Somatic Cell Nuclear Transfer
(SCNT)
Master Sciences Biomédicales
Module : Biologie moléculaire
Année universitaire 2024 - 2025
Elaboré par : MZOURA Reda Encadré par : Pr. Nadia
CHEIKH Diatta
Plan :
Introducti
on
Définition
Mécanisme de la
technique
Applications du SCNT
Perspectives et défis
Méthodologie de recherche
Conclusion
Introduction
En 1996, la naissance de Dolly la brebis, premier mammifère cloné à partir d'une
cellule adulte, a marqué un tournant en biologie (Campbell et al., 1996).
Introduction
Derrière cette révolution se trouve la technique du Somatic Cell Nuclear
Transfer (SCNT), une méthode complexe mais fascinante qui ouvre des
perspectives en médecine régénérative, en préservation des espèces et en
recherche fondamentale.
Définition
Le SCNT consiste à remplacer le noyau haploïde (1n) d'un ovule par un
noyau diploïde (2n) prélevé dans des cellules animales cultivées en
laboratoire. Ces cellules peuvent être cryoconservées dans de l'azote liquide
pendant de longues périodes avant d'être utilisées pour générer un zygote
(Alshanbari et al, 2024).
Mécanisme du SCNT
Mécanisme du SCNT
Le SCNT se déroule en plusieurs
1. Énucléation de l'ovocyte étapes :
-Action : Retrait du noyau (matériel génétique) d'un ovocyte mature (stade
métaphase II).
- Objectif : Préparer un cytoplasme "vide" capable de reprogrammer un noyau de
cellule somatique.
Mécanisme du SCNT
2. Transfert du noyau somatique
- Source du noyau : Noyau d'une cellule somatique différenciée en phase G0 ou G1
(ex. : fibroblaste, cellule de peau).
- Méthode :
- Injection directe du noyau dans l'ovocyte énucléé.
- Ou fusion de la cellule somatique entière avec l'ovocyte.
Mécanisme du SCNT
3. Formation des chromosomes condensés
(PCC)
- Phénomène : Après transfert, le noyau somatique
subit une condensation prématurée des
chromosomes (PCC) induite par les facteurs
cytoplasmiques de l'ovocyte (ex. : MPF, M-phase
Promoting Factor).
- Importance : Nécessaire pour effacer l'état
différencié de la cellule somatique.
Mécanisme du SCNT
4. Activation artificielle
- Chimique : Traitement au chlorure de strontium (SrCl₂) pour les souris.
- Électrique/ionophore : Pour les primates/humains (moins sensibles au
SrCl₂).
- Objectif: Stimuler la fécondation et déclencher la division cellulaire.
Mécanisme du SCNT
5. Expansion nucléaire et reprogrammation
- Événements :
- Formation d'un pseudo-pronucleus (PPN) (similaire au pronucleus des
zygotes).
- Remplacement des histones somatiques par des histones maternelles (ex. :
H3.3, H2AX).
- Déméthylation de l'ADN (via TET3) et modifications des marques histone
(ex. : perte de H3K9me3 : Bloque l'activation des gènes zygotiques ).
Mécanisme du SCNT
6. Réplication de l'ADN et activation du génome zygotique ZGA
(Zygotic Genome Activation) :
- Réactivation des gènes embryonnaires (ex. : à 2 cellules chez la souris, 8
cellules chez l'humain).
- Échec partiel dans les embryons SCNT (barrière épigénétique).
Mécanisme du SCNT
Barrières
épigénitique
H3K9me3: Bloque l'activation
des gènes zygotiques (solutions :
injection de Kdm4d).
- Xist : Silencing anormal du
chromosome X (solutions :
suppression de Xist).
- H3K27me3 : Perturbation des
gènes soumis à empreinte (ex. :
Sfmbt2)
Mécanisme du SCNT
Barrières
épigénitique
Parmi les méthodes innovante pour résoudre ce problème de barrière
épigénitique.
APPLICATIONS DU
SCNT
CLONAGE REPRODUCTIF
Parmi ces utilités nous avons:
- Le clonage d’animaux
reproducteurs de haute valeur
génétique ;
- La préservation de la diversité
génétique ;
- La production d’animaux
transgéniques.
Ex: Prometea
RECHERCHE FONDAMENTALE
Permet de mieux comprendre les
mécanismes impliqués dans:
- la reprogrammation épigénétique ;
- la sénescence ;
- la pluripotence ;
- le cancer.
Ex: Bos Taurus
BIOPHARMACEUTIQUE
Clonage d’animaux pour produire
des médicaments. Exemple:
- Anticorps ;
- Protéines ;
Ex: capra aegagrus hircus
CLONAGE THERAPEUTIQUE
Utilisé pour:
- La production des produits du SCNT
comme vecteurs pour la thérapie
génique ;
- La création de modèles animaux de
maladies humaines ;
- La thérapie cellulaire substitutive en
médecine régénérative.
Ex: Rats Wistar
DEFI
S
FAIBLE EFFICACITE TECHNIQUES ET ETHIQUE
Faible efficacité de la SCNT pour la La complexité technique nécessite des
création d'une descendance viable ressources spécialisées. Les débats
normale chez les animaux (1 à 5 %) et éthiques, notamment sur le clonage
le nombre élevé d'anomalies observées humain et le bien-être animal, limitent
sont dus à un échec de la son acceptation
reprogrammation épigénétique
01 02
ANOMALIES DU PLACENTA
Les échecs dans la reprogrammation
épigénétique peuvent affecter la
03 04 PROBLEME MITOCHONDRIALE
La coexistence d'ADN
mitochondrial de la cellule
formation normale du placenta somatique et de l'ovocyte peut
perturber la fonction cellulaire
PERSPECTIVE
S
L’IPSC (Induced Pluripotent Stem Cells)
Ce sont des cellules somatiques reprogrammées pour retrouver un état pluripotent
similaire à celui des cellules souches embryonnaires et elles et peuvent se différencier en
dérivés des trois feuillets embryonnaires et sans utiliser d’embryons.
Critères iPSC SCNT
Fibroblastes,cellules endothéliales… Ovocytes de donneuses + cellules somatiques
Source cellulaire
facilement accessibles. (fibroblastes, lymphocytes).
0,01–1 % de colonies iPSC obtenues ; dépend < 1 % de blastocystes viables après transfert ;
Rendement / efficacité fortement de la méthode d’introduction des nécessite souvent de nombreux ovocytes pour
facteurs et de l’état cellulaire initial. isoler quelques NT-ESC.
Usage d’ovocytes humains, débat sur clonage
Éthique & Contourne l’argument embryonnaire, mais
thérapeutique vs reproductif, régulations
réglementations questions de sécurité et consentement.
restrictives.
Modélisation de maladies, criblages
Thérapies personnalisées avec ESC autologues,
Applications cliniques pharmacologiques, thérapies autologues
études mécanistiques, banques de NT-ESC.
(Parkinson, DMLA…).
~4–6 mois de reprogrammation et ~6–12 mois incluant obtention d’ovocytes,
Temps & coût
caractérisation ; coût modéré. reprogrammation ; coût élevé.
Autonomie vis-à-vis des ovocytes, méthode Qualité épigénétique/transcriptionnelle proche des
Forces
standardisée, adaptabilité. ESC, tolérance immunitaire élevée.
Hétérogénéité des lignées, mutations, mémoire Faible rendement, dépendance aux ovocytes,
Limites
cellulaire, risque tumoral. enjeux éthiques, coût élevé.
CONCLUSION
Références bibliographiques
:
• Matoba S, Zhang Y. Somatic Cell Nuclear Transfer Reprogramming: Mechanisms and Applications. Cell Stem Cell.
2018 Oct 4;23(4):471-485. doi: 10.1016/[Link].2018.06.018. Epub 2018 Jul 19. PMID: 30033121; PMCID:
PMC6173619.
• Campbell, K.H., McWhir, J., Ritchie, W.A., Wilmut, I., (1996). Sheep cloned by nuclear transfer from a cultured cell
line. Nature, 380: 64-66. [Link]
• Alshanbari FA, Elseory AMA (2024). Dromedary camel (Camelus dromedarius) cloning using somatic cell nuclear
transfer (SCNT) current knowledge and future perspectives. J. Anim. Health Prod. 12(4): 535-544.
• Niemann, Heiner & Lucas-Hahn (2012). Somatic Cell Nuclear Transfer Cloning: Practical Applications and Current
Legislation. 47 Suppl 5. 2-10. 10.1111/j.1439-0531.2012.02121.x.
• Kfoury C. Therapeutic cloning: promises and issues. Mcgill J Med. 2007 Jul;10(2):112-20. PMID: 18523539; PMCID:
PMC2323472.
Références bibliographiques :
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determinants and application to transgenics and biomedicine. International journal of molecular sciences, 22(14),
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• Chenoweth J.G. & Kendler K.S., SCNT versus iPSCs: proteins and small molecules in reprogramming, Annual
Review of Cell and Developmental Biology (2015)
• Wolf D.P. et al., Concise Review: Embryonic Stem Cells Versus Induced Pluripotent Stem Cells, Stem Cells 35(1),
26–34 (2017)