Motilité bactérienne et adhérence initiale
Le mouvement fluide, caractérisé par la sédimentation, la diffusion et la convection,
constitue le mécanisme principal de transport bactérien et de masse le long d'une
surface, comme schématisé dans la Fig.
Motilité bactérienne et adhérence initiale
Le flux favorise une croissance de biofilm plus épaisse et plus dense par
rapport aux environnements statiques, mais ce contraste peut dépendre
du temps, de l'espèce et du substrat.
En comparaison avec les environnements statiques, les biofilms de
Candida atteignent une épaisseur plus importante sous écoulement aux
premiers stades de croissance (< 6 h), mais sont plus minces qu'en
environnement statique à des stades ultérieurs (24 h) .
Motilité bactérienne et adhérence initiale
Le flux facilite la détection de l'environnement bactérien et les efforts de
communication des agrégats.
L'adhérence bactérienne à la surface est complexe car elle implique
différentes méthodes actives et passives de fixation, telles que les
processus de transfert de masse, les forces de Van der Waals,
l'hydrophobicité de la surface, les interactions électrostatiques et le
déploiement d'adhésifs organiques par les bactéries .
Fig. 1. Regions of interaction between the bacterium and substratum. At separation distances of >50nm (left) adhesion is driven
by macroscopic cell surface properties. Between 10 nm and 20 nm (middle) electrostatic repulsion introduces the possibility of
reversible adhesion. Under 1.5 nm (right), only adhesion via extruding probes and hydrophobic groups can achieve coupling with
the substratum. Adapted from [99].
Motilité bactérienne et adhérence initiale
La capacité à se fixer à une surface découle principalement de la position et
de la motilité des bactéries près de la surface.
Un mouvement actif est nécessaire pour que les bactéries se dirigent vers
une surface et établissent un contact, même avant de prendre en compte
les effets d'un matériau ou d'une texture de surface particuliers.
Suite à l'activité de positionnement près de la surface, le processus de
formation du biofilm se poursuit avec l'adhésion initiale des bactéries à la
surface.
Cette activité passe généralement par deux phases : une adhésion
réversible et une adhésion irréversible
Motilité bactérienne et adhérence initiale
Les cellules dépourvues d'appendices mobiles, dépendent
fortement du flux de fluide pour se fixer à une surface et former un
biofilm.
Les bactéries motiles se déplacent de manière autonome en
dépensant de l'énergie et bénéficient de plusieurs avantages de
survie dans les fluides statiques en utilisant leurs appendices pour
la fixation, le détachement et le déplacement.
La fixation initiale est caractérisée par une réversibilité potentielle,
où les bactéries quittent la strate pour tenter une recolonisation
ailleurs.
Motilité bactérienne et adhérence initiale
La détection d'une surface proche peut être réalisée via des signaux issus
de l'une des trois catégories : changements physico-chimiques, fixation
d'appendices et contact corporel, comme illustré dans la Fig. 2.
Les gradients d'osmolarité, valeur de pH, force ionique et de
concentrations en nutriments sont des propriétés physico-chimiques qui
peuvent être détectées par une bactérie, Fig. 2a I.
La détection de la fixation peut être réalisée soit par le biais d'appendices
tels que des flagelles, des pili (Fig. 2a II) ou des curli, soit par le contact
corporel (Fig. 2a III).
Fig. 2. (a) Cues sensed by a cell approaching the surface. (I) changes in micro-environment, (II) physical contact of appendages,
and (III) envelope stress of physical contact. (b) Torques imposed on a cell model moving parallel to a surface at constant velocity
U. (IV) Surface induced drag torque, causing forward roll of the spherical body. (V) Balance of “surface” and “form-drag” torques
acting on a prolate spheroid, directing the body toward the surface at an equilibrium angle (θ). Adapted from [100,102].
Motilité bactérienne et adhérence initiale
Les Cellules avec et sans flagelles peuvent posséder des pili. Les pili
permettent la motilité et l'attachement, et facilitent à la fois le contact initial
et le déplacement ultérieur à la surface.
Après l'attachement, les cellules se déplacent à la surface en rétractant les
pili attachés, soit en s'enracinant vers le haut sur les pili.
La rétraction des pili permet aux cellules de P. aeruginosa de migrer en
amont après que l'écoulement a fait tourner la cellule autour du point
d'attache et a aligné son pôle tourné vers l'avant avec la direction de
l'écoulement, comme illustré à la Fig3.
Fig. 3. Pili enabled bacterial movement. (a) dragging. (b) walking. (c) rotation about the point of attachment with the aid
of near-field flow. (d) “slingshot” maneuver [96]. Panels (c) and (d) adapted from [106,108].
Motilité bactérienne et adhérence initiale
Tout comme l'hydrodynamique favorise l'attachement, l'écoulement peut également
faciliter le détachement.
Une augmentation de la vitesse d'écoulement en vrac facilite le transport des cellules et
des nutriments, mais déclenche également des événements de détachement.
Un équilibre entre les deux événements est atteint à une valeur de "contrainte de
cisaillement critique".
Dans le cas des bactéries S. epidermidisHBH276 cultivées sur du caoutchouc de
silicone, la contrainte de cisaillement critique est de 2,7 ± 1,1 Pa, mais l'application d'un
revêtement en oxyde de polyéthylène réduit cette valeur à seulement 0,2 ± 0,1 Pa.
Biofilms de Streptococcus sanguinis
sur différentes surfaces. (a-d) montre
un développement sur 72 heures, et
(e-h) montre un développement sur
120 heures. Chaque rangée
représente un matériau, de haut en
bas : PEEK, PEEK sablé, titane,
alliage TiAlV. Les flèches indiquent
une substance de type EPS autour
des streptocoques. La barre
d'échelle indiquée dans le panneau
(a) représente 2 μm dans tous les
panneaux.
Étant donné la variété de matériaux susceptibles au bio-encrassement,
il est Intéressant d'énumérer ceux qui entravent la croissance du
biofilm.
Le caoutchouc par exemple s'est avéré résistant à la formation de
biofilm, du moins vis-à-vis de S. paucimobilis.
Le cuivre, les alliages de cuivre et le laiton se distinguent comme des
matériaux qui résistent significativement à l'encrassement par certaines
souches bactériennes, telles que Legionella pneumonia.
Cette caractéristique du cuivre est hypothétiquement attribuée aux
propriétés bactéricides du cuivre .
Énergie de surface et adhérence initiale
L'énergie de surface est un facteur critique dans la capacité des micro-organismes à se
fixer sur des substrats [237]. La majorité des études s'accordent sur le fait que la
capacité d'un substrat à l'adhérence bactérienne diminue avec une faible énergie de
surface libre.
Cependant, quelques études présentent des résultats contradictoires [245,246]. Par
exemple une énergie de surface libre comprise entre 23 et 30 mN/m produisait la plus
faible adhérence bactérienne.
La plus faible adhérence d'E. coli est signalée pour une énergie de surface libre de 21-
29 mN/m [249], tandis que pour Pseudomonas aeruginosa, elle est de 20-27 mN/m
[250].
L'étude des relations entre l'énergie de surface et l'adhérence est motivée par la
conception pratique de surfaces permettant un nettoyage facile par vibration et
cisaillement avec une faible attraction interfaciale.
Une combinaison de matériaux à faible énergie de surface avec des
surfaces structurées conduit à une propriété de surface du 21e siècle
connue sous le nom de « superhydrophobicité » .
De telles surfaces ont été initialement inspirées par la nature et sont
connues pour leur capacité à prévenir l'adhérence bactérienne [247,267].
La feuille de lotus est l'exemple classique d'une surface anti-salissure
inspirée de manière naturelle [268]),
Une mise en œuvre de telles surfaces anti-salissures a été démontrée sous
la forme d'un revêtement polymère sur de l'acier inoxydable pour résister à
deux souches bactériennes pathogènes, P. aeruginosa et L.
monocytogenes, présentes dans les environnements de traitement des
aliments et médicaux.
Matériau de substrat et topographie, et croissance du biofilm
La topographie de surface, telle que les motifs réguliers et la rugosité irrégulière, dicte le succès de la
contamination bactérienne des substrats, ce qui est également fortement spécifique à l'espèce
La nano-rugosité (Fig. 15A-2) impose une barrière énergétique plus importante aux cellules bactériennes
entrantes par rapport aux surfaces lisses (Fig. 15A-1) et micro-rugueuses (Fig. 15A-3), favorisant ainsi
l'anti-incrustation.
Dans le cas des surfaces nano-rugueuses à rapport d'aspect élevé, les particules de protéines s'infiltrent à
travers les pores, ce qui empêche la formation d'un film protéique, réduisant ainsi l'attachement bactérien
efficace, comme illustré dans la Fig. 15C-2.
Les surfaces rugueuses peuvent emprisonner de l'air entre les crêtes, empêchant ainsi les bactéries
d'accéder à la surface, comme montré dans la Fig. 15E.
Des pores plus petits que la plus petite dimension des cellules bactériennes empêchent la ségrégation,
favorisant ainsi l'anti-incrustation, comme schématisé dans la Fig. 15F.
La nano-rugosité favorise généralement l'anti-incrustation, tandis que la micro-rugosité a tendance à
favoriser l'encrassement.
Fig. 15. Effets répulsifs de la topographie du stratum sur l'attachement initial des cellules et leurs échelles
pertinentes. Les panneaux (a-c) représentent des interactions amplifiées par des caractéristiques de surface
significativement plus petites qu'une bactérie. Les panneaux (d-g) illustrent l'effet de caractéristiques de la même
échelle que la cellule, ou plus grandes. Chaque ligne montre, de gauche à droite : des topographies de surface
plates, nanométriques et microscopiques..
Table 2. Influence of surface roughness on bacterial attachment.
Surface material Roughness [μm] Influence on Microorganisms Reference
Attachment
25 times more
bacteria Indigenous oral Bollen et
Titanium implant 0.81 and 0.35
attached to microbiota al., 1997 [281]
rougher surface
Higher Indegenous Arnold and
Stainless steel with different
0.009–0.145 attachment on bacteria from Bailey, 2000
surface finishes
rougher surface poultry rinse [282]
Higher
attachment on
P. aeruginosa, P.
rougher surface,
putida, D.
bacteria tend to Medilanski et
0.03–0.89 desulfuricans,
align with al., 2002 [283]
Les conditions de flux identiques peuvent engendrer une variété de
caractéristiques de croissance de biofilm dépendant de la topographie de la
surface à laquelle le biofilm est attaché
Par exemple, une contrainte de cisaillement de 1,3 à 1,4 Pa limite la
croissance du biofilm sur le verre, mais sur le PDMS, les biofilms continuent
de croître même à une contrainte de cisaillement de 2,0 Pa
La lutte contre le bio-encrassement via des motifs de surface est plus
efficace lorsque les formes des motifs sont conçues pour ne pas
correspondre à la forme naturelle des bactéries.
Fig. 16. Biofilms de diatomées cultivés sur du verre et un élastomère de polydiméthylsiloxane (PDMS). La rangée
supérieure, (a,c,e), montre des lames de verre, la rangée inférieure, (b,d,f), des lames de PDMS. Les conditions
hydrodynamiques du canal d'essai sont les suivantes : (a,b) milieu statique, (c,d) contrainte de cisaillement de 0,54
Pa, (e) contrainte de cisaillement de 1,0 Pa et (f) contrainte de cisaillement de 2,0 Pa. Le panneau (f) en encart
illustre les différences dans l'arrangement cellulaire : (r) orientation avec le côté raphe vers le bas, (v) orientation
avec le côté valve vers le bas. Les barres d'échelle représentent 50 μm. Figure adaptée de [184].
Fig. 17. Adhérence cellulaire à diverses topographies de surface en PDMS sous des conditions statiques (en bleu)
et en relation avec l'orientation des strates pendant l'écoulement du fluide : écoulement sous la strate (en rouge) et
écoulement au-dessus de la strate (en vert). L'encart montre une vue zoomée de l'adhérence cellulaire sur diverses
topographies de surface sous des conditions statiques. L'axe des x montre les sept topographies de surface
différentes, de gauche à droite, surface lisse, surface avec des lignes continues de 1 μm de largeur et
d'espacement, lignes échelonnées de 230 nm de largeur de ligne, trous espacés de 4 μm, trous espacés de 2 μm,
trous espacés de 1 μm et trous espacés de 0,5 μm. Tous les trous ont un diamètre de 1,7 μm. L'encart a le même
axe des x. Les barres d'erreur représentent un écart-type. Les barres d'échelle = 10 μm [49].
Fig. 19. Cellules allongées de P. aeruginosa sur des surfaces de TiO2. Diamètres des pores : (a) 0,5 μm, (b) 2
μm et (c) 1 μm. Les barres d'échelle représentent 1 μm sur les panneaux (a) et (b), et 5 μm sur le panneau (c).
Les panneaux (a) et (b) proviennent de [305], et le panneau (c) est précédemment inédit.
Matériau du substrat et topographie, signalisation chimique et détachement
Les facteurs qui déclenchent le détachement ne sont pas
entièrement compris, mais semblent être basés sur une
signalisation chimique qui initie la libération de cellules après la
saturation et la famine des colonies .
Une fois que le biofilm atteint la maturation, les bactéries se
détachent délibérément de la surface dans le but de quitter les
colonies de biofilm saturées, d'atteindre des environnements plus
nutritifs et de conquérir de nouveaux domaines.