Institut national de formation supérieure paramédicale de BATNA
Anomalies des Globules Rouges
Elaboré par : PEPM Mme KADRI
Dans certains états pathologiques (anémies), l'observation des hématies sur
frottis sanguin coloré au MGG montre :
– des variations de la taille, de la forme, de la couleur
– Et même parfois la présence anormale d’inclusions intra cytoplasmiques.
Parfois les hématies qui normalement sont généralement isolées sur un frottis
sanguin, peuvent s’associer et pour former des rouleaux ou des amas :
groupement anormal.
Ces anomalies doivent être signalées lors de l’étude du frottis sanguin coloré
au MGG.
Rappel de la morphologie normale sur frottis sanguin coloré au MGG
1 - Anomalie de taille = Anisocytose
Définie par une grande variabilité des diamètres des hématies sur un même
frottis.
Microcytose : Hématies de petite taille
Macrocytose : Hématies de grande taille
2 - Anomalie de forme = Poïkilocytose
Poïkilocyte : définie par la présence dans le sang d’hématies de forme
anormale, aberrante.
Attention : il ne faut pas les confondre avec des artéfacts dus à l’étalement ou
au séchage
3 - Anomalie de couleur = Anisochromie
Anisochromie : Hématies de couleurs différentes.
4 - Anomalies d'inclusions intra-érythrocytaires
Attention : ne pas confondre précipité de colorant et inclusion intra
érythrocytaire.
Formation des corps de Jolly et de Cabot
Attention : Une plaquette de petite taille peut parfois se superposer sur une
hématie et ne doit pas être confondue avec une inclusion intra-érythrocytaire.
N.B. La présence d’érythroblastes (précurseurs nucléés d’hématies) est à
signaler.
Attention : certaines anomalies ne sont pas visibles sur frottis coloré par la
méthode de May-Grünwald Giemsa (MGG), elles nécessitent des colorations
particulières :
5 - Anomalie de groupement
Test « d’Emmel » ou test de falciformation
des hématies
Plan
I. Principe
II. Matériel et réactifs
[Link]
IV.Résultats
V. Causes d'erreurs
I . Principe
La désoxygénation totale de l'échantillon est induite, souvent en
présence de réactifs comme le métabisulfite de sodium à 2%.
Cette désoxygénation provoque la polymérisation de l'hémoglobine S
en cristaux insolubles.
Les hématies contenant de l'hémoglobine S se déforment alors en forme
de faucille (globules rouges falciformes).
Conditions de prélèvement
- Le prélèvement est effectué sur sang veineux dans un tube avec ou sans
anticoagulant .
- il n’est pas nécessaire d’être à jeun.
II . Matériel et réactifs
- Spatule
- Méta bisulfite de sodium en poudre (ou
prêt a l’emploi)
- Balance de précision
- Eau distillée
- Flacon de 125 ml
- Papier buvard (ou papier filtre)
- Lame
- Lamelles
- Vernis à ongles
III . Technique
-Préparer le méta bisulfite tous les jours et de le vérifier sur des échantillons
considérés comme positifs et négatifs (pour plus de fiabilité)
- déposer le papier buvard sur le plateau de la balance
- calibrer l’appareil
- à l’aide d’une spatule, prélever la poudre de méta bisulfite et la déposer sur le
papier buvard
- peser exactement 2 grammes de cette poudre
- recueillir les 2 grammes dans un flacon de 125 ml
- ajouter 100 ml d’eau distillée
- mélanger et attendre 15 mn environ pour que la solution soit stable
- tester la solution de méta bisulfite à 2% avec les échantillons positifs de la veille
Préparation du test
- déposer sur une lame propre une goutte de sang et une goutte de la solution de
méta bisulfite
- mélanger doucement
- déposer sur le mélange une lamelle en évitant les bulles d’air
- essuyer délicatement l’excès du mélange avec du papier buvard (à défaut
utiliser une compresse)
- sceller les bords de la lamelle avec du vernis à ongles ou de la paraffine, le
but étant d’empêcher le contact des hématies avec l’oxygène de l’air ambiant.
-Observer au microscope à un grossissement de 40x environ.
Rechercher la transformation des globules rouges en forme de faucille
indicative de la présence d'hémoglobine S.
IV . Résultats
Test négatif : les hématies gardent leur forme régulièrement arrondie ;
Test positif : présence de nombreuses hématies en forme de « faucille Fig 1
N.B : La concentration de métabisulfite de sodium doit être respectée: car
une concentration de 4% peut provoquer de fausses falciformations avec du
sang Normal.
Fig :1 Test d’emmel
V. Causes d'erreurs
La sensibilité du test : le test d'Emmel est qualitatif mais peut être faussement
négatif, surtout chez le nouveau-né ou les porteurs avec un faible taux
d'hémoglobine S (HbS).
La non-spécificité : le test détecte la présence d'HbS mais ne différencie pas les
formes hétérozygotes (porteurs sains) des formes homozygotes (malades) ou
d'autres variantes d'hémoglobine, ce qui peut induire des erreurs d'interprétation.
Des erreurs techniques : mauvaise manipulation de l'échantillon, insuffisance de
désoxygénation, mauvaise préparation du réactif, ou observation tardive ou
inappropriée au microscope.
• Ces causes expliquent pourquoi le test d'Emmel est considéré comme un test
de dépistage initial et non un test diagnostique définitif, nécessitant souvent une
confirmation par électrophorèse de l'hémoglobine ou d'autres méthodes plus
spécifiques.