Introduction aux cosmidés en clonage
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DÉFINITION :
Les cosmidés sont des vecteurs de clonage, qui ont été largement utilisés dans la
élaboration de banques génétiques d'ADN génomique de grande taille, car elles permettent la
introduction d'inserts d'ADN allant jusqu'à 45 kb, le double des vecteurs dérivés de
l'élimination d'une partie du génome du phage λ.fagémidos.
CARACTERÍSTICAS:
Descritos por primera vez por Collins Hohn en 1978.
Ce sont des vecteurs hybrides construits en utilisant des parties du chromosome du phage.
lambda y de l'ADN plasmidique.
Ils contiennent la séquence “cos” du phage lambda.
Secuencias plasmidicas de replicación y de genes de resistencia a antibióticos.
Molécules d'ADN circulaires extra-chromosomiques qui combinent des caractéristiques de
plasmides et phages. Les cosmidés sont des hybrides entre plasmides et le phage λ.
Cosmidos Cósmidos
Descripción:
Origine de réplication (ori), site cos (site cos), gène de résistance à l'ampicilline (ampR) et
sites de clonage
D'une part, ils possèdent la capacité du plasmide à se répliquer de manière autonome les cellules,
contiennent l'origine de réplication et les gènes de résistance aux antibiotiques de leur
plasmide parental. De l'autre, ils contiennent les sites cos du phage λ pour l'emballage
in vitro.
Le site cos permet d'emballer 40-45 kb d'ADN dans une particule λ qui se réplique comme
un plasmide. Le principal avantage des cosmidés en tant que vecteurs est la capacité de
insérer des fragments d'ADN de 35 à 45 kb.
Son ADN contenant de l'ADN inséré est emballé dans la capsule protéique de
lambda pour former des particules phagiques infectieuses.
Une fois le cosmid entre dans la cellule hôte, il se réplique comme un plasmide.
Les cosmidés peuvent transporter des inserts d'ADN beaucoup plus grands que ceux que
lambda peut porter.
Pueden replicarse como plásmidos si tienen un origen de replicación adecuados.
Généralement, ils contiennent des marqueurs génétiques qui permettent leur sélection dans les
deux systèmes hôtes.
EN QU'EST-CE QUE CELA CONSISTE?
Réellement, un cosmide consiste en un plasmide auquel ont été ajoutés des
segments du génome d'un bactériophage, le phage λ.
QUE CONTIENT ?
Un cosmide contient :
Du plasmide, leori Cet un gène de résistance à un antibiotique, cela dépend du type
de plasmide duquel il dérive et, par conséquent, peut contenir plus de segments comme par
exemple le gèneLacZ, quepermet lasélection blanc/bleudes colonies.
Del fago λ, lesextrêmes COS,extrêmes complémentaires du génome du phage et que
sont utilisés pour la recirculation de celui-ci.
Ces vecteurs facilitent le travail car ils permettent l'[Link] vitrodes
séquences entre deux extrêmes COS et utiliser les phages empaquetés pourtransfectarcepas
de E. coli, obtenant un plasmide dans lebactériespuisque le cosmide se recircule au
entrer grâce aux extrêmes COS.
Elle a également des gènes de résistance aux antibiotiques d'origine plasmidique, qui aident dans la
identification des cellules hôtes contenant les cosmidés recombinants. Après
pour insérer des fragments d'ADN, les cosmides recombinants sont emballés dans la capside
protéique de λ pour former des particules phagiques infectieuses. Une fois dans la cellule hôte,
le cosmicide se réplique comme un plasmide.
BIBLIOGRAPHIE :
Klug, William S.; Cummings, Michael R.; Spencer, Charlotte A., "Concepts de
Génétique” 8ème édition. Pearson Prentice Hall.
ENCCH. (2015). Clonage : Vecteurs. Portail Académique CCH. Récupéré
de:[Link]
riagenetique/ADNrecombinaison/clonageVecteurs
Gómez, M & Echenique, V. et al. (s.f.). Biotechnologie et Amélioration Végétale
[Link] : INTA. Récupéré de :[Link]
contenu/téléchargements/2010/09/bio_WEB.pdf
Posada, D. (2005). Outils de la génétique moléculaire. [PDF]. Récupéré
de :[Link]
[Link]
S.A. (s.f.) Vecteurs de clonage.[PDF]. Récupéré
de :[Link]
VECTEURS_DE_CLONAGE.pdf