T4
PREPARATION DES REACTIFS
1-Tous les réactifs doivent être amenés a la température ambiante (18-22 oC) avant
utilisation.
Pour préparer T4 – HRPRO réactif conjugué, ajoutez 0,1 ml de T4 – HRPRO concentré (11×) á
1,0 ml de T4 conjuguer (diluant 1 :10 ),et bien mélanger.
Note : Préparer uniquement la quantité de réactif conjugué qui est nécessaire a chaque fois.
Le réactif de travail conjugué devait être utilisé dans les 24 heures. Jeter l’excédent après
utilisation.
La méthode
[Link] le nombre souhaité de puits revêtus dans le support.
[Link] 50 Ul des standards, des échantillons et des contrôles dans les puits approprié.
[Link] 100 Ul d’ENZYM
E CONJUGATE REAGENT dans chaque puits.
[Link] mélanger pendant 30 secondes.C’est très important d’avoir un mélange complet dans
cette étape.
[Link] á la température ambiante ( 37 oC) pendant 60 minutes.
[Link] le mélange d’incubation dans un conteneur de déchets.
[Link] et feuilletez les puits 5 fois avec le tampon de lavage.
[Link] les puits fortement sur des serviettes en papier absorbant pour enveler toutes
gouttelettes d’eau résiduelle.
[Link] 100 Ul de solution de TMB dans chaque puits.Mélangez doucement pendant 5
secondes.
[Link] a la température ambiante pendant 20 munites,sans secouer.( dans l’obcutité).
[Link]êter la réaction en ajoutant 100 Ul de STOP SOLUTION dans chaque puits.
12.Mélangez délicatement pendant 30 secondes. C’est important de s’assurer que les puits
changent a la couleur jaune.
[Link] la densité optique a 450 nanomètres avec un lecteur ELISA dans les 15 minutes.
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