PENETAPAN KADAR HCG DENGAN TEKNIK IMUNOKROMATOGRAFI

Oleh :
Nama : Kasriati Heruningsih
NIM : B!"##
R$m%$ngan : III
Kel$m&$' : (
Asisten : Anggraeni Arum )ari
*APORAN PRAKTIKUM IMUNO*OGI
KEMENTERIAN PENDIDIKAN DAN KEBUDA+AAN
UNI,ER)ITA) !ENDERA* )OEDIRMAN
FAKU*TA) BIO*OGI
PUR-OKERTO
."/
I0 PENDAHU*UAN
A0 *atar Bela'ang
Terjadinya kehamilan pada diri seorang perempuan akan
membuat tubuh bereaksi dengan membentuk perubahan-perubahan dan
segera memproduksi hormon-hormon kehamilan guna mendukung
kelangsungan kehamilan. Hormon-hormon kehamilan ini bertujuan guna
mendukung kehamilan yang berlangsung khususnya agar janin dapat
tumbuh dan berkembang dengan baik dan sehat. Salah satu hormon yang
diproduksi ialah Human Chorionic Gonadotrophin (HCG). Hormon
kehamilan ini hanya ditemukan pada tubuh seorang wanita hamil yang
dibuat oleh embrio segera setelah pembuahan dan karena pertumbuhan
jaringan plasenta. Hormon kehamilan yang dihasilkan oleh villi horiales
ini berdampak pada meningkatnya produksi progesteron oleh indung telur
sehingga menekan menstruasi dan menjaga kehamilan (!rawirohardjo"
#$$#).
!roduksi HCG akan meningkat hingga sekitar hari ke-%& dan
akan menurun selama sisa kehamilan. Hormon kehamilan HCG mungkin
mempunyai 'ungsi tambahan" sebagai ontoh diperkirakan HCG
mempengaruhi toleransi imunitas pada kehamilan. Hormon ini merupakan
indikator yang dideteksi oleh alat test kehamilan yang melalui air seni.
(ika" alat test kehamilan mendeteksi adanya peningkatan kadar hormon
HCG dalam urine" maka alat test kehamilan akan mengindikasikan sebagai
terjadinya kehamilan atau hasil test positi' (!rawirohardjo" #$$#).
)ira-kira sepuluh hari setelah sel telur dibuahi akan bergerak
menuju rahim dan melekat pada dindingnya. Sejak saat itulah plasenta
mulai berkembang dan memproduksi HCG yang dapat ditemukan dalam
darah serta air seni. )eberadaan hormon protein ini sudah dapat dideteksi
dalam darah sejak hari pertama keterlambatan haid" kira-kira hari keenam
sejak pelekatan janin pada dinding rahim. )adar hormon ini terus
bertambah hingga minggu ke #*-#+ kehamilan" terhitung sejak hari
terakhir menstruasi. Sebagian besar ibu hamil mengalami penambahan
kadar hormon HCG sebanyak dua kali lipat setiap , hari. !eningkatan
kadar hormon ini biasanya ditandai dengan mual dan pusing yang sering
dirasakan para ibu hamil. Setelah itu kadarnya menurun terus seara
perlahan dan hampir menapai kadar normal setelah persalinan. Tetapi
adakalanya kadar hormon ini masih di atas normal sampai * minggu
setelah persalinan atau keguguran (-ose" .&&+).
B0 Tin1auan Pusta'a
Human Chorinic Gonadotropin (HCG) adalah suatu glikoprotein yang
mengandung galaktosa dan heksosamin. )adar HCG meningkat setelah
implantasi ovum yang sudah dibuahi (/randson" #$$,). !rinsip kerja
immunologial HCG test adalah suatu reaksi penghambatan aglutinasi yang
digunakan untuk menunjukkan hormon Human Chorionic Gonadotropin
yang disekresikan kedalam urine selama masa kehamilan. !artikel-partikel
antigen seara kimia akan berikatan dengan antibodi HCG dan
menyebabkan aglutinasi. Terdapatnya HCG bebas didalam urine akan
menetralisir antibodi sehingga tidak terjadi aglutinasi (!rawirohardjo" #$$#).
0alam urine yang normal komposisinya terdiri dari bahan sepaerti air"
urea" dan natrium klorida (/randson" #$$,). )adar HCG yang lebih tinggi
terjadi pada ibu kembar dan kasus hamil anggur (mola). !erempuan yang
tidak hamil menandakan kadar HCG di atas normal. )adar HCG yang
terlalu rendah pada ibu hamil pun patut diwaspadai" karena dapat berarti
kehamilan terjadi di luar rahim (ektopik) atau kematian janin yang biasa
disebut aborsi spontan. Sebagian besar merk test pak yang beredar di
pasaran sudah dapat mendeteksi HCG dengan kadar .1 2345 - 1& 2345"
sehingga ukup akurat untuk menentukan ada atau tidaknya kehamilan pada
hari pertama keterlambatan menstruasi. 3ji kehamilan yang akurat adalah
tes kuantitati' hormon HCG dalam darah. 6iasanya yang diukur adalah
jumlah subunit beta hormon HCG (!eare" #$$%).
C0 Tu1uan
#. 7engetahui kadar HCG dengan teknik imunokromatogra'i.
II0 MATERI DAN METODE
A0 Materi
8lat dan bahan yang digunakan dalam praktikum adalah teststrip"
botol 'ilm" urine wanita hamil (9) dan urine wanita hamil (-).
B0 Met$2e
#. 3rin dituang ke dalam botol 'ilm.
.. Testrip dibuka" dielupkan ke dalam botol 'ilm berisi urin.
,. Hasil dibaa setelah 1 menit.
III0 HA)I* DAN PEMBAHA)AN
A0 Hasil


Ta%el (00 Ta%el Pengamatan Teststri& Urine
)elompok
Hasil
9 -
# : -
. - :
, : -
* - :
B0 Pem%ahasan
2munokromatogra'i 8SS8; (2C8) atau disebut juga aliran
samping (lateral flow test) atau dengan singkat disebut uji strip (strip test)
tergolong dalam kelompok imuno 8SS8; berlabel sampel seperti
imunofluerens (2/) dan imuno enzim (<28). 2munokromatogra'i assay (2C8)
merupakan perluasan yang logis dari teknologi uji aglutinasi late= yang
berwarna yaitu uji serologi yang telah dikembangkan sejak tahun #$1%
singes dan piots untuk penyakit 8rthritisrheumatoid. 2munokromatogra'i
assay (2C8) merupakan uji laboratorium yang handal sehingga amat
Gam%ar (00 Hasil Test 345 Gam%ar (0.0 Hasil Test 365
dibutuhkan di negara sedang berkembang. 2munokrimatogra'i assay tidak
membutuhkan alat anggih (mikroskop kliorogens dan radio onts) untuk
membaanya ukup hanya dengan melihat adanya perubahan warna
memakai mata telanjang sehingga jauh lebih pratktis. Teknik ini juga
memiliki sensivitas dan spesi'itas yang setara dengan <52S8" namun
kelemahan dari teknik imunokromatogra'i adalah tidak bersi'at kuantitati'
(Subekti et al." .&#.).
Human chorionic gonadotropin (hCG) adalah hormon glikoprotein
yang terdiri dari suatu >-subunit dan ?-subunit. hCG dianggap paling asam
dan glikoprotein paling glikosilasi. Gula membentuk bagian penting dari
struktur hCG. HCG merupakan hormon yang dibuat oleh sel-sel
sinsitiotro'oblas plasenta. HCG terdiri dari $. asam amino >-subunit dan
#*1 asam amino ?-subunit. The ?-subunit hCG" sementara struktural mirip
dengan ?-subunit dari 5H" hal tersebut yang membedakan hCG dari hormon
glikoprotein lain. hCG" seperti 5H" adalah hormon" dan mengikat reseptor
hormon hCG 4 5H umum (Cole" .&#.).
Tiga minggu pertama kehamilan" hCG menstimulasi produksi
progesteron oleh sel luteal orpus ovarium. 6eberapa kelompok peneliti
telah menunjukkan bahwa hCG juga ber'ungsi selama kehamilan untuk
menstimulasi angiogenesis dalam pembuluh darah rahim. Hal ini menjamin
pasokan darah maksimal ke plasenta yang merupakan 'ungsi penting selama
kehamilan. Sementara hCG hyperglyosylated dapat meningkatkan
pertumbuhan sel sitotro'oblas selama kehamilan. HCG menstimulasi 'usi sel
dan di'erensiasi untuk sel sinsitiotro'oblas. Hal tersebut merupakan
kombinasi dari dua proses yang mengarah pada pembentukan jaringan
tro'oblas vili dan plasentasi hemohorial pada kehamilan. 6eberapa
kelompok menunjukkan bahwa hCG menstimulasi 'aktor penghambat anti-
makro'ag atau penghambatan migrasi makro'ag" 'aktor yang menegah
penghanuran 'eto-plasenta asing oleh jaringan ibu selama kehamilan.
)elompok-kelompok lain telah menunjukkan bahwa hCG juga mengontrol
pertumbuhan rahim selama kehamilan" namun kelompok lain telah
menunjukkan bahwa hCG juga melemaskan kontraksi miometrium selama
kehamilan (Cole" .&#.).
HCG ber'ungsi untuk mempertahankan orpus luteum yang
membuat esterogen dan progesterone sampai saat plasenta terbentuk
sepenuhnya dan dapat membuat sendiri esterogen dan progesterone yang
ukup. HCG dalam urine akan diketahui pada wanita hamil karena HCG
dapat dideteksi @-$ hari setelah adanya peristiwa ovulasi. HCG dalam urine
berisi dua reagen" pertama yaitu suspense partikel lateks yang dilapisi atau
terikat seara kovalen dengan HCG dan yang kedua berisi larutan antibody
HCG. 6ila terdapat 3rine" HCG terikat pada antibody dan dengan demikian
akan menegah aglutinasi partikel lateks yang dilapisi HCG yang
diperlihatkan oleh antibody tersebut. Hasil positi' terjadi apabila tidak
terjadi aglutinasi" jika terjadi aglutinasi maka hasilnya adalah negati'
(7urray" #$$$).
-eaksi pembentukan kompleks antigen antibodi antara HCG
sebagai antigen dan anti HCG sebagai antibodi bersi'at spesi'ik. 8ntibodi
akan mengenali antigen pada lokasi tertentu yang disebut epitop. 8ntibodi
poliklonal adalah antibodi yang mengenali suatu antigen melalui ikatan
dengan epitop yang bervariasi karena berasal dari sel 6 yang berbeda-beda.
Sedangkan antibodi monoklonal lebih spesi'ik mengenali antigen pada satu
epitop tertentu karena berasal dari satu sel 6 yang dibiakan (6ratawidjaja"
.&&.).
8ntibodi tersebut adalah antibodi anti HCG yang pertama (kita
sebut saja anti HCG-#)" antibodi anti HCG yang kedua (anti HCG-.) dan
anti-anti HCG-# (antibodi dengan anti HCG-# sebagai antigen). )etiga
antibodi itu terletak di lokasi yang berbeda dengan si'at yang berbeda pula.
8nti HCG-# bersi'at mobile sehingga bisa ikut berpindah ke area Test (T)
dan Control (C) melalui gerakan kapilaritas. 8nti HCG-# merupakan
antibodi monoklonal sedangkan anti HCG-. bersi'at poliklonal. 8nti HCG-
. di area T dan anti-anti HCG-# di area C bersi'at 'i=ed atau tertanam"
artinya tidak dapat berpindah sehingga tidak ikut mengalir4berpindah
tempat. <nAim yang terikat anti HCG-# akan menjadi enAim akti' bila ada
ikatan antara anti HCG-#" HCG dan 8nti HCG-. di area T atau ikatan
antara anti HCG-# dan anti-anti HCG di area C. <nAim akti' di area T dan
atau C akan mengubah substansi tak berwarna menjadi substansi berwarna
merah (Hardjoeno" .&&%).
Hasil praktikum kelompok tiga adalah positi' (9)" terdapat dua
garis strip merah pada teststrip. Hal ini sesuai dengan pernyataan Hardjoeno
(.&&%) bahwa akan terlihat dua strip merah yaitu pada daerah T dan daerah
C yang diintepretasikan sebagai hasil positi' hamil. HCG sebagai antigen"
akan berikatan dengan anti HCG. Gaya kapilaritas membawa senyawa
ikatan HCG dan anti HCG-# menuju daerah T. 0i daerah T" anti HCG-.
akan berikatan dengan HCG yang telah berikatan dengan anti HCG-#
namun pada epitop yang berbeda. Terbentuklah kompleks anti HCG-#"
HCG" dan anti HCG-.. <nAim menjadi akti' dan daerah T berwarna merah.
Selanjutnya" sisa anti HCG-# yang belum berikatan dengan HCG akan
menuju daerah C dan berikatan dengan anti-anti HCG-#. )ompleks ini akan
mengakti'kan enAin sehingga daerah T berwarna merah. !ada akhirnya"
akan terlihat dua strip merah yaitu pada daerah T dan daerah C dan
diintepretasikan sebagai hasil positi' hamil (Hardjoeno" .&&%).
Cara kerja test pak adalah dengan memeriksa kadar hormon hCG
(human Chorionic Gonadotropin). 8pabila kadar hCG dalam urin sudah
menapai minimal .1 ml34ml maka alat tes kehamilan ini akan menunjukan
hasil positi'. hCG akan meninggi setelah terjadi implantasi embrio pada
dinding rahim biasanya terjadi +-#. hari setelah hubungan. Sesitivitas alat
tes kehamilan ini bervariasi yang lebih sensiti' tentu saja lebih baik karena
dapat mendeteksi hCG meskipun masih dalam kadar yang rendah dalam
urin. 8da juga yang mempunyai sensitivitas tinggi yakni menapai 1
ml34ml. )euntungan menggunakan teststrip adalah ara kerjanya praktis"
waktu yang dibutuhkan untuk mendapatkan hasil amat singkat dan stabil
untuk jangka panjang. Sedangkan kelemahannya adalah pemeriksaan
bersi'at kualitati' bukan kuantitati'. Tes kehamilan juga dapat dilakukan
dengan melakukan tes darah dan 3SG (Hardjoeno" .&&%).
I,0 KE)IMPU*AN DAN )ARAN
A0 Kesim&ulan
)esimpulan yang didapat dari praktikum kali ini adalah B
#. Human Chorinic Gonadotropin (HCG) adalah hormon glikoprotein yang
terdiri dari suatu >-subunit dan ?-subunit..
.. 2munokromatogra'i assay (2C8) merupakan perluasan yang logis dari
teknologi uji aglutinasi late= yang berwarna yaitu uji serologi.
B0 )aran
3ntuk praktikum selanjutnya bisa lebih tertib dan penjelasan lebih jelas lagi.
DAFTAR REFEREN)I
6ratawidjaja" ). G. .&&.. 2munologi 0asar. <d 1. (akarta B /akultas )edokteran
3niversitas 2ndonesia.
Cole" 5. 8. .&#.. HCG Cariants" The Growth /ators whih 0rive Human
7alignanies. 8m ( Caner -es . (#) pp. ..-,1.
/randson" -.0. #$$,. 8natomi dan /isiologi Ternak. ;ogyakarta B Gajah 7ada
3niversity !ress.
Hardjoeno. .&&%. 2nterpretasi Hasil Tes 5aboratorium 0iaggnostik. Cet 1.
7akassar B Hasanuddin 3niversity !ress.
7urray" -. ). #$$$. 6iokimia Harper. (akarta B <CG
!eare" <. #$$%. 8natomi dan /isiologi untuk !aramedis. (akarta B Gramedia
!ustaka 3tama.
!rawirohardjo" S. #$$#. 2lmu )andungan. Cetakan kelima. (akarta B ;ayasan 6ina
!ustaka.
-ose. D. .&&+. !anduan 5engkap !erawatan )ehamilan. (akarta" 0ian -akyat.
Subekti" 0. T." 8rtama" D. T. dan 2skandar" T. .&#.. !erkembangan )asusu dan
Teknologi 0iagnosis Toksoplasmosis. 5okakarya Easional !enyakit
Foonosis pp. .1, G .+*.