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Propriétés de l'α-amylase en TP

Le document décrit une expérience visant à déterminer si l'α-amylase est une enzyme. L'expérience comporte trois problèmes à résoudre : si l'α-amylase accélère la transformation de l'amidon en glucose, si elle est spécifique, et si elle reste intacte après la réaction. Les résultats suggèrent que l'α-amylase répond aux critères pour être considérée comme une enzyme.

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Propriétés de l'α-amylase en TP

Le document décrit une expérience visant à déterminer si l'α-amylase est une enzyme. L'expérience comporte trois problèmes à résoudre : si l'α-amylase accélère la transformation de l'amidon en glucose, si elle est spécifique, et si elle reste intacte après la réaction. Les résultats suggèrent que l'α-amylase répond aux critères pour être considérée comme une enzyme.

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TP2 : Propriétés des

enzymes

[Link]
Une enzyme est une protéine qui :
- Accélère une réaction chimique (c’est un catalyseur)
- Est spécifique (action et substrat)
- Reste intacte en fin de réaction
Problématique : L’α-amylase est-elle une enzyme?
Rappel : (glucose)n + eau amylase glucose + (glucose)n-1
Pour répondre à cette problématique, nous devons répondre à trois problèmes :

Problème n°1 : Problème n°2 : Problème n°3 :


L’α-amylase accélère-t- L’α-amylase est- L’α-amylase reste-t-elle
elle la transformation de elle spécifique ? intacte en fin de réaction ?
l’amidon en glucose ?
Mode opératoire global :
Tube 1 Tube 2 Tube 3
1 ml d’eau distillée 1 ml d’amylase 1 ml d’amylase

15 ml d’une 15 ml d’une 15 ml d’une


solution d’amidon solution d’amidon solution de saccharose

Puis prélèvement d’une goutte de chaque tube toutes les 2 min, pour réaliser un test à l’eau iodée.
jaune orangée
Rappel : l’eau iodée est ……………………….., bleu
elle se colore en ……………en
présence d’amidon.
Problématique : L’α-amylase est-elle une enzyme?
Rappel : (glucose)n + eau amylase glucose + (glucose)n-1
Pour répondre à cette problématique, nous devons répondre à trois problèmes :

Problème n°1 : Problème n°2 : Problème n°3 :


L’α-amylase accélère-t-elle L’α-amylase est- L’α-amylase reste-t-elle
la transformation de elle spécifique ? intacte en fin de réaction ?
l’amidon en glucose ?

Tube 1 Tube 2 Tube 2 Tube 3 3 ml d’amidon


1 ml d’eau 1 ml 1 ml 1 ml
distillée d’amylase d’amylase d’amylase

15 ml d’une 15 ml d’une 15 ml d’une 15 ml d’une


solution solution Reste du
solution solution de tube n°2
d’amidon d’amidon d’amidon saccharose
Problème n°1 : L’α-amylase accélère-t-elle la transformation
de l’amidon en glucose ?
Hypothèse : L’α-amylase
Phrase affirmative
accélère
quilarépond
transformation
au problème
de l’amidon
selon votre
en opinion.
glucose.
Mode opératoire : Choisir une expérience permettant de répondre au problème.
Penser à un témoin. Tube 1 Tube 2
1 ml d’eau distillée 1 ml d’amylase
Le témoin est le tube qui a un seul facteur de différents avec les
autres. Généralement le témoin est la modélisation la plus proche
du phénomène
15 ml d’une naturel étudié, le15 point de départ avant la
ml d’une
modification de tel ou tel facteur.
solution d’amidon solution d’amidon
Témoin
Conséquences vérifiables : Résultats
L’eau iodéeque l’on aimerait
en contact obtenir du
avec la solution pour que
tube notre du
2 passera
hypothèse
bleu au jaunesoit vraie.
orangé plus rapidement qu’au contact du tube 1.
Résultats (observations) : Comparaison
Tube 1 des résultats avec le témoin.
Tube 2

Interprétations : Le
- Valider ou invalider
tube 1 reste notren’a
bleu, l’amidon hypothèse
donc pas été hydrolysé au contraire du tube 2
où il disparaît peuc’est-à-dire
- Explications, à peu. Le testexpliquer
glucose aurait du nous permettre
les résultats d’observer
pour pouvoir
l’apparition
répondre au de problème.
glucose dans le tube 2 et pas dans le tube 1. L’amylase présente
dans ce tube 2 a donc permis l’accélération de la réaction d’hydrolyse.
Conclusion : Réponse simple
L’α-amylase au problème
accélère (sans aucune
la transformation explication
de l’amidon nouvelle).
en glucose.
Problème n°2 : L’α-amylase est-elle spécifique ?
Hypothèse : L’α-amylase est spécifique.
Mode opératoire : Tube 2 Tube 3
1 ml d’amylase 1 ml d’amylase

15 ml d’une 15 ml d’une
solution d’amidon solution de saccharose

Conséquences vérifiables : Le test au glucose devrait être positif en fin d’expérience


dans le tube 2 et négatif dans le tube 3.

Résultats : Tube 2 Test au glucose positif ?


Tube 3 Test au glucose négatif

Interprétations : Le test au glucose étant positif dans le tube 2 en fin de réaction et l’amidon
Remarques
ayant disparu :(test à l’eau
- Pour ceuxiodée
dont jaune
le testorangé), l’amylase
au glucose du tubepermet l’hydrolyse
2 est resté né[Link] l’amidon en
glucose. Le test- au glucose
Nous est négatif
ne pouvons pas pour le tube
vraiment 3, l’amylase
conclure quant ne
à lapermet doncde
spécificité pasl’α-amylase.
l’hydrolyse
du saccharose. L’amylase serait donc spécifique de l’hydrolyse de l’amidon en glucose.

Conclusion : L’α-amylase semblerait être spécifique.


Problème n°3 : L’α-amylase reste-t-elle intacte en fin de
réaction ?
Hypothèse : L’α-amylase reste intacte en fin de réaction.
Mode opératoire :
3 ml d’amidon

Remarque : Témoin ?
Reste du tube n°2
Glucose + amylase (intacte?)

Conséquences vérifiables : La couleur de l’eau iodée en contact avec le nouveau tube 2


va de nouveau passer du bleu au jaune orangé.

Résultats : Tube 2

Interprétations: L’amidon disparaît de nouveau assez rapidement, l’α-amylase facilite


Remarque : - Nous ne pouvons pas vraiment conclure.
donc toujours son hydrolyse en glucose. Elle est donc intacte.

Conclusion : L’α’amylase semble intacte en fin de réaction.


Conclusion générale :
L’α-amylase semble accélérer spécifiquement
l’hydrolyse de l’amidon en glucose, tout en restant
intacte en fin de réaction.
L’α-amylase semble donc être une enzyme.

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