Test ASO : Détection des Anticorps
Traduit par
ScribdTranslationsTest ASO : Détection des Anticorps
Traduit par
ScribdTranslationsDÉTERMINATION DES ANTICORPS ANTIESTREPTOLYSINE O (ASO)
(Test de LaTeX)
Pratique N° 3
INTRODUCCIÓN
Les streptocoques du groupe A les bêta-hémolytiques produisent plusieurs antigènes
intracellulaires et extracellulaires qui stimulent la production d'anticorps par
patient infecté.
Beaucoup de ces anticorps sont détectables par des tests sérologiques appropriés.
Le plus familier d'entre eux est la streptolysine O, une toxine avec des caractéristiques de
enzyme.
La test ASO a été sélectionné parce que : a) Il a une bonne répétabilité. b) Le
l'antigène est produit par la plupart des souches de streptocoques du groupe A.
L'antigène est commercialement abordable. d) C'est le test le plus étudié.
Dans ce type de test, la streptolysine O est adsorbée sur des particules telles que le latex. Les
des particules recouvertes se mélangent avec le sérum du patient, sur une lame porte-
Des objets. Les particules s'aglutinent en quelques minutes si l'anticorps ASO est présent.
dans le sérum.
Le principal avantage de ce type de test est que les sérolipoprotéines, les produits de
développement bactérien, la streptolysine O oxydée, ne provoquent pas de faux titres positifs.
Un titre élevé d'ASO est généralement indicatif d'une infection récente par
streptocoques du groupe A bêta-hémolytique, et en tant que tel, cela peut être utile pour le
médico en el diagnóstico de fiebre reumática aguda o glomerulonefritis aguda.
Le test ASO n'est pas le seul test utile pour le diagnostic de la glomérulonéphrite
aguda, son importance réside dans le fait qu'elle a été la plus largement utilisée des tests
de l'anticorps streptococcique et pour cela la plus familière, certaines de ses inconvénients :
{"a":"Les titres bas associés aux infections cutanées et leurs séquelles","b":"Les faux"}
titres positifs causés par le développement de certaines bactéries dans l'échantillon de sérum c)
Et les faux titres positifs provoqués par l'oxydation du réactif Estreptolysine
Antigènes du Streptocoque groupe A.
Fig. 1 Composantes cellulaires et produits extracellulaires du streptocoque groupe
Un
Cellulaires Produits extracellulaires
Paroi cellulaire Hémolysine
Estreptolisine "O" et "S"
carbohydrates spécifiques Estreptoquinase
*protéines M, T, R Hyaluronidase
*S. O. R. Desoxyribonuclease ( A, B, C, D )
Peptidoglucane Adenine nicotinamide dinucléotidase
Membrane Protoplasmique * Exotoxine pyrogénique SPE A, B, C, F
Amylase
Capsule d'acide hyaluronique Esterasa
Acide lipotéichoïque.
Tableau 1 Tests pour déterminer les anticorps contre les streptocoques
Test d'antigène
EXTRACELLULAIRE
Estreptolisine O ASO
Estreptoquinase DEMANDER°
Hyaluronidase CENDRE°
Dnase B Anti-NADase
NADase Anti-NADase
Tous les mentions........................................... Estreptozotocine
CELULAIRES
Protéine M spécifique ........................................ Anticorps spécifique
Polysaccharide de groupe spécifique............................ Anti-A-CHO
ASK, Antiestreptokinase
°ASH, Anti-Hialuronidase.
Méthodes courantes pour la détermination des anticorps anti-streptolysines sont les
suivants :
a) Méthode au latex
b) Méthode immunoturbidimétrique.
c) Nefélométrie.
( En pratique, nous développerons la méthode de latex )
AVITEX – ASO PRÉPARATION DE LATEX
Introduction et Utilité
AVITEX – ASO est un test rapide d'agglutination pour la détection des anticorps
Antistreptolysins –O (ASO) dans le sérum humain.
Les anticorps ASO apparaissent dans le sérum des patients en réponse à l'infection.
pour les streptocoques hémolytiques des groupes A, C ou G. La Streptolysine O est hautement
antigénique, en conséquence, les patients infectés produisent des anticorps spécifiques
qui sont détectables par le réactif AVITEX-ASO.
PRINCIPES DE LA PREUVE
Les particules de latex du réactif AVITEX-ASO sont recouvertes de streptolysine.
O purifiée et stabilisée. Lorsque nous mélangeons la suspension de particules de latex et un
un sérum avec une concentration élevée d'ASO provoque une agglutination visible aux
deux minutes.
MATÉRIAUX FOURNIS
Réactif latex AVITEX - ASO
Sérum de contrôle positif
Contrôle négatif du sérum
Agitateurs
Porta réutilisable
Brochure d'instructions
MATERIAUX NÉCESSAIRES MAIS NON FOURNIS
Micropipettes
Solution saline (0,9 % NaCl)
PRÉCAUTIONS
Avant sa dispensation, agiter la suspension de particules de latex.
Le porta doit être parfaitement propre, car les résidus de détergent ou de sérum
ils peuvent altérer les résultats.
ATEMPERER LES RÉACTIFS ET LES ÉCHANTILLONS AVANT DE RÉALISER LA
PRÉTESTE.
Les réactifs AVITEX contiennent des matériaux d'origine humaine qui ont été
testés par des méthodes approuvées par la FDA pour confirmer leur négativité pour les
anticorps VIH et antigène de surface de l'Hépatite B, cependant, dans leur utilisation et
L'élimination doit être traitée comme potentiellement infectieuse.
Los reactivosAVITEX contienen 0.1 % de azida sódica como conservante, su ingesta
peut devenir toxique. L'azoture de sodium peut réagir avec les tuyaux en plomb et
cuivre, formant des sels explosifs. Lorsque vous le versez dans les conduits, utilisez beaucoup
quantité d'eau.
Los equiposAVITEX deben ser conservados a 2-8 °C. No congelar. No usar reactivos
expirés.
OBTENTION DE L'ÉCHANTILLON
Obtenir un échantillon de sang veineux, permettant la formation et la rétraction du
caillot.
Centrifuger à environ 4 500 tr/min (5 minutes) pour obtenir un sérum propre.
NOTA : Ne pas utiliser de sérums hémolysés, contaminés ou lipémiques. Le sérum peut
conserver à -20 °C jusqu'à un maximum de six semaines.
NE PAS DILUER LE SÉRUM POUR RÉALISER L'ESSAI QUALITATIF.
PROCÉDURE DE L'ESSAI
Permettre aux réactifs et aux échantillons d'atteindre la température ambiante.
1. Déposer une goutte de sérum dans le cercle de la porte.
2. Agiter la suspension de latex. En utilisant le compte-gouttes, déposer sur le cercle
une goutte de réactif.
3. Mélanger les deux gouttes avec l'agitateur, en couvrant avec le mélange toute la zone du
cercle.
4. De manière douce, faire tourner et équilibrer la porte pendant deux minutes, alors que
nous observons l'apparition de l'agglutination.
RÉSULTATS
Après deux minutes, examinez la porte sous une lumière intense. La présence de
l'agglutination évidente est interprétée comme un résultat positif. S'il n'y a pas de changement dans
la suspension de latex, le résultat sera négatif.
AVITEX-aso a une limite de détection de 200 UI/ml. Lorsque la concentration de
ASO dans le sérum est égal ou supérieur à 200 UI/ml. Un résultat positif est obtenu et
quand le résultat est inférieur, il est négatif.
PRÉTEST SEMIQUANTITATIF
Préparer une série de dilutions successives du sérum problème avec une solution saline ( ½,
¼, 1/8 et 1/16). Répéter dans chacune des dilutions la procédure indiquée
auparavant. La concentration d'ASO peut être calculée de manière approximative
en multipliant le facteur de dilution (2, 4, 8 ou 16) par la limite de détection. Par
exemple si la dernière dilution où l'agglutination est observée est la 1/8, le
La concentration approximative sera de 8x200 = 1600 UI/ml.
INTERPRÉTATION
Les résultats obtenus avec AVITEX- ASO peuvent être comparés favorablement à
les dérivés de la méthode hémolytique traditionnelle. Il est conseillé de répéter les titrations.
positives à intervalles hebdomadaires pour suivre l'évolution et contrôler l'efficacité du
traitement
Des réactions positives peuvent survenir chez les patients atteints d'arthrite rhumatoïde, de tonsillite
et d'autres infections dans lesquelles le niveau d'ASO est élevé.
ASL La méthode immunoturbidimétrique pour la détermination quantitative in vitro de
anti-Estreptolisina O dans le sérum et le plasma humains avec des analyseurs automatiques de
chimie clinique.
Principe du Test ou de l'Épreuve.
La streptolysine O fixée sur latex réagit avec l'anticorps de l'échantillon formant un
complexe antigène-anticorps mesuré par turbidimétrie après la
aglutinación.
Latex avec SL O (antigène) ASL O (anticorps)
Concentration.
Aglut. Antic. – Antig. Mesure turbidimétrique.
Obtention et préparation des échantillons :
Suero, recueilli dans un tube de prélèvement standard
Plasma : avec héparine et EDTA.
Stabilité de l'échantillon : 2 jours à 20-25 °C
6 mois à –20°C
Limitations et interférences :
Ictère : N'interfère pas.
Hémolyse : Sans interférence significative.
Lipémie : Sans interférence significative.
Facteurs rhumatoïdes : < 180 UI/ml n'interfèrent pas avec le test.
BIBLIOGRAPHIE