I.
Mécanismes moléculaires des recombinaisons génétiques
Recombinaisons génétiques = modifications dans
l'ADN => variabilité génétique.
Causes:
:.. insertion de nouvelles séquences
- réarrangement de séquences pdt la mitose ou la méiose.
••
Résultats nouvelles combinaisons de l'information
génétique entre 2 molécules d'ADN.
NB Les échanges d'informations génétique pendant les
recombinaisons se font par des cassures et réparations
au cours des crossing-over.
,.,,:
1. La recombinaison homologue
Elle se réalise entre 2 régions homologues suite à :
(mitose)
- une cassure accidentelle de I'ADN ou
- de façon obligatoire au cours de la méiose.
NB : Les 2 régions ne sont pas nécessairement identiques.
Il existe 2 mécanismes de recombinaison
- soit par coupure simple brin dans chacune des 2
molécules d'ADN
- soit par coupure double brin de l'une des 2 molécules.
1.1. Modèle de cassure simple brin
a. Apparie me nt de s b. Coupures simple brin dans c. Formation d'une jomture
chrornosomes homologues chaque chromosome homologue recombinante
, ,
,
,
, ,
, ,
d. Deplacement du crossin-over
Coupure dans les autres brins
Courpure dans Ie s memes brins (coupure verticale)
(coupure horizontale
180
Seconde jointure recombinante
Région hybridé
Figure 3. 9. Recombinaisons
homologues selon le modèle de
cassure simple brin
1
• Appariement des 2 ADN double brin (région homologue);
• Cassure d'un brin dans chaque ADN en un point
homologue;
• Chaque brin se sépare de son complémentaire et
s'apparie au brin de l'autre duplex qui lui est
complémentaire;
• Formation d'une jointure recombinante au point de liaison
des duplex (structure de Holliday) ;
• Déplacement dans un sens ou dans l'autre de la jointure
recombinante le long du duplex d'ADN ;
jointure recombinante--------->crossing-over
NB : La recombinaison implique 2 autres coupures de brins.
• Si coupure horizontale, duplex ADN libérés avec une
zone de recombinaison (région hybride);
• Si coupure verticale, ADN recombinants libérés après
un 2 nd crossing-over entre les brins nouvellem�nt
coupes;
'
� Dans les 2 cas, il y a ligature des brins d'ADN coupés.
1 . 2. Modèle de cassure double brin
c. Coupure agrandie
par des exonucléases
g. Formation de structure
de Holliday
Figure 3.10. Recombinaisons Recombinaison réciproque
Recombinaison
coupure horizontale
homologues selon le modèle de coupure verticale
la cassure double brin
• Coupure double brin de l'une des molécules d'ADN par une
endonucléase ;
• Des exonucléases agrandissent la coupure de chaque côté
produisant des extrémités 3' simple brin ;
• L'une des extrémités 3' va s'apparier à son
complémentaire de l'autre duplex, le brin complémentaire de
ce duplex est alors déplacé ;
• Le brin déplacé du 1 er duplex migre vers le 2 nd ;
• L'ADN polymérase resynthétise les régions
manquantes en utilisant le brin complémentaire
comme matrice ; 02/07/2016
Les brins échangés se croisent en une double jointure
,\
recombinante (crossing-over)
Les jointures recombinantes sont supprimées par coupure
conduisant à différentes formes de recombinaison.
Dans le cas d'une cassure simple brin, aucune information
génétique n'est perdue.
Cependant, lorsqu'un ADN hybride est obtenu, le système de
réparation de l'ADN peut exciser et remplacer l'un des brins
pour rétablir la complémenrarité.
Dans le cas d'une cassure double brin, il y a perte
d'information puis resynthèse à partir du brin
complémentaire de l'autre duplex.
Si le t er duplex d'ADN porte une mutation et pas le 2nd, la
mutation disparârt.
Quel que soit le type de cassure, il peut y avoir une conversion
génique (changement dans l'information génétique).
2. La recombinaison site-spécifique
Elle met en jeu des enzymes qui :
- reconnaissent des séquences spécifiques et
- catalysent des coupures et des ligotions :
• soit entre 2 molécules d'ADN,
• soit au sein d'une même molécule.
Ex. de recombinaison site-spécifique entre 2 molécules
d'ADN chez les procaryotes : intégration du génome
des phages dans l'ADN bactérien.
(att=attachement)
Chez E. coli, l'intégration du phage A est catalysée Par 2
enzymes qui reconnaissent des sites spécifiques
(séquences att) ayant une courte région homologue :
- attP sur le génome du phage ;
- attB sur le chromosome bactérien.
Le mécanisme de l'intégration fait intervenir un crossing
over entre les 2 régions homologues des génomes du phage
et de la bactérie.
virus qui infectent la bactérie sont appelés
phages ou bactériophages. dès qu'il intègre la
bactérie on l'appelle prophage
Crossing-over
X
attB
� Intégration (intégrase)
Prophage
Excision (excisionase)
Figure 3.11 : L'insertion du phage λ est
une recombinaison site specifique
Le phage synthétise l'enzyme Int (Intégrase).
La bactérie synthétise la protéine IHF (Integration Host
Factor).
L'intégration du phage A est réversible : son excision
fait intervenir l'intégrase et une enzyme Xis
(excisionnase) synthétisée par le phage.
1
Ex. de recombinaison site-spécifique sur une même mo!écule
d'ADN:
Ex. chez certaines bactéries pour contrôler l'expression de
certains gènes
Chez Salmonella, � un contrôle de l'expression
alternée des gènes codant les flagellines.
La recombinaison site-spécifique provoque l'inversion
du promoteur de l'un des gènes qui n'est alors plus
. ,
exprime.