Étape 1 : Préparation de l'échantillon (ou la "methylation")
L'objectif est de transformer les acides gras de l'huile en une forme plus simple et volatile, appelée Esters
Méthyliques d'Acides Gras (EMAG). Sans cette étape, le passage dans le chromatographe serait
impossible.
· Pourquoi ? Imaginez que les acides gras sont comme de grosses pierres difficiles à faire passer par un
tuyau. En les convertissant en EMAG, on les transforme en petits cailloux plus
· Comment ? On mélange une petite quantité d'huile avec un produit chimique spécial (souvent du
méthanol avec un catalyseur). Ce mélange chauffe et réagit pour transformer les acides gras en EMAG.
Étape 2 : Analyse par chromatographie en phase gazeuse (CPG)
C'est le moment de l'analyse proprement dite.
· Injection : On injecte une petite quantité d'EMAG dans le CPG. L'appareil est équipé d'une colonne (un
long tube fin) et est chauffé pour vaporiser l'échantillon.
· Séparation :
Les EMAG sont transportés par un gaz inerte (comme l'hélium). Chaque type d'EMAG (acide oléique,
acide linoléique, etc.) a une taille et une forme différentes, ce qui le fait se déplacer à une vitesse
différente dans la colonne. Les plus petits voyagent plus vite que les plus gros.
· Détection :
Au bout de la colonne, un détecteur (généralement un FID) mesure chaque EMAG qui sort. Le résultat
est un chromatogramme, une sorte de graphique avec des pics. Chaque pic correspond à un acide gras
différent.
Étape 3 : Interprétation du chromatogramme et application de la norme
C'est l'étape où vous lisez les résultats et les comparez aux règles de l'ONH.
· Identification : On identifie chaque pic du chromatogramme en le comparant avec des échantillons de
référence connus. Cela permet de savoir quel pic correspond à l'acide oléique, au palmitique, etc.
· Quantification : La taille de chaque pic (sa surface) est proportionnelle à la quantité d'acide gras dans
l'échantillon. Le logiciel de l'appareil calcule le pourcentage de chaque acide gras par pourcentage de
chaque acide gras par rapport au total.
· Validation selon l'ONH : On compare les pourcentages obtenus avec les fourchettes définies par l'ONH,
qui sont basées sur les normes du Conseil Oléicole International (COI).· Exemple : L'huile d'olive vierge
extra a des pourcentages d'acides gras spécifiques : l'acide oléique doit être entre 55 et 83 %, l'acide
linoléique entre 3,5 et 21 %, et ainsi de suite pour les autres acides gras.
· Conclusion : Si les pourcentages d'acides gras de votre échantillon se situent dans les fourchettes
acceptables, l'huile est considérée comme conforme pour ce critère. Sinon, cela peut indiquer un
problème (fraude, mauvaise qualité, etc.).