REPUBLIQUE DEMOCRATIQUE DU CONGO
ENSEIGNEMENT SUPERIEUR ET UNIVERSITAIRE
INSTITUT SUPERIEUR DES TECHNIQUES MEDICALES DE BUKAVU
« I.S.T.M.- BUKAVU »
B.P. 3036 BUKAVU
SECTION : TECHNIQUES DE LABORATOIRE ET PHARMACIE
PROMOTION : L1 BM ET TPH
TRAVAIL PRATIQUE DE COMPLEMENT DE
MICROBILOGIE
SUJET: MICROSCOPE
Présenter par: Dispenser par:
Prof. David KAPANDE
1. GRACE HURUMA Matabishi
2. FURAHA NEEMA Merveille
3. DORTIN KITEGIE
4. CIZA KAVAGO Theophile
5. SIFA MUDOSA
6. KABILA MANDE Nourdin
ANNEE ACADEMIQUE 2022-2023
1. HISTOIRE DE MICROSCOPE OPTIMISTE.
Antoine Van Leeuwenhoek(1632-1723)
Il est resté pour l’histoire l’Inventeur du Microscope Né à Delz, il travaille à 16 ans
comme commis chez un drapier d’Amsterdam. Il va utiliser un compte –fils
pour vérifier la qualité des draps. Très curieux, observateur méticuleux,
d’une grande habileté manuelle, il va construire un microscope simple
Du Photon à l’Electron : Le Microscope Electronique
A la fin du XIX ème Siècle il était difficile de concevoir des agents infectieux
Autres que ceux que l’on pouvait déceler au microscope optique
(Bactéries, champignons, parasites)
Le microscope utilisé les électrons qui ont une longueur
D’onde plus courte que celle de la lumière pour " illuminer" l’objet permanant
De visualiser des structures plus petites. Le premier microscope électronique à
balayage (MEB) est créé en 1942 et commercialisé en 1965.
REFERENCE BIBLIOGRAPHIQUE :Jacques Bourel pharmacien biologiste, une histoire de microscope, janvier
2016
2. TYPES DE MICROSCOPES
Le microscope est divisé en deux grands groupes :
•Le microscope optique et
•Le microscope électronique.
2.1. LE MICROSCOPE OPTIQUE OU PHOTONIQUE
Les différents types des microscopes optiques ou photoniques
Les types Utilisés pour :
1. MO à fond clair L’observation des structures cellulaires
internes après coloration.
2. MO à fond noir L’observation d’échantillons non colorés et
des cellules vivantes et en déplacement.
3. MO à fluorescence Le marquage fluorescent de structure et de
composés macromoléculaires.
4. MO à contraste de phase La mise en évidence des différences
d’indices de réfraction et de contraste.
5. MO inversé l’observation de cellules en culture.
2.2. LE MICROSCOPE ELECTRONIQUE
Les diverses catégories des microscopes électroniques
Les types Utilisés pour :
Microscope électronique à transmission (MET) Dans le MET, les électrons traversent
l’échantillon traité par des métaux lourds. Sur
l’écran du MET apparait une image claire et
agrandie.
Microscope électronique à balayage (MEB) Le MEB permet d'observer l’objet en trois
dimensions. Il est utilisé dans l’étude des
surfaces des objets massifs après leur
traitement par des substances métalliques
réfléchissantes telles que le platine, l’argent et
l’or.
REFERENCE BIBLIOGRAPHIQUE : Dr. ZOUAGHI Youcef ; Cours de Biologie Cellulaire, Chapitre II : Méthodes
d’étude de la cellule 2022.
3. COMPOSITION DU MICROSCOPE
3.1. COMPOSITION DU MICROSCOPE OPTIQUE
• Les différentes parties du microscope peuvent
être classées en 4 systèmes :
• Système de support
• Système de grossissement
• Système d’éclairage
• Système de réglage.
3.2. COMPOSITION DU MICROSCOPE ELECTRONIQUE
Les microscopes électroniques contiennent les pièces
suivantes :
• Canon à électrons
• Système de lentille électromagnétique
• Porte-échantillon ou porte-échantillon
• Système de visualisation et d’enregistrement d’images
• Electronique et système informatique.
REFERENCE BIBLIOGRAPHIQUE:
[Link]
4. PRINCIPE DE FONCTIONEMENT
• 4.1. PRINCIPE DE FONCTIONNEMENT DU MICROSCOPE OPTIQUE.
Le microscope optique ou microscope photonique est constitué d’un tube qui
possède à ses deux extrémités des lentilles. Le premier groupe de lentilles, dirigé
vers l’objet à examiner, constitue l’objectif. Il donne une image réelle, inversée et
agrandie de l’objet. Cette image n’est pas formée sur un verre dépoli, mais se
trouve quelque part dans le tube optique, c’est l’image intermédiaire.
L’IMAGE INTERMEDIAIRE FORMEE PAR L’OBJECTIF EST GROSSIE PAR L’OCULAIRE.
• Le deuxième groupe de lentilles, dirigé vers l’œil de
l’observateur, est appelé l’oculaire ; il fonctionne
comme une simple loupe et grossit l’image
précédente. On obtient alors l’image définitive
virtuelle, plus ou moins fortement grossie et renversée
de l’objet initial.
• Le grossissement total du microscope est égal au
produit du grandissement de l’objet (un rapport de
longueurs) par le grossissement de l’oculaire (un
rapport angulaire).
4.2. PRINCIPE DE FONCTIONNEMENT D’UN MICROSCOPE ELECTRONIQUE.
Le principe de fonctionnement ressemble un peu à celui d’un microscope
optique sauf que : les photos sont remplacés par des électrons. Les lentilles
électromagnétiques. La limite de résolution du ME est plus élevée à celle du
MO.
REFERENCE BIBLIOGRAPHIQUE: Jean-pierre Gaveriaux, le microscope optique en Lichenologie et mycologie.
5. CONSIGNE D’UTILISATION DU MICROSCOPE OPTIQUE
Le microscope optique permet d’observer, à travers une lame mince, les elements que forment un organisme vivant ou une roche.
MATERIEL
• Pour une séance de microscope, les matériels nécessaires se composent :
• D’un microscope, des lamelles minces, des chiffons propres pour ensouiller lame, objectif et oculaire.
UTILISATION DE MICROSCOPE
PREPARATION
• Placer le microscope prêt du bord de la table ou de la paillasse afin de pouvoir observer aisément ;
• Remonter entièrement le tube optique afin d’éloigner au maximum les objectifs de la platine :
• Allumer et régler la lumière pour obtenir une lumière homogène à travers l’oculaire ;
• Tourner la tourelle porte objectif et ajuster dans l’axe du tube optique le plus faible des objectifs (×4 en général) ;
• Déposer la préparation microscopique (lame mince) au centre de la platine, en la fixant à l’aide des valets.
• Premier ajustement ;
• Rapprocher l’objectif de la préparation (sans la touche) à l’aide du bouton macrométrique, sans regarder dans l’oculaire ;
• Regarder dans l’oculaire et tourner le bouton macrométrique jusqu’à obtention d’une image ;
• Ajuster ensuite la netteté à l’aide du bouton micrométrique ;
• Affiner l’éclairage en ouvrant ou en fermant le diaphragme ;
• Observation ;
• Explorer l’ensemble de préparation et choisir une zone favorable à l’observation ;
• Centrer la zone choisie dans le champ d’observation ;
• Lorsque le grossissement s’avère insuffisant passer à un objectif plus fort (×10 voir ×40) ;
• Tourner alors doucement la tourelle porte objectif ;
• Attention, l’extrémité de l’objectif est très proche de la préparation et risque de briser mince en cas de manipulation violente.