INTRODUCTION
Le stage académique effectué au laboratoire de l’hôpital CMOK s’inscrit dans le
cadre de la formation professionnelle visant en renforcer les compétences pratiques
indispensables au métier de technicien de laboratoire biomédical.
Ce stage a constitué une occasion privilégiée de confronter les connaissances
théoriques acquise durant le cursus aux réalité du terrain, dans un
environnement ou la qualité des analyses et la rigueur scientifique sont
essentielles à la prise en cherche des patients.
Au sein du laboratoire, j’ai pu observer et participer aux différentes activités
liées aux diagnostics biologiques, notamment la réception et traitement des
enchantions, la réalisation des examems de routines , lutisation des
equipemments analytique, ainsi que lapplication de regrets de securite,
dhygiene et dassurence qualité. Lhopital CMOK reconnu pour ladversité de ses
services et la competence de son personnel, offre un cadre idéal pour
lapprendisage et l’acquisition dune experiance pratique enrichissante.
C’est ainsi que dans les lignes qui suivent nous détaillerons ces différentes
techniques que nous avions réalisé tout au long de notre stage
SUBDIVISION DU TRAVAIL
Notre travail est subdivisé en deux chapitres dont La présentation du lieu et
les activités réalisées.
CHAP I. PRESENTATION DU LIEU D’INVESTIGATION
I.I. HISTORIQUE DE L’HOPITAL
Le docteur Bernard SOMONA TSHIKOMO est initiateur et le promoteur de la
clinique moderne médicaux ophtalmologique de Kolwezi aujourd'hui.
En effet, après avoir terriné ses études en médecin général, il a poursuivis une spécialisation en ophtalmologie
à Lubumbashi.
Arriver à Kolwezi il va procéder à des campagne de consultation gratuite en ophtalmologie, accompagner de
certains soins oculaires à Kolwezi, Dilolo,Sandos, Musumba etc. En 2015, il va murir de, après une longue
réflexion d'ouvrir un centre ophtalmologique de Kolwezi (COK), ou les malades trouveraient un siège précis
pour leur soins.
Peu à peu, avec la sollicitation et les besoins de la population, il va décider d'aouter d'autre services médicaux
pour répondre aux attentes de la population, ceci va lui permettre de changer l'appellation de la structure en : a
centre medico -ophtalmologie de Kolwezi »
(СМОК).
A l'aider du seigneur et sa bravoure, il va moderniser la structure en construisant un bâtiment VIP avec
des services des spécialités, notamment la chorégie, ophtalmologie, la dentisterie, la kinésithérapie, la
radiologie, etc. Aujourd’hui la structure change de nom en clinique moderne medico- ophtalmologique de
Kolwezi(CMOK)
II. LOCALISATION
La clinique moderne medico- ophtalmologique est situé au N°62 de l'avenue Banza
Mona, au quartier mutoshi, non loin du rond-point de l'indépendance, dans la commune de
Manika, ville de Kolwezi, province de Lualaba en RDC ;
II. MISSION ET OBJECTIFS
Jadis le centre ophtalmologique de Kolwezi avait comme objectif et mission d'aider les patients qui
avaient des problèmes de la vision à recouvrer la vue, jusqu'alors leurs devises était : « vivre pour les autres »
La structure recevait les patients de différentes catégories, ceux dont les moyens sont limités étant traité
gratuitement sous le nom de « prodeo Dr Bénard », ce qui signifie (il ne peut pas payer). Aujourd'hui, le centre
administre de soins médicaux spécialisés et diversifiés.
IV. STATUT JURIDIQUE
La clinique moderne medico- ophtalmologique est une structure sans but lucratif, ouvrant au bénéfice
des malades, malgré que, pour bien travailler il faut des moyens : mais cela ne la caractérise pas du tout.
V. PERSPECTIVE D'AVENIR
La clinque medico- ophtalmologique de Kolwezi est une structure qui a une vision de loin et u
avenir encourageant, Aussitôt ses portes ouvertes en 2015, elle va mettre en œuvre un autre bâtiment moderne
à Fugurume, nommée « hopital moderne de fugurume (CMOK) » dans le but de répondre aux besoins de la
population de cette contrée, équipé avec des matériels adéquats et moderne et de différentes spécialités.
Le manager Dr bénard SOMONA TSHIKOMO, un homme ambitieux et courageux, ce propose l'implantation
de ladite structure hospitaliers dans toute les villes et tous les territoires de la province du Lualaba, notèrent
KASAJI, DILOLO, SANNDOA ET *MUSUMBA, pour répondre aux besoins et la population de cette
province.
ORGANIGRAMME DE L’HOPITAL
MANAGER
MEDECIN DIRECTEUR
ADMINISTRATION INFIRMIER TITULAIRE CHEF DE SERVICE DE CHEF DE SERVICE CHEF DE SERVICE
GESTIONNAIRE BASE SPECIALITE DIAGNOSTIC
INFIRMIER
MED INT PED GYNE CHIR LABO IMAGERIE
CHIR CHIR CHIR
PHARM COMPT FIN RECEP
RADIOLOGIE ECHOGRA
ENTRETIEN SECURITE
II. GENERALITE
II.1. SIGLEETABRÉVIATIONS
√ALAT: Alanine aminotransférase
√ASAT: Aspartate aminotransférase
√ASLO: antistreptolysine O
√BD: bilirubine direct
√BT: Bilirubine total
√GB: globule blanc
√GR: globule rouge
√GS: groupe sanguin Hb :
hémoglobine √LCR: liquide
Céphalorachidien.
√RAA: rhumatisme articulaires aiguë
√VDRL:Venereal Disease Research Laboratory
√VS : vitesse de sédimentation
II.2. DEFINITION ET QUELQUES NOTIONS DE BASE SUR LES TECHNIQUES DE
LABORATOIRE
Un laboratoire médical est un lieu où sont prélevés et analysés divers
fluides biologiques d’origine humaine sous la responsabilité des agents
médicaux, qui en interprètent les résultats dans le but d’aider au
diagnostic médical.
Différentes étapes interviennent dans L’analyse de ces fluides on a :
[Link] phase pré analytique : Elle
comprend o L’état du patient (à jeun
ou non), o La phase de prélèvement,
o Celle de l’étiquetage des
échantillons prélevés, o De
l’enregistrement des demandes
d’analyses, o De la centrifugation, o
De l’aliquotage des prélèvements.
Pendant cette étape un certain nombre d’opérations peut fausser les résultats
comme par exemple l’utilisation d’un tube avec un mauvais anticoagulant ou
la présence d’une hémolyse.
On a eu à effectuer différents types de prélèvement tel que :
•Prélèvements de sang veineux (au pli du coude, sur la main, à la malléole…)
et artériel.
•Prélèvement de selles et d’urine
•Prélèvement de crachat
Et d’autres prélèvements ont été amenés au laboratoire après avoir été
effectué dans les salles d’hospitalisation par les médecins eux-mêmes
•Prélèvements cutanéomuqueux (vaginaux, urétraux, de la cavité buccale…)
•Prélèvements de liquides d’épanchement (pleural, péritonéal, etc…) ou de
ponction (liquide céphalo-rachidien)
[Link] phase analytique : la phase analytique utilise de plus en plus souvent des
automates très sophistiqués qui permettent d’améliorer la rapidité du
rendu de résultats et la reproductibilité des résultats.
On peut voir là l’utilisation du spectrophotomètre, ainsi que certains réactifs.
[Link] post-analytique : C’est la phase de validation technique, de validation
biologique et d’interprétation du résultat par le biologiste médical et de
rendu de résultats au près des cliniciens et des patients.
Durant notre stage, nous avons eu à fréquenté différents services, tel que :
-Bactériologie et Parasitologie
-Biochimie
-Hématologie
-Sérologie
[Link] REALISEES EN STAGE
III.1. SERVICES D’HEMATOLOGIE
Ici on parle plus l’hémogramme, qui est un examen hématologique complet,
où on détermine de manière quantitative et qualitative des éléments figurés
du sang.
Pour ce service, la quantité de sang prélevé est mise dans un flacon citraté et
avec ce dernier on peut effectuer plusieurs examens.
On a eu notamment à faire :
-LaVS
-La numération
des GB -Le
groupagesanguin
-Le dosage l’Hb
[Link]
La vs détermine le taux de sédimentation ou chute libre des globules
rouges (hématies) dans un échantillon de sang laissé dans un tube
vertical, au bout d’une heure. Cette vitesse dépend de la concentration
des protéines dans le sang
Matériels utilisés:
-Support à VS
-Tube de wertgl
-Chronomètre
-Poire
Mode opératoire
-À l'aide d'une poire, on aspire le sang dans le tube
-On le place au support à VS
-Pendant1h ensuite on passe à la lecture.
III.1.2. DOSAGE DE L’HEMOGLOBINE
Matériels utilisés:
-Pipettes spécial avec divers embouts
-Réactifs : solution de drabkin Mode opératoire :
-On prend 5cc de drabkin
-20µL de l’échantillon de sang
-Puis on mélange avec un mélangeur
-Puis on effectue la lecture au spectrophotomètre, d’abord le blanc ensuite les
échantillons.
III.1.3. LE GROUPAGE SANGUIN
Matériels utilisés:
-Lames
-Réactifs antigénique (anti A, anti B et anti D)Mode opératoire :
-On effectue un prélèvement de quelques gouttes de sang sur la lame
-Ensuite on y ajouté une goutte du réactif
-Puis on fait des mouvements rotatoires avec la lame et on attend qu'il ait
agglutination, on déduira donc que l'on a le groupe A+, A-, B+, B-, AB+,
AB-, O+, O-.
III.1.4. LETESTD'HEMMEL
Il a pour objectif de déterminer la forme des GR
Matériels utilisés:
-Lame et lamelle
-Microscope
Mode opératoire:
-On effectue un prélèvement d'une goutte de l’échantillon, qu’on étale sur la
lame et qu'on recouvre d'une lamelle ainsi pendant 24h
-Évitant de placer l’échantillon à l'air libre, car risque de déformer les
Hématies et de fausser les résultats.
-Ensuite on passe à la lecture au microscope, car la forme normale des
hématies est ovale, on peut assister à des formes de demi-lune,
témoignant d'une déformation.
On peut également confirmer cet examen par électrophorèse.
[Link] NUMERATION DES GLOBULES BLANCS
Matériels utilisés:
Micropipettes
√Cellules de Newbaers (elle nous permet de compter les GB)
√Microscope
Ãprouvette
√Réactifs : solution de Turk : permet la lyse des GR et laisse les GB Mode
opératoire :
-On prélève 190µL de solution de Turk (toujours essuyer l'embout pour éviter
le surnageant)
-On le place dans un tube vide
-Puis on le fait dans 3 autres tubes
-On prélève10µLde l’échantillon qu'on mélange avec la solution de turk
-On laisse reposer 5’ avant de faire la lecture
On recouvre la chambre de la solution mélangée, on utilise une lamelle, et on
procède à la lecture au microscope. On a également eu à faire :
III.2. SERVICES DE BACTERIOLOGIE ET PARASITOLOGIE
III.2.1. EXAMEINS BACTERIOLOGIQUE
1) Examen des urines
•Mode opératoire
Les urines doivent être examinées dès que possible après émission car les
éléments et les cellules qui s'y trouvent peuvent se détruire rapidement.
•Centrifugation : -Les urines doivent être bien mélangées, de manière à
examiner un échantillon homogène.
-Placer 15ml d'urine dans un tube puis centrifuger pendant 5’à
2000 tours /min
-On verse doucement les urines pour rester avec les sédiments
-Puis on mélange le culot restant et on le dépose sur une lame, une goutte
entre la lame et la lamelle.
-On examine au microscope en lumière réduite et au grossissement moyen.
Vu au microscope, lors d’une infection urinaire, on remarque des éléments
tels que :
●Des globules blancs (++)
●Des cellules épithéliales (++)
Puis on procède à la coloration de Gram pour déterminer si le germe est
gram+ ou gram–
1. COLORATION DE GRAM
Si on remarque que pour un échantillon d’urine, on a des nombreux globules
blancs, on effectue cette coloration.
[Link]
1erréactif : violet de Gentiane pendant1’
2èmeréactif : Lugol pendant1’
3èmeréactif : Alcool acétonependant1’
4èmeréactif : FushineSafranine pendant5-10’’
Lampe à alcool, lame,
pince en bois
[Link]
-On fixe les échantillons à la flamme (une seule fois)
-On recouvre les lames de violet de gentiane (1’)
-Puis on passe au lugol
-Ensuite l'alcool acétone
-Enfin au safranine
Tout en lavant après chaque colorant
Les Gram+ prennent la coloration du1erréactif (violet) et les Gram- celle du
dernier réactif.
Ensuite on passe à la microscopie. Pour notre cas ; on a eu à observer des
bacilles Gram+ de couleur violet en forme de bâtonnet et Des coques Gram-
de couleur rose de forme ovale.
2) Examen de
crachats
Matériels
utilisés :
-Lampe à alcool
-Lame
-Pince en bois
-Boite à scori (bain de sable)
Modeopératoire
a. Étalement
-Utilisé des lames neuves, on utilise deux lames pour chaque échantillon
-Dégraisser les lames à la flamme (en utilisant une pince en bois)
-Prendre une anse de platine que l'on stérilise à la flamme jusqu’à ce qu’elle
soit rouge.
-Lorsqu’on étale on veille à 2cm de long et1cm de large-L’étalement
s’effectue toujours à côté de la flamme.
-Puis après avoir récupérer l’échantillon pour passer à un autre, on plonge
l'anse de platine dans le bain de sable, puis on fait passer à la flamme et
on attend avant que l’utiliser encore.
2. COLORATION DE ZIEHL NEELS EN A CHAUD
-Placer les lames numérotées dont les frottis sont bien fixés sur 2 baguettes
de verre audessus de l’évier
-Couvrir complètement les lames de fushinephéniquée à 1%
-Chauffer très doucement jusqu’à l’émission de vapeur, éviter le
dessèchement du colorant, ajouter le colorant si nécessaire
-Mettre le chronomètre en marche pour 10’
-Chauffer encore à la 3èmeet à la 6èmeminutes à l’aide d'un tampon brûleur
chaque lame jusqu’à l’émission de vapeur.
-Rejeter le colorant et laver le frottis à l'aide d'un fil et d’eau ordinaire
-Recouvrir les lames de solution d’alcool acide et laisser agir 3’, si le frottis
reste trop rouge, répéter cette étape une fois au maximum (1’)
-Rincer à l'eau ordinaire
-Recouvrir de solution de bleu de Méthylène pendant1’
-Rincer et laisser à l'air libre
Les lames ainsi colorés et séchés sont prêtes pour la lecture à la
microscopie.
III.2.1. EXAMEN PARASITOLOGIE
3) Examen microscopique des selles
C’est un examen à frais ou direct, il a pour but recherché les
parasites dans les selles
Matériels utilisés
-Baguettes en verre Lames
Sérum physiologique
Modeopératoire
-Un petit grain de matière fécale est prélevé avec une baguette en verre et
est placé sur une lame avec une goutte de sérum physiologique,on
mélange puis on recouvre d'une lamelle
-Après avoir mélangé, on examine entre lame et lamelle, au faible
grossissement à lumière réduite.
Pour notre cas on a eu à noter la présence :
-Des GR ou GB
-Mucus
-Œufs ou kystes de parasites
4) Goutte épaisse
Cet examen a pour but recherché le plasmodium dans
notre milieu .Ici on ne détermine plus les croix du
paludisme mais plus tôt si le test est positif ou négatif.
Matériels utilisés
-Microscope
-Lame porte objet
-Lancette
-Boite coloration
-Réactifs: solution de GIEMSA
Mode opératoire
-Placer une goutte de sang sur une lame port objet
-Onde fibrine immédiatement avec un mouvement en spirale à l'aide du coin
de la lame porte objet
-On laisse sécher à l'air libre
-Ensuite on fait la coloration avec la solution de Giemsa à10% sans fixer le
frottis, pendant15-30minutes
-On rince à l’eau
-On sèche et on examine au microscope
III.3. SERVICE DE BIOCHIMIE
En biochimie, on utilise plus le spectrophotomètre avec évaluer de
l’intensité de la coloration provoqué par les réactions biochimiques
Les principaux matériels utilisés sont :
-La micropipette
-Tubes à essai
-Les réactifs selon les
examens La
centrifugeuse
Les différents dosages que nous avons eu à effectuer ; on a la glycémie,
la cholestérolémie, urémie et la créatinémie, le taux de bilirubine total
et direct, le taux de transaminases (ALAT et ASAT), l’uricémie ainsi que
l'ionogramme : notamment le dosage du potassium, le sodium et du
calcium
Examenbiochimiques
1. Glycémie
La glycémie détermine le taux de glucose sanguin.
Matériels utilisés:
-Tubes à essai
-Spectrophotomètre
-Réactifs de la glycémie Mode opératoire :
-Après prélèvement de l’échantillon de sang, on le place dans la centrifugeuse
-On prépare 3 tubes à essai où respectivement, on aura le blanc, le
standard ainsi que l’échantillon (selon que nous avons plusieurs
échantillons, on peut mettre plusieurs tubes à essai)
-À l’aide d’une micropipette, On met dans tous les tubes 1cc ou1000µL de
réactifs pour la glycémie
-Le blanc reste comme tel avec ces réactifs, alors qu'au tube standard on
ajoute10µL duré actif standard de la glycémie.
-En suite pour les tubes restant on ajoute10µL de l’échantillon
-On laisse incuber pendant 15’
On passe à la lecture
La lecture sur le spectrophotomètre varie selon l’examen,
-On va sur glycémie
-On aspire le blanc
-Puis le standard, on aura des valeurs normales
-Ensuite on lit les différents échantillons. Presque 30’à peu près
[Link]émie et créatinémie
L’urémie détermine le taux d’urée dans le sang et la créatinémie le taux
de
créatinine sanguin.
Matériels utilisés
-Réactifs de l’urée, réactifs de la
créatinine. Mode opératoire
-On procèdede la même que pour la glycémie. Jusqu’à la centrifugation et la
préparation des différents tubes
-À l’aide d’une micropipette, on prélève 1cc ou 1000µL du réactif de l’urée ou
de la créatinine, qu’on met dans chaque tube
On ajoute le réactif standard de10µL au tube
standard. On laisse incuber 15min
-Ensuite on passe à la lecture, de la même manière, en lisant le blanc, le
standard puis les échantillons.30’pour la lecture
Il faudrait savoir que pour la créatinine, on peut diviser par 30 la valeur
trouvée pour l’urée et déterminer ainsi le taux de créatinine sanguin. Ou
faire×30 la valeur de la créatinine pour trouver l’urée.
3. Cholestérolémie
La cholestérolémie détermine le taux de cholestérol dans le sang.
Matériels utilisés
-Réactifs du cholestérol
Mode opératoire
-À l’aide d’une micropipette, on prélève1cc ou1000µL du réactif de cholestérol
qu’on met dans chaque tube
-On ajoute le réactif standard de 10µL au tube standard du cholestérol
-On laisse incuber
-Ensuite on passe à la lecture, de la même manière, en lisant le blanc, le
standard puis les échantillons, au spectrophotomètre. Prends30’
[Link] Bilirubine total et direct
Ces éléments déterminent notamment un problème hépatique suite à
un problème de conjugaison.
Matériels utilisés
-Réactifs de la bilirubine
Il faut noter qu’ici on avait à utiliser deux tubes pour un échantillon.
Le1er dit tube avant et le 2èmedit tube arrière, placer sur le
porte objet de cette façon.
Modeopératoire
Pour la bilirubine directe
-Dans le tube avant, on pipette 10µL du réactif D et1cc de l’échantillon
-Pour le tube arrière, on pipette 25µL du réactif N, 100µL de l’échantillon
et1ccdu réactif
D
Pour la bilirubine totale
-Dans le tube avant, on pipette10µL du réactif T et 1cc de l’échantillon
-Pour le tube arrière, on pipette25µL du réactif N, 100µL de l’échantillon et
1cc du réactif
T
L’incubation dans ce cas, ne prend pas beaucoup de
temps et on peut passer à la lecture. Mais
lalectureelleprenddutemps1’30’’
[Link] transaminases (ALAT et ASAT)
Elles déterminent une atteinte hépatique.
Matériels utilisés
-Réactifs d'ALAT et
d'ASAT Mode
opératoire
-On pipette1cc de réactif -100µL de
l’échantillon -On laisse incuber
-Puis on passe à la lecture. Prends à peu près 1’30’’
[Link]
L’ionogramme sanguin est un test extrêmement commun et l’un
des plus demandés, qui correspond au dosage des principaux
constituants ioniques du sang (ou électrolytes).
On a eu à faire le dosage du calcium, du sodium et potassium.
Matériels utilisés:
-Cryotubes
-Micropipettes
-Réactifs du calcium, potassium, sodium
III.4. SERVICES DE SEROLOGIE
La sérologie est un examen de biologie médicale utilisant le sérum pour
établir des diagnostics médicaux. Elle est basée sur la recherche
d’anticorps spécifiques (IgM ou IgG), afin de pouvoir poser un diagnostic
de maladie infectieuse, de suivre l’évolution d’une maladie.
Au cours de notre stage
Nous avons eu à faire :
-Le test D'ASLO
-Le test WIDAL
-Le test WEILFELIX
-Le VDRL
[Link]
Permet de déterminer ou pas la présence des AC tourné vers les
streptocoques. Patient souffrant de RAA.
Matériels utilisés
-Plaquettes sérologiques
-Micropipettes
-Embouts
-Réactifs
Modes opératoires
Centrifuger l’échantillon
-Prélevé une goutte de sérum à l'aide d'une micropipette
-Puis y ajouté une goutte du réactif
-Mélanger et puis attendre
Le test est positif selon qu'il y a présence d’agglutination et négatifs ion
n’a rien
2. WIDAL
Permet de diagnostiquer une infection à salmonella typhi
On a le même matériel que pour l'aslo
sauf pour le réactif Il est à
noterqu’ici on utilise deux réactifs
:
-Salmonella typhiH
-Salmonella typhiO Mode opératoire :
-On procède de la même manière, sauf que là sur les plaques sérologiques on
place deux gouttes de l’échantillon
-On mélange et on observe les agglutinations
3. WEIL FELIX
Ce test est presque similaire à celui de Widal car ils visent tous à détecter
le même germe, c’est une sorte de confirmation de Widal.
Ici on note la présence de 3 réactifs :
-OX2
-OX19
-OXk
On prélève 3 gouttes pour chaque échantillon et on met une goutte de
chaque réactif et on attend les agglutinations
4. VDRL
Ce test est effectué pour le diagnostic de la syphilis mais il n’est pas
spécifique.
C’est un test rapide que l'on effectue avec des éléments présents dans le
kit de test.
[Link] EXAMENS
On a également eu la chance d'assister à certains examens tels que :
1. Examen du liquide d’ascite
RIVALTA : examen du liquide d’ascite
-On prend un verre d'eau ordinaire
-3 à 5 gouttes d'acide acétique glacial
-Faire tomber l’échantillon dans le verre
-S'il y a apparition de précipité blanc le test est+
-Si non il est négatif
Ensuite on passe à l’examen microscopique où on fait la numération des
éléments mais cette fois ci avec la cellule de NAGETTE mais avec le
même réactif de Turk
[Link] du LCR
Pour cet examen on utilise la solution de PANDY et on procède comme
décrit ci haut
[Link] spermogramme
Où à la microscopie, on a sus objectiver des spermatozoïdes.
[Link]
Après avoir fréquenté différents services composant les techniques de
laboratoire, entre autres : bactériologie, biochimie, hématologie et
parasitologie, nous sommes capables de dire que nous n’avons pas
gaspillé notre temps car plusieurs examens ont été à notre disposition par
les encadreurs et nous y avons beaucoup maitrisé
Sachant que la para clinique a un but majeur dans la confirmation des
diagnostiques, il est nécessaire de bien maitriser les étapes de chaque
examen, du prélèvement, à l’analyse jusqu’à l’interprétation des résultats.
UNIVERSITÉ DE KOLWEZI
FACULTÉ DE MÉDECINE
RAPPORT DE STAGE DU LABORATOIRE
Effectuer à CMOK
Du 15/10 au 15/11/2025
NOM : KAUMBA SHIDI DIEUDONNE
Promotion : Bac 3
Année Académique 2024-2025