LE COMPLEMENT
Pr Hend Hachicha
Pr Hatem Masmoudi
HISTORIQUE
• Buchner en 1880 : présence dans le sérum normal
d'une substance à activité bactéricide : " alexine
• Jules Bordet 1898: le pouvoir bactériolytique in vitro
d'un immun sérum disparaît, après chauffage à 56°C et
est restauré par simple addition de sérum frais →
• l'activité bactéricide provient de l'action conjointe de 2
substances :
- L'une thermostable et spécifique de l’Ag :
bactériolysine ↔ l'anticorps
- L'autre thermolabile et non spécifique (présente
dans le sérum normal) : complément ↔ l'alexine
Définition et généralités
• Le complément (C’): système biologique, ensemble de
protéines sériques dont l’activation mutuelle en cascade
(→ amplification) engendre diverses activités biologiques
• Le C’ joue un rôle très important dans :
- l’immunité anti-infectieuse
- la réaction inflammatoire
- le métabolisme des complexes immuns
• la plupart des activités dépendent de l'interaction des
composants du C’ ou de leurs fragments de clivage avec
des récepteurs cellulaires spécifiques
Définition et généralités
• Les composants du système : dans le sang à l’état natif
excepté : fact D
• Activateurs → 3 voies d’activation :
- classique - alterne - lectines
• → tronc commun final : MAC
• Les conséquences biologiques de l’activation du C’
peuvent être aussi bien bénéfiques que néfastes pour
l’organisme
• → mécanismes de contrôle stricts
NOMENCLATURE
• Composants du C’: C1, C2, ..., C9 selon l'ordre
chronologique de leur découverte
• Fragments de clivage: désignés par l'adjonction
d'une lettre minuscule a, b, c.. (ex : C3a, C3b ...)
• Fragments inactivés: suffixe i (ex : C3bi = iC3b)
• Composants propres à la voie alterne; certains
facteurs de régulation : lettres majuscules :
P, B et D; H, I…
• Produits ayant une activité enzymatique :
marqués par une barre horizontale : C1s, C4b2a
VOIES D’ACTIVATION
• Trois voies d’activation du complément:
– La voie classique
– La voie alterne
– La voie des lectines
VOIE CLASSIQUE
• Activateurs:
– Ag-Ac: IgM++ , IgG (IgG1,2,3 )+, pas d’IgG4
– Endotoxines bactériennes
– Certains protéines virales
– ADN
– CRP
– Héparine…
VOIE CLASSIQUE
• Activateurs:
– Ag-Ac: IgM++ , IgG (IgG1,2,3 )+, pas d’IgG4
– Endotoxines bactériennes
– Certains protéines virales
– ADN
– CRP
– Héparine…
Voie classique : activation de C1
• C1 : formé de 3 types de molécules ≠ :
– C1q : dépourvu d’activité enzymatique
interaction avec les activateurs
se lie au fragment Fc des Ac de
classe IgM et IgG..
– C1r : sérine protéase (C1s)
– C1s : sérine protéase (C4 et C2)
• C1 ₌ C1q – (C1r – C1s)2
Le complexe C1
C1 = protéine avec un domaine
de type collagène et un domaine
lectine
C1 est une COLLECTINE.
ACTIVATION DE C1
• Pour que C1r2C1s2 puisse se lier à C1q, il faut que
C1q subisse lui-même un changement de
conformation
• La fixation de C1q, notamment sur des complexes
immuns permet ce changement de conformation
ACTIVATION DE C1
• Ac (IgM ou IgG) fixés à leur Ag →
modifications allostériques des Ig qui démasquent le
site de fixation du C1q
• La liaison multivalente de C1q avec l’Ac
(ou un autre activateur de la voie classique)
- favorise (en présence de Ca++) son
interaction avec le tétramère C1r2- C1s2
- stabilise le complexe C1 ainsi obtenu
- déclenche l'auto-activation de C1r
ACTIVATION DE C1
• Complexes immuns à IgM
– les IgM sont des pentamères
– chaque molécule d’IgM possède trois sites de
fixation au C1q
• les IgM activent très efficacement le complément
– Les sites de fixation au C1q ne sont
exposés que si l’IgM est liée à un
antigène
IgM : immunoglobuline pentamérique
Forme liée à un antigène :
révélation des sites de
fixation au C1q
Le complexe C1
• La liaison de C1q à deux Ig ou plus n’est
possible que si ces dernières appartiennent
à un même complexe immun ou si elles
sont fixées sur une même surface
ACTIVATION DE C1
• C1r activé clive C1s en 2 fragments dont un qui
porte l'activité enzymatique sérine-estérase
• C1s clive C4 en 2 fragments :
- C4a : anaphylatoxine
- C4b : porteur d'un site de fixation covalente
aux membranes cellulaires ou aux IgG des CI et
d'un site labile d'interaction avec C 2
• C1s clive C2 en 2 fragments : C2b (kinine) et
C2a qui reste associé à C4b → C4b2a :
C3 convertase
→ Constitution de la C5 convertase :
C4b2a(3b)n
2a
Génération d’une grande quantité de C3b qui
couvre la surface bactérienne à proximité de C4b2a
2
a
Tout le C3b ne se lie pas à la membrane
Une partie est inactivé en iC3b ou diffuse et se fixe sur des complexes
immuns solubles et des microorganismes : opsonisation
Une molécule de C4b2a clive 1000
molécules de C3 en C3b!
C4b2a C4b2a C4b2a3bn
Conversion de C5 en C5a et C5b
2a
• La C5 convertase classique
C4b2a(3b)n clive C5 en 2 fragments:
–C5a : anaphylatoxine
–C5b : porte un site labile de liaison
avec C6
Voie d’activation par la lectine liant le
mannose (MBL)
• Fait intervenir la MBP (mannose binding protein), une
collectine de la même famille que C1q
• MBL est donc l’équivalent de C1q
• Une fois liée, la MBP recrute une protéase (la mannose
binding protein associated protease ou MASP) qui est
l’équivalent de C1s et dont les substrats sont C4 et C2
Voie de MBL
VOIE DES LECTINES
_____
C4b2a is C3 convertase; it
will lead to the generation of
C5 convertase
MASP1
MBL
26
VOIE ALTERNE
• Activateurs:
– BGN
– Cellules infectées par des virus
– Levures
– LPS
– IgA agrégées
– Venin de cobra….
VOIE ALTERNE
• Non liée à la fixation d’une collectine sur un
complexe immun ou sur un pathogène donc
indépendante de l’immunité adaptative
• Considérée comme constituant de l’immunité
naturelle
• Aboutit à l’activation du MAC (formation de
C5b sans l’intervention d’anticorps)
VOIE ALTERNE
• Présence physiologique de petites quantités de C3b
dans le plasma (hydrolyse spontanée à bas bruit de la
liaison thioester instable)
• Fixation de C3b sur toutes les cellules (y compris les
cellules de l’hôte)
VOIE ALTERNE
• Indépendante des Ac : immunité naturelle
• 2 phases:
– Phase initiale:
• Spontanée
• Indépendamment de la présence d’activateurs
– Phase amplificatrice:
• Ne peut fonctionner qu’a la surface de particules activatrices
• Soumise à une régulation très stricte
PHASE INITIALE
• En permanence, à bas bruit et de façon tt à fait
physiologique :
• De petites quantités de molécules C3 natif :
hydrolyse spontanée d'un pont thiol-ester
interne instable de leur chaîne → C3b-like
• C3b-like ₌ C3 H2O
• C3b-like ↔ B, D → C3b-like – B – D – P
• → C3 convertase alterne initiale : C3blike-Bb
• C3 → C3a et C3b
PHASE AMPLIFICATRICE
• C3b ainsi formé par la phase initiale
• Se dépose sur une surface cellulaire
activatrice : pauvre en acide sialique
• En présence de Mg++, lie le facteur B
• le facteur D clive B en 2 fragments :
- Ba libéré dans le milieu
- Bb qui reste associé à C3b pour constituer la
C3 convertase alterne amplificatrice : C3bBb
VOIE ALTERNE
• C3bBb clive C3 en C3a et C3b
• 1 molécule de C3bBb peut cliver plusieurs C3
• Le dépôt de plusieurs fragments de C3b sur la
surface cellulaire à proximité de C3bBb
• → formation de la C5 convertase alterne
C3bBb(C3b)n qui clive C5 en C5a et C5b
Voie alterne
Facteur B : une fois fixé sur C3b,
devient le substrat du facteur D :
protéase qui circule dans le sang
sous forme active
C3bBb : C3 convertase alterne
Properdine : augmente la ½ vie
de la C3 convertase alterne : 530 mn
LA VOIE ALTERNE
• Mécanisme de surveillance, de résistance naturelle à l’infection
• C3 convertase initiale et C3 convertase amplificatrice
• La voie alterne est activée directement, en l’absence d’Ac au contact de
polysaccharides désialylés présents sur les paroies bactériennes/virales ou
de cellules infectées C3b
C3a D
C3
D
B
C3 C3b
C3b
Bb
B Bb
C3b
C3(H2O) C3(H2O)
C3a
Surface bactérienne
Aboutit à la formation de la C3 convertase alterne : C3b Bb 35
Activation du MAC (membrane attack
complex) (C5-C9)
2a
Activation du MAC (membrane attack
complex) (C5-C9)
Activation du MAC (membrane attack
complex) (C5-C9)
Activation du MAC (membrane attack
complex) (C5-C9)
100 Å
Voie classique vs. voie alterne
La régulation du complément
• Une activation intempestive du complément peut
tuer un individu ou altérer gravement ses organes
• Régulation intrinsèque ou endogènes:
– Durée de vie très courte
– Tendance spontanée à la dissociation
La régulation du complément
• Régulation extrinsèque ou exogène:
– Facteurs plasmatiques
• Le C1 inh ( inhibiteur de la C1-estérase): se lie au C1r et
C1s dés qu’ils sont activés, bloque leur activité sérine-
estérase et les dissocie de C1q.
La régulation du complément
• Régulation extrinsèque ou exogène:
– Facteurs plasmatiques
• Le C4bp: se lie au C4b libre, l’empêche d’intéragie avec
C2 et le rend accessible à l’action du facteur I
• En se liant au C4b lié au C2a, chasse C2a et permet le
clivage par I
La régulation du complément
• Régulation extrinsèque ou exogène:
– Facteurs plasmatiques
• Le facteur I (ou inactivateur de C3b et C4b): clive le C4b
lié à la C4bp ou à la MCP « membrane cofactor protein »
en C4c et C4d. Inactive le C3b lié au facteur H ou au
CR1(C3b-R) en C3bi, puis clive ce dernier en C3c et C3dg.
La régulation du complément
• Facteurs plasmatiques
• La properdine (P): en se liant au complexe C3bBb, elle le
stabilise et augmente d’environ dix fois sa durée de vie.
La régulation du complément
• Facteurs plasmatiques
• Le facteur H: dissocie la C3 convertase alterne et prévient sa
formation, sert de cofacteur à l’inactivation et au clivage de
C3 par le facteur I
La régulation du complément
• Facteurs plasmatiques
• La protéine S (vitronectine): se lie de façon irréversible au
complexe C5b-6-7 et empêche ainsi son insertion dans la
bicouche lipidique de la membrane cellulaire, elle empêche la
polymérisation du C9 au contact du complexe S-C5b-8
La régulation du complément
– Facteurs membranaires:
• Le DAF (decay accelerating factor = CD55): accélère la
dissociation spontanée de la C3 convertase classique
C4b2b et , à moindre degré, celle de la C3 convertase
alterne C3bBb
La régulation du complément
– Facteurs membranaires:
• Le CR1 ( C3b-R = CD35): accélère la dissociation
spontanée de C3 et C5 convertase classique et alterne
et prévient leur formation, cofacteur dans le clivage de
C3b et C4b par le facteur I
La régulation du complément
– Facteurs membranaires:
• Le MCP « membrane cofactor protein »: fixe le C4b et
le C3b et les rendent accessible a la dégradation par le
facteur I
La régulation du complément
– Facteurs membranaires:
• Le HRF « homologous restricting factor »: empêche la
polymérisation de C9 et l’insertion du MAC dans la
membrane.
Les récepteurs du complément
Récepteurs Spécificitcé Fonctions Types cellulaires
CR1 (CD35) C3b, C4b -Favorise dégradation C3b et GB, Macrophages,
C4b monocytes, PN, LB, CD
-Stimule la phagocytose folliculaires
-Transport CI sur GB
CR2 (CD21) C3b, iC3b, C3dg, EBV -Participe au corécepteur LB LB, CD folliculaires
-récepteur de EBV
CR3 (CD11b/CD18) iC3b Stimule phagocytose Macrophage, monocytes,
PN, NK
CR4 (CD11c/CD18) iC3b Stimule phagocytose Macrophage, monocytes,
PN, NK
Récepteur du C5a C5a -Liaison au C5a Cellules endothéliales,
mastocytes, phagocytes
Récepteur du C3a,C 4a -Liaison au C3a et C4a Cellules endothéliales,
C3a/C4a mastocytes, phagocytes
LES EFFETS BIOLOGIQUES DU
COMPLEMENT
• DEFENSE ANTI-INFECTIEUSE:
– Bactériolyse, virolyse et lyse des cellules infectées par
des virus.
• Le complément est l’agent cytotoxique de la réaction Ag-Ac
• Activation C5b-9 lyse
• Les cellules infectées par une grande variété de virus sont
lysées par le complément en présence d’Ac contre les Ag
viraux exprimés à leur surface
Conséquences de l’activation du
complément
bactéries Gram-
virus enveloppés
herpesvirus, retrovirus,...
LES EFFETS BIOLOGIQUES DU
COMPLEMENT
• DEFENSE ANTI-INFECTIEUSE:
– Opsonisation, stimulation de la phagocytose:
• C3b, C4b et C3bi récepteurs membranaires
spécifiques (CR1 et CR3) à la surface des cellules
phagocytaires (PNN, macrophages, monocytes )
• Meilleure adhésion première étape de la
phagocytose
LES EFFETS BIOLOGIQUES DU
COMPLEMENT
Principale opsonine : C3b
LES EFFETS BIOLOGIQUES DU
COMPLEMENT
Principale opsonine :
C3b
Récepteur CR1
LES EFFETS BIOLOGIQUES DU
COMPLEMENT
• DEFENSE ANTI-INFECTIEUSE:
– Neutralisation de certains virus par la fixation de
certains composants du complément
indépendamment de l’activation du MAC
LES EFFETS BIOLOGIQUES DU
COMPLEMENT
• ACTION PRO-INFLAMMATOIRE:
• C3a, C4a et C5a sont des anaphylatoxines, des facteurs
solubles qui initient la réponse inflammatoire
• Interagissent avec les récepteurs cellulaires C3a/C4a-R et
C5a-R présents sur les mastocytes, PNB et les cellules
phagocytaires
• C2b induit une augmentation de la perméabilité capillaire
• C5b-9 capable d’activer la phospholipase A2 médiateurs
de l’inflammation dérivés de l’acide arachidonique
(leucotriènes, prostaglandines)
LES EFFETS BIOLOGIQUES DU
COMPLEMENT
• Principaux effets pro-inflammatoires des
anaphylatoxines:
• Contraction du muscle lisse: vasoconstriction des
veinules post-capillaires avec augmentation de la
perméabilité capillaire et une bronchoconstriction
• Libération d’histamine (PNB, mastocytes)
• Chimiotactisme et activation des PN et monocytes
LES EFFETS BIOLOGIQUES DU
COMPLEMENT
• Solubilisation et épuration des complexes
immuns:
– Solubilisation:
• C3b et C4b fixées sur les complexes immuns
s’intercalent entre les Ac et empêchent ainsi les
interactions Fc-Fc cruciales dans le processus de
précipitation
Solubilisation et épuration des complexes
immuns
Complexes immuns Complexes immuns
solubles insolubles
LES EFFETS BIOLOGIQUES DU
COMPLEMENT
• Solubilisation et épuration des complexes
immuns:
– Epuration:
• Les complexes immuns opsonisés par C3b et C4b se
lient au CR1 des GR transport vers le foie et la
rate ou ils se dissociés des GR avant d’être dégradés par
les macrophages
Solubilisation des complexes
immuns
Le C3b et les hématies
(riches en CR1)
interviennent pour
éliminer les complexes
immuns via les cellules
phagocytaires de la rate et
du foie
LES EFFETS BIOLOGIQUES DU
COMPLEMENT
Méningite à meningocoque Lupus érythémateux systémique
Purpura fulminans Erythème en ailes de papillon
Lupus érythémateux systémique
Néphropathie lupique