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Coloration de Ziehl-Neelsen : Guide Pratique

La coloration de Ziehl-Neelsen est une technique utilisée pour identifier les bacilles acido-alcoolo-résistants (BAAR) comme Mycobacterium tuberculosis et Mycobacterium leprae. Créée à la fin du XIXe siècle, elle utilise la fuchsine phéniquée pour colorer ces bactéries qui ne se décolorent pas avec l'acide-alcool. Les résultats sont interprétés par la présence de bacilles rouges sur un fond recoloré, indiquant un test positif.

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Coloration de Ziehl-Neelsen : Guide Pratique

La coloration de Ziehl-Neelsen est une technique utilisée pour identifier les bacilles acido-alcoolo-résistants (BAAR) comme Mycobacterium tuberculosis et Mycobacterium leprae. Créée à la fin du XIXe siècle, elle utilise la fuchsine phéniquée pour colorer ces bactéries qui ne se décolorent pas avec l'acide-alcool. Les résultats sont interprétés par la présence de bacilles rouges sur un fond recoloré, indiquant un test positif.

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COLORATION DE ZIEHL

DEFINITION
• La coloration de Ziehl-Neelsen , technique
utilisée pour identifier les BAAR

• en utilisant le FUCHSINE PHENIQUEE


HISTORIQUE
• La coloration de Ziehl-Neelsen a été créée à la
fin du XIXᵉ siècle pour colorer le bacille de la
tuberculose, résistant aux colorations
classiques.

• Grâce aux améliorations d’Ehrlich, Ziehl et


Neelsen, on a enfin pu identifier rapidement ce
microbe, révolutionnant le diagnostic.
PRINCIPE
• Son objectif est de distinguer ces bactéries
des autres germes qui, eux, se décolorent
avec l’acide-alcool.
• Les Bactéries concernées sont:
• Mycobacterium tuberculosis
(tuberculose)
• Mycobacterium leprae (lèpre)
PRINCIPE
• La coloration Ziehl-Neelsen utilise la fuchsine phéniquée (fuchsine +
phénol),
• un colorant basique aidé par le phénol et la chaleur pour traverser la
paroi riche en acides mycoliques des BAAR.

• Ces bactéries retiennent fortement le colorant et ne se décolorent pas


avec l’acide-alcool.

• Les autres bactéries, dépourvues d’acides mycoliques, se décolorent


puis se recolorent au bleu de méthylène.
MATERIELS
ETAPES
• 1. Préparer et fixer le frottis.
• 2. Appliquer la fuchsine phéniquée (avec chaleur ou
équivalent pour aider la pénétration).
• 3. Rincer puis décolorer à l’acido-alcool.
• 4. Ajouter le contre-colorant.
• 5. Observer au microscope avec l’objectif à
immersion.
RESULTATS
• Positif : présence de bacilles fins (bacilles) qui
conservent la couleur primaire et apparaissent
rouge/rose vif sur un fond recoloré.

• Négatif : absence de bacilles rouges ; on


visualise uniquement le fond et les éléments
recolorés par le contre-colorant.
INTERPRETATION

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