Faculté de médecine TALEB Mourad SIDI BEL ABBES

Département de Médecine

Cours d’immunologie fondamentale

2eme année médecine

Le système du complément

Dr MEHADJI N
mhdjnafissa@[Link]
OBJECTIFS DU COURS

Les différentes voies du complément et

01 leurs mécanismes d’activation

02 La régulation du système du
complément

03 Les fonctions biologiques du système

du complément

04 Les axes d’exploration du système

du complément
 INTRODUCTION

Bases de l’immunologie fondamentale et clinique 4eme édition. Chapitre 1:

introduction au système immunitaire (2013)
 HISTOIRE DE DECOUVERTE DU SYSTEME DU
COMPLEMENT

Tard dans le 19 eme siècle, les recherches étaient focalisées sur la défense de l’organisme contre les
infections

Jules Bordet a soutenu la "théorie humorale" (immunité conférée par des substances antitoxiques et
bactéricides dans les fluides corporels) en démontrant que la bactériolyse nécessitait la présence de deux
facteurs : un facteur thermolabile (le COMPLEMENT) et un facteur thermostable (les ANTICORPS)

Paul Ehrlich l’a nommé « Complément » pour désigner qu’un composant du sérum COMPLETE les effets des
anticorps dans la lyse des bactéries et des globules rouges
 UNE PRESENTATION DU SYSTEME DU
COMPLEMENT
Le complément est un composant HUMORAL EFFECTEUR de l’immunité innée
C’est un réseau complexe de plus de 50 protéines (plasmatiques ou membranaires)
l‘activation conduit à une cascade séquentielle de réactions enzymatiques commençant par la
reconnaissance des surfaces de pathogènes et conduisant à :

Génération de LA LYSE DES SRUFACES

médiateurs L’OPSONISATION des PATHOGENES via la
inflammatoires (les surfaces pathogènes formation d’un complexe
ANAPHYLATOXINES) par des opsonines lytique

Ces cascades sont hautement REGULEES par l’intermédiaire de des protéines en phase soluble ou à la
membrane afin d’éviter d’endommager les tissus autologues
Impliqué dans la défense contre les infections et dans le maintien de l’homéostasie
Une déficience en protéines du complément ou une hyperactivation conduisent à plusieurs pathologies
 UNE PRESENTATION DU SYSTEME DU
COMPLEMENT
Les initiateurs Changement conformationnel
Les protéines de

Les protéines d’activation et Initialement des zymogènes (inactives)

régulation

d’amplification Activées par protéolyse

Les récepteurs du
complément

Le complexe d’attaque
Les opsonines Les anaphylatoxines
membranaire
 01
Les différentes voies du
complément et leurs mécanismes
d’activation
 LES VOIES D’ACTIVATION DU COMPLEMENT
Trois voies d’activation: CLASSIQUE, LECTINE, ALTERNE
Initiés DIFFEREMMENT mais convergent toutes à une voie commune : Le clivage et l’activation de C3, ensuite le
clivage et l’activation de C5 et la génération des molécules effectrices

Complement and its role in innate and adaptive immune responses. Cell research (2010)
 1/ LA VOIE CLASSIQUE

Les activateurs de la voie classique sont:

• Les complexes immuns/ anticorps-bactérie ou virus ou fungi
L’anticorps doit être d’isotype IgM ou IgG: les seuls isotypes capables d’activer le
L’initiation de la voie complément
Pour activer le C1, un seul IgM (structure pentamérique) suffit mais plus de deux
classique IgG sont nécessaires (structure monomérique)
• Corps apoptotiques
• La CRP (protéine C réactive)
• Le facteur XII activé
C1q
La protéine du complément qui initie la voie classique (Initiateur) est le C1:
C1r • Macromolécule complexe composée d’un C1q, deux de chacune des
protéases à sérine (C1r et C1s) stabilisé par Ca+2 : C1q(C1r)2(C1s)2
C1s
L’interaction du complexe immuns avec le C1 se fait via: la tête globulaire de
C1q et le domaine constant d’anticorps CH3 d’IgM ou CH2 d’IgG
Conséquence d’interaction: changement conformationnel de C1q qui devient
actif et clive les 2 C1r puis les 2 C1s
 1/ LA VOIE CLASSIQUE

Le clivage de C4b et C3b

expose un groupement
THIOESTER permettant
leur liaison covalente à la C1s
surface activatrice

Complement, An Overview for the Clinician (2015)

L’amplification de la voie classique

 2/ LA VOIE DE LECTINE

Les activateurs de la voie de lectine sont:

• Certains carbohydrates tel le mannose et le N-acétylglucosamine
• Mais pas le galactose et l’acide sialique
Ce qui rend son activation SELECTIVE vis-à-vis les surfaces de pathogènes
• Molécules acétylées : acide lipotéchoique, N acétyl glucosamine

L’initiation de la voie
de lectine
MBL ou
Ficoline
La protéine du complément qui initie la voie classique (Initiateur) est la MBL ou
MASP1 la ficoline:
• MBL (Mannose Binding Lectin) et la ficoline ressemblent structurellement et
MASP2 fonctionnellement au C1q de la voie classique
• La MBL s’associe à deux types de protéases à sérine (MBL Associated Serin
Protease 1 et 2) (MASP1 et 2) qui ressemble au C1r et C1s de la voie classique
 2/ LA VOIE DE LECTINE

Complement, An Overview for the Clinician (2015)

L’amplification de la voie de lectine

 3/ LA VOIE ALTERNE

La voie alterne est constitutivement active:

• Le processus ‘ticking over » se réfère à l’hydrolyse continue des molécules C3
en absence d’une surface activatrice
L’hydrolyse se fait au niveau de groupement thioester de C3 formant C3 (H2O)
En présence de Mg, le C3 (H2O) se lie au FB qui sera cliver par un autre facteur
FD (constitutivement actif) en Bb
La liaison C3(H2O)Bb forme la C3 convertase d’initiation de la voie alterne
Le dépôt de C3b à une surface activatrice déclenche la voie d’amplification de la
voie alterne

L’initiation de la voie
alterne
Les membranes des cellules de l’hote sont capables d’inhiber l’activation et
l’amplification de C3 car elles sont riches en acide sialique
L’acide sialique favorise la fixation de facteur H, cofacteur d’une estérase
sérine: facteur I , qui clive et inactive le C3b
 3/ LA VOIE ALTERNE

Complement, An Overview for the Clinician (2015)

L’amplification de la voie alterne

 LES VOIES D’ACTIVATION DU COMPLEMENT

• Le C5 est labile, il devient

stable quand il se lie au C6
• La liaison de C7 au C5bC6
permet de s’insérer à
l’intérieur de la membrane
• C5b-8 permet de créer un
petit pore dans la
membrane de 10 Å
• La polymérisation de C9 par
C5b-8
• C5b-9: pore cytolytique de
70 to 100 Å
• La perte de l’intégrité
membranaire

Complement, An Overview for the Clinician (2015)

La voie terminale
 02
La régulation du système du
complément
 LA REGULATION DU COMPLEMENT

Ce système EFFECTEUR a le potentiel de causer un endommagement significatif à l’ hôte s’il n’est pas met
sous contrôle (REGULE)
Il doit y avoir une BALANCE entre la détection et la destruction efficaces des pathogènes et la minimisation
de dommages tissulaires
Exemple 1: l’activation des deux voies CLASSIQUE et LECTINE dépend de la présence de pathogènes mais
dans les situations d’ischémie-reperfusion ,les deux voies s’activent et lysent les cellules autologues
Exemple 2: le dépôt de C3b lors de l’activation et l’amplification de la voie ALTERNE s’il n’est pas
correctement régulé, peut endommager rapidement les cellules de l’ hôte

1- Mécanismes de BUILT-IN beaucoup de produits intermédiaires de régulation sont

instables et spontanément inactivés s’ils n’interagissent pas rapidement à d’autres
composants de la cascade
2- La régulation de la voie alterne par le Facteur H et I
3-Une variété des protéines INHIBITRICES PLASMATIQUES ou LIEES A LA MEMBRANE
régulent une ou plusieurs voies d’activation du complément à différents niveaux
 LA REGULATION DU COMPLEMENT
On peut les classer:
• Selon la voie ou les voies d’activation cibles
• Selon leurs mécanismes de régulation
• Selon le fait qu’elles sont en phase fluide (solubles) ou membranaires

01 02 03 04
INHIBITION DE INHIBITION DES LE CLIVAGE DES INHIBITION DU
L’INITIATION DE LA VOIE CONVERTASES ANAPHYLATOXINES COMPLEXE LYTIQUE LE
CAM

Les protéines de la régulation

du complément
 LA REGULATION DU COMPLEMENT

MBL/Ficoline
01 C1INH

INHIBITION DE
L’INITIATION DE LA VOIE
MASP1
MASP2
Overview of Complement Activation and Regulation (2013)

C1INH (C1 inhibiteur):

• Se lie de façon irréversible
• Inactive les protéases C1r/C1s de la voie classique
• Inactive les protéases MASP1/MASP2 de la voie
lectine
• Inhibant l’initiation des deux voies
 LA REGULATION DU COMPLEMENT

02
INHIBITION DES
CONVERTASES Facteur I:
• Une sérine protéase constitutivement Overview of Complement Activation and Regulation (2013)
active
• Clive le C3b en fragments inactifs: C3bi, Prévenir la formation de
convertases via le
C3dg et C3c en présence de COFACTEURS
catabolisme de C3b et C4b
(MCP/CD46, CR1/CD35 et facteur H)
• Clive aussi le C4b en fragments inactifs:
C4c et C4d en présence de COFACTEURS
(MCP/CD46, CR1/CD35 et C4BP)
MCP: Membrane Cofactor Protein
C4BP: C4 Binding Protein
 LA REGULATION DU COMPLEMENT

02 DAF (Decay Accelerating Factor) ou CD55:

• Anchré à la membrane via GPI
• Inhibe la formation des C3 convertases
INHIBITION DES de la voie classique et de lectine
CONVERTASES • Accélère la dissociation de la C3
convertase (C4bC2a) de la voie classique Overview of Complement Activation and Regulation (2013)
et de lectine (en C2a, inactif en absence
de C4b et C4b, dégradé par le facteur I) Prévenir l’assemblage de
• Nécessite cofacteurs (C4BP et CR1) nouveaux convertases et
réduire la durée des
convertases déjà formés
• Accélère la dissociation de la C3
convertase (C3bBb) de la voie alterne
• Nécessite cofacteurs (CR1 et Facteur H)
GPI: Glycosyl Phosphatidyl Inositol
 LA REGULATION DU COMPLEMENT

03
CLIVAGE DES
ANAPHYLATOXINES
Complement and its role in innate and adaptive immune responses. Cell research (2010)

Carbopeptidases sériques N, B et R:
• Limite l’activité des anaphylatoxines par
le détachement d’un résidu Arginine N-
terminal
• Les formes « des-Arg » résultants de C5a
et C3a limitent l’interaction avec les
récepteurs C5aR et C3aR respectivement
 LA REGULATION DU COMPLEMENT

CD59 ou protectin :
• Anchré à la membrane via GPI
04 • Inhibe l’association de molécules C9
au complexe C5b-8 pour former le
complexe d’attaque membranaire
INHIBITION DU
COMPLEXE LYTIQUE LE
CAM
Overview of Complement Activation and Regulation (2013)
Vitronectine ou Protéine S:
• Protéine en phases fluide
• Protéine S: glucoprotéine synthétisée par
les cellules endothéliales
• Occupe le site d’insertion du complexe
C5b-7 à la membrane
 LA REGULATION DU COMPLEMENT
On peut les classer:
• Selon la voie ou les voies d’activation cibles
• Selon leurs mécanismes de régulation
• Selon le fait qu’elles sont en phase fluide (solubles) ou membranaires

En phase fluide
(solubles)

Membranaires
 LA REGULATION DU COMPLEMENT
On peut les classer:
• Selon la voie ou les voies d’activation cibles
• Selon leurs mécanismes de régulation
• Selon le fait qu’elles sont en phase fluide (solubles) ou membranaires

C1inh
FI FH
FI
CD46
CR1 CD55 Stabilisé par La properdine
C4BP
FI CD46
FI CR1
FH
CD55 CD55

CD59 CD59
Prot S Prot S
 LES RECEPTEURS DU COMPLEMENT

Opsonisation et
phagocytose

Activation des
lymphocytes B

Kuby, Immunology (2018)

 LES RECEPTEURS DU COMPLEMENT

Inflammation

C1qRp CD93 C1q Monocytes Stimulation de la

Elimination des MBL Neutrophiles phagocytose
corps apoptotiques Plaquettes
Cellules
endothéliales
cC1qR Calréticuline Région ?
collagène
de C1q
gC1qR / Région ?
globulaire
de C1q
Kuby, Immunology (2018)
 03
Les fonctions biologiques du
système du complément
 LES FONCTIONS BIOLOGIQUES DU
COMPLEMENT

01 02 03
DEFENSE CONTRE MAINTIEN DE REGULATION DE
LES INFECTIONS L’HOMEOSTASIE LA REPONSE
ADAPTATIVE
 LES FONCTIONS BIOLOGIQUES DU
COMPLEMENT

La destruction La lyse osmotique du pathogène

directe du par le complexe d’attaque
pathogène membranaire

Les anaphylatoxines: des

molécules inflammatoires générées
suite au clivage de C3, C4 et C5 en
Médiation de C3a,C4a et C5a
l’inflammation Se lient à leurs récepteurs
déclenchant plusieurs effets
inflammatoires selon le type
cellulaire

Complement and its role in innate and adaptive immune responses. Cell research (2010)
 LES FONCTIONS BIOLOGIQUES DU
COMPLEMENT

Opsonisation (les opsonines : les

composants du complément C3b et C3bi, se
L’opsonisation lient à la surface du pathogène et
et la conduisent à son internalisation par les
phagocytose cellules phagocytaires via les récepteurs
opsoniques (récepteurs du complément)

Complement and its role in innate and adaptive immune responses. Cell research (2010)
 LES FONCTIONS BIOLOGIQUES DU
COMPLEMENT

01 02 03
DEFENSE CONTRE MAINTIEN DE REGULATION DE
LES INFECTIONS L’HOMEOSTASIE LA REPONSE
ADAPTATIVE
 LES FONCTIONS BIOLOGIQUES DU
COMPLEMENT

Les cellules apoptotiques expriment des NEOEPITOPES

à leurs surfaces, ces derniers sont reconnus par les
ANTICORPS NATURELS IgM; Ces anticorps activent la
voie classique du complément (C1q), conduisant à
l’opsonisation et la phagocytose médiée par les
récepteurs du complément (C1qR)

Le C1q peu lier de façon spécifique les ADNs, les

glycoprotéines et les phospholipides exposés à la surface
L’élimination des cellules des cellules mortes et les fragments apoptotiques
mortes et des corps Il favorise la phagocytose via le C1qR exprimé par les
apoptotiques cellules phagocytaires
Il peut conduire à l’activation de la voie classique, le
dépôt de C3b à la surface et leur reconnaissance par les
macrophages au moyen de CR1
 LES FONCTIONS BIOLOGIQUES DU
COMPLEMENT

La clearance des
complexes immuns

Les complexes immuns active la voie classique du

complément
Le C3b se dépose à la surface de l’antigène formant un
complexe ternaire, reconnu par les érythrocytes via le
récepteur de C3b (CR1)
Les érythrocytes acheminent le complexe vers la foie
et la rate ou elles vont le délivrer aux macrophages via
CR3 (affinité élevée pour le C3bi généré par
catabolisme de C3b par le facteur I)
Les macrophages éliminent les complexes immuns par
opsoniation et phagocytose

Kuby, Immunology (2018)

 LES FONCTIONS BIOLOGIQUES DU
COMPLEMENT

01 02 03
DEFENSE CONTRE MAINTIEN DE REGULATION DE
LES INFECTIONS L’HOMEOSTASIE LA REPONSE
ADAPTATIVE
 LES FONCTIONS BIOLOGIQUES DU
COMPLEMENT

Rôle dans la réponse

adaptative humorale

Le CR2 (CD21) est exprimé par les lymphocytes B et les

cellules dendritiques folliculaires (CDFs)

1- le CR2 lie l’antigène opsonisé par C3d forme le

complexe corécepteur CD21-CD19-CD81 qui augmente
la signalisation via le BCR quand les lymphocytes B
naïfs reconnaissent leurs antigènes spécifiques
conduisant à l’expansion clonale les lymphocytes B
2- le CR2 lie l’antigène opsonisé par C3d à la surface
des CDFs permettant sa présentation aux
lymphocytes B

Regulation of Humoral Immunity by [Link] (2012)

 LES FONCTIONS BIOLOGIQUES DU
COMPLEMENT

Rôle dans la présentation Rôle dans la réponse

antigénique adaptative cellulaire

1- Les CDFs expriment des récepteurs du Rôle dans le développement des lymphocytes T et dans leur
complément qui captent l’antigène et le activation
présentent aux lymphocytes B 1- Le complément sert de contrôle qualité de la maturation des
2- La signalisation via C5aR dans les CPAs thymocytes RTE (Recent Thymic emigrants) en périphérie
favorise leur migration et leur production 2- L’interaction CPA-LT favorise la sécrétion de C3
d’IL-12 (polarisation des lymphocytes T CD4+ et l’expression les C3aR et C5aR/ les lymphocytes T CD4+
en Th1) produisent des faibles quantités intracellulaires de C3a et C3b/
L’interaction de C3a avec son récepteur favorisent la survie des
lymphocytes T et leur production des cytokines Th1
3- L’interaction C5a-C5aR favorise l’activation des lymphocytes
T CD8+ (costimulateur) par l’induction de la production des IL-
12 par les CPAs
 04
Les axes d’exploration du
système du complément
 LES PATHOLOLGIES DU COMPLEMENT

Dysfonctionnement du
système du complément

Déficit Héréditaire
(primitif)
HYPOACTIVATION du HYPERACTIVATION du
complément complément Déficit en nombre (quantitatif)
ou en fonction (qualitatif) en un
ou plusieurs composants DE
REGULATION du complément
Déficit Héréditaire Déficit Acquis
(primitif) (secondaire)
Malnutrition
Déficit en nombre (quantitatif) Insuffisance hépatique
ou en fonction (qualitatif) en un Maladie auto-immune à complexe immuns: lupus
ou plusieurs composants Défaut de synthèse Sepsis
D’ACTIVATION du complément Glomérulopnéphrite (anti C3 convertase Alterne)
Consommation Vascularite de Mac duffy (anti C1q)
Œdème angioneurotique acquis (anti C1inh)
Présence des AAcs
 LES PATHOLOGIES DU COMPLEMENT
Déficit Héréditaire
(primitif)

Protéines de régulation Protéines d’activation

Œdème Susceptibilité au lupus

angioneurotique Glomérulonéphrite
(OAN) Infections bactériennes
Syndrome hémolytique
et urémique atypique Glomérulonéphrite
(SHU) Infections bactériennes
Infections de type
Infections bactériennes à
Neisseria
pneumocoques et Neisseria
Hémoglobulinurie
Infections de type
Paroxystique nocturne
Neisseria
(HPN)
 QUAND ON EXPLORE LE COMPLEMENT?
L‘exploration du complément ne permet pas fréquemment de faire un diagnostic étiologique

En revanche, interprétée dans le contexte clinique et des autres examens complémentaires, il peut
jouer un rôle diagnostic important

01 02 03
Suspicion de
déficit Les maladies Les maladies
immunitaire auto-immunes rénales
primitif

Devant des infections récurrentes Lupus Glomérulonéphrite lupique

à pyogènes Vascularite de Mac Duffy Glomérulonéphrite à Auto-anticorps
++ pneumocoques SHUa
++ Neisseria HPN
 COMMENT EXPLORER LE COMPLEMENT?

Test fonctionnel d’une voie du

complément

Exploration de la voie classique Exploration de la voie alterne

(CH50) (AP50)
• Explore l'activité fonctionnelle globale des protéines • Explore l'activité fonctionnelle des Protéines de la voie
de la voie classique et de la voie finale commune alterne

• Se fait par TECHNIQUE HEMOLYTIQUE: • Se fait par TECHNIQUE HEMOLYTIQUE

Elle repose sur la lyse d'érythrocytes de mouton Basé sur le même principe que le test du CH50 et utilise le
sensibilisés de façon optimale par des anticorps de plus Couramment des érythrocytes de lapin non
lapin (hémolysine). La CH50 correspond à la dilution du sensibilisés. Les érythrocytes de lapin, dont la surface
sérum provoquant la lyse 50% des érythrocytes cellulaire est pauvre en résidus sialiques, sont
spontanément activateurs de la voie alterne
• Se fait aussi par TCHNIQUES NON HEMOLYTIQUES: • Se fait aussi par TCHNIQUES NON HEMOLYTIQUES:
immunoenzymatique (ELISA) ou immunodiffusion immunoenzymatique (ELISA) ou immunodiffusion
 COMMENT EXPLORER LE COMPLEMENT?

Test fonctionnel d’une protéine du

complément

Par TECHNIQUE HEMOLYTIQUE

• Plasma de patient + plasma déficitaire en une fraction
(fraction connue)
• Si absence de restauration de l’activité hémolytique du
plasma de patient : diagnostic positif
Par TECHNIQUES NON HEMOLYTIQUES:
Immunoenzymatique (ELISA)
 COMMENT EXPLORER LE COMPLEMENT?

Dosage antigénique des protéines Par immunonéphélémétrie ou

plasmatiques du complément immunoturbidimétrie
Dosage de C3 et C4
Dosage de FI, C1q, C5, C9….
Expression des protéines membranaires Par cytométrie en flux
Du complément
Expression de CD59 et CD55
Dans la HPN
Par ELISA La recherche des auto-anticorps
La recherche des anti-C1q
Anti C1inh
Anti C3 convertase alterne
Par PCR Étude génétique
La recherche des mutations et
de polymorphismes des gènes
codant pour les protéines du
complément
 DEMARCHE DIAGNOSTIQUE
• La voie classique peut être explorée à l’aide du CH50 et des dosages du C4 et C3
• La voie alterne peut être explorée par les dosages de C3 et du FB fonctionnellement par l’AP50
• L'exploration du complément débute généralement par la mesure du CH50 et le dosage
antigénique de C3 et C4
• La démarche diagnostique sera orientée différemment selon les résultats trouvés
 CONCLUSION

OJBJECTIFS ATTEINTS?

Qu’elles sont les trois voies d’activation du complément?

L’initiation de chaque voie

Quels sont les trois produits de l’activation du système du complément?

Citez deux mécanismes de régulation du complément

Citez trois fonctions biologiques du complément