 1,3 gram media LBB dilarutkan dalam 100 mL aquadest,

kemudian dipanaskan dalam microwave hingga larut. Larutan disterilkan dalam

autoklaf selama 15 menit pada suhu ke dalam 121oC agar media LBB dalam

keadaan steril sebelum inokulasi selanjutnya diinkubasi dalam inkubator selama

24 jam.

4.7.3 Peremajaan Bakteri Uji (Staphylococcus epidermidis)

Bakteri S. epidermidis sebelum diujikan dilakukan peremajaan terlebih

dahulu, dengan cara diambil sebanyak 20 mL media LBB kemudian dituangkan

kedalam tabung steril dan dimasukkan 2 jarum ose bakteri S. epidermidis lalu

ditutup dengan kapas dan plastic wrap. Selanjutnya diinkubasi pada suhu 37oC

selama 24 jam (Lay, 1994).

4.7.4 Pembuatan Media Uji Aktivitas Bakteri Staphylococcus epidermidis

Cara pembuatan media uji dilakukan dengan mengambil bakteri yang

sudah diremajakan menggunakan mikropipet selanjutnya dituangkan media NA

ke dalam cawan petri lalu dibiarkan sampai memadat. Kemudian dibuat sumuran

(well) menggunakan alat blue-tipe dengan diameter ± 6 mm, sumuran dibuat tegak

lurus dengan permukaan media dengan kedalaman 0,1 gram. Masing-masing

sumuran diatur jaraknya, agar daerah pengamatan tidak saling bertumpuh.

Kemudian dimasukkan suspensi bakteri sediaaan mikroemulsi fekstrak daun

kersen, pada masing-masing sumuran dan diberi tanda. Kemudian dimasukkan

cawan petri ke dalam inkubator selama 24 jam pada suhu 37oC dan diamati zona

hambat yang terbentuk serta di interpretasikan dengan melihat daerah bening

 52

disekitar sumuran kemudian dihitung diameter zona hambat, daya hambat

antibakteri dapat ditentukan dengan mengukur zona inhibisi disekitar lubang

sumuran, menggunakan penggaris ataupun jangka sorong dengan cara mengukur

secara horizontal dan vertikal kemudian hasil yang didapat dikurangi diameter

sumuran.

4.8 Analisa Data Statistika

Untuk mengetahui pengaruh aktivitas antibakteri dari sediaan mikroemulsi

maka perlu dilakukan pengujian statistik untuk mengambil kesimpulan. Untuk

analisis uji pH, dan uji aktivitas antibakteri dianalisis menggunakan metode

analisis One Way ANOVA dengan menggunakan software SPSS 23 dengan

derajat kepercayaan 95%, untuk mengetahui perbedaan yang bermakna antara

sistem mikroemulsi formula 1, 2, 3 Apabila pada hasil diperoleh p=0,05 maka

menunjukkan adanya perbedaan bermakna (Sugiyono, 2003).

Salah satu bagian dari uji persyaratan analisis data, sebelum melakukan

analisis data dengan menggunakan ANOVA, maka diperlukan pemenuhan atas

beberapa asumsi data, yaitu data harus mempunyai sebaran (distribusi) normal

ataukah tidak dan mempunyai ragam yang homogen. Syarat uji normalitas dan

homogenitas yaitu P > 0,05 untuk mengetahui perbedaan yang bermakna bila

terdapat perbedaan pada uji ANOVA maka dilanjutkan uji LSD. Hasil uji

ANOVA dan LSD dikatakan memiliki perbedaan yang signifikan P < 0,05

(Sudjana, 1996).
 53

BAB V

HASIL DAN PEMBAHASAN

5.1 Preparasi Sampel

Preparasi sampel pada tahap ini terdiri dari proses pengambilan sampel,

pengeringan dan penyerbukan. Sampel pada penelitian ini adalah tumbuhan

kersen (Muntingi calabura L.) diperoleh dari Balai Tanaman Materia Medika

Batu sebanyak 1 kg, bagian tumbuhan yang diambil yaitu daun kersen. Daun

kersen yang diperoleh dipisahkan dari tangkai dan dicuci dengan air untuk

menghilangkan pengotor yang masih menempel pada daun kemudian daun

dikeringkan didalam rumah kaca selama 1 minggu, tujuannya agar dapat

menghilangkan kadar air dalam sampel yang menyebabkan terjadinya proses

enzimatik sehingga dimungkinkan dapat merusak senyawa-senyawa dalam daun

kersen. Selanjutnya dihaluskan dengan menggunakan penggiling hingga terbentuk

serbuk daun kersen lalu diayak dengan menggunakan ayakan 60 mesh, dengan

tujuan untuk meningkatkan luas permukaan sampel sehingga pelarut lebih mudah

menarik senyawa yang terkandung dalam sampel. Pada penelitian ini hasil

simplisia daun kersen yang diperoleh berwarna hijau muda sebanyak 500 gram.

5.2 Uji Kadar Air Daun Kersen

Uji kadar air dilakukan untuk mengetahui presentase kandungan air yang

terdapat pada sampel. Tujuan dari analisa kandungan air adalah untuk menentukan

kualitas dan stabilitas bahan (Tabrani,1997). Pada penetuan kadar air simplisia

53
54
 54

daun kersen alat yang digunakan yaitu moisture analyzer HC 103 memiliki

kelebihan analisa yang dapat memberikan pengukuran kadar air yang akurat dan

konsisten hanya dalam waktu sekitar tiga menit, pengoperasionan sederhana serta

mutu yang terjangkau. Analisa kandungan air daun kersen dengan moisture

analyzer HC 103, dilakukan replikasi sebanyak tiga kali.

Berdasarkan hasil pengujian kadar air didapatkan bahwa kadar air pada

simplisia daun kersen (Muntingia calabura L.) yakni sebesar 7,01%, 7,16% dan

7,23% (Lampiran 6) diketahui bahwa besarnya kadar air pada sampel daun kersen

tersebut telah memenuhi standar yang ditentukan. Kadar air pada suatu simplisa

bahan obat tidak boleh melebihi dari 10%, apabila lebih dari 10% maka simplisia

akan mudah rusak karena air akan memicu terjadinya pertumbuhan mikroba serta

reaksi-reaksi kimia yang disebabkan karena kelembapan, misalnya reaksi

enzimatik yang dapat menguraikan zat aktif dalam simplisia (Departemen

Kesehatan RI, 1995).

5.3 Pembuatan Ekstrak Etanol dengan Metode Ultrasonik

Pada tahap ini dilakukan pembuatan ekstrak daun kersen (Muntingia

calabura L.) dengan menggunakan metode ultrasonik, karena penggunaan metode

ekstraksi ultrasonik merupakan salah satu upaya peningkatan efisiensi hasil

ekstraksi dari metode-metode ekstraksi konvensional. Ekstraksi konvensional

memiliki beberapa kekurangan yaitu membutuhkan banyak waktu dan pelarut

sehingga memiliki tingkat efisiensi yang rendah (Soni, dkk 2010).

 55

Daun kersen diekstraksi dengan metode ultrasonik menggunakan pelarut

etanol 96%, karena lebih mudah dalam melarutkan semua zat yang bersifat polar,

semipolar, maupun non polar selama 18 menit dengan perbandingan 1:10.

Menurut penelitian yang dilakukan oleh Handayani (2016) proses ekstraksi

terbaik dari ekstrak daun sirsak sebagai antioksidan dengan metode ultrasonic

cleanser diperoleh dari rasio bahan:pelarut 1:10 (b/v). Proses ekstraksi ultrasonik

dilakukan dengan cara menimbang 50 gram sampel, dimasukkan ke dalam labu

erlenmeyer 500 ml lalu ditambahkan pelarut etanol 96% sebanyak 500 ml

dilakukan 3 kali remaserasi selama 18 menit, hal ini dikarenakan ekstrak yang

didapat dari hasil maserasi yang pertama kurang mencukupi sehingga ekstraksi

dilakukan 3 kali. Selanjutnya dilakukan penyaringan untuk mendapatkan filtrat

yang diinginkan, penyaringan dilakukan dengan menggunakan kertas saring agar

filtrat dapat dipisahkan dari residunya. Filtrat yang diperoleh lalu dipekatkan

dengan vacum rotary evaporator pada suhu 50oC, hal ini bertujuan agar dapat

memekatkan ekstrak serta dapat memisahakan antara pelarut etanol 96% dengan

senyawa aktif dalam daun kersen. Proses evaporasi dihentikan apabila pelarut

tidak menetes lagi pada labu alas bulat. Setelah didapatkan ekstrak kental,

rendemen ekstrak dihitung berdasarkan perbandingan berat ekstrak yang

dihasilkan dengan berat awal lalu dikalikan 100%. Hasil ekstraksi daun kersen

ditunjukkan pada Tabel 5.1 degan perhitungan rendemen pada Lampiran 2.

 56

Tabel 5.1 Hasil Ekstraksi Ultrasonik Ekstrak Etanol 96% daun Muntingia
calabura
Hasil
Berat Warna Berat Ekstrak
Pelarut Rendemen
Serbuk ekstrak pekat Pekat (g)
(%)

500 gram Hijau pekat 80 gram 16%

Etanol 96%
kehitaman

Berdasarkan tabel diatas hasil proses ekstraksi daun Muntingia calabura

L. dengan menggunakan ekstraksi ultrasonik didapatkan berat serbuk daun kersen

sebanyak 500 gram, ekstrak kental yang berwarna hijau pekat kehitaman sebesar

80 gram dengan rendemen ekstrak etanol pekat daun kersen sebesar 16%.

Menurut penelitian sebelumnya yang dilakukan oleh Manik, dkk (2014) bahwa

ekstrak etanol 96% daun kersen diperoleh ekstrak kental sebanyak 199,62 gram

dengan rendemen sebesar 30,7%. Perhitungan rendemen berfungsi untuk

mengetahui berapa presentase jumlah ekstrak daun kersen yang dibandingkan

dengan simplisia serbuk daun kersen yang digunakan.

5.4 Uji Bebas Etanol dan Identifikasi Senyawa Aktif Daun Kersen

Uji bebas etanol dilakukan bertujuan untuk membuktikan bahwa tidak

terdapat adanya kandungan etanol yang ada didalam sampel, selain itu etanol

bersifat sebagai antibakteri dan antifungi sehingga akan berpengaruh terhadap

pengujian aktivitas antibakteri.

 57

Tabel 5.2 Hasil Uji Bebas Etanol ekstrak daun kersen (Muntingia calabura L.)
Jenis Perlakuan Hasil Keterangan
Asam asetat, asam
Etanol Tidak bau ester -
sulfat(dipanaskan)
Kalium dikarbonat, asam Berwarna coklat
Etanol -
sulfat

Tabel diatas menunjukkan hasil uji bebas etanol ekstrak daun kersen

positif bebas dari etanol, hal tersebut dibuktikan dengan dilakukan pengujian

dengan menggunakan dua metode reaksi yakni dengan reaksi esterifikasi dan

redoks. Esterifikasi dilakukan dengan reaksi kimia antara asam asetat dan asam

sulfat pada ekstrak dengan dibantu pemanasan.

O H+kalor O

CH3COH + HOCH2CH3 ⥫ CH3COCH2CH3 + H2O

Asam asetat Etanol Etil aseat

Dari hasil reaksi esterifikasi etanol diatas menunjukkan bahwa tidak

terdapat adanya bau ester, hal ini terjadi karena tidak ada atom H dari etanol yang

diikat oleh atom OH dari asam asetat, reaksi ini diperantarai oleh H2SO4 yang

berfungsi sebagai katalis dan bersifat asam kuat sehingga tidak menimbulkan

reaksi bau dari ester maka dapat dinyatakan ekstrak daun kersen bebas dari etanol.

Selanjutnya dilakukan reaksi reduksi dan oksidasi dengan penambahan

asam sulfat dengan kalium dikarbonat menghasilkan warna coklat, dapat dilihat

pada reaksi dibawah ini;

K2Cr2O7+ 4H2SO4+ 3CH3CH2OH Cr2(SO4)3+ K2SO4+ 7H2O + 3CH3CHO

Dari hasil reaksi redoks antara kalium dikromat, asam sulfat dan etanol

pada pengujian bebas etanol menghasilkan warna coklat, warna coklat

 58

dimungkinkan karena adanya Kromium (III) sulfat. Sehingga dapat dinyatakan

ekstrak daun kersen sudah bebas etanol, dengan demikian hasil pada pengujian

aktivitas antibakteri murni karena pengaruh peningkatan konsentrasi ekstrak daun

kersen yang digunakan bukan karena pelarut etanol. Hal ini sejalan dengan

penelitian sebelumnya yang dilakukan oleh Setyaning, dkk (2016) bahwa

ekstraksi daun som jawa (Talinum poniculatum. G) dilakukan pengujian bebas

etanol menghasilkan ekstrak sudah bebas dari etanol dibuktikan dengan tidak

terbentuk warna merah frambos maupun bau pisang. Setelah dilakukan pengujian

bebas etanol ekstrak daun kersen selanjutnya dilakukan pengujian identifikasi

senyawa aktif ekstrak daun kersen.

Identifikasi senyawa aktif yang dilakukan secara kualitatif bertujuan untuk

mengetahui adanya kandungan senyawa aktif dalam daun kersen. Berdasarkan

identifikasi senyawa aktif pada Tabel 5.3 diketahui bahwa ekstrak etanol daun

kersen mengandung flavonoid, tanin dan saponin. Kandungan senyawa tersebut

dapat memperkuat adanya dugaan terhadap aktivitas antibakteri. Hal ini didukung

menurut penelitian Naim (2004) daun kersen memiliki kandungan senyawa

flavonoid, tanin, glikosida, saponin, steroid yang berpotensi dalam menghambat

pertumbuhan bakteri. Hasil identifikasi senyawa aktif ekstrak daun kersen

ditunjukkan pada Tabel dibawah ini dan hasil pada Lampiran 3

 59

Tabel 5.3 Hasil identifikasi senyawa aktif ekstrak daun kersen

No Metabolit sekunder Reagen Indikator Hasil
1. Berwarna jingga
Flavonoid Mg, HCl pekat +
kecoklatan
2. Terbentuknya warna
Tanin FeCl3 +
hijau kehitaman
3. Aquadest, asam Terbentuk buih
Saponin +
klorida 2N setinggi ±1,5 cm
Keterangan : (+) menunjukkan hasil positif

Berdasarkan tabel diatas dilakukan identidikasi senyawa aktif ekstrak

etanol 96% daun Muntingia calabura L. menunjukkan hasil positif mengandung

senyawa flavonoid, tanin dan saponin.

5.4.1 Uji Flavonoid

Flavonoid pada umumnya mudah larut dalam air atau pelarut polar

dikarenakan memiliki ikatan dengan gugus gula (Markham, 1988). Dari analisis

yang dilakukan, diketahui bahwa didalam daun kersen positif mengandung

senyawa flavonoid. Hal tersebut dibuktikan terbentuk sedikit busa dengan

perubahan warna menjadi jingga setelah ditambahkan serbuk Mg dan HCl pekat.

Menurut Prashant et al., (2011) mengatakan bahwa, penambahan HCl pekat pada

uji flavonoid dengan mereduksi inti £-benzopiron yang terdapat pada struktur

flavonoid sehingga terbentuk perubahan warna menjadi merah atau jingga.

Sedangkan dalam penambahan Mg untuk mereduksi sehingga menjadikan flavon,

flavonol, flavonon dan xanton. Dalam ekstrak tumbuhan dapat diketahui apabila

terdapat senyawa flavonoid saat penambahan Mg dan HCl akan terbentuk garam

flavilium, garam ini lah yang dapat memberikan warna merah atau jingga

(Robinson, 1995). Dugaan reaksi senyawa flavonoid yang terbentuk dengan

menggunakan pereaksi Mg dan HCl dapat direaksikan sebagai berikut:

 60

Gambar 5.3 Mekanisme reaksi pembentukan garam flavilium (Achmad,

1986)

5.4.2 Uji Tanin

Dari analisis yang telah dilakukan, dapat diketahui bahwa didalam daun

kersen positif mengandung tanin. Hal ini dapat diketahui dari perubahan warna

yang terjadi saat ditambahkan larutan FeCl3, penambahan FeCl3 dilakukan agar

dapat mengetahui adanya gugus fenol yang terdapat dalam sampel. Hal tersebut

ditunjukkan dengan timbulnya warna hijau kehitaman,perubahan warna yang

terjadi disebabkan oleh reaksi penambahan dengan salah satu gugus hidroksil

yang terdapat dalam senyawa tanin. Menurut Halimah (2010) terbentuknya warna

hijau kehitaman dalam ekstrak setelah ditambahkan dengan FeCl3 karena tanin

akan bereaksi dengan ion Fe3+ membentuk senyawa komplek.

 61

Gambar 5.4 MekanismeReaksi Tanin dan FeCl3

5.4.3 Uji Saponin

Dari analisis diketahui bahwa daun kersen positif mengandung saponin

dibuktikan dengan terbentuknya busa setinggi ± 3 cm apabila dikocok dalam air.

Timbulnya busa pada uji saponin menunjukkan adanya glikosida yang

mempunyai kemampuan membentuk buih didalam air yang terhidrolisis menjadi

glukosa dan aglikon (Rusdi, 1990 dalam Marliana, dkk., 2005). Untuk

memastikan busa yang terbentuk berasal dari saponin selanjutnya ditetesi dengan

menggunakan larutan asam klorida, hal ini menunjukkan bahwa busa yang terjadi

karena pemecahan gula tersebut yang terdapat dalam uji saponin tidak hilang dan

tetap stabil sehingga dapat ditegaskan bahwa esktrak daun kersen terdapat adanya

senyawa saponin.
 62

1-Arabinopiriosil-3β-asetil oleanolat Aglikon Glukosa

Gambar5.5 Mekanisme reaksi hidrolisis saponin dalam air

5.5 Pembuatan Sediaan Mikroemulsi Ekstrak Daun Kersen

Pada pembuatan sediaan mikroemulsi dilakukan percobaan pendahuluan

dengan tujuan menentukan kondisi dan komposisi bahan yang sesuai untuk

menghasilkan sediaan mikroemulsi yang jernih dan stabil, dalam hal ini yang

perlu diperhatikan adalah konsentrasi surfaktan, kosurfaktan dan fase minyak

serta suhu, lama pengadukan dan kecepatan pengadukan. Proses pengadukan ini

tidak boleh terlalu cepat dan terlalu lama apabila terlalu cepat dapat menyebabkan

ukuran globul yang terdispersi menjadi tidak rata sehingga ukuran partikelnya

menjadi lebih besar. Sedangkan pengadukan yang terlalu lama akan menyebabkan

bahan-bahan sulit untuk homogen dan dapat menghasilkan mikroemulsi yang

keruh (Maya L, 2006).

Mikroemulsi ekstrak etanol daun kersen dibuat 3 formula yaitu, F1, F2 dan

[Link] formula tersebut memiliki konsentrasi basis sistem mikroemulsi yang

sama dan bahan aktifyang sama, namun jumlah konsentrasibahan aktif yang

berbeda tujuannya agar dapat membandingkan tingkat kestabilan mikroemulsi dan

terutama tingkat aktivitas antibakteri. Bahan aktif yang digunakan dalam

 63

mikroemulsi yaitu ekstrak daun kersen (Muntingia calabura L.) yang dapat

digunakan dalam pengobatan jerawat dengan konsentrasi (5%, 10% dan 15%).

Penentuan komposisi basis mikroemulsi yang optimal diawali dengan

penentuan pemilihan surfaktan, surfaktan yang digunakan adalah surfaktan

nonionik yang relatif aman karena sifat mengiritasinya rendah. Pada penelitian ini

digunakan kombinasi surfaktan tween 80 dan span 80 yang merupakan

emulsifying agent nonionik menyebabkan fase minyak dan fase air dapat saling

bercampur hingga membentuk mikroemulsi yang lebih efektif dibandingkan

penggunaan emulsifying agent tunggal. Pada umumnya penggunaan surfaktan saja

tidak cukup dalam menurunkan tegangan permukaan sehingga dapat digunakan

penambahan kosurfaktan, kosurfaktan yang digunakan adalah PEG 400 berfungsi

untuk membantu surfaktan dalam menstabilkan mikroemulsi yang telah terbentuk

selain itu dapat meningkatkan penetrasi zat aktif kedalam kulit, dipilih konsentrasi

kosurfaktan 5% pemilihan konsentrasi didasarkan pada penelitian sebelumnya

yang dilakukan oleh Athiyah (2015), hal tersebut dikarenakan pada konsentrasi

5% dapat membantu kelarutan dari zat aktif dalam sediaan mikroemulsi. Yang

ketiga optimasi fase minyak, fase minyak yang digunakan adalah isopropyl

myristate (IPM) karena dapat meningkatkan penetrasi dan penghantaran

transdermal sehingga dapat meningkatkan absorbsi obat ke dalam kulit selain itu

IPM dapat memberikan rasa halus dan nyaman ketika dipakai pada kulit,

pemilihan konsentrasi ini didasarkan pada penentuan IPM dari sediaan topikal

yakni antara 1-10% Rowe et al., (2009), digunakan konsentrasi IPM pada sediaan

mikroemulsi ekstrak daun kersen sebanyak 5%.

 64

Pada tahap awal optimasi komponen mikroemulsiyang digunakan dipilih

berdasarkanperhitungan nilai keseimbangan HLB dari surfaktan dan minyakyang

digunakan dalam formula (perhitungan pada Lampiran 2) memiliki konsentrasi

surfaktan tween 80 sebanyak 33,5%, konsentrasi span 80 sebanyak 16,5%,

konsentrasi kosurfaktan PEG-400 sebanyak 5% dan fase minyak IPM sebanyak

5%. Bahan aktif yang digunakan yaitu ekstrak etanol daun kersen, dibuat dengan

cara melarutkan Dimethyl Sulfoxide (DMSO) dan ekstrak. DMSO berfungsi

sebagai pelarut agar ekstrak dapat larut dengan baik, karena DMSO merupakan

salah satu pelarut yang dapat melarutkan hampir semua senyawa polar maupun

non-polar selain itu DMSO tidak memberikan daya hambat pertumbuhan bakteri

sehingga tidak mempengaruhi hasil pengujian aktivitas antibakteri. Selanjutnya

ekstrak disaring karena terdapat bagian ekstrak yang tidak larut dengan

menggunakan kertas saring whattman, proses penyaringan ini bertujuan untuk

menyeragamkan ukuran ekstrak daun kersen dengan mikroemulsi.

Pembuatan mikroemulsi diawali dengan mencampurkan fase air yang

terdiri dari Tween 80, air bebas Co2dan fase minyak yang terdiri darispan 80, IPM

serta PEG 400. Kedua fase dipanaskan secara terpisah hingga homogen dengan

kecepatan pengadukan 1000 rpmdibantu pemanasan pada suhu 50oC,pemanasan

pada tahap ini bertujuan untuk memudahkan pencampuran serta dapat

membantumenurunkan tegangan antarmuka diantara kedua fase selama 30 menit.

Lamanya pengadukan sangat mempengaruhi hasil akhir mikroemulsi, pengadukan

kurang dari 30 menitmasih terdapat butiran-butiran fase terdispersi sehingga

belum terbentuk mikroemulsi sedangkan pengadukan lebih dari 30 menit

 65

menyebabkan terbentuknya busa dan kabut halus pada sediaan sehingga

menyebabkan sediaan menjadi keruh. Selanjutnya ekstrak daun kersen

ditambahkan sedikit demi sedikit sampai terbentuk mikroemulsi yang jernih

transparan dan stabil setelah disimpan selama 24 jam.

5.6 Evaluasi Fisik Mikroemulsi

Evaluasi karakteristik fisik sistem mikroemulsi ekstrak etanol daun kersen

dilakukan dengan tujuan untuk mendapatkan sediaan mikroemulsi yang

memenuhi karakteristik fisik sesuai dengan spesifikasi yang telah ditentukan

meliputi pengamatan organoleptis, pengukuran pH, pemeriksaan tipe mikroemulsi

dan pemeriksaan ukuran partikel. Setelah dilakukan evaluasi sediaan, selanjutnya

dilakukan uji stabilitas freeze-thaw sediaan mikroemulsi disimpan dalam suhu

dingin 4oC dan suhu tinggi 40°C selama 6 siklus.

5.6.1 Penentuan Organoleptik

Pengujian organoleptis bertujuan untuk mengetahui bahwa karakteristik

fisik mikroemulsi ekstrak etanol daun kersen telah memenuhi kriteria yang

[Link] dilakukan secara visual berdasarkan karakteristik bentuk,

warna, dan bau sediaan mikroemulsi. Pada pemeriksaan organoleptis dilakukan

selama 8 minggu penyimpanan dan pemeriksaan dilakukan secara visual.

 66

Tabel 5.3 Hasil dari pemeriksaan organoleptis mikroemulsi ekstrak daun kersen
Pengamatan Hari ke-
Formula Pengamatan
1 3 5 8 15 22 29 35
Homogenitas HM HM HM HM HM HM HM HM
G G G G G G G G
Warna KJK3 KJK3 KJK3 KJK3 KJK3 KJK3 KJK3 KJK3
F1
Bentuk Semi Semi Semi Semi Semi Semi Semi Semi
solid solid solid solid solid solid solid solid
Bau Khas Khas Khas Khas Khas Khas Khas Khas
Homogenitas HM
HM HM HM HM HM HM HM
G
G G G G G G G
F2 Warna KJK2 KJK2 KJK2 KJK2 KJK2 KJK2 KJK2 KJK2
Bentuk Semi Semi Semi Semi Semi Semi Semi Semi
solid solid solid solid solid solid solid solid
Bau Khas Khas Khas Khas Khas Khas Khas Khas
Homogenitas HM HM HM HM HM HM HM HM
G G G G G G G G
Warna KJK1 KJK1 KJK1 KJK1 KJK1 KJK1 KJK1 KJK1
F3
Bentuk Semi Semi Semi Semi Semi Semi Semi Semi
solid solid solid solid solid solid solid solid
Bau Khas Khas Khas Khas Khas Khas Khas Khas
Keterangan :
HMG : Homogen
Khas : Bau khas dari daun kersen
KJK : Kuning jernih kecoklatan

Berdasarkan hasil pengamatan organoleptis yang dilakukan selama 8

minggu pada ketiga formula menunjukkan sediaan stabil disimpan pada suhu

kamar (27oC) dengan nilai rentang yang ditentukan (Lampiran 6). Masing-masing

formula mikroemulsi ekstrak daun kersen memiliki organoleptis yang hampirsama

kecuali pada warna sediaan mikroemulsi. Pada F1 dengan konsentrasi ekstrak

daun kersen sebanyak 5% memiliki warna kuning coklat muda dengan nilai

rentang 3, F2 dengan konsentrasi ekstrak daun kersen sebanyak 10% memiliki

warna orange kecoklatan dengan nilai rentang 2 dan F3 memiliki warna yang

coklat pekat dengan semakin meningkatnya konsentrasi ekstrak daun kersen

 67

dengan nilai rentang 1. Hal ini dikarenakan pada F3 dengan konsentrasi ekstrak

daun kersen paling banyak (15%) dibandingkan dengan F1 (5%) dan F2 (10%),

sehingga penggunaan ekstrak daun kersen yang semakin banyak akan

menyebabkan warna mikroemulsi semakin [Link] organoleptis

formula menunjukkan bau khas daun kersen dengan semakin meningkatnya

konsentrasi maka bau khas daun kersen semakin tajam selain itu memperlihatkan

bahwa konsistensi dari F3 agak sedikit kental dibandingkan F1 dan F2, hal ini

dikarenakan laju air yang ada pada F3 lebih sedikit. Hasil pengamatan

organoleptik sediaan mikroemulsi ekstrak daun kersen homogen, karena tidak ada

pengendapan dan pemisahan komponen-komponen dalam sediaan.

5.6.2 Uji pH

Pengukuran nilai pH dilakukan untuk memastikan pH sediaan

mikroemulsi ekstrak daun kersen yang dibuat tidak menyebabkan iritasi pada

kulit, hal yang sama dijelaskan oleh Utami (2005) bahwa nilai pH sediaan tidak

boleh terlalu asam karena akan menyebabkan iritasi pada kulit serta tidak boleh

terlalu basa karena akan menyebabkan kulit bersisik. Dilakukan 2 kali pengujian

yakni sebelum pengujian stabilitas dan sesudah stabilitas freeze-thaw, berikut ini

merupakan hasil penentuan pH sebelum stabilitas dapat dilihat pada tabel dibawah

ini

Tabel 5.4 Hasil pemeriksaan rata-rata nilai pH sebelumpengujian stabilitas

Uji pH Minggu Ke-
Formula
1 2 4 8
F1 5,54 ± 0,10 6,04 ± 0,11 5,88 ± 0,07 5,75 ± 0,13
F2 5,79 ± 0,01 6,19 ± 0,07 6,08 ± 0,12 5,84 ± 0,16
F3 6,12 ± 0,46 6,36 ± 0,47 5,97 ± 0,46 5,97 ± 0,36
 68

6,5

6
F1
5,5 F2
5 F3

4,5
Minggu 1 Minggu 2 Minggu 4 Minggu 8

Gambar 5.6 Grafik rata-rata pemeriksaan nilai pH pengujian sebelum

stabilitas

Berdasarkan tabel diatas penentuan pH dilakukan dengan alat pH meter

pada suhu ruang (29oC) selama 8 minggu. Setelah penyimpanan sediaan

mikroemulsi ekstrak daun kersen tetap jernih transparan, bau khas daun kersen,

tidak mengalami pemisahan fase dan tidak terdapat endapan, hal ini menunjukkan

bahwa sediaan mikroemulsi stabil. Hasil dari pengukuran nilai pH sebelum

pengujian stabilitas pada ketiga formula terjadi penurunan pH dan peningkatan pH

yang cenderung tidak terlalu besar selama penyimpanan. Penurunan pH pada

minggu ke-4 dan ke-5 terjadi akibat pengaruh CO2, karena CO2 bereaksi dengan

fase air sehingga membentuk asam. Namun perbedaan nilai pH sediaan

mikroemulsi ekstrak daun kersen tidak terlalu berpengaruh selama masih memiliki

rentang pH antara (4,5-6,5), rentang pH tersebut sesuai dengan ketentuan pH

untuk sediaan topikal.

Dari data pengujian nilai pH yang didapat selanjutnya dilakukan uji

statistik dengan menggunakan software SPSS 23, sebelum dilakukan pengujian

dengan One-Way ANOVA perlu dilakukan pengujian normalitas data terlebih

dahulu menggunakan Shapiro-Wilk. Hasil yang diperoleh menunjukkan bahwa

 69

nilai signifikansi 0,072 (p>0,05) yang berarti bahwa data menunjukkan normal.

Selanjutnya dilakukan uji homogenitas data menggunakan Levene test hasil yang

diperoleh menunjukkan bahwa 0,142 (p>0,05) yang berarti bahwa data

menunjukkan telah homogen. Data pH yang telah homogen kemudian dilanjutkan

dengan pengujian One-Way ANOVA between group, didapat bahwa nilai

signifikansi 0,246 (p>0,05) yang berarti bahwa tidak adanya pengaruh yang

signifikan terhadap nilai pH. Untuk mengetahui perbedaaan antar konsentrasi

dilakukan uji lanjutan Post-Hoc test yakni Tukey HSD, berdasarkan hasil yang

diperoleh antar masing-masing formula menunjukkan bahwa nilai signifikasi 0,23

(p>0,05) yang artinya bahwa data tersebut tidak terdapat perberbedaan yang

bermakna dapat dilihat pada lampiran 4.

5.6.3 Uji Freeze-thaw

Pada pengujian stabilitas freeze-thaw dilakukan penyimpanan sediaan

mikroemulsi ekstrak daun kersen pada suhu yang berbeda secara bergantian yakni

suhu dingin (4oC) dan suhu tinggi (40oC) dalam rentang waktu tertentu, reaksi

yang terjadi bersifat reversible atau sebaliknya serta dilakukan pemeriksaan nilai

pH sesudah stabilitas freeze-thaw pada sediaan yang bertujuan untuk mengetahui

pengaruh suhu penyimpanan terhadap stabilitas nilai pH sediaan mikroemulsi

ekstrak daun kersen dapat dilihat pada tabel dibawah ini

 70

Tabel 5.5 Hasil pengamatan uji Freeze-thaw selama 6 siklus

Siklus ke-
Formul
Organoleptis 1 2 3 4 5 6
a o
Suhu 4 C Suhu 40oC
Bentuk SS Beku Beku SS SS SS
Warna KJC3 Kuning Kuning KJC3 KJC3 KJC3
Bau Khas Khas Khas Khas Khas Khas
F1
Endapan/
pemisahan - - - - - -
fase
Bentuk SS Beku Beku SS SS SS
Warna KJC2 KJ KJ KJC2 KJC2 KJC2
Bau Khas Khas Khas Khas Khas Khas
F2
Endapan/
pemisahan - - - - -
-
fase
Bentuk SS Beku Beku SS SS SS
Warna KJC1 KK KK KJC1 KJC1 KJC1
F3 Bau Khas Khas Khas Khas Khas Khas
Endapan/
pemisahan - - - - - -
fase
Keterangan:
KJC : Kuning jernih kecoklatan
KK : Kuning kecoklatan
KJ : Kuning jernih
Khas : Bau khas daun kersen
SS : Semisolid

Tabel 5.6 Hasil pengujian rata-rata nilai pH setelah stabilitas Freeze-thaw

pH
Formula
Rata-Rata Nilai SD
F1 5,79 0,16
F2 6,23 0,07
F3 6,09 0,45
 71

6,5

6 F1

5,5 F2
F3
5

4,5
Rata-Rata

Gambar 5.7 Grafik hasil rata-rata pemeriksaan nilai pH setelah stabilitas

Dari data diatas sediaan mikroemulsi ekstrak daun kersen dilakukan

pengujian stabilitas dengan metode Freeze-thaw. Metode stabilitas ini dilakukan

secara organoleptis selama 6 siklus disimpan secara bergantian pada suhu dingin

(40C) dan suhu tinggi (400C). Uji stabilitas freeze-thaw menunjukkan bahwa

keseluruhan formula sediaan secara organoleptik menunjukkan mengalami

perubahan fisik, yang terjadi pada siklus ke-2 dan ke-3 saat disimpan pada suhu

dingin sediaan mikroemulsi membeku pada F1 memiliki warna kuning, F2

memiliki warna kuning jernih dan F3 memiliki warna kuning kecoklatan tetapi

ketika sediaan mikroemulsi dipindahkan pada suhu ruang (29oC) maupun suhu

tinggi (40oC) sediaan kembali kebentuk dan warna semula, hal ini menunjukkan

bahwa fase air dan minyak dengan bantuan surfaktan dapat membentuk suatu

larutan tunggal yang terdispersi dengan baik serta bersifat reversible karena tidak

terjadi pemisahan fase. Menurut Faizatun et al., (2008) sediaan dapat dikatakan

stabil apabila tidak mengalami pemisahan fase, tidak memiliki endapan dan

gumpalan dapat dilihat pada Lampiran 3 selain itu pada ketiga formula sediaan

mikroemulsi ekstrak daun kersen tetap memiliki bau khas daun kersen serta

bentuk semisolid.
 72

Pada pemeriksaan pH setelah stabilitas Freeze-thaw berdasarkan pada

Gambar 5.7 hasil yang didapat menunjukkan bahwa nilai pH mengalami

penurunan pada F3, hal ini terjadi dikarenakan perubahan suhu mengalami

degradasi oksidatif pada rantai polimer surfaktan sehingga menyebabkan pH

menurun (Nandiet al., 2013) namun penurunan tersebut tidak terlalu signifikan

dari pH awal sediaan dan masih termasuk dalam rentang pH kulit.

Dari data hasil pengujian nilai pH sesudah stabilitas dilakukan analisis

statistik untuk mengetahui adanya perbedaan bermakna nilai pH antara ketiga

formula. Sebelum dilakukan pengujian dengan One-Way ANOVA perlu dilakukan

pengujian normalitas data terlebih dahulu menggunakan Shapiro-Wilk diperoleh

nilai signifikansi 0,690 (p>0,05) yang berarti bahwa data menunjukkan normal.

Selanjutnya dilakukan uji homogenitas data menggunakan Levene test hasil yang

diperoleh menunjukkan bahwa 0,195 (p>0,05) yang berarti bahwa data

menunjukkan telah homogen. Data pH yang telah homogen kemudian dilanjutkan

dengan pengujian One-Way ANOVA, didapat bahwa nilai signifikansi 0,224

(p>0,05) yang berarti bahwa tidak adanya pengaruh yang signifikan terhadap nilai

pH. Kemudian dilakukan pengujian lanjutan dengan menggunakan post-hoc test

(LSD), hasil yang diperoleh menunjukkan bahwa nilai signifikan (p>0,05). Nilai

tersebut menunjukkan bahwa nilai pH antar semua formula tidak memiliki

perbedaan yang signifikan, sehingga sediaan dapat dikatakan stabil dalam

pengujian freeze-thaw selama 6 siklus.

 73

Analisis data statistik dengan membandingkan nilai pH sediaan

mikroemulsi ekstrak daun kersen sebelum dan sesudah stabilitas dilakukan untuk

mengetahui adanya perbedaan yang bermakna antara pH sebelum dan sesudah.

Tabel 5.7 Hasil pengujian nilai pH sebelum dan sesudah stabilitas Freeze-thaw
Rata-rata ± SD
Formula
Sebelum Sesudah
F1 5,81 ± 0,08 5,79 ± 0,16
F2 5,94 ± 0,08 6,23 ± 0,07
F3 6,20 ± 0,43 6,09 ± 0,45

6,6
6,4
6,2
F1
6
F2
5,8
F3
5,6
5,4
sebelum sesudah

Gambar 5.8 Grafik hasil rata-rata pemeriksaan nilai pH pengujian pH sebelum

dan sesudah stabilitas Freeze-thaw

Analisis data yang digunakan yakni Paired t-test menggunakan software

SPSS 23. Berdasarkan hasil uji tersebut pada F1 dan F3 diperoleh nilai

signifikansi 0,707 dan 0,188 (P>0,05) yang berarti bahwa menunjukkan tidak

terdapat perbedaan yang bermakna antara nilai pH sebelum dan sesudah stabilitas

freeze-thaw. Pada F2 sediaan mikroemulsi ekstrak daun kersen didapatkan nilai

signifikansi 0,00 (P<0,05) yang menunjukkan bahwa terdapat perbedaan yang

bermakna antara nilai pH sediaan pada ketiga formulasebelum dan sesudah

pengujian stabilitas, hal ini dikarenakan terjadi peningkatan suhu tanpa

 74

menggunakan konsentrasi 10% akan berakibat pada peningkatan pH selengkapnya

dapat dilihat pada lampiran 5.

5.6.4 Penentuan Tipe Mikroemulsi

Pemeriksaan tipe emulsi bertujuan untuk mengetahui tipe mikroemulsi yang

terbentuk, dilakukan denganpenambahan zat warna larut air yaitu metilen red pada

permukaan sediaan mikroemulsi diatas kaca objek lalu diamati dibawah

mikroskop elektron. Tipe mikroemulsi tergantung pada konsentrasi dan

komponen-komponen bahan yang terlarut didalamnya, karena hal tersebut dapat

mempengaruhi pembentukan tipe mikroemulsi.

Dihasilkan tipe emulsi sesuai dengan kategori yang diinginkan, pada

awalnya mikroemulsi berwarna kuning kecoklatan setelah ditambahkan metilen

red menghasilkan warna merah menunjukkan bahwa metilen red terdispersi

merata keseluruh bagian permukaan sediaan mikroemulsi. Hal tersebut

dikarenakan nilai keseimbangan HLB yang digunakan sesuai dengan

pembentukan tipe m/a, disebabkan karena sebagian dari komponen mikroemulsi

bersifat hidrofilik sehingga meskipun terdapat komponen bersifat hidrofob tipe

mikroemulsi ekstrak daun kersen yang dihasilkan bersifat m/a. Selain itu surfaktan

yang memiliki gugus polar cenderung lebih kuat sehingga membentuk tipe emulsi

m/a (Martin et al., 1993).

 75

Gambar 5.9 Hasil penentuan tipe mikroemulsi ekstrak daun kersen dengan
menggunakan mikroskop optik perbesaran (400x)

5.6.5 Uji Kelembapan Mikroemulsi

Uji kelembapan sediaan dilakukan untuk mengetahui presentase

kandungan air yang terdapat pada masing-masing sediaan dengan menggunakan

alat moisture analyzer HC 103. Didapatkan nilai kadar air dalam sediaan

mikroemulsi ekstrak daun kersen pada ketiga formula diperoleh 57,65%

konsentrasi F3 15% kadar air yang diperoleh 58,36% konsentrasi F2 10% kadar

air yang diperoleh 59,13% konsentrasi F1 5%, hal ini sejalan dengan penelitian

yang dilakukan oleh Jessica et al., (2016) bahwa standar kadar air dalam sediaan

maksimal 60%. Berdasarkan standar yang ditentukan hasil yang diperoleh sediaan

mikroemulsi ekstrak daun kersen masih dibawah rentang yang ditentukan, karena

dalam pengujian kadar air dipengaruhi oleh konsentrasi ekstrak sehingga dapat

disimpulkan semakin besar konsentrasi ekstrak maka semakin kecil presentase

kandungan air yang didapat.

 76

5.7 Uji Aktivitas Antibakteri

Pengujian aktivitas antibakteri bertujuan untuk menentukan kemampuan

ekstrak etanol daun kersen (Muntinga calabura L.) dalam menghambat

pertumbuhan bakteri. Dilakukan dengan menggunakan metode difusi sumuran

(well diffusion method), metode sumuran jarang digunakan dalam pengujian

antibakteri karena sulitnya pengerjaan, namun hasilnya akan lebih mudah terlihat.

Hal ini terjadi karena pada setiap lubang diisi dengan konsentrasi ekstrak, maka

osmolaritas yang terjadi lebih menyeluruh serta konsentrasi ekstrak yang

dihasilkan akan lebih tinggi dan lebih kuat dalam menghambat pertumbuhan

bakteri dibandingkan dengan metode difusi disk (Suprastiwi, 2006).

Bakteri yang digunakan sebelumnya dilakukan peremajaan terlebih dahulu

untuk meregenerasi bakteri agar diperoleh bakteri yang muda serta tidak

terkontaminasi. Media yang digunakan dalam pengujian aktivitas antibakteri ada 2

macam yang pertama, media Luria Bertani Broth (LBB) merupakan media cair,

media yang tidak mengandung agar dan dapat digunakan untuk pemeliharaan

isolat bakteri serta peremajaan bakteri. Yang kedua, media Nutrient Agar (NA)

merupakan media agar yang digunakan untuk pengujian aktivitas antibakteri.

Peremajaan awal bakteri dilakukan dengan menggunakan metode dilusi

cair yaitu, media Luria Bertani Broth (LBB) dengan cara diambil 2 jarum ose

bakteri [Link] kemudian dimasukan pada media LBB. Parameter yang

digunakan adalah kekeruhan (ada pertumbuhan bakteri) dan kejernihan (tidak ada

pertumbuhan bakteri), yang terlihat setelah diinkubasi selama 24 jam pada suhu

37oC yang bertujuan untuk memaksimalkan pertumbuhan bakteri. Hasil dari

 77

peremajaan bakteri menunjukkan bahwa media LBB mengalami kekeruhan yang

menandakan bahwa didalam media tersebut didominasi oleh bakteri

[Link], sehingga diketahui bakteri dapat berkembang dengan baik.

Pembuatan media aktivitas antibakteri dengan menggunakan media

Nutrient Agar (NA) dilakukan dengan cara mencampurkan serbuk media agar NA

dengan aquadest. Kemudian dihomogenkan menggunakan magnetic stirrer diatas

hotplate pada suhu 50oC sampai media agar dan aquadest, setelah itu dimasukan

media agar NA kedalam autoklaf selama 15 menit pada suhu 121oC agar media

tersebut tetap steril dan terhindar dari mikroba-mikroba lainnya.

Pembuatan media uji aktivitas antibakteri, proses ini dilakukan secara

steril dan aseptis yang dikerjakan didalam Laminar Air Flow (LAF). Pembuatan

media uji dilakukan dengan cara diambil biakan bakteri [Link] yang ada

didalam media Luria Bertani Broth (LBB) menggunakan mikropipet sebanyak

200 µl kedalam cawan petri yang sudah disterilkan, lalu dimasukan media

Nutrient Agar (NA) dengan menggunakan gelas ukur sebanyak 17 ml putar cawan

petri secara perlahan agar media NA dapat bercampur dengan bakteri, hingga

media NA memadat. Selanjutnya dibuat sumuran pada masing-masing media agar

menggunakan blue-tip dengan ukuran lubang sumuran ± 6 mm.

Diameter zona hambat terhadap bakteri [Link] dipengaruhi oleh

konsentrasi ekstrak daun kersen, serta dalam pengukuran zona hambat dapat

diketahui dengan terbentuknya zona bening yang terdapat disekitar lubang

sumuran. Pada penelitian ini menggunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL)

dengan tiga perlakuan dan disetiap perlakuan terdiri dari tiga ulangan. Pada
 78

pengujian aktivitas antibakteri digunakan kontrol pembanding yakni blanko

sediaan mikroemulsi, tujuannya untuk membuktikan bahwa komponen bahan

yang terdapat didalam pembuatan sediaan mirkoemulsi tidak berpengaruh

terhadap aktivitas antibakteri. Pada kontrol negatif digunakan aquadest steril

karena untuk memastikan bahwa aquadest steril tidak memiliki aktivitas

antibakteri terhadap bakteri [Link]. Kontrol positif yang digunakan dalam

penelitian adalah cendo xitrol tetes mata memiliki kandungan neomisin. Neomisin

termasuk antibiotik golongan aminoglikosida, aminoglikosida lebih efektif

terhadap organisme yang pertumbuhannya cepat sehingga akhirnya membunuh

melalui beberapa mekanisme (Anonim, 2010). Neomisin efektif baik terhadap

Gram positif maupun Gram negatif. Mekanisme kerja neomisin dalam

menghambat bakteri dengan berkumpul pada subunit-subunit ribosom, sehingga

menghambat sintesa protein yang pada akhirnya bakteri menjadi terganggu,

sehingga dapat mengakibatkan kematian sel pada bakteri (Katzung, 2004).

Media sumuran masing-masing diisi kontrol positif, kontrol negatif,

kontrol pembanding dan sediaan mikroemulsi dengan masing-masing konsentrasi

ekstrak yaitu 5%, 10%, dan 15% sebanyak 50 µl pada media yang telah

diinokulasi bakteri [Link]. Selanjutnya cawan petri dibungkus dengan

menggunakan plastik wrap, diinkubasi selama 24 jam pada suhu 37oC dalam

kondisi aerob sehingga agar dapat diamati zona bening yang terbentuk disekitar

lubang sumuran(Ulya et al., 2015)

 79

Hasil uji aktivitas antibakteri sediaan mikroemulsi dalam penelitian ini,

sesuai dengan tujuan yaitu untuk mengetahui aktif atau tidaknya ekstrak daun

kersen terhadap bakteri gram positif [Link]. Dari hasil tersebut dapat

ditentukan ukuran zona beningnya, sehingga didapatkan diameter zona hambat

pada tabel dibawah ini.

Tabel 5.8 Rata-rata hasil diameter zona hambat mikroemulsi ekstrak daun kersen
dengan sumuran berdiameter 6 mm
Rata-rata Diameter Zona Hambat
Konsentrasi Rata-rata ± Nilai
(mm)
ekstrak SD
Ulangan I Ulangan II Ulangan III
F1 5% 5,60 mm 6,61 mm 6,20 mm 6,13 ± 0,50
F2 10% 8,30 mm 8,49 mm 8,24 mm 8,34 ± 0,13
F3 15% 12,7 mm 11,21 mm 12,45 mm 12,2 ± 0,79
Kontrol (+) 17,21 mm 16,32 mm 17,21 mm 16,9 ± 0,51
Kontrol (-) 0 0 0 0
Kontrol 0
0 0 0
pembanding
Kontrol media 0 0 0 0

Berdasarkan hasil tabel diatas dapat diketahui bahwa pengujian aktivitas

antibakteri sediaan mikroemulsi ekstrak daun kersen (Muntingia calabura L.)

pada konsentrasi 5%, 10% dan 15% diperoleh hasil sesuai dengan standar kategori

respon zona hambat menurut Davis dan Stout (1971) memiliki rata-rata diameter

zona hambat yang termasuk dalam kategori sedang dan kuat. Pada F1 konsentrasi

5% ekstrak daun kersendapat memberikan aktivitas antibakteri terhadap bakteri

[Link] sebesar 5-6mm hasil tersebut menunjukkan bahwa konsentrasi

hambat minimum terendah dalam kategori sedang, dan dengan semakin

meningkatnya konsentrasi ekstrak yang digunakan pada daun kersen yaitu

konsentrasi 10% dan 15%, luas zona hambat yang ditunjukkan semakin besar
 80

sedangkan pada F2 konsentrasi ekstrak 10% luas zona hambat sekitar 8 mm maka

dapat dikategorikan sedang, dan pada F3 konsentrasi ekstrak 15% luas zona

hambat sekitar 11-12 mm memiliki kemampuan zona hambat tertinggi

dibandingkan dengan semua perlakuan, maka dapat dikategorikan kuat. Hal ini

sesuai dengan pendapat Jawetz (2005) bahwa semakin tinggi konsentrasi zat

antimikroba maka semakin besar kemampuan untuk membunuh mikroorganisme.

Pada pengujian kontrol positif memiliki daya hambat sekitar 16-17mm,

maka dapat dikategorikan kuat dalam menghambat bakteri [Link].

Konsentrasi zona hambat sediaan mikroemulsi ekstrak etanol daun kersen

terhadap bakteri [Link] lebih rendah dibandingkan kontrol positif, hal ini

disebabkan karena neomisin merupakan senyawa murni, sedangkan mikroemulsi

ekstrak etanol daun kersen masih mengandung berbagai senyawa lain yang dapat

mempengaruhi kemampuan flavonoid, saponin, tanin, dan alkaloid untuk

menghambat pertumbuhan bakteri. Zona hambat yang dihasilkan oleh ekstrak

daun kersen (Muntingia calbura L.) terhadap bakteri [Link] dapat dilihat

pada Gambar 5.6

A B C D
. . . .
. . . .

Gambar 5.10 Hasil Zona hambat F1 5% (A) Zona hambat F2 10% (B) Zona
hambat F3 15% (C) Kontrol positif Neomisin (D)
Hasil penelitian sebelumnya yang dilakukan oleh Pembayun et al., (2012)

menunjukkan bahwa gel ekstrak bunga rosella (Hibiscus sabdariffa L.) memiliki
 81

daya hambat terhadap pertumbuhan bakteri [Link] dengan diameter

hambat sebesar 20,33±0,29 mm untuk konsentrasi ekstrak 10% yang termasuk

kategori kuat. Ulya et al., (2015) juga menyebutkan bahwa minyak atsiri rimpang

bangle memiliki aktivitas antibakteri [Link] dan antibiofilm terbesar

ditunjukkan pada konsentrasi 90% dengan diameter zono hambat sebesar

20,29±1,31 mm.

Dari hasil identifikasi senyawa kimia menunjukkan bahwa ekstrak etanol

daun kersen memiliki kandungan senyawa yang sama yaitu flavonoid, saponin

dan tanin. Ketiga golongan senyawa tersebut diketahui memiliki aktivitas

antibakteri. Dalam mekanisme kerja zat antibakteri terhadap golongan senyawa

metabolit sekunder memiliki aktivitas yang berbeda. Flavonoid dapat digunakan

sebagai antibakteri karena dapat menghambat fungsi membran sel yaitu dengan

membentuk ikatan komplek dengan dinding sel dan merusak membran

(PepeIjnjak et al., 2005). Flavonoid dapat menghambat metabolisme energi

dengan cara menghambat sistem respirasi, karena dibutuhkan energi yang cukup

untuk penyerapan aktif berbagai metabolit dan biosintesis makromolekul

(Cushnieet al., 2005).

Saponin memiliki aktivitas sebagai antibakteri. Mekanisme kerja

antibakteri senyawa saponin yaitu dengan cara menurunkan tegangan permukaan

sehingga mengakibatkan naiknya permeabilitas atau kebocoran sel, hal ini

menyebabkan sitoplasma bocor dan keluar dari sel sehingga sel akan mati

(Adi,dkk2010). Sejalan dengan penelitian yang dilakukan oleh Dzen, dkk (2003)

menjelaskan juga bahwa mekanisme kerja dari senyawa saponin dapat dengan
 82

cara merusak membran sitoplasma, membran sitoplasma bakteri sendiri berfungsi

untuk mengatur masuknya bahan-bahan makanan atau nutrisi. Apabila membran

sitoplasma rusak maka metabolit penting dalam bakteri akan keluar dan bahan

makanan untuk menghasilkan energi tidak dapat masuk sehingga terjadi

ketidakmampuan sel bakteri untuk tumbuh

Senyawa metabolit sekunder lainnya yang terkandung pada duan kersen

adalah tanin. Mekanisme kerja antibakteri senyawa tanin yaitu dengan merusak

membran sel bakteri, senyawa astringent tanin dapat mereduksi pembentukan

suatu ikatan kompleks tanin terhadap enzim atau substrat mikroba dan

pembentukan suatu ikatan kompleks tanin terhadap ion logam yang dapat

menambah daya toksisitas tanin itu sendiri (Akiyama et al., 2001) sementara

menurut Naim (2004) aktivitas antibakteri senyawa tanin adalah cara merusak

dinding selatau membran sel, sehingga mengganggu permeabilitas sel yang

mengakibatkan sel tidak dapat melakukan aktivitas hidup karena pertumbuhannya

terhambat.

Hasil dari pengujian aktivitas antibakteri terhadap bakteri [Link]

dilakukan uji statistik dengan One-Way ANOVA dengan α 0,05 taraf kepercayaan

95% untuk mengetahui ada atau tidaknya pengaruh konsentrasi terhadap zona

hambat yang dihasilkan bakteri [Link]. Sebelumnya dilakukan uji

normalitas dengan Shapiro-Wilk yang bertujuan untuk melihat apakah data yang

diperoleh dalam penelitian terdistribusi normal atau tidak. Hasil normalitas

menunjukkan nilai signifikansi 0,225 (p>0,05), hal ini menunjukkan bahwa data

hasil penelitian terdistribusi normal. Selanjutnya dilakukan uji homogenitas data

 83

dengan menggunakan Levene test dengan (p>0,05), dilakukan untuk mengetahui

apakah data yang didapat homogen atau tidak. Hasil homogenitas menunjukkan

nilai signifikansi 0,104 (p>0,05), hal ini menunjukkan bahwa data hasil penelitian

ini homogen.

Setelah data terdistribusi normal dan homogen selanjutnya dapat dilakukan

pengujian lanjutan dengan one-way ANOVA. Berdasarkan hasil one-way

ANOVA diketahui bahwa signifikansi 0,00 yang artinya (p<0,05) dengan nilai F

hitung (227,496) > f tabel (237) sehingga dapat disimpulkan bahwa hipotesa nol

(Ho) ditolak dan hipotesa 1 (H1) diterima, jadi pemberian ekstrak daun kersen

secara signifikan dapat berpengaruh terhadap aktivitas antibakteri [Link]

hal ini dikarenakan didalam daun kersen terdapat senyawa-senyawa yang

bertanggung jawab sebagai antibakteri. Selanjutnya untuk perbedaan antar rata-

rata kelompok konsentrasi secara lebih spesifik dapat dilakukan uji Post-Hoc,

hasilnya menunjukkan bahwa terdapat perbedaan yang signifikan P-value < 0,05

antar perlakuan, seperti dilihat pada Tabel 5.9

Tabel 5.9 Hasil Statistik Tukey HSD

No Konsentrasi (I- J) Nilai signifikan Keterangan
1. 5% - 10% 0,005 Berbeda signifikan
2. 5% - 15% 0,000 Berbeda signifikan
3. 5% - kontrol positif 0,000 Berbeda signifikan
4. 10% - 15% 0,000 Berbeda signifikan
5. 10% - kontrol positif 0,000 Berbeda signifikan
6. 15% - kontrol positif 0,000 Berbeda signifikan

Menurut hasil uji Post-Hoc yang terdapat pada tabel diatas yang berfungsi

untuk melihat perbedaan antar 2 kelompok kontrol positif dan perlakuan,

menunjukkan efek yang dimiliki pada masing-masing perlakuan tidak sebanding.

 84

Pada tabel diatas dapat diketahui bahwa data terdapat perbedaan yang signifikan,

hal ini menunjukkan karena pada kelompok perlakuan memiliki kemampuan

menghambat bakteri [Link] yang tidak sama dengan kelompok kontrol

positif, hal tersebut dikarenakan pada kontrol positif memiliki spektrum luas

sehingga dapat melawan bakteri baik Gram positif maupun Gram negatif selain itu

diameter zona hambat yang dihasilkan oleh kontrol positif lebih besar dari pada

zona hambat yang dihasilkan oleh ekstrak daun kersen. Hal tersebut juga terjadi

dikarenakan perbedaan adanya perlakuan yang berbeda pada tiap formulasi

mikroemulsi yang dibuat, yakni perbedaan antar konsentrasi ekstrak 5% 10% dan

15%.

Semakin besar konsentrasi ekstrak daun kersen maka semakin besar pula

aktivitas antibakterinya, untuk mengetahui KBM dalam menghambat bakteri

[Link] yaitu dengan menggunakan konsentrasi 15%, karena dengan

konsentrasi 15% dapat menghambat bakteri dalam kategori kuat. Penentuan

ukuran konsentrasi tersebut sudah dijelaskan dalam surat al Furqon (25): 2

ِ ‫يك فِي أٱل ُم أل‬

َ َ‫ك َو َخل‬
‫ق‬ ٞ ‫ض َولَمأ يَتَّ ِخ أذ َولَ ٗدا َولَمأ يَ ُكن لَّهۥُ َش ِر‬ ‫ك ٱل َّس َٰ َم َٰ َو ِ أ‬
ِ ‫ت َوٱۡلَ أر‬ ُ ‫ٱلَّ ِذي لَ ۥه ُ ُم أل‬
ٗ ‫ُك َّل َش أي ٖء فَقَ َّد َر ۥهُ تَ أق ِد‬
٢ ‫يرا‬
Artinya: “Yang kepunyaan-Nya-lah kerajaan langit dan bumi, dan Dia tidak

mempunyai anak, dan tidak ada sekutu bagi-Nya dalam kekuasaan(Nya), dan dia

telah menciptakan segala sesuatu, dan Dia menetapkan ukuran-ukurannya

dengan serapi-rapinya”.

ٗ ‫ق ُك َّل ش أَي ٖء فَقَ َّد َر ۥهُ ت أَق ِد‬

Lafad ‫يرا‬ َ َ‫ َو َخل‬pada ayat diatas menjelaskan bahwa Allah

telah menetapkan segala sesuatu dan menetapkan ukuran dengan serapi-rapinya

 85

tanpa ada cela atau kebengkokan didalamnya, tanpa penambahan atau

pengurangan semua demi kemaslahatan manusia (al Jazairi, 2008). Hal tersebut

menunjukkan bahwa nilai KHM serta KBM dalam pengujian aktivitas antibakteri

sediaan mikroemulsi ekstrak daun kersen merupakan ukuran yang sesuai dalam

menghambat pertumbuhan bakteri [Link], sehingga pemakaian sediaan

mikroemulsi disesuaikan dengan kebutuhan seseorang dalam pengobatan jerawat.

Apabila konsentrasi penggunaan kurang dari KHM dimungkinkan bakteri tidak

dapat terhambat dengan konsentrasi yang terlalu kecil sehingga tidak dapat

memberikan efek dalam pengobatan jerwat, sedangkan apabila menggunakan

konsentrasi yang lebih tinggi sampai melebihi batas rentang sebagai konsentrasi

maksimal yang dapat membunuh bakteri uji dimungkinkan akan terjadi kelebihan

dosis yang mengakibatkan iritasi pada kulit. Dalan hal penggunaan konsentrasi

yang berlebihan tidak dianjurkan dalam islam, karena pada dasarnya sesuatu yang

berlebih-lebihan itu tidak baik. Dengan demikian sediaan mikroemulsi ekstrak

daun kersen dapat digunakan sebagai alternatif pengobatan penyakit jerawat pada

konsentrasi 5%, 10% dan 15%.

5.8 Pemeriksaan Ukuran Partikel Mikroemulsi

Pemeriksaan ukuran partikel sediaan mikroemulsi ekstrak daun kersen

dilakukan dengan menggunakan Particle Size Analyzer (Malvern) SZ-100 dengan

sensitivitas 3-10000nm. PSA merupakan instrument yang dapat mengukur ukuran

partikel dengan ukuran 1 nm -2000 µm serta zeta potensial partikel berukuran 5

nm – 30 µm (Nikumbh et al., 2013), selain ukuran droplet, nilai polidispersitas

 86

indeks (PI) juga memberikan informasi mengenai kestabilansediaan, semakin

rendah nilai PI maka menunjukkan ukuran yang semakin seragam. Ukuran yang

seragam ditunjukkan grafik yang cenderung lebih curam serta distribusi ukuran

partikelnya lebih sempit dengan memiliki titik puncak yang lebih tinggi. Dimana

rentang nilai PI 0,1-0,25 menunjukkan distribusi ukuran sempit sedangkan nilai

lebih dari 0,5 menunjukkan distribusi yang luas, semakin mendekati nilai nol

maka distribusinya semakin baik (Nindhin, 2008)

Penggunaan mikroemulsi sangat bermanfaat sebagai zat pembawa serta

dapat meningkatkan aktivitas antibakteri dalam sediaan topikal dikarenakan

memiliki ukuran yang kecil sehingga menyebabkan partikel tersebut berdifusi

melalui membran sel. Mekanisme transportasi sediaan transdermal dari daun

kersen pada konsentrasi yang ditentukan secara umum dapat diaplikasikan pada

kulit yang diserap ke dalam permukaan kulit kemudian didistribusikan secara

sistemik sehingga daun kersen dapat berpenetrasi ke dalam kulit, selain itu

kelebihan pemberian obat secara transdermal dapat menghindarkan transportasi

obat dalam saluran cerna sehingga dapat mencegah terjadinya interaksi dengan

obat lain, minuman, makanan serta pH saluran cerna (Hendriati, 2008)

Pemilihan konsentrasi terbaik sediaan mikroemulsi ekstrak daun kersen

dipilih F2 konsentrasi 10%, hal tersebutdikarenakan pada F1 dan F3 memiliki

komposisi basis mikroemulsi yang sama sehingga tidak mempengaruhi pengujian

ukuran partikel selain itu ditunjukkan hasil evaluasi fisikuji organoleptik, pH,

stabilitas freeze-thaw dan aktivitas antibakteri yang baik. Pada konsentrasi 10%

memiliki kemampuan daya hambat yang baik 8,34±0,13 mmkategori sedang

 87

dalam menghambat bakteri [Link], sehingga pemilihan konsentrasi 10%

merupakan formula yang efektif untuk dilakukan pemeriksaan ukuran partikel.

Dari hasil uji pemeriksaan ukuran droplet dengan PSA sediaan

mikroemulsi ekstrak daun kersen pada F2 dengan konsentrasi 10% menunjukkan

bahwa mikropartikel yang dihasilkan memiliki rata-rata ukuran partikel sebesar

15,01 nm dengan nilai polidispersitas indeks 0,22<0,5 masih dianggap memiliki

distribusi ukuran yang sempit, hal ini dapat dikatakan bahwa mikroemulsi ekstrak

daun kersen memiliki homogenitas ukuran partikel yang baik. Selain itu

komponen bahan yang terdapat pada sediaan mikroemulsi mempengaruhi ukuran

partikel, hal ini ditunjukkan dengan tingginya konsentrasi surfaktan yang

digunakan sehingga mengakibatkan banyak terbentuknya misel. Menurut Martin

et al., (1993) menjelaskan bahwa misel-misel yang terbentuk disekitar globul

minyak dapat menyebabkan cahaya monokromatis yang dapat menembus globul

minyak sedikit hal tersebut mengakibatkan cahaya yang terdifraksi juga sedikit,

sehingga menghasilkan ukuran globul yang terbaca dalam alat particle size

analyzer (PSA) semakin kecil.

 88

BAB VI

KESIMPULAN DAN SARAN

6.1 Kesimpulan

Berdasarkan hasil penelitian yang dilakukan maka dapat diambil

kesimpulan sebagai berikut:

1. Sediaan mikroemulsi ekstrak daun kersen (Muntingia calabura L.)

memiliki karakteristik fisik yang baik secara organoleptis jernih

transparan, bau khas kersen, bentuk semisolid, memiliki rentang pH 5-6,

tipe mikroemulsi o/w, memiliki nilai rata-rata ukuran partikel 15,01 nm,

uji kelembapan sediaan mikroemulsi diperoleh 58,36% dan sediaan tetap

stabil selama periode waktu penyimpanan memenuhi persyaratan

farmasetik.

2. Variasi konsentrasi ekstrak daun kersen (Muntingia calabura L.) dalam

sistem mikroemulsi pada konsentrasi 5%, 10% dan 15% dapat

berpengaruh dalam menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus

epidermidis.

3. Sediaan mikroemulsi ekstrak daun kersen yang terbaik ditunjukkan dengan

evaluasi karakteristik fisik sediaan mikroemulsi dengan luas zona hambat

sebesar 8,34±0,13 mm pada konsentrasi 10%.

88
 89

6.2 Saran

Berdasarkan hasil penelitian, maka perlu dilakukan penelitian lebih lanjut

yakni;

1. Berdasarkan hasil dan pembahasan perlu dilakukan pengembangan

formulasi uji penetrasi secara in-vivo dari sediaan mikroemulsi ekstrak

daun kersen

2. Perlu dilakukan penelitian dengan melakukan perbandingan konsentrasi

basis mikroemulsi yang berbeda untuk mengetahui pengaruh stabilitas dan

ukuran mikroemulsi.
 90

DAFTAR PUSTAKA

Abu Sayyid, Salafudin, Pengantar Memahami Tafsir Fi Zhilal Al-Qur’an Sayyid

Quthb, Era Intermedia, Surakarta, cet. 1, 2001.

Achmad, S. A. 1986. Kimia Organik Bahan Alam. Jakarta: Karnunika

Adi, P., S. Winarsih dan A. Hilmi. 2010. Aktivitas Ekstrak Etanol Kismis (Vitis
vinifera L.) Sebagai Antimikroba Terhadap Bakteri Penyebab Karies
Streptococcus mutans Strain 2302-unr Secara In Vitro. Program Studi.
Pendidikan Dokter Gigi Fakultas Kedokteran Universitas Brawijaya
[Link]://[Link]/artikel/id/filedownload/gigi/[Link].
Diakses pada tanggal 11 Desember 2016.

Agunbiade, OM., Ogunleye, OV. 2012. Constraint to Exclusive Breastfeeding

Practise Among Breastfeeding Mothers in Southwest Nigeria:
Implications for Scaling Up. International Breastfeeding Journal, 7(5).

Agnes D,C., Dina M, Fitrianti D,. Perbandingan Formulasi dan Evaluasi Gel
Antiseptik Tangan yang Mengandung Ekstrak Daun Kersen (Muntingia
calabura L.), Daun Jeruk Purut (Citrus hystrix DC.) dan Kombinasinya.
Bandung: Universitas Islam Bandung, Fakultas Matematika dan Ilmu
Pengetahuan Alam, prodi farmasi, 2016

Akiyama H., Kazuyasu fujii., Osamu Y., Takashi O., Keiji I. 2001. Antibacterial
action of several tannins against Staphylococcus aureus. Journal of
antimocrobial Chemotheraphy (2001) 48: 487-491. http://
[Link]/cgi. May, 5th 2005.

Anonim. 2010. MIMS Indoensia Petunjuk Konsultasi, Edisi 9, 2009/2010.

Jakarta: Penerbit Asli (MIMS Pharmacy Guide)

Ansel, H., 1989, Pengantar Bentuk Sediaan Farmasi, edisi keempat, Jakarta, UI
Press.

Arabski M, Weglerek-Cluk A, Czerwonka G, lankoff A, Kaca W 2009. Effect of

Saponin against Clinical E-coli Stain and Eucaryotic Cell Line. Journal
of Biomedic and Biotechnology. Volume 2009 pp. 1-7

Arikunto, Suharsimi. 1996. Prosedur Penelitian : Sut Pendekatan Praktek. Jakarta

: PT. Rineka Cipta

Bergey, D.H., Boone D.R., 2009. Bergey’s Manual of Systematic Bacteriology,

Volume 3, Springer, London.
 91

Billany, M. 2005. “Transdermal Delivery Sistem”. Dalam Aulton, M. E.

Pharmaceutics, The Science of Dosage Form Design. Second Edition.
Churchill: Livingstone

Candra , A., & Sharma, P.K. (2008, November 3) Microemulsion : A Overview,

September 6 2017 [Link]
Microemulsions_An_Overview_and_Pharmaceutical_Applications

Chin, H. F., dan Black, M., 1989. Determination of Moisture Content of

Recalsitrant Seeds by Microwave Technique. Departement of Agronomy
and Horticulture, Malaysia

Cho, Y, H, Kim S, Bae EK., Mok CK., Park J. 2008. Formulation Cosurfaktan
free O/W Microemulsion Using Nonionic Surfactan Mixtures J. Food
Scl, Vol 73 (3):115-121

Nshimo., C, M,. 1993. Cytotoxic Constituents of Muntingia calabura Leaves and

Stems Collected in Thailand Vol. 31, No. 1, p: 77-81

Cushnie, T. P. & Lamb, A. J., 2005, Antimicrobial activity of flavonoids,

International Journal of Antimicrobial Agents, 26, 343–356.

Davis, W. W and Stout, T. R. 1971. Disc Plate Methods of Microbiology. 22(4):

659-665.

Depkes RI, 1995, farmakope Herbal Edisi Pertama, Jakarta

Dirjen POM RI. (1994). Petunjuk Pelaksanaan Pembuatan Obat Tradisional

Yang Baik (CPOTB). Jakarta : Departemen Kesehatan Republik
Indonesia.

Djajadisastra, Joshita, et al., 2009. Formulasi Gel Topikal Dari Ekstrak neril
Folium Dalam Sediaan Anti Jerawat. Jurnal Farmasi Indonesia Vol 4
No. 4 Juli 2009: 210-216. Universitas Indonesia. Fakultas MIPA.

Fauzy, A, Pengaruh Konsentrasi Minyak Ikan terhadap Penetrasi Kurkumin

dalam Sediaan Mikroemulsi. Skripsi. Tidak diterbitkan,. Fakultas
matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Indonesia,
Depok.

Gautam, D., Sharma, G., dan Goy al, R.P. (2010). Evaluation of Toxic Imp act of
Tartrazine on M ale Swiss Albino M ice. Pharmacologyonline. 1(1):
133-140.

George, M.J, Gones, J.R (2008). Understanding Managing Organizational

Behavour. NewJersey: Person Education
 92

Guenther,E. 2006. Minyak Atsiri,.UI-Press. Jilid 1. Jakarta.

Handa, S.S., 2008, Extraction Technologies for Medicinal and Aromatic Plants,
22, UNIDO, Italy.

Harborne, J. B., 1996, Metode Fitokimi: Penuntun Cara Modern Menganalisis

Tumbuhan, Cetakan kedua, diterjemahkan oleh Padmawinata, K. &
Soediro, I., 49, Penerbit ITB, Bandung.

Handayani, V, 2016. Pengujian Aktivitas Bakteri Ekstrak Etanol Daun Kersen

(Muntingia calaburaL.) Terhadap Bakteri Penyebab Jerawat,
universitas muslim Indonesia.

Hazem A, Fawzia A-C, and Dina G (2012). Biochemical, antibacterial and

antifungal activity of extracts from Achillea fragrantissima and
evaluation of volatile oil composition. Der Pharmacia Sinica, 3(3):349-
356

Hendriati, L. 2010. Absorbsi Perkutan. Http:/[Link]-

[Link]/2008/08/14. 28 Agustus 2017, pk. 23.10

ICMR. 2009. Detection of Antimicrobial Resistance in Common Gram Negative

and Gram Positive Pacteria Encountered in Infectious Deseases- An
Update. ICMR Bulletin ISSN 0377-4910 . Vol. 39: 1-3.

Idson, B. Pharmaceutical Emnulsion. Dalam : Lieberman, H.A., Rieger, M.M and

Banker G.S, eds. Pharmaceutical Dossage Forms : Disperse system.
Vol. 1. New York : Marcel Dekker. 1989:233,240.

Jawetz, E., Melnick, J. L., & Adelberg, E. A., 2005, Mikrobiologi Kedokteran,
edisi XXII, diterjemahkan oleh Bagian Mikrobiologi Fakultas
Kedokteran Universitas Airlangga, 205, 235, Penerbit Salemba Medika,
Jakarta.

Jahanshahi dan Babaei.2008. Protein Nanoparticle: A Unique System as Drug

Delivery Vehicles.J. Biotechnology. Vol 7(25): pp.4926-4934.

Kogan, A., Aserin, A., & Garti, N. 2007. Improved Solubilization of

Carbamazepine and Structural Transitions in Nonionic Microemulsions
Upon Aqueous Phase Dilution. J Colloid Interf Sci, 315(2), 637-647

Kunaepah, U. 2008. Pengaruh Lama Fermentasi dan Konsentrasi Glukosa

terhadap Aktivitas Antibakteri, Polifenol Total dan Mutu Kimia Kefir
Susu Kacang Merah. (Tesis). Semarang. Universitas Diponegoro.
 93

Lucida, H., Salman dan Hervian M.S., 2008, Uji Daya Peningkat Penetrasi Virgin
Coconut Oil (VCO) Dalam Basis Krim, Jurnal Sains dan Teknologi
Farmasi, 1, 13, ISSN 1410-0177

Lawrence, M. Jayne dan Gareth D. Rees (2000) Microemulsion-based as novel

drug delivery system. Elsevier. Advance Drug Delivery Review 45 89-121

Lund, W., 1994, The Pharmaceutical Codex Principles and Practice of

Pharmaceutics, 12th ed. The pharmaceutical press. London 82-91, 493-
495

Manik, D. F., Hertiani, T., Anshory, H, Analisis Korelasi Antara Kadar Flavonoid
Dengan Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Dan Fraksi-Fraksi Daun
Kersen (Muntingi calabura L.) Terhadap Staphylococcus aureus. Vol 6
No. 2 Januari 2014

Martin, A., Swarbrick, J., and Cammarata, A. 1993. Physical Pharmacy. 3rd ed
Philadelphia: Lea & Febriger

Maya, L. 2006. Pembuatan Mikroemulsi dari Minyak Buah Merah (Pandanus

coroidenus). Skripsi Program sarjani Farmasi, FMIPA-UI. Depok.

McEvoy E, 2008, The Development and Application of Oil-In-Water

Microemulsion Lquid and Electrokinetic Chromatography for
Pharmaceutical Analysis, Dep of Chemical & Life Sciences, Waterford
Institute of Technology, Waterford, Ireland

Mitsui, T. (1997). New Cosmetic Science. Edisi Kesatu. Amsterdam: Elsevier

Science [Link]. 13,19-21.

Muhlisah, F., 2000, Tanaman Obat Keluarga, Penebar Swadaya, Jakarta.

Muzaffar, F. A., Singh, U. K., & Chauhan, L. Asch. (2013). Review on

Microemulsion as Futuristic Drug Delivery. Int J Pharm Pharm Sci, 5,
39- 53

Naim, R. 2004. “senyawa antimikroba dari tanaman” http: //www. kompas. com/
kompascetak/0409/15/sorotan/[Link]. Diakses Tanggal 5 Januari 2017.

Nandi, I., M, Bari, H Joshi. (2013). Study of isopropyl myristate microemulsion

system containing cyclodextrins to improve the solubility of 2 model
hydrophobic. AAPS PharmSciTech
 94

Nikumbh, K. V., Sevenkar, S. G., and Patil, M. P. 2013. Formulation

Development in vitro and in vivo evaluation of Microemulsion Based Gel
Loaded with Ketoprofen. Informa Healthcare USA

Nindhin, M., Indumathy, R.,Sreeram, K.J., and Nair B. U. 2008. Synthetis of Iron
Oxid Nanoparticles of Narrow Size Distribution of Polisacaridde
Template. Bull. Matter. Sci 31:93-96

Novak et al., 2008. Ultrasound Extracted Flavonoids from Four Varieties of

Portuguese Red Grape Skins Determined by Reverse-phase High-
performance Liquid Chromatography with Electrochemical Detection.
Analytica Chimica Acta Volume 630: 107–115.

Novak, Joseph D. & Cañas, Alberto J. (2006). "The Theory Underlying Concept
Maps and How To Construct and Use Them", Institute for Human and
Machine Cognition. Accessed 24 Nov 2008.

Prashant, et al., 2011. Phytochemical Screening and Extraction. International

Pharmaceutical Sciencia. 1(1): 1-9

Pembayun et al., 2012. Formulasi Gel Ekstrak Bunga Rosella (Hibiscus

sabdariffa L.) Dengan Uji Sifat Fisik Dan Aktivitas Antibakteri
Staphylococcus epidermidis [Naskah publikasi]. Yogyakarta: Universitas
Muhammadiyah Surakarta.

Peres et al., 2006. Comparison of Soxhlet, Ultrasound-assisted and Pressurized

Liquid Extraction of Terpenes, Fatty Acids and Vitamin E from Piper
gaudichaudianum Kunth. Journal of Chromatography Volume 1105: 115–
118.

Perry, L. M., 1980. Medicinal Plant of East and Southeast Asia, The MIT Press,
Cambridge Massachusetts and London English, 132.

Perry, R.H. 1984. Perry’s Chemical Engineers’ Handbook 6 ed. New York:
[Link] Hill Book Company, Inc.

Plantamor. 2008. Plantamor Situs Dunia Tumbuhan, Informasi Spesies-Kersen.

[Link] 12 November 2016.

Priani, Ega S., Humanisya Haniva, Darusman, F. (2014). ‘Development of

Sunscreen Emulgel Containing Cinnamomum Burmannii Stem Bark
Extract’, International Journal of Science and Research (IJSR), Des, Vol.
3, Issue. 12 hal. 2338-2339

Redhamahsya. 2011. Standardisasi Simplisia Dan Ekstrak Etanol Daun Kersen

(Muntingia calabura L). Universitas Jenderal Ahmad Yani.
 95

Rina Isnarianti, Ivan A. Wahyudi, Rini M. Puspita Muntingia calabura Leaves

Extract Inhibits Glucosyltransferase Activity of Streptococcus mutans.
Yogyakarta: UGM, Journal of Dentistry Indonesia 2013

Robinson, T., 1991. The Organic Constituen of Higher Plants. 6th Edition.
Department of Biochemistry. Universitas of Masschussets.

Rostamailis. 2005. Perawatan Badan Kulit dan Rambut. Jakarta: Rineka Cipta.

Rowe, R. C., Paul, J. S., dan Marian, E. Q. 2009. Handbook of Pharmaceutical

Excipients Sixth Edition. USA: Pharmaceutical Press and American
Pharmacists Association.

Saising. J,: Hiranrat, A,: Mahabusarakan, W,: Ongsakul, M. & Voravuthikunchai,

S.P. 208. Rhodomyrthone from Rhodomyrtus tomentosa (Aiton). Hassk.
As a Natural Antibiotic for Staphyloccocus Cutaneous infection. Journal
of Health Science, 54(5) 589-59.

Shailesh, 2008, Topical Drug Delivery System : A Review, Pharmaceutical

Information, [Link]

Savitri, Sandi, Evika, MO. 2008. Petunjuk Praktikum Struktur perkembangan

Tumbuhan (Anatomi Tumbuhan). Malang : UIN Press
Setyaning, W., Setyowati H., Ayuningtyas, D., Pemanfaatan Ekstrak
Terstandarisasi Daun Som Jawa (Talinum paniculatum (Jacq.) Gaertn)
dalam Sediaan Krim Antibakteri Staphylococcus aureus, Jurnal Farmasi
Sains dan Komunitas, Mei 2016. [Link].(1):No 44-51

Subiyakto, Haryono. 1994. Statistika 2. Jakarta: Gunadarma

Sugiyono. 2003. Metode Penelitian Administrasi. Bandung : CV Alfabeta.

Suprastiwi, E., 2006, Efek Antimikroba Polifenol dari Teh Hijau Jepang terhadap
Streptococcus Mutans, Laporan Penelitian: [Link] Gigi FKG-
UI

Swastika NSP, alissya, Mufrod, Purwanto. 2013. Aktivitas Antioksidan Krim

Ekstrak Sari Tomat (Solanum lycopersicumL.). Yogyakarta: Fakultas
Famasi UGM Trad. Med, J., September 2013 Vol. 18(3), p 132-140 ISSN:
1410-5918

Sweetman, S.C. (2009). Martindale 36 The Complete Drug Reference. London:

The Pharmaceutical Press.

Tabrani, 1997. Emping Jagung: Teknologi dan Kendalanya . Institute Teknologi

Bandung
 96

Thompson, L. H., and L. K. Doraiswamy. 1999. Sonochemistry: Science and

Engineering. Industrial and Engineering Chemistry Research Volume 38:
1215–1249.

Tiwari, P. Kumar, B. Kaur, M. Kaur, G. Kaur, H. 2011. Phytochemical screening

and Extraction: A review. International Pharmaceutical Sciencia. Vol. 1.
Issue. 1.

Tranggono RI., Latifah F. 2007. Buku Pegangan Ilmu Pengetahuan Kosmetik.

Jakarta: Gramedia pustaka Utama. Hal. 11-25, 165-166

Ulya et al., 2015. Uji Aktivitas Antibakteri dan Antibiofilm Minyak Atsiri
Rimpang Bangle (Zingiber purpureum Roscoe) terhadap Bakteri
Staphylococcus epidermidis. Jember: Fakultas Farmasi, Universitas
Jember.

United States Departement of agriculture (USD). 2008 National Nutrient

Database for Standar Reference. Nuts. Coconut Water [online] diakses :
18 November 2016 [Link]
bin/list_nut.edit_pl/.

Utami, P.M (2005) Uji Stabilitas Sediaan Mikroemulsi Menggunakan Hidrolisat

Pati (DE 35-40) Sebagai Stabilizer. FMIPA UI. Depok

Steenis, CGGJ van. 2003. Flora, untuk sekolah di Indonesia. Pradnya Paramita,
Jakarta.

Verheij E.W.M. and Coronel, R.E (Ed). 1992. Plant Resources of South-East Asia.
No.2. Edible Fruits and Nuts. Prosea Foundation. Bogor. Indonesia.
p186-190.

Handayani V, 2016. Pengujian Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Kersen

(Muntingia calabura L.) Terhadap Bakteri Penyebab Jerawat. Universitas
Muslim Indonesia.

Voight R. 1994. Buku Pelajaran Teknologi Farmasi. Edisi Kelima. Yogyakarta:

Gajah Mada University Press.

Wasitaatmadja. S Penuntun Ilmu Kosmetik Medik. Jakarta: Penerbit Universitas

Indonesia. Hal. 62-63, 111-112.

William PC, Raquel OR, Demetrio RV., 2015., Bioactive Metabolite Profile and
antibacterial activity of ethanolic extracts from Muntingia calabura L.
leaves and steems. Int J. Tropical Biomedicine [Page 682-685]
 97

Zakaria ZA, Fatimah CA, Mat Jais AM, Zaiton H, Henie EFP, Sulaiman
MR, Somchit MN, Thenamutha M, Kasthuri D., 2006., The In Vitro
Antibacterial Activity Of Muntingia Calabura Extracts. Int. [Link].
2(4): 439-442.

Zakaria ZA, Sani HM, Arafah AK, The LK Salleh ZM., Antinociceptive effect of
Semi-purified Petroleum ether partition of Muntingia calabura leaves. In
J. Pharmacognosy [page 408-419] Brazilian Journal of Pharmacognosy

Zatz, J.L. and G.P. Kushla, 1989, Gels, in: Pharmaceutica l Dosage Forms, H.A.
Lieberman, M.M. Rieger, G.S. Banker (Eds.), vol. 2, Marcel Dekker,
New York, 495-508.

Zakaria ZA. 2007, Natural Medicines, Department of Medicine and Healt

Science, Universiti Putra Malaysia. Hal 443-448

Zetasizer Nano Series User Manual. (2004). Malvern Instrumen Ltd:England.

Zheng, Min-Ying, Feng Liu, Zheng-Wu Wang dan Jin-Hua Baoyindugorong

(2011) Formation and Characterization of self-Assembling Fish oil
Micriemulsions Colloid Journal, 2011. Vol. 73, No 3, pp. 319-326
 98

Lampiran 1. Skema Kerja

L.1.1 Preparasi Sampel

Daun Kersen
- Dicuci bersih
- Dikeringkan dengan cara dianginkan
- Dikeringkan di dalam rumah kaca selama 1 minggu
dan tidak terkena matahari langsung
- Dihaluskan dengan penggiling
- Diayak dengan ayakan 60 mesh

Hasil

L.12 Pembuatan Ekstrak Etanol

50 gram sampel
- Dimasukkan kedalam erlenmeyer
- Ditambahkan 500 ml etanol
- Dimasukkan kedalam sonikasi selama 18 menit
- Disaring menggunakan kertas saring
- Dirotav pada suhu 50oC dengan rotary evaporator

Hasil

L.13 Uji Skrining Fitokimia

L.13.1 Uji Flavonoid

1 mg ekstrak sampel
- Dimasukkan kedalam tabung reaksi
- Ditambah logam Mg dan4-5 tetes HCl pekat

Jingga/merah

L.13.2 Uji Tanin dengan FeCl3

1 gram ekstrak sampel
- Ditambah 5 ml FeCl3 1%

Hijau kehitaman
 99

L.13.3 Uji Saponin

1 gram ekstrak sampel

- Dimasukkan dalam tabung reaksi
- Ditambahkan aquadest (1:1) sambil dikocok apabila menimbulkan
busa ditambahkan 2 tetesHCl 2N dan dibiarkan selama 10 menit

Timbul busa dengan ketinggian 1,5 cm

L.1.4 Pembuatan Mikroemulsi

Fase air Fase minyak
- Tween 80 - Span 80
- Air Co2 - Isopropyl mirystate
- Pemanasan 50oC - PEG 400
- Aduk dengan magnetic stirrer
-
Hasil Hasil

-Campurkan fase minyak ke dalam fase air

- Pemanasan 50oC
- Aduk dengan magnetic stirrer

Hasil

L.1.5 Pembuatan Media

L.15.1 Media Nutrien Agar

3 gram media NA
- Dilarutkan dengan 250 ml aquadest dalam erlenmeyer
- Dipanaskan dan diaduk menggunakan magnetic stirer
- Disterilkan dalam autoklaf pada suhu 1210C selama 15 menit
- Dimasukkan dalam cawan petri hingga memadat

Hasil
 100

L.15.2 Media Luria Bertani Broth

1 gram media LBB

- Dilarutkan dengan 50 ml aquadest dalam erlenmeyer
- Dipanaskan dan diaduk menggunakan magnetic stirer
- Disterilkan dalam autoklaf pada suhu 1210C selama 15 menit
- Dimasukkan dalam tabung reaksi

Hasil

L.15.3 Inokulasi Bakteri

Biakan Murni Bakteri
- Diambil 2 ose bakteri dai bakteri induk
- Disuspensikan dalam 10 ml media LBB
- Diinkubasi pada suhu 370C selama 24 jam

Hasil

L.15.4 Uji Aktivitas Antibakteri dengan Metode Sumuran

200 µl suspensi bakteri

- Dituang pada cawan petri
- Dituang 17 ml media NA tunggu hingga memadat
- Dibuat lubang sumuran denga diameter ± 6 mm
- Dituang 50 µl sediaan mikroemulsi dengan berbagai konsentrasi
serta K+, K- dan K pembanding
- Diinkubasi pada suhu 37oC selama 24 jam
- Diukur zona hambat menggunakan jangka sorong

Hasil
 101

Lampiran 2. Perhitungan

L.5.1 Perhitungan Rendemen Serbuk Daun Kersen

Berat daun kersen sebelum diserbukkan : 1000 kg
Berat daun kersen setelah diserbukkan :500 gram
berat sampel setelah diserbukkan 500 g
Rendemen = berat sampel sebelum diserbukkan 𝑥 100% = 1000 g x 100 % = 50 %

L.5.2 Perhitungan Rendemen Hasil Ekstrak Daun Kersen

Berat serbuk daun kersen = 500 gram
Berat ekstrak kental daun kersen = 80 gram
berat ekstrak pekat 80g
Rendemen = 𝑥 100% = 500 g x 100 % = 16 %
berat serbuk

L.5.3 Pembuatan Asam Klorida 2N

Larutan Asam Klorida 2N (N2) sebanyak 1000 ml (V2)
V1.N1 = V2.N2
V1 = V2 x N2 : N1
= 1000 ml x 2N : 12N
= 55,55 = 55,6 ml
a. Asam klorida 55,6 ml dilarutkan dalam labu takar 1000 ml
b. Tambah aquadest 600 ml secara perlahan agar terhindar dari panas dan
letupan

l.5.4 FeCl3 1%
1 𝑔𝑟𝑎𝑚
𝑚𝑎𝑠𝑎𝑎 𝐹𝑒𝐶𝑙3 = × 10 𝑚𝑙 = 0,1 𝑔𝑟𝑎𝑚
100 𝑚𝑙
a. Ditimbang sebanyak 0,1 gram FeCl3 menggunakan neraca analitik
b. Dilarutkan FeCl3 menggunakan aquadest sebanyak 5 ml dalam gelas beker
50 ml.
c. Dimasukkan larutan dalam labu ukur 10 ml dan ditambahkan aquadest
sampai tanda batas, kemudian dihomogenkan.
 102

L.5.5 Perhitungan nilai HLB

% Tween 80 = HLB butuh – HLB Span 80 X 100%
HLB Tween – HLB Span 80
= 11,5 – 4,3 X 100%
15 – 4,3
= 67%
- Bobot Tween 80 = 67/100 X 50%
= 33,5%

% Span 80 = 100 – 67%

= 33%
- Bobot span 80 = 33/100 X 50% = 16,5%
 103

Lampiran 3. Gambar Proses Penelitian

L.3.1 Gambar Proses Pemilihan Sampel dan Ekstraksi

(proses pengeringan simplisia kersen) (proses ekstraksi ultrasonik)

(Proses penyaringan ekstrak cair) (Proses rotary evaporator)

(Ekstrak pekat kersen) (Ekstrak dan DMSO)

 104

L.3.2 Hasil Uji Bebas Etanol

L.3.3 Hasil Identifikasi Senyawa Saponin, Tanin dan Flavonoid

L.3.4 Hasil Optimasi Formula Mikroemulsi

 105

L.3.5 Hasil UjiTipe Mikroemulsi

L.3.6 Hasil Uji pH

 106

L.3.7 Hasil Uji Stabilitas Freeze-thaw

Suhu 4oC Suhu 40oC

L.3.8 Hasil Uji Aktivitas Antibakteri Staphylococcus epidermidis

3.8.1 Peremajaan Bakteri
 107

3.8.2 Sterilisasi Alat

3.8.3 Pembuatan Media Uji Bakteri

 108

3.8.4 Hasil Uji Zona Hambat Bakteri

(kontrol media, kontrol positif, kontrol negative dan kontrol
pembanding)

(F1, F2 dan F3)

L.3.9 Uji Pengukuran Partikel dengan PSA

 109

Lampiran 4 Data Hasil Tabel

L.4.1 Hasil Pengamatan Organoleptis suhu ruang (27oC)

pengamata F1 F2 F3
n R1 R2 R3 R1 R2 R3 R1 R2 R3
Homogenit HMG HMG HMG HMG HMG HMG HMG HMG HMG
as
Warna KJK KJK KJK KJK KJK KJK KJK KJK KJK
Bentuk Semis Semi Semis Semis Semis Semis Semis Semis Semis
olid solid olid olid olid olid olid olid olid
Bau Khas Khas Khas Khas Khas Khas Khas Khas Khas
Endapan - - - - - - - - -

L.4.1.1 Hasil Pengamatan Organoleptis suhu dingin (4oC)

Pengamata F1 F2 F3
n R1 R2 R3 R1 R2 R3 R1 R2 R3
Homogenit HMG HMG HMG HMG HMG HMG HMG HMG HMG
as
Warna KJK KJK KJK KJK KJK KJK KJK KJK KJK
Bentuk Semis Semi Semis Mem Memb Memb Memb Memb Membe
olid solid olid beku eku eku eku eku ku
Bau Khas Khas Khas Khas Khas Khas Khas Khas Khas
Endapan - - - - - - - - -

L.4.1.2 Hasil Pengamatan Organoleptis suhu tinggi (40oC)

Pengamata F1 F2 F3
n R1 R2 R3 R1 R2 R3 R1 R2 R3
Homogenit HMG HMG HMG HMG HMG HMG HMG HMG HMG
as
Warna KJK KJK KJK KJK KJK KJK KJK KJK KJK
Bentuk Semis Semi Semis Semis Semisol Semisol Semis Semis Semis
olid solid olid olid id id olid olid olid
Bau Khas Khas Khas Khas Khas Khas Khas Khas Khas
Endapan - - - - - - - - -
 110

L.4.1.3 Hasil Pengamatan Organoleptis F4 (Blanko Mikroemulsi)

F4
Pengamatan
Suhu 27oC Suhu 4oC Suhu 40oC
Homogenitas HMG HMG HMG
Kuning Kuning Kuning
Warna
jernih jernih jernih
Bentuk Semisolid Membeku Semisolid
Bau - - -
Endapan - - -

L.4.2 Hasil Penentuan pH selama 8 minggu suhu ruang

UjiPh
Formula Minggu
1 2 4 8
F1a 5.43 5.92 5.82 5.75
F1b 5.58 6.10 5.97 5.89
F1c 5.63 6.12 5.87 5.62
Rata-rata 5.54 6.04 5.88 5.75
Nilai SD 0.10 0.11 0.07 0.13
F2a 5.79 6.10 5,94 5.70
F2b 5.79 6.25 6,13 5.81
F2c 5.81 6.22 6,18 6.03
Rata-rata 5.79 6.19 6.08 5.84
Nilai SD 0.01 0.07 0.12 0.16
F3a 5.65 5.83 5,71 5.68
F3b 6.15 6.51 6,23 5.86
F3c 6.58 6.75 6,64 6.38
Rata-rata 6.12 6.36 5.97 5.97
Nilai SD 0.46 0.47 0.46 0.36
 111

L.4.3 Hasil Pengujian pH setelah Pengujian Stabilitas Freeze-thaw selama

2minggu suhu (4oC dan 40oC)
Uji pH setelah
Formula
freeze-thaw
Formula 1 Replikasi 1 5,63
Replikasi 2 5,95
Replikasi 3 5,79
Rata-rata 5,79
Nilai SD 0.16
Formula 2 Replikasi 1 6,16
Replikasi 2 6,24
Replikasi 3 6,30
Rata-rata 6,23
Nilai SD 0,07
Formula 3 Replikasi 1 5,63
Replikasi 2 6,10
Replikasi 3 6,54
Rata-rata 6,09
Nilai SD 0,45
(F4) Blanko pH Suhuruang(27oC) pH Suhu freeze-thaw
1 5,2 (40C)-(450C)
2 5,1
4 5,1
8 5,0 5,4

Rata-rata± SD 5,1 ± 0,08

L.4.5 Hasil Rata-rata Diameter Zona Hambat Mikroemulsi Ekstrak Daun

Kersen (Muntingia calabura. L)
Rata-rata Diameter ZonaHambat (mm)
Konsentrasi
Ulangan Rata-rata Nilai SD
ekstrak Ulangan I Ulangan III
II
F1 5% 5,60 mm 6,61 mm 6,20 mm 6.13 mm 0,50
F2 10% 8,30 mm 8,49 mm 8,24 mm 8.34 mm 0,13
F3 15% 12,7 mm 11,21 mm 12,45 mm 12.2 mm 0,79
Kontrol (+) 17,21 mm 16,32 mm 17,21 mm 15.2 mm 0,51
Kontrol (-) 0 0 0 0 mm 0
Kontrol 0 mm 0
0 0 0
pembanding
Kontrol media 0 0 0 0 mm 0
 112

Lampiran 5

Uji Normalitas
Tests of Normal ity
a
Kolmogorov -Smirnov Shapiro-Wilk
St at ist ic df Sig. St at ist ic df Sig.
pH sebelum ,231 9 ,180 ,849 9 ,072
a. Lillief ors Signif icance Correction

Oneway
Descriptives

pH sebelum
95% Confidence Interv al for
Mean
N Mean Std. Dev iation Std. Error Lower Bound Upper Bound Minimum Maximum
5% 3 5,8100 ,08000 ,04619 5,6113 6,0087 5,73 5,89
10% 3 5,9433 ,08021 ,04631 5,7441 6,1426 5,86 6,02
15% 3 6,2067 ,43822 ,25300 5,1181 7,2953 5,72 6,57
Total 9 5,9867 ,28596 ,09532 5,7669 6,2065 5,72 6,57

Test of Homogeneity of Variances

pH sebelum
Lev ene
St at ist ic df 1 df 2 Sig.
2,748 2 6 ,142

ANOVA

pH sebelum
Sum of
Squares df Mean Square F Sig.
Between Groups ,244 2 ,122 1,790 ,246
Within Groups ,410 6 ,068
Total ,654 8

Post Hoc Tests

 113

Multiple Comparisons

Dependent Variable: pH sebelum

Mean
Diff erence 95% Confidence Interv al
(I) Konsentrasi (J) Konsentrasi (I-J) Std. Error Sig. Lower Bound Upper Bound
Tukey HSD 5% 10% -,1333 ,21337 ,812 -,7880 ,5213
15% -,3967 ,21337 ,230 -1,0513 ,2580
10% 5% ,1333 ,21337 ,812 -,5213 ,7880
15% -,2633 ,21337 ,478 -,9180 ,3913
15% 5% ,3967 ,21337 ,230 -,2580 1,0513
10% ,2633 ,21337 ,478 -,3913 ,9180

Homogeneous SubsetsMeans Plots

pH sebelum

Subset
f or alpha
= .05
Konsentrasi N 1
Tukey HSDa 5% 3 5,8100 6,3

10% 3 5,9433
6,2
15% 3 6,2067
Sig. ,230 6,1

Duncan a 5% 3 5,8100 6,0

10% 3 5,9433
Mean of pH sebelum

5,9
15% 3 6,2067
Sig. ,123 5,8

Means for groups in homogeneous subsets are display ed. 5,7

5% 10% 15%
a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 3,000.
Konsentrasi

UjiNormalitas

Tests of Normal ity

a
Kolmogorov -Smirnov Shapiro-Wilk
St at ist ic df Sig. St at ist ic df Sig.
pH sesudah ,134 9 ,200* ,950 9 ,690
*. This is a lower bound of the true signif icance.
a. Lillief ors Signif icance Correction
 114

Oneway
Descriptives

pH sesudah
95% Conf idence Interv al f or
Mean
N Mean St d. Dev iation St d. Error Lower Bound Upper Bound Minimum Maximum
5% 3 5,7900 ,16000 ,09238 5,3925 6,1875 5,63 5,95
10% 3 6,2333 ,07024 ,04055 6,0589 6,4078 6,16 6,30
15% 3 6,0900 ,45508 ,26274 4,9595 7,2205 5,63 6,54
Total 9 6,0378 ,31272 ,10424 5,7974 6,2782 5,63 6,54

Test of Homogeneity of Variances

pH sesudah
Lev ene
St at ist ic df 1 df 2 Sig.
2,169 2 6 ,195

ANOVA

pH sesudah
Sum of
Squares df Mean Square F Sig.
Between Groups ,307 2 ,154 1,938 ,224
Within Groups ,475 6 ,079
Total ,782 8

Post Hoc Tests

Multiple Comparisons

Dependent Variable: pH sesudah

Mean
Diff erence 95% Confidence Interv al
(I) Konsentrasi (J) Konsentrasi (I-J) Std. Error Sig. Lower Bound Upper Bound
Tukey HSD 5% 10% -,4433 ,22980 ,211 -1,1484 ,2618
15% -,3000 ,22980 ,443 -1,0051 ,4051
10% 5% ,4433 ,22980 ,211 -,2618 1,1484
15% ,1433 ,22980 ,813 -,5618 ,8484
15% 5% ,3000 ,22980 ,443 -,4051 1,0051
10% -,1433 ,22980 ,813 -,8484 ,5618
 115

Homogeneous Subsets Means Plots

pH sesudah

Subset
f or alpha
= .05
6,3
Konsentrasi N 1
Tukey HSDa 5% 3 5,7900 6,2

15% 3 6,0900
6,1
10% 3 6,2333
Sig. ,211 6,0
Duncana 5% 3 5,7900
Mean of pH sesudah

15% 3 6,0900 5,9

10% 3 6,2333
5,8
Sig. ,112
5,7
Means for groups in homogeneous subsets are display ed. 5% 10% 15%
a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 3,000.
Konsentrasi

T-Test konsentrasi 5%
Paired Samples Statistics

St d. Error
Mean N St d. Dev iation Mean
Pair pH sebelum 5,8100 3 ,08000 ,04619
1 pH sesudah 5,7900 3 ,16000 ,09238

Paired Samples Correlations

N Correlation Sig.
Pair pH sebelum &
3 1,000 ,000
1 pH sesudah

Paired Samples Test

Paired Diff erences

95% Confidence
Interv al of the
Std. Error Diff erence
Mean Std. Dev iation Mean Lower Upper t df Sig. (2-tailed)
Pair pH sebelum -
,0200 ,08000 ,04619 -,1787 ,2187 ,433 2 ,707
1 pH sesudah
 116

T-Test konsentrasi 10%

Paired Samples Statistics

St d. Error
Mean N St d. Dev iation Mean
Pair pH sebelum 5,9433 3 ,08021 ,04631
1 pH sesudah 6,2333 3 ,07024 ,04055

Paired Samples Correlations

N Correlation Sig.
Pair pH sebelum &
3 1,000 ,007
1 pH sesudah

Paired Samples Test

Paired Diff erences

95% Confidence
Interv al of the
Std. Error Diff erence
Mean Std. Dev iation Mean Lower Upper t df Sig. (2-tailed)
Pair pH sebelum -
-,2900 ,01000 ,00577 -,3148 -,2652 -50,229 2 ,000
1 pH sesudah

T-Test konsentrasi 15%

Paired Samples Statistics

St d. Error
Mean N St d. Dev iation Mean
Pair pH sebelum 6,2067 3 ,43822 ,25300
1 pH sesudah 6,0900 3 ,45508 ,26274

Paired Samples Correlations

N Correlation Sig.
Pair pH sebelum &
3 ,974 ,145
1 pH sesudah

Paired Samples Test

Paired Diff erences

95% Confidence
Interv al of the
Std. Error Diff erence
Mean Std. Dev iation Mean Lower Upper t df Sig. (2-tailed)
Pair pH sebelum -
,1167 ,10263 ,05925 -,1383 ,3716 1,969 2 ,188
1 pH sesudah

T-Test
 117

One-Sample Statistics

St d. Error
N Mean St d. Dev iation Mean
pH sebelum 3 6,2067 ,43822 ,25300
pH sesudah 3 6,0900 ,45508 ,26274

Uji Normalitas Diameter Zona Hambat

Tests of Normality
a
Kolmogorov -Smirnov Shapiro-Wilk
Statistic df Sig. Statistic df Sig.
Diameter Zona Hambat ,130 15 ,200* ,924 15 ,225
*. This is a lower bound of the true signif icance.
a. Lillief ors Significance Correction

Tests of Normality

Kolmogorov-Smirnova Shapiro-Wilk

konsentrasi Statistic Df Sig. Statistic df Sig.

Zonahambat 5% .216 3 . .988 3 .793

10% .297 3 . .917 3 .443

15% .327 3 . .872 3 .300

kontrolpositif .385 3 . .750 3 .000

a. Lilliefors Significance Correction

One-way
Descriptives

Diameter Zona Hambat

95% Confidence Interv al for
Mean
N Mean Std. Dev iation Std. Error Lower Bound Upper Bound Minimum Maximum
K Neg 3 ,0000 ,00000 ,00000 ,0000 ,0000 ,00 ,00
K Pos 3 16,9133 ,51384 ,29667 15,6369 18,1898 16,32 17,21
5% 3 6,1367 ,50797 ,29328 4,8748 7,3985 5,60 6,61
10% 3 8,3433 ,13051 ,07535 8,0191 8,6675 8,24 8,49
15% 3 12,1200 ,79793 ,46069 10,1378 14,1022 11,21 12,70
Total 15 8,7027 5,89783 1,52281 5,4366 11,9688 ,00 17,21

Test of Homogeneity of Variances

 118

Zonahambat

Levene Statistic df1 df2 Sig.

2.864 3 8 .104

ANOVA

zonahambat

Sum of Squares Df Mean Square F Sig.

Between Groups 200.618 3 66.873 227.496 .000

Within Groups 2.352 8 .294

Total 202.969 11

Post Hoc Tests

Multiple Comparisons

zonahambat
Tukey HSD

95% Confidence Interval

Mean Difference
(I) konsentrasi (J) konsentrasi (I-J) Std. Error Sig. Lower Bound Upper Bound

5% 10% -2.20667* .44268 .005 -3.6243 -.7890

15% -5.98333* .44268 .000 -7.4010 -4.5657

kontrolpositif -10.77667* .44268 .000 -12.1943 -9.3590

10% 5% 2.20667* .44268 .005 .7890 3.6243

15% -3.77667* .44268 .000 -5.1943 -2.3590

kontrolpositif -8.57000* .44268 .000 -9.9876 -7.1524

15% 5% 5.98333* .44268 .000 4.5657 7.4010

10% 3.77667* .44268 .000 2.3590 5.1943

kontrolpositif -4.79333* .44268 .000 -6.2110 -3.3757

kontrolpositif 5% 10.77667* .44268 .000 9.3590 12.1943

10% 8.57000* .44268 .000 7.1524 9.9876

15% 4.79333* .44268 .000 3.3757 6.2110

*. The mean difference is significant at the 0.05 level.

 119

Homogeneous Subsets
Diameter Zona Hambat

Subset f or alpha = .05

Kelompok N 1 2 3 4 5
Tukey HSDa K Neg 3 ,0000
5% 3 6,1367
10% 3 8,3433
15% 3 12,1200
K Pos 3 16,9133
Sig. 1,000 1,000 1,000 1,000 1,000
Duncan a K Neg 3 ,0000
5% 3 6,1367
10% 3 8,3433
15% 3 12,1200
K Pos 3 16,9133
Sig. 1,000 1,000 1,000 1,000 1,000
Means f or groups in homogeneous subsets are display ed.
a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 3,000.

Means Plots
20
Mean of Diameter Zona Hambat

10

0
K Neg K Pos 5% 10% 15%

Kelompok

Mencari F tabel :
Df1 = K-1
= 8-1 f tabel = 237
Df2 = n-k
=1
 120

Lampiran 6

Lembar Rentang Uji Organoleptik Warna, Aroma, dan Tekstur Mikroemulsi

Ekstrak Daun Kersen 5%, 10% dan 15%

Sampel : Mikroemulsi Ekstrak Daun Kersen

Karakteristik : Warna/Bau/Tekstur

Warna : Nilai 1 untuk mikroemulsi dengan warna coklat pekat

Nilai 2 untuk mikroemulsi dengan warna orange kecoklatan
Nilai 3 untuk mikroemulsi dengan warna kuning coklat muda
Nilai 4 untuk mikroemulsi dengan warna kuning jernih
Bau : Nilai 1 untuk mikroemulsi dengan bau daun kersen sangat tajam
Nilai 2 untuk mikroemulsi dengan bau daun kersen tajam
Nilai 3 untuk mikroemulsi dengan bau daun kersen tidak tajam
Nilai 4 untuk mikroemulsi tidak terdapat bau
Tektur : Nilai 1 untuk mikroemulsi dengan tekstur mengental
Nilai 2 untuk mikroemulsi dengan tekstur sedikit mengental
Nilai 3 untuk mikroemulsi dengan tekstur mengalir
Nilai 4 untuk mikroemulsi dengan tekstur cair
 121

Nilai
Karakteristik Formula
1 2 3 4
F1
F2
Warna
F3

F4
F1
F2
Bau
F3

F4
F1
F2
Tekstur
F3
F4

Lampiran Uji Kadar Air Simplisia Daun Kersen

122
123
124
 125

Lampiran 8 Kadar Air Sediaan Mikroemulsi Ekstrak Daun Kersen

126
127
 128

Lampira 9 Hasil Pengukuran Ukuran Partikel

129
 130

Lampiran COA Tween 80

 131

Lampiran COA Isopropyl Miristate

 132

Lampiran Span 80
133
134
135
136