Sommaire Pages
1. Introduction……………………………………………………. 2
2. But…………………………………………………………………… 2
3. Principe…………………………………………………………. 2
4. Mode opératoire……………………………………………. 2 et 3
5. Matériels +rôle ………………………………………………… 3
6. Résultats et interprétation………………………………. 3
7. Conclusion/commentaire………………………………… 4
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1. Introduction
Les protides désignent l’ensemble des acides aminés naturels et de leurs
combinaisons chimiques qui sont les peptides et les protéines, caractérisés
par la présence d’azote en proportion importante (15%) et un peu de
soufre. Exemple : la proline, valine, glycine, serine…etc. Ils sont
indispensables et permettent la croissance, la nutrition, et reproduction.
Les protides sont classés en trois familles tels que les acides aminés, les
peptides, et les protéines.
2. But
Le but de cette manipulation est de caractériser et doser les protides
3. Principe
La réaction avec ninhydrine c’est une réaction en général des acides
aminés utilisé couramment pour caractériser et doser les acides aminés.
Leur spécifié n’est pas absolue puisque certains composés possèdent une
fonction acide primaire réagissent également et d’autre part la proline est
colorée en jaune.
La réaction de Biuret cette réaction caractérise la liaison peptidique elle
s’applique donc à l’analyse qualificative des protéines et des peptides mais
à conditions que ces peptides contiennent au moins cinq (5) acides
aminés.
La thermocoagulation cette réaction permet la dénaturation de la plupart
des protéines par chauffage à ébullition de leur solution.
4. Mode opératoire
On prélève 2ml (proline, témoin) et on a ajouté quelques gouttes de la
solution fraîche de la ninhydrine à 0.5%. Porté au bain-marie bouillant
pendant 1mn puis on observe, on observe une coloration jaune dans
l’échantillon contenant de proline, mais pour le témoin on a rien pour
coloration
Avec la réaction de Biuret : ont prélevé 2ml (eau distillée, proline, niébé,
blanc d’œuf) et on ajoute 4ml de lessive de soude et quelque goutte de la
solution de CuSO4 puis on observe l’apparition de coloration rose violet
sur les échantillons de niébé et de blanc d’œuf.
Thermocoagulation : on prélève 2ml de blanc d’œuf+ 1ml de NaOH, porté
à ébullition. Acidifier la solution chaude avec l’acide acétique dilué au
[Link] on observe l’apparition d’un précipitée de coagulation. Ensuite on a
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prélevé 2ml de blanc d’œuf, on ajoute de l’acide chlorhydrique
concentre on observe une coagulation rapide avec précipitation mais
moins dense que le premier échantillon
5. Matériels et leurs rôles
- Bain-marie bouillant : permet de chauffer l’échantillon
- Pipette : elle permet de prélever en quantité mesurée un
liquide
- Tube à essai : il contient l’échantillon à analyser
- Support : sur lequel sont déposés les tubes à essai qui
contiennent les échantillons
- Compte-goutte : un petit tube qui permet de verser goutte à
goutte le liquide.
6. Résultats et interprétation
Echantillons
Réactions
Eau distillée Proline Niébé Blanc d’œuf
Ninhydrine
- + - -
Biuret
- - + +
thermocoagulation Coagulation
plus
concentrée
en chauffant
La réaction avec la ninhydrine dans le tube contenant les échantillons
(proline et témoin) on observe que le résultat est positif avec pour
coloration jaune de la proline. Donc cette dernière caractérise les protides.
La réaction de Biuret seul les échantillons contenant du niébé et blanc
d’œuf ont réagis en donnant le résultat positif.
Et dans toutes ces réactions le témoin n’a pas réagi ce qui implique qu’il
n’y a pas de protides dans ce témoin.
En fin pour la thermocoagulation les tests contenant du blanc d’œuf on a
observé un précipité de coagulation concentrée, par l’utilisation de HCl
concentré sans chauffage on observe une coagulation mais moins
concentrée que celle du premier échantillon.
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7. Commentaire
En cours de la manipulation nous avons constaté que le passage un à un
permet aux étudiants de bien comprendre la manipulation afin de
compléter leur connaissance théorique.
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