UNIVERSITÉ AUTONOME DE CHIHUAHUA

FACULTÉ DES SCIENCES CHIMIQUES

CARNETS DE LABORATOIRE

MICROBIOLOGIE GÉNÉRALE

[Link] VIRAMONTES RAMOS

SAMANTHA GARCIA AGUIRRE 343543

GROUPE : 5A

INTRODUCTION :

La découverte des microorganismes a eu lieu il y a un peu plus de 300 ans.

avec les observations de Robert Hooke et Antony van Leeuwenhoek, étant
Leeuwenhoek qui a commencé la recherche sur la vie microscopique. Ses
observations sur ce qu'il a appelé « animálculos » comme il l'a écrit dans ses lettres envoyées
à la Royal Society de Londres, réalisées au moyen d'un microscope simple, se
conservent jusqu'à aujourd'hui comme documents historiques. (Santos., 2021)

Les microorganismes sont des êtres vivants très petits qui ne peuvent être vus qu'à
à travers un microscope, cependant participent à divers processus métaboliques,
écologiques et biotechnologiques devenant un facteur clé pour le
fonctionnement des systèmes biologiques et le maintien de la vie dans la
Terre. On reconnaît qu'il existe une grande diversité biologique, par exemple, de
70 000 espèces de champignons ont été décrites. De plus, ils possèdent une capacité rapide.
pour s'adapter aux changements environnementaux en raison de son histoire évolutive, puisque
les archées, un groupe de ces microorganismes, sont considérées comme les
premières formes de vie sur la planète.

Les microorganismes se regroupent généralement en deux catégories :

procaryotes et eucaryotes. Dans le premier se trouvent les archées et les bactéries,
tandis que dans la deuxième se trouvent des champignons, des algues et des protozoaires. Non
obstante, de manière conventionnelle les virus sont aussi considérés
microorganismes.

Certaines caractéristiques du premier groupe sont qu'elles sont des cellules simples différentes en
son organisation interne par rapport aux eucaryotes, sa taille est plus petite (1 -10 micromètres),
ils manquent de noyau et d'organites cellulaires, ils ont une molécule unique d'ADN
circulaire, membrane cellulaire, et paroi cellulaire de peptidoglycane. D'autre part, les
Les cellules eucaryotes sont plus complexes que les procaryotes, de taille supérieure.
(10-100 micromètres), ont un noyau avec membrane et nucléole, ADN linéaire qui
formulaire chromosomes, organites entourés de membranes, membrane cellulaire.

Étant donné sa grande diversité, il existe quelques classifications plus spécifiques de

accord à d'autres caractéristiques propres des micro-organismes comme le
reproduction, la respiration, la croissance, et sa nutrition. (Santos., 2021)

La microbiologie est l'étude des microorganismes et de leurs activités.

concerne sa forme, sa structure, sa physiologie, sa reproduction, son métabolisme et
identification. L'objectif est de comprendre les activités nuisibles et
bénéfiques des microorganismes.

La microbiologie se divise en différentes zones qui s'occupent d'étudier comment :

Bactériologie.-Étudie les bactéries, micro-organismes procaryotes unicellulaires

de structure relativement simple. Exemples : Staphylococcus aureus, Bacillus
subtilis, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, etc.
Mycologie.-Étudie les champignons, les microorganismes eucaryotes chimiohétérotrophes,
ils peuvent être unicellulaires ou multicellulaires. Exemples : Aspergillus fumigatus,
Histoplasma capsulatum, Candida albicans, etc.

Virologie.- Étudie les virus, agents submicroscopiques filtrables, parasites

unicellulaires obligés, qui possèdent un seul type d'acide nucléique entouré d'un
enveloppe protéique. Exemples : Virus de la rage, virus de la poliomyélite, virus de
rougeole.

La protozoologie.-se charge d'étudier les protozoaires, des micro-organismes

unicellulaires eucaryotes. Exemples : Giardia lamblia, Entamoeba histolytica,
Trypanosoma cruzi, etc.

En 1866, ERNST HAECKEL a classé le monde des organismes en trois groupes.

principales 0 reinos : animal, végétal et des protistes. Le troisième royaume des
Les protistes incluent les organismes qui se séparent des animaux et des
végétales par une différenciation morphologique très limitée ; la plupart sont
unicellulaires. En fonction de leur structure cellulaire, les protistes peuvent être divisés en deux
groupes parfaitement délimités : les protistes supérieurs se ressemblent en ce qui concerne
la constitution de ses cellules dans les animaux et les plantes ; ce sont des eucaryotes. A
ils appartiennent aux algues, aux champignons et aux protozoaires. Parmi les protistes
les bactéries et les cyanobactéries sont comptées parmi les inférieurs.

La dénomination micro-organismes fait référence aux dimensions réduites

des organismes cités, et par son signification correspond à la dénomination de
protistes. (Schlegel, 1997)

Les algues sont un groupe d'organismes très divers qui vivent dans des systèmes
aquatiques comme les rivières, les lacs et la mer. Ils peuvent être de très petite taille
(microscopiques) ou former de grandes colonies et donc être visibles à l'œil nu
(macroscopiques). Elles peuvent également être constituées d'une seule cellule
(unicellulaires), ou par de nombreuses cellules, ce qui leur permet de former des colonies ou
filaments.

Ils ont des fonctions très importantes dans les systèmes aquatiques car ils sont
producteurs primaires, cela signifie qu'ils peuvent produire de la matière organique et
oxygène à travers la photosynthèse. Les algues les plus abondantes que l'on trouve
dans ces systèmes, il peut s'agir de diatomées, d'algues vertes, de cyanobactéries et
dinoflagellés. (INSTITUT D'ÉCOLOGIE, A.C, 2013)

L'étude de la bactériologie vérifie les principes de la biologie, car les

les bactéries possèdent de nombreux caractères qui en font un sujet idéal pour la
étude des phénomènes biologiques. Ils peuvent être étudiés par culture
facilement dans des tubes ou des flacons, ce qui nécessite moins d'espace. Ils grandissent
rapidement et se reproduisent à un rythme extraordinaire, certaines espèces de
les bactéries produisent presque 100 générations en une période de 24 heures. En aucun
la diversité biologique est mieux appréciée dans les microorganismes, les
qui ne peuvent pas être observés à l'œil nu. En forme et en fonction, que ce soit dans le
propriété biochimique ou mécanisme génétique, l'analyse des microorganismes entraîne
aux limites de la compréhension des phénomènes biologiques. (Msc., 2019)

Les bactéries se trouvent partout, dans le sol, dans l'air, dans l'eau et
particulièrement dans tout type de matière organique morte. Ce sont des microorganismes
unicellulaires qui se reproduisent par division simple ou fission binaire. Ils jouent un rôle
un rôle important dans les processus métaboliques de la matière vivante,
décomposant les substrats organiques provenant des plantes et de
animaux, les minéralisant et les restituant à la nature pour leur nouveau
exploitation.

Pour identifier une espèce bactérienne, il est nécessaire de l'isoler dans une culture.
purement qu'il ne contienne que la progéniture d'une cellule de cette espèce. Pour cela, il est
nécessaire de "semer" une portion de l'échantillon sur la surface d'un milieu
sólido (medio de cultivo) para separar a las bacterias de modo tal que en el sitio en
que reste confinée chacune d'elles se développe en une colonie. La colonie
bactérienne contient théoriquement, un culture pure, et tant ses caractéristiques
morphologiques, comme les transformations qu'elles produisent sur le milieu de culture
employé, ils ont une valeur diagnostique. À partir d'une colonie isolée, nous pouvons
inoculer d'autres moyens et réaliser différentes expériences qui nous conduisent à la
identification de l'espèce.

Conformément à l'augmentation des connaissances sur les bactéries, les propriétés que
partagent et sur lesquelles ils divergent ont donné naissance à des systèmes de classification qui
en général, ils permettent de classer une nouvelle bactérie
identifiée au sein d'un groupe de microorganismes bien
caractérisés. (MSc., 2019). Les pratiques de
Le laboratoire de microbiologie générale facilite le
apprentissage des principales méthodes de diagnostic et
identification de agents étiologiques de les
maladies infectieuses humaines : milieux de culture,
tintures, tests immunologiques et de microscopie et
les relier aux connaissances acquises.

PRATIQUE 1
OBSERVACIÓN MICROSCÓPICA DE CÉLULAS EUCARIOTAS (ALGAS Y
PROTOZOAIRES

Photo Caractéristiques
Nombre:Phacus
Características:género de micro algas
protistes unicellulaires de forme
aplanée et pointée appartenant à
filoEuglénobiontesSuperficie
transparent, naviguer oscillant, tiré
pour son long fléau. Cellules de 23-26
µm de long et 20-21 µm de large.

Nombre:Micrasteria
Caractéristiques : algue verte
unicelular del orden Desmidiales. Estas
les algues se divisent en deux moitiés
symétriques unies par une petite
zone. Elles sont d'un intense vert.

Nombre:Alga filamentosa
Caractéristiques : appartiennent au groupe
des algues vertes. On observe que
ils peuvent développer des fils fins comme
environ 5 centimètres.
Ils ressemblent à des toiles d'araignée ou à des bouchons de

coton petits et verts.

Nombre:Oedogonium
Características:género de algas
verdes filaments de vie libre, de
microscopiques à plusieurs dizaines de
centimètres de longueur, de filaments
simples.

Nombre:Spirogyra
Características:género de algas
filaments verts, ainsi appelés en raison de la
disposition en forme de hélice des
chloroplastes.
LaSpirogyratiene aproximadamente
entre 10 et 100 μm de large et peut
atteindre plusieurs centimètres de longueur
 Rotifère

Nombre:Brachionus plicatilis
Caractéristiques : minuscules ou
microscopiques mesurent principalement 0,1
millimètre de longueur, de couleur
transparent et ce sont des nageurs.
Son mouvement est en forme de roue
giratoire.

PROTOZOAIRES

Photo Caractéristiques
Nombre:Amoeba nuclearia
Caractéristiques : Peut changer de
forme et se déplacer par
prolongements appelés pseudopodes
le faux pied (mouvement amiboïde).
Elle peut être très petite (et se faire observer
seulement avec un microscope) ou parvenir à mesurer
plus de 1 mm et observable à l'œil nu
vue.
Nombre:Amoeba
Caractéristiques : Peut changer de
forme et se déplacer par
prolongements appelés pseudopodes
pied faux (mouvement amiboïde).
Elle peut être très petite (et être observée
solo avec un microscope) ou parvenir à mesurer
plus de 1 mm et visible à l'œil nu
vue.
Nombre:Euglena
Caractéristiques : il est de couleur verte, en
l'eau se déplace avec l'aide de deux
flagelles, avec une taille qui varie
entre 30 - 45 µm de long et 8-10 µm de
l'ancho et sa forme peuvent être très
variée. Ce sont des protistes unicellulaires
flagellés.
 Nombre:Vorticella
Características:Es de color
transparent, sa taille est de 90 x 30
micras. Son corps est de forme circulaire
ou vésiculaire.

PRATIQUE 2

OBSERVACIÓN MICROSCOPICA DE CÉLULAS EUCARIOTAS (HONGOS)

Microculture

Caractéristiques Muestra 1 Échantillon 2 Montre 3 Mise en évidence 4

Formé par -Hifas - -Hifas
hifes hyalines septadas ou Hifas blanquecinas septées ou
septadas tabicadas. . tabicadas.
Morfologie coloniale Conidiospores Conidiospores - spores colorées Conidiospores
 Aspect hifas On a trouvé le Se vert ou bleuâtre. Se forma
genre observé On a trouvé le champignon
 Aspect
Aspergillus dans les alternaria avec le genre Aspergillus filamentoso en
espérances citron acide. hyphes septés dans la moisissure verte la boîte de pétri
 Observations et conidies. d'une orange. pour l'échantillon
que s'est pris
de la pomme
sin laver.

Morphologie
microscopique

Nom du Geotrichum
Aspergillus Ascomycètes Pénicillium
genre candidum
 Figure 1. Microculture des 4 échantillons différents

Levures

Caractéristiques Muestra 1 Échantillon 2 Montrer 3 Montre 4

Conidiospora Esporangiosp Esporangiospor Esporangiospor
-On observe oros comme. comme.
la levure -On observe ["Se observan de","Se observe de"]
du genre une couleur café une couleur jaune une couleur très
Morphologie colonialesaccharomyce claro transparent transparent et
 Aspect s, présentent présente un Levadura du peu visible au
 Odeur une couleur entre l'aspect de genre microscope, il est
 Observations orange et cellules Candida. une levure
jaune rouges u qui appartient à
claire. ovales. le fruit de la
ananas.

Morphologie
microscopique

Saccharomyces
Nom du Candida Candida Saccharomyces
cérévisiae.
genre albicans tropicalis. bayanus

Figures 2 et 3. Culture de fruits non lavés (pomme)

Champignon

Photo Características
Observation des lamelles du chapeau
de setas du champignon. Se
observe un morceau de l'hymen
formé de basidiospores qui sont
espèces sexuelles des champignons.

Coloration des ascospores

Photo Caractéristiques
Le champignon est une espèce de champignon
basidiomycète, sur l'image de la
à gauche, on peut observer la teinte
des basidio spores au microscope
d'une couleur marron.

PRATIQUE 3
 OBSERVATION MICROSCOPIQUE DES CELLULES PROCARYOTES (BACTÉRIES)

Tableau 1. Culture des bactéries orales

Photo Caractéristiques
Morphologie microscopique
Forma cellulaire : cocos
Sous la coloration de Gram, on observe
cocons Gram+ et Gram- car
S. aureus a cette caractéristique de
que se présentent les deux colorations
tant violet que rouge
Par conséquent, lors du test de KOH à 3 %
se montra un peu de viscosité dans la
échantillon.

Cepa Coloration de Réaction Teinture de Coloration de Observation

Gram KOH 3% Maneval Shaeffer-Fulton des flagelles
(capsule) (espoirs)

Escherichia
Hébras Si Non Si
Coli.

2 Sans fils - Non Non

 3 Hébras - - -

Bacillus cereus Sans fils - Si Si

5 Hébras - - -

Staphylocoque Montre un
s aureus un peu de Si Non Non
hebras

Réaccio
Réaction Morphologie Arrangement
Cepa n con Mobilité Capsule Endospores
avec Gram un portable cellulaire
KOH%
Staphylocoque G(+) Non Cocos Chaîne Immobile Non Non
staphylocoque doré hébra s

Escherichia G(-) Si hébra Bacilos Chaîne Mobile Si Non

coli s
Entérocoque G(+) Si hébra Cocos Chaîne Inmovile Non Non
us faecalis s
Bacille G(+) Non Bacilo de Cadena Mobile Non Si
céréus hébra bâton s
Bacillus G(+) Non Bacilos Chaîne Mobil Non Si
mégathérium hébreu s
Klebsiella G(-) Si hébra Bacilos Chaîne Inmovil Si Non
pneumonie rectos s
 e
Klebsiella G(-) Si hébra Bacilos Chaîne Inmovil Si Non
aliment courts s

PRATIQUE 4

MILIEUX DE CULTURE

La morphologie coloniale bactérienne est l'ensemble des caractéristiques descriptives qui

aident à déterminer et à compléter le "profil" d'une espèce bactérienne cultivable.
De nombreux types de bactéries dans un milieu gélosé peuvent être facilement
distinguibles por las características de sus colonias. La morfología de una colonia
la bactérie est très variable, tant du point de vue macroscopique que
microscopique. (Puig, 2020). Dans cette pratique, différents types de
agares disponibles dans le laboratoire de Microbiologie II, observant
détaillée la croissance bactérienne dans chacun d'eux et en identifiant son
morphologie.

Exsudat buccal

1.- Morphologie coloniale

Medio de Cultivo Descripción

Forma : ponctuelle / circulaire

Tamaño: pequeño
Borde:Entier
Sang de nopal Elevación:Plana
Consistencia:Cremosa
Luz transmitida:No
Color:Gris

Le milieu de culture agar sang ovine permet la croissance de la grande

la majorité des bactéries Gram-positives et Gram-négatives ainsi que des champignons
(moisissures et levures), à partir d'une
base rica y complétée,
offrant des conditions optimales de
développement
 Figure 1 et 2. Stries de culture de l'exsudat pharyngé sur agar sang et colonies
bactéries isolées avec présence d'un halo vert

Présence de halo

Halo vert : Alpha Halo Transparent : Beta

L'hémolyse alpha fait référence à une lyse partielle des érythrocytes qui produit une
coloration verte qui se observe autour des colonies (en raison de la libération
d'un produit de dégradation de l'hémoglobine appelé biliverdine); la
L'hémolyse bêta se réfère à un halo d'hémolyse complètement clair.

Croissance : streptocoques

Descripciones de crecimientos coloniales

Milieu de culture TSA Descripción

Dans ce type d'agar
incliné se introduit le
asa de nicromo jusqu'à le
fond et se zigzague dans
toute la surface, avec le
objectif des bactéries
les espèces croissent dans une
Inclinado (solido) plus grande surface à l'intérieur de
un tube à essai
se reproduisant
rapidement, ce type de
les cultures sont utilisées pour réduire
l'espace à l'heure de
incuber dans une boîte de Pétri
c'est beaucoup plus spacieux.
 Dans ce milieu de culture, il y a
introduisez une poignée de
nicromo recta avec la
montre jusqu'au fond de
tuyau et se retire
soigneusement, cela avec
Semisolid le but d'observer la
motilité des bactéries
Dans l'image, nous pouvons
noter comment c'est le
croissance de ces
bactéries et l'accumulation
des halos à la surface.
Dans ce milieu de culture, il
introduire la poignée en nicrhom
et l'échantillon est déposé dans
le liquide et se secoue
soigneusement, c'est
important car
favorisent la croissance de
Chaud
bactéries quand la
l'échantillon n'est pas suffisant,
peut donner lieu à
formation de gaz et à
précipités que
ultérieurement à son
l'incubation est analysée

Figure 3. Inclined agar, broth, and semi-solid incubated with E. coli growth
 PRATIQUE 5

MEDIOS DE CULTIVO: MEDICION DE CRECIMIENTO BACTERIANO

Milieux de culture travaillés et leur action dans le milieu

Figure 1. Agar sal manitol, MacConkey, Salmonella-Shigella, entérico de Hektoen et TSA

respectivement, avant de cultiver

Milieu de culture Photo Caractéristiques

Le substrat principal de ceci
l'agar est le lactose et le thiosulfate
de sodium, les sels biliaires sont
les responsables d'inhiber le
croissance, comme son nom l'indique
Agar Salmonella- désigne le fait d'isoler
Shigella principalement Salmonella et
Shigella, ses principaux
Les indicateurs de pH sont le citrate
ferreux, vert brillant et rouge
neutre. Il y a une production de
H2S
 Le substrat principal de l'agar
MacConkey est le lactose, à l'intérieur
de sus inhibiteurs de
la croissance est dans les sels
biliaires et le cristal violet, le
indicateur principal pour les changements
de pH est le rouge neutre, se
vous pouvez observer que quand se
Agar MacConkey
il a un pH acide se présente
une coloration rouge, tandis que
que si le pH est alcalin il
présentera une couleur ambre, ce
agar s'occupe principalement
d'isoler des bactéries Gram (-) et
bactéries fermentatrices de
lactose.
Le substrat principal de ceci
agar manitol, peptonas et
viande de bœuf, son inhibiteur de
la croissance est le NaCl, se
s'occupe d'inhiber les bactéries
Gram (-), le rouge phénol est le
indicateur pour les changements de pH
qu'ils se présentent, on observe
Agar Sal-Manitol
dans l'image une couleur jaune
intense lorsqu'il se trouve dans
un pH acide, tandis que dans un
un pH neutre est observé
coloration rouge/saumon
principalement conçu pour
isoler des staphylocoques, comme
[Link] et S. aureus
 Parmi ses principaux substrats
on trouve les peptonas, les
levures, lactose et saccharose
son inhibiteurs de croissance
les sels biliaires s'occupent
d'inhiber le développement de Gram
(+), ses indicateurs que
prédire un changement de pH sont
le tiosulfate de sodium, sels
Agar entérique de
férriques, bleu de bromothymol et la
Hektoen
fuschina acida, sa coloration en
Le pH acide sera d'une couleur
jaune, tandis qu'à un pH
l'alcalin deviendra une
coloration verte/Bleue, est
conçu pour isoler Salmonella
y Shigella, aunque aussi se
vous pouvez cultiver E. coli, cela se
présentera d'une couleur saumon
Cet agar est utilisé pour
la croissance et l'isolement de
bactéries aérobies et
anaérobies et pour favoriser le
développement de la plupart de
microorganismes exigeants. C'est
considéré comme le milieu nutritif
général, est basé sur une
Agar TSA source protéique avec un
petite quantité de
carbohydrates, NaCl and 5%
sang, a une contribution de
caséine et peptonas de soja
cela rend le milieu très
nutritif dans le cas de l'image
on peut observer le
croissance de E. coli
 Figure 2. Agar mannitol salé, MacConkey, Salmonella-Shigella, entérique d'Hektoen et TSA
ensemble avec des colonies bactériennes

PRATIQUE 6

MESURE DE LA CROISSANCE MICROBIENNE

Vaciado en plaque

Dilution Numéro de colonies Compte total (UFC/ML)

1:10 21 210
Dilution Numéro de colonies Compte de coliformes
(UFC/ML)
1:10 15 150

Technique du nombre le plus probable (NMP)

Medio utilizado Prueba (fases) 10 ml 1ml 0,1 ml

Chaud Presuntiva (tubes +) 3 3 3
lactosé 17-40 bact
Caldo verde Confirmativa (tubes 0 0 0
Brillant +)
Agar McK Identification - - -
(UFC/ml)
Observations selon l'échantillon utilisé : nos cultures en tube étaient
réalisés avec un échantillon d'eau de horchata commerciale, comme nous pouvons
observer dans les résultats que vos colonies de bactéries ne sont pas aussi visibles que dans
le cas des échantillons d'eau usée.

EFFET DES FACTEURS ENVIRONNEMENTAUX

Oxygène

Figure 1. Croissance microbienne dans des échantillons de Pseudomonas, S. aureus et

Enterococcus faecalisrespectivement

Dans les tubes, on peut observer un halo vert à la surface, cela se produit par
la présence d'oxygène dans chaque tube à essai avec sa bactérie caractéristique.

Température
 Figure 2. Croissance microbienne à différentes températures (60°, 36° et 3°)

D'autre part, nous pouvons observer sur l'image que la température est effectivement un facteur.
ce qui affecte la croissance de la culture de bactéries, à 36 degrés nous voyons que c'est
une température optimale pour que les bactéries croissent plus rapidement, tandis que
qu'à des températures plus élevées ou plus basses, on n'observe pas de croissance
approprié des colonies.

RÉSULTATS EFFET DES FACTEURS AMBIENTAUX SUR LA CROISSANCE

MICROBIANO

Effet des substances chimiques

R= resistente S= sensible (presenta halo de inhibición)

Micro-organisme Cristal violet D'autres substances chimiques

o 1:10 1:100 1:10000 Fabuloso Pinol Éclair
Pseudomonas R R R S R R
S. aureus S S R S R S
E. coli - - - - - -
Shigella S R R S S R
Salmonelle R R R S R S
S. epidermidis S S S S R S
 Figure 3. Effet des substances chimiques commerciales (fabuloso, flash et pinol) et cristal
violet sur les cultures de bactéries

Dans l'image, on peut observer l'inhibition de la croissance microbienne avec les

différents désinfectants que nous utilisons, on peut voir que dans le cas du produit
flash est celui qui aide le plus à les inhiber, tandis que les autres cas comme le
fabuloso remplit sa fonction mais pas au niveau de celui mentionné précédemment et
Avec le pinol, nous constatons que sa capacité à inhiber les bactéries est presque nulle.

PRATIQUE 7

ESSAIS BIOCHIMIQUES

Tuyau Caractéristiques

EVIDENCE INTÉGRATRICE : TESTS BIOCHIMIQUES

Problème analysé : 5

RESULTADOS

Morphologie coloniale :

 Forma: Redonda circular

  Tamaño: Pequeño
 Bord : Arrondi
 Élévation : Plana
 Consistance : Crémeuse
 Luz transmitida: Si
 Luz reflejada: Si
 Color: Naranja/marrón

Morphologie microscopique :

 Tache de Gram : Négatif (-)

 Forma et disposition cellulaire : Bacille isolé

Observations :

Les colonies présentaient un halo transparent autour de leurs colonies

Activité métabolique

Catalasa
Oxydase
Ureasa
Utilisation de glucose
Production de gaz
Utilisation du lactose
Utilisation du saccharose
Production de H2S
Prueba de rouge de métile
Test de Vogues Proskauer
Utilisation du citrate
Utilisation de malonate
Déscarboxylation de la lysine
Déamination de la lysine
Déaminisation de la phénylalanine
Décarboxylation de l'ornithine
Mobilité
Producción de indol
Réduction des nitrates en nitrites
Figure 1. Tableau d'annexe 2 "réactions"
Dénitrification
biochimiques

Genre bactérien trouvé : Proteus mirabilis

Observations :
Bien que l'annexe 2 du « manuel cerise » montre que Proteus est
l'oxydase négative, l'échantillon avec le réactif a présenté un changement de coloration à
violet intense (+) comme nous pouvons l'observer dans la figure 3 respectivement

Le genre a été trouvé par le biais du tableau montré précédemment dans l'annexe.
2, les caractéristiques observées ont été trouvées et le protéus est celui qui correspond le plus.
selon ces caractéristiques biochimiques.

Figures 2 et 3. Tests de catalase et d'oxydase respectivement dans l'échantillon problème 5

DISCUSSION DE RÉSULTATS

Pratique 1 : Observation microscopique des cellules eucaryotes (algues et

protozoaires
Practica 2:Observación microscópica de células eucariotas (Hongos)

Practica 3:Observación microscópica de células procariotas (bacterias)

Pratique 4 : milieux de culture

Pratique 5 : milieux de culture : croissance bactérienne

Pratique 6 : mesure de la croissance microbienne

Pratique 7 : tests biochimiques

CONCLUSIONS POINTUES :

Pratique 1 : Observation microscopique des cellules eucaryotes (algues et

protozoaires)

Les microorganismes protistes sont les protozoaires et les algues.

Les protistes habitent et se développent principalement dans des habitats aquatiques
riches en matière organique.
Les protistes sont des eucaryotes unicellulaires.
Les algues sont des organismes photosynthétiques, c'est-à-dire fondamentaux pour
producir oxígeno.
Il existe 6 groupes principaux d'algues : chlorophytes, chrysophytes, phéophytes,
rodofites, eugléniens et pyrrophytes
Les algues chlorophytes contiennent des chloroplastes avec de la chlorophylle (algues vertes).
Les protozoaires sont des hétérotrophes unicellulaires.
Les protozoaires ont une certaine forme de locomotion, mesurant de 1 à 10.
micromètres.
Les protozoaires manquent de paroi cellulaire
Les protozoaires peuvent être ciliés, flagellés ou à pseudopodes

Practica 2:Observación microscópica de células eucariotas (Hongos)

Les phylums de champignons sont les chytridiomycètes, les zygomycètes, les ascomycètes,
basidiomycètes et
gloméromycètes.
L'échantillon de pomme non lavée contenait un champignon filamenteux.
Le champignon Geotrichum candidum présente des hyphes septés et fragmentés.
Les champignons sont des microorganismes eucaryotes.
Les cellules des champignons possèdent une paroi cellulaire de chitine.
Alternaria est un champignon filamenteux du phylum des ascomycètes.
Les basidiospores sont des spores sexuelles des champignons.
 Le champignon est un basidiomycète ce qui veut dire qu'il contient
basidiospores

Practica 3:Observación microscópica de células procariotas (bacterias)

Les bactéries varient en taille, forme et agencement cellulaire.

La coloration de Gram est un test de coloration qui détecte les bactéries Gram
positives et négatives
Staphylococcus aureus et Bacillus cereus sont des bactéries Gram +
Salmonella typhi et E. coli sont des bactéries Gram -
Les bactéries Gram positives retiennent l'iode lugol en donnant une coloration bleue.
violette.
Les bactéries Gram négatives décolorent l'iode de Lugol et retiennent le
safranina donnant une coloration rouge/rose
En effectuant le test KOH, les Gram négatives aboutissent à une suspension.
la viscose et les Gram positifs ne montrent aucun changement.
La technique de coloration des capsules utilise un colorant acide tel que le rouge
le Congo et un colorant basique teignent la cellule.
La coloration des spores bactériennes, également appelée coloration Schaeffer-
Fulton est largement utilisé pour l'identification des bactéries Bacillus.
y Clostridium.

Pratique 4 : milieux de culture

Dans les laboratoires de microbiologie, il existe différents milieux de culture qui

ils nous permettent de cultiver des échantillons d'un type de bactérie
Les bactéries peuvent être identifiées en fonction de leur développement dans des tubes de
essai
Il existe trois types de milieux de base : milieu solide, semi-solide ou liquide.
Composition de milieu solide incliné : de 1 à 5 % d'agar, milieu semi-solide
0,3-0,75% agar et bouillon 0% agar
On a identifié et compris l'importance de l'utilité de chaque moyen et quand
il est plus approprié de l'utiliser

Pratique 5 : milieux de culture : croissance bactérienne

L'agar-agar est une gélatine qui provient d'une algue marine du même
nombre, et a le pouvoir d'épaissir les liquides sous forme de gélatine
Les milieux de culture (agar) sont identifiés par leurs caractéristiques et
sustrats principaux
Les bactéries sont identifiées en fonction de leur croissance et de leurs caractéristiques.
macroscopiques comme la couleur
 Les milieux de culture peuvent être sélectifs pour un type de bactérie
Les milieux de culture ont des indicateurs de pH et des inhibiteurs de bactéries dans
sa composition

Practica 6: medición del crecimiento microbiano

Des facteurs tels que l'oxygène, la température et le pH affectent ou favorisent le

croissance microbienne
À 36 °C, les bactéries se développent plus rapidement car c'est une température
optima
Les désinfectants commerciaux sont capables d'inhiber la croissance de
colonies bactériennes
Certaines sortes de bactéries sont résistantes et devant des agents inhibiteurs, mais
aujourd'hui
Le cristal violet est un colorant antiseptique utilisé dans la coloration de Gram,
et le plus important agent identifiant les bactéries.
La technique de vidage en plaque est une technique qui est utilisée pour le
recount des batteries présentes dans un échantillon

Pratique 7 : tests biochimiques

Le test TSI montrera une coloration jaune dans le pic s'il est positif
en lactose et saccharose
La prueba de Kliger mostrara una coloración en el pico amarilla si es
positif en lactose et glucose
Une coloration rouge sur le bec dans le TSI indiquera que le lactose et le saccharose sont négatifs
Lorsque du gaz est présent dans un milieu, un fond fissuré ou
présence de bulles
S'il n'y a pas de changements de coloration dans les milieux, cela signifie que non
présente une croissance ou est très lent
Si dans un milieu la présence de H2S est détectée, elle se manifestera sous forme de précipité ou
coloration noire
Pour la détermination de la lysine, on utilise le milieu LIA : pic rouge + et pic
purpura
Pour la détermination de la phénylalanine, on utilise le milieu FeA et on ajoute
chlorure ferrique : vert + et sans changement –
Pour le test de citrate, on utilise le milieu citrate : coloration bleu intense +
sans changement
Au milieu de MIO et SIM, une piqûre profonde est faite et un réactif est utilisé.
de kovac's (indol)
Dans le milieu RM, on utilise du rouge méthyle, milieu bouillon
 Le milieu VP se dissout avec du Naftol et du KOH à 40 % pour déterminer l'acétoïne.
Pour déterminer l'uréase, on utilise le bouillon d'urée : coloration rose + et
jaune ou orange est –
En el medio de nitratos se añaden 2 reactivos (Ac. Sulfanilico y naftilamina)
pour réduire en nitrites avec un fond rouge
Dans le milieu de malonate pour l'identifier, il donnera une coloration bleu roi
si c'est + et sans changement ou légèrement jaune -

BIBLIOGRAFIA:

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