Extraction d'ADN de plantes : méthode et résultats
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Traduit par
ScribdTranslationsPRATIQUE 1 : EXTRACTION D'ADN
1. Objetivos
Objectif général
Pratiquer un processus physico-chimique pour l'extraction d'ADN d'une
échantillon végétal afin d'obtenir la précipitation de l'ADN en fonction de son
polarité.
Objectifs spécifiques
1. Extraire l'ADN d'un échantillon végétal par séparation
mécanique des cellules et dissolution des membranes pour la
libération du matériel génétique.
2.Vérifier l'action des sels (NaCl) et des solvants organiques (OH)
sur l'ADN pour rendre sa présence évidente dans l'échantillon.
2. Material Réactifs Équipements
2 Gasas 100 mL d'eau 1 Mixeur
1 seringue 5 mL 5 mL Éthanol 1 Balance
1 Cuillère 5g Chlorure de sodium
1 Cuillère 10 mL Détergent liquide ou
pâtissière solide
2 Verres 20 g Muestras:
tequileros Banane,Oignon
Jitomate
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3. Méthodologie
4. Résultats et discussion
Résultats avec d'autres équipes
En ce qui concerne les résultats obtenus par les autres équipes, nous pouvons dire que
En majeure partie, il existe une comparaison similaire car ils ont atteint les objectifs.
établis, c'est-à-dire que l'extraction d'ADN d'un échantillon végétal a été réalisée
à travers la séparation mécanique des cellules et la dissolution de la membrane,
puisqu'avec l'équipe "Les mitochondries", ils ont utilisé comme échantillon végétal
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une fraise où en suivant la même procédure que nous ont obtenu la
précipitation d'ADN dans l'interphase tout comme notre équipe juste comme cela
voir la figure 1.
Figure 1. Précipité d'ADN d'un échantillon de fraise.
*Remarque : Il n'a pas été possible de comparer les résultats obtenus avec le reste des autres.
équipements en raison de l'absence des informations nécessaires pour comparer les
résultats.
Résultats propres
Selon les objectifs fixés, il a été possible d'extraire le matériel génétique d'échantillons.
des légumes tels qu'une banane, un oignon et une tomate, comme montré dans le
tableau 1. De plus, l'action du chlorure de sodium a été vérifiée et comment elle a influencé
le solvant organique, qui dans ce cas était de l'éthanol, pour obtenir la précipitation
de l'ADN donc les résultats respectent tous les objectifs fixés
tant les généraux que les spécifiques, cependant il y avait des différences concernant
l'obtention de l'ADN, car étant des végétaux différents, on observait une légère
changement dans l'interface, c'est-à-dire que pour la banane, on observait un contenu plus élevé de
ADN concernant la tomate et l'oignon, ce dernier ayant la moindre visibilité de
matériel génétique tel qu'indiqué dans le tableau 1. En ce qui concerne la comparaison
il faut probablement que l'utilisation de détergent solide le rendait plus visible
matériel génétique, cela basé sur le fait que dans l'échantillon de banane, un détergent a été utilisé
solide et bien sûr était majoritairement visible par rapport à celle de tomate et
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oignon où du détergent liquide a été utilisé, cependant pour les 3 échantillons se
a obtenu la précipitation à l'interface, les résultats étant ainsi
attendus, puisque pour les 3 échantillons, le matériel génétique était visible.
Extraction d'ADN
Banane Jitomate Oignon
Tableau 1. Comparaison sur l'extraction de l'ADN de banane, tomate et
oignon respectivement.
Discussion des résultats
Comme analysé précédemment, les résultats obtenus ont été réussis grâce à
que l'ADN des échantillons végétaux sélectionnés a pu être extrait grâce à la
séparation mécanique des cellules et dissolution des membranes pour la
libération du matériel génétique. Selon les résultats obtenus par le
L'équipe "Les mitochondries" était semblable à celles que nous avons obtenues, atteignant
les objectifs souhaités.
C'est pourquoi il est important de souligner que la précipitation de l'ADN a été réalisée avec succès.
merci à l'ajout de chlorure de sodium qui remplit une fonction importante
dans cette pratique, car les mêmes sels augmentent le pouvoir ionique de la
solution, ainsi que l'ajout de l'éthanol qui a permis de diminuer la constante
dielektrische des wässrigen Lösungsmittels, denn ohne diese beiden Komponenten hätte es nicht gegeben
possible d'arriver aux résultats obtenus.
*Remarque : aucune discussion plus approfondie n'a pu avoir lieu car il n'y avait pas
avec les informations fournies par les autres équipes impliquées dans la
elaboración de esta práctica, por lo que se procedió a trabajar con la información
fourni.
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5. Conclusions
Il convient de noter que l'ADN sera constitué de deux brins de nucléotides.
lesquelles sont liées entre elles pour former une double hélice ; donc pendant la
l'élaboration de la pratique permet de corroborer la séparation que possède l'ADN avec
les différents fruits utilisés, cette extraction consiste à isoler et purifier les
molécules que chacun des fruits possède grâce à une précipitation en utilisant
alcool éthylique avec l'aide de cations qui va aider à neutraliser les charges
négatives que l'ADN possède ; en conclusion, en réalisant le processus d'extraction de
ADN, on observe comment les particules se séparent du filtrat en réalisant le
séparation de l'ADN du fruit, ; donc les objectifs fixés ont été atteints
durant l'élaboration de la pratique à travers une séparation mécanique des
cellules et la dissolution des membranes pour la libération du matériel génétique.
6. Questionnaire
1. Quelle est la fonction du chlorure de sodium dans le processus?
● La fonction du chlorure de sodium est que les sels augmentent le pouvoir ionique de
la solution, provoquant la précipitation de l'ADN (Velasco Mosquera, 2005).
2. Pourquoi l'ADN précipite-t-il lors de l'ajout d'alcool ?
L'ADN est un polymère de nucléotides, il est hydrophile et a une charge nette négative.
par la présence d'un groupe phosphate dans chaque monomère ; dans les alcools, le
L'ADN n'est pas soluble, c'est pourquoi en ajoutant l'alcool au filtrat, cela va
à diminuer la constante diélectrique du solvant aqueux provoquant une
précipitation (Ciochinni&Niemirowicz, 2018).
7. Bibliographie
Ciochinni, A., & Niemirowicz, G. (2018). Acides nucléiques. Université
Nationale de San
Martí[Link]://[Link]/archivos/docencia/licenciatura/
biotechnologie/2018/ChimieBiol/[Link]
Velasco Mosquera, R. (2005, 10 février). Marqueurs moléculaires et la
extracción de ADN. Facultad de Ciencias Agropecuarias. Recuperado 18 de
février 2022, de[Link]