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Préparation et utilisation du réactif T4

Le document décrit la préparation des réactifs pour une méthode d'analyse impliquant T4 – HRPRO. Il fournit des instructions détaillées sur la préparation des réactifs, le mélange des échantillons et les étapes d'incubation nécessaires pour obtenir des résultats fiables. La lecture des résultats doit être effectuée dans les 15 minutes suivant l'ajout de la solution STOP.

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T4

PREPARATION DES REACTIFS


1-Tous les réactifs doivent être amenés a la température ambiante (18-22 oC) avant
utilisation.
Pour préparer T4 – HRPRO réactif conjugué, ajoutez 0,1 ml de T4 – HRPRO concentré (11×) á
1,0 ml de T4 conjuguer (diluant 1 :10 ),et bien mélanger.
Note : Préparer uniquement la quantité de réactif conjugué qui est nécessaire a chaque fois.
Le réactif de travail conjugué devait être utilisé dans les 24 heures. Jeter l’excédent après
utilisation.

La méthode
[Link] le nombre souhaité de puits revêtus dans le support.
[Link] 50 Ul des standards, des échantillons et des contrôles dans les puits approprié.
[Link] 100 Ul d’ENZYM
E CONJUGATE REAGENT dans chaque puits.
[Link] mélanger pendant 30 secondes.C’est très important d’avoir un mélange complet dans
cette étape.
[Link] á la température ambiante ( 37 oC) pendant 60 minutes.
[Link] le mélange d’incubation dans un conteneur de déchets.
[Link] et feuilletez les puits 5 fois avec le tampon de lavage.
[Link] les puits fortement sur des serviettes en papier absorbant pour enveler toutes
gouttelettes d’eau résiduelle.
[Link] 100 Ul de solution de TMB dans chaque puits.Mélangez doucement pendant 5
secondes.
[Link] a la température ambiante pendant 20 munites,sans secouer.( dans l’obcutité).
[Link]êter la réaction en ajoutant 100 Ul de STOP SOLUTION dans chaque puits.
12.Mélangez délicatement pendant 30 secondes. C’est important de s’assurer que les puits
changent a la couleur jaune.
[Link] la densité optique a 450 nanomètres avec un lecteur ELISA dans les 15 minutes.
T4

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