Expt 2 : Estimation du glucose par le réactif quantitatif de Benedict

OBJECTIF :
Pour estimer la quantité de glucose présente dans l'échantillon inconnu donné par la méthode de Benedict.
méthode.

PRINCIPE :
Le réactif quantitatif de Benedict est la forme modifiée du réactif qualitatif. Il se compose de
sulfate de cuivre, carbonate de sodium et citrate de sodium, thiocyanate de potassium et potassium
ferrocyanure.
L'alcali présent dans le réactif de Benedict énolise le sucre, provoquant ainsi leur
être un agent réducteur puissant. Le ferrocyanure sert à dissoudre l'hydroxyde de cuivre alors que
le thiocyanate aide à convertir l'oxyde cuivrique rouge en cristaux blancs de thiocyanate de cuivre.
donne le point final clair.

RÉACTIFS NÉCESSAIRES
le réactif quantitatif de Benedict (BQR)
(a)Cupric sulphate, (b)Sodium carbonate, (c)Sodium citrate, (d)Potassium
thiocyanate, (e)Potassium ferrocyanate.
carbonate de sodium anhydre
(iii) Solution de glucose standard de travail
perles en porcelaine.

PROCÉDURE :

Titration I : Standardisation du réactif qualitatif de Benedict

Pipettez avec précision 5 ml du réactif quantitatif de Benedict dans un flacon conique propre.
Deux spatules pleines de 2 g de carbonate de sodium ont été ajoutées dans le flacon conique. Quelques morceaux de
Des perles en porcelaine ont également été ajoutées afin d'éviter les chocs. Le contenu a été amené à
température d'environ 60-70oC. Le contenu a été titré contre le glucose standard.
solution avec agitation régulière jusqu'à ce que la couleur bleue disparaisse. Le point final est l'apparition
d'un précipité blanc crayeux. Les titrages ont été répétés pour des valeurs concordantes.

Titration II : Estimation du glucose

La solution d'échantillon inconnue donnée a été préparée jusqu'à 100 ml avec de l'eau distillée dans un
flacon standard. Il a été bien agité pour une concentration uniforme. La burette a été remplie avec cela
solution inconnue et les titrages ont été effectués comme mentionné ci-dessus jusqu'à l'apparition de
précipité blanc crayeux. Les titrations ont été répétées pour des valeurs concordantes.

Result:
La quantité de glucose présente dans 100 ml de la solution donnée =__________mg

EXPT 2
Titration I
Normalisation du réactif quantitatif de Benedict

1
 Glucose standard vs réactif quantitatif de Benedict : Autre
Contenu dans la lecture de la burette Concordant
[Link]. conique Value
flacon Initial Final (ml)
(ml)

1.

2.

3.

Titration II
Estimation de la glucose
Réactif quantitatif standard de Benedict contre glucose inconnu
Indicator : Self
Contents Burette Concordant
N° en conique lecture Valeur
flacon (ml)
(ml) Initial Final

1.

2.

3.

Calcul
100 de la solution de glucose inconnue contient = Valeur standardx 100
valeur inconnue

2
ANALYSE QUALITATIVE DES CARBONHYDRATES

PRÉPARATION DES RÉACTIFS

Réactif de Molisch
5%unnaphthal dans l'alcool, c'est-à-dire, 5g deunnaphthalène dissous dans 100 ml d'éthanol.
2. Solution d'iode
0,005 % dans 3 % de KI, c'est-à-dire 3 g de KI dissous dans 100 ml d'eau et ensuite 5 mg d'iode
est dissous.
Solution de Benedict
17,3 g de citrate de sodium et 10 g de carbonate de sodium sont dissous dans 75 ml de
eau. 1,73 g de CuSO4.5H2O est dissous dans 20 ml d'eau. Mélangez le CuSO4
solution avec citrate alcalin en agitant constamment, enfin tout le volume est
complété à 100 ml avec de l'eau.
Réactif de Barfoed
13,3 g d'acétate de cuivre dans 200 ml d'eau et ajouter 2 ml d'acide acétique glacial.
Réactif de Bial
Dissoudre 300 mg d'orcine dans 100 ml de HCl concentré.
Réactif de Seliwanoff
Dissoudre 50 g de résorcinol dans 100 ml de HCl concentré dans un rapport de 1:2.
HCl concentré
H concentré2DONC4
Réactif Osazone
Hydrochlorure de phénylhydrazine
Acétate de sodium
Acide acétique

PRINCIPE DES RÉACTIONS

Le test de Molisch
Con. H2ALORS4déshydrate les glucides pour former du furfural et ses dérivés. Ceci
le produit se combine avec du sulfonéanaphtalene pour donner une couleur violette.
2. Test à l'iode
L'iode forme un complexe d'absorption coloré avec des polysaccharides en raison de la
formation of micellae aggregate. Iodine will form a polysaccharide inclusion
complexe.
Test de Benedict
Les glucides avec un groupe aldéhyde ou cétone potentiel ont un effet réducteur.
propriété lorsqu'elle est placée dans une solution alcaline. Les ions cupriques présents dans le
la solution sera réduite à l'ion cuivres. Cela donnera une couleur rouge
précipité. De plus, ce test est plus spécifique pour les sucres réducteurs.
4. Test de Barfoed

3
 Le réactif de Barfoed est faiblement acide et il n'est réduit que par des monosaccharides.
Une ébullition prolongée peut hydrolyser le disaccharide
donner un faux positif au test.
5. Test de Bial
Lorsque le pentose est chauffé avec de l'HCl concentré, le furfural se condense avec l'orcinol.
en présence d'ion ferrique pour donner une couleur bleu-vert.
6. Test de Seliwanoff
Les cétoses se déshydratent plus rapidement que les aldoses pour donner des dérivés de furfural.
qui se condense ensuite avec du résorcinol pour former un complexe de couleur rouge.
Test de l'acide mucique
Les monosaccharides sont convertis en acides dicarboxyliques respectifs en présence
d'agent oxydant fort con HNO3L'acide galactarique formera un incolore
des cristaux en forme de morceaux de verre cassé.
8. Test d'osazone
Les composés contenant des groupes aldéhydes et cétones forment des osazones cristallins avec
hydrochlorure de phénylhydrazine. Les cristaux d'osazone ont une forme caractéristique et
point de fusion qui aide à l'identification des sucres réducteurs.

PROCÉDURE GÉNÉRALE POUR L'ANALYSE QUALITATIVE DE

GLUCIDES

N° EXPERIMENT OBSERVATION INFERENCE

1. Le test de Molisch
À 1 ml de solution d'essai, ajoutez 2 Bague de couleur violette Présence de glucides.
des gouttes de réactif de Molisch. Ensuite est formé au
ajouter con. H2ALORS4prudemment le long de jonction des 2
côtés du tube à essai. couches.
2. Test à l'iode
À 1 ml de la solution de test, 2 couleur bleu profond Présence de
des gouttes d'iode sont ajoutées et est obtenu. polysaccharide.
observez le changement de couleur. broun foncé Présence de
couleur polysaccharide.(Glycogène)
est obtenu. Absence de
(ii) Pas de caractéristique polysaccharide.
changement de couleur.
3. Test de Benedict
5 ml de réactif de Benedict rouge orange Présence de réduction
mélangé avec 1 ml de solution test et un précipité est sucre.
les contenus sont bouillis pendant quelques obtenu.
minutes. (ii) Pas de caractéristique Absence de réduction
changement de couleur. sucre.
4. Test de Barfoed
À 2 ml de solution test, 2 ml de rouge brique Présence de réduction
Le réactif de Barfoed est ajouté et précipité est monosaccharide
bouilli pendant 3 minutes et la couleur obtenu à la

4
 le changement est noté. bas du test Absence de réduction
tube. monosaccharide.
(ii) Pas de caractéristique
changement de couleur.

Test de Bial couleur bleu-vert Présence de pentose

5. À 1 ml de la solution test, 5 ml est obtenu. sucre.
du réactif de Bial est ajouté. Le (ii) Aucune caractéristique Absence de sucre pentose.
Le contenu est bouilli et refroidi. changement de couleur.

6. Seliwanoff’s test
À 1 ml de la solution de test, 3 ml (i) Couleur rouge cerise Présence de fructose.
du réactif de Seliwanoff est ajouté est obtenu.
et les contenus sont bouillis (ii) Aucune caractéristique Absence de fructose.
changement de couleur.
7. Test de l'acide mucique
1 ml de solution test est mélangé Incolore Présence de galactose ou
avec un volume égal de HNO concentré3, cristaux formés. lactose.
puis chauffé dans un bain-marie Les cristaux sont
pendant environ une heure. observé à travers
un microscope.

Morceau de verre brisé

des cristaux façonnés sont
observé
(ii) Pas de caractéristique Absence de galactose et
changement. lactose.

8. Test des osazones

À 1 ml de la solution d'essai, couleur jaune Présence d'oligosaccharides
ajoutez 2-3 gouttes d'acide acétique glaciaire, des cristaux se forment confirmé
suivi par l'ajout d'une pincée dans 5 minutes, comme
d'hydrazine phénylhydrochlorure observé à travers un
et deux fois la quantité de sodium microscope.
l'acétate et le contenu sont bouillis

Structure de la meule de foin

forme de fructosazone.
Couleur jaune

5
les cristaux se forment La présence de glucose est
dans 5 à 10 minutes, comme confirmé.
observé à travers un
microscope.

structure de la meule de foin

forme de glucosazone
(iii) Couleur jaune
les cristaux se forment Présence de galactose
dans 10 minutes. confirmé.

Structure de ventilateur large

cristaux de
galactosazone sont
observé à travers
microscope.
couleur jaune
les cristaux se forment La présence de Matose est
dans 20 à 25 minutes, confirmé.

En forme de tournesol
cristaux de
les maltosazones sont
observé à travers le
microscope.
couleur jaune
les cristaux se forment La présence de xylose est
dans 5 à 10 minutes, confirmé.

6
 aiguilles éparpillées
cristaux sculptés de
Les xylosazones sont
observé à travers le
microscope.
Couleur jaune
les cristaux se forment La présence de lactose est
dans 20-30 minutes, confirmé.

en forme de boule de poudre

cristaux de
Les lactosazones sont
observé à travers le
microscope.

ANALYSE QUALITATIVE DU GLUCOSE

[Link]. EXPÉRIMENT OBSERVATION INFERENCE

1. Test de Molisch
À 1 ml de la solution test, ajoutez 2 Bague de couleur violette Présence de
se forme à la
des gouttes de réactif de Molisch. Ensuite, ajoutez glucide
con.H2ALORS4soigneusement le long des côtés de la jonction des 2
the test tube. couches.
2. Test à l'iode
À 1 ml de la solution test, 2 gouttes Pas de caractéristique Absence de
de l'iode est ajouté et observer le changement de couleur. polysaccharide.
changement de couleur.
3. Test de Benedikt
5 ml de réactif de Benedict est mélangé (i) Rouge-orange Présence de
avec 1ml de solution test et le précipité est réduction de sucre.
Les contenus sont bouillis pendant quelques minutes. obtained.
.
4. Test de Barfoed
À 2 ml de solution de test, 2 ml de rouge brique Présence de
Le réactif de Barfoed est ajouté et bouilli précipité est réduction

7
 pendant 3 minutes et le changement de couleur est obtenu au monosaccharide
noté. fond du tube à essai.

5. Le test de Bial Pas de caractéristique Absence de

À 1 ml de la solution test, 5 ml de changement de couleur. sucre pentose.
Le réactif de Bial est ajouté. Le contenu
sont bouillis et refroidis.
6. Seliwanoff’s test
À 1 ml de la solution de test, 3 ml de Pas de caractéristique Absence de
Le réactif de Seliwanoff est ajouté et le changement de couleur. fructose.
les contenus sont bouillis.
7. Test de l'acide mucique
1 ml de solution test est mélangé avec Aucune caractéristique Absence of
volume égal de HNO concentré3, alors changer. galactose et
chauffé dans un bain-marie pendant environ lactose.
une heure.
8. Test d'osazone
À 1 ml de la solution de test, ajoutez Couleur jaune Présence de
2-3 gouttes d'acide acétique glaciaire, des cristaux se forment dans le glucose
suivi de l'ajout d'une pincée de 5-10 minutes, comme confirmed.
hydrochlorure de phénylhydrazine et observé à travers un
deux fois la quantité d'acétate de sodium microscope.
et le contenu est bouilli

Structure de la meule de foin

forme de glucosazone

ANALYSE QUALITATIVE DU FRUCTOSE

[Link]. EXPÉRIENCE OBSERVATION INFERENCE

1. Test de Molisch
À 1 ml de la solution test, ajoutez 2 Bague de couleur violette Présence de
gouttes du réactif de Molisch. Puis ajoutez se forme au glucide.
con.H2ALORS4prudemment le long des bords de la jonction des 2
le tube à essai. couches.

8
2. Test à l'iode Aucune caractéristique Absence de
À 1 ml de la solution test, 2 gouttes de changement de couleur. polysaccharide
d'iode est ajouté et observer le
changement de couleur.
3. Test de Benedict
5 ml de réactif de Benedict est mélangé (i) Rouge orange Présence de
avec 1 ml de solution teste et le précipité est réduction du sucre.
les contenus sont bouillis pendant quelques minutes. obtenu.
.
4. Test de Barfoed
À 2 ml de solution d'essai, 2 ml de rouge briquet Présence de
Le réactif de Barfoed est ajouté et bouilli précipiter est réduire
pendant 3 minutes et le changement de couleur est obtenu à le monosaccharide
noté. fond du tube à essai.
5. Le test de Bial
À 1 ml de la solution test, 5 ml de Aucune caractéristique Absence de
Le réactif de Bial est ajouté. Le contenu changement de couleur. sucre pentose
sont bouillis et refroidis.
6. Test de Seliwanoff
À 1 ml de la solution test, 3 ml de couleur rouge cerise Prescence of
Le réactif de Seliwanoff est ajouté et le est obtenu. fructose.
les contenus sont bouillis.
7. Test de l'acide mucique
1 ml de solution de test est mélangé avec Pas de caractéristique Absence de
même volume de HNO concentré3, alors changement. galactose et
chauffé dans un bain-marie pendant environ lactose.
une heure.
8. Test d'osazone
À 1 ml de la solution d'essai, ajoutez Couleur jaune Présence de
2-3 gouttes d'acide acétique glaciaire, cristaux formés en 5 fructose
suivi de l'ajout d'une pincée de minutes, comme observé confirmé
hydrochlorure de phénylhydrazine et au microscope.
deux fois la quantité d'acétate de sodium
et le contenu est bouilli.

Structure de la meule de foin

forme de fructosazone.

9
 ANALYSE QUALITATIVE DU GALACTOSE

N° EXPÉRIENCE OBSERVATION INFERENCE

1. Test de Molisch
Ajoutez 2 à 1 ml de solution d'essai Bague de couleur violette Présence de
gouttes de réactif de Molisch. Puis ajoutez se forme au hydrat de carbone.
con.H2DONC4soigneusement le long des côtés de la jonction des 2
le tube à essai. couches.
2. Test à l'iode
À 1 ml de la solution de test, 2 gouttes Aucune caractéristique Absence de
de l'iode est ajouté et observer le changement de couleur. polysaccharide.
changement de couleur.
3. Test de Benedict
5 ml de réactif de Benedict est mélangé (i) Rouge orange Présence de
avec 1 ml de solution test et le précipité est réduction du sucre.
les contenus sont ébouillantés pendant quelques minutes. obtenu.

4. Test de Barfoed
À 2 ml de solution de test, 2 ml de rouge brique Présence de
Le réactif de Barfoed est ajouté et bouilli. précipiter est réduction
pendant 3 minutes et le changement de couleur est obtenu à la monosaccharide
noté. fond du tube à essai.

5. Test de Bial
À 1 ml de la solution test, 5 ml de Aucune caractéristique Absence de
Le réactif de Bial est ajouté. Le contenu changement de couleur. sucre pentose.
sont bouillis et refroidis.
6. Test de Seliwanoff
À 1 ml de la solution d'essai, 3 ml de Aucune caractéristique Absence de
Le réactif de Seliwanoff est ajouté et le changement de couleur. fructose.
contents are boiled.
7. Test d'acide mucique
1 ml de solution test est mélangé avec (i) Cristaux incolores Présence de
volume égal de HNO concentré3, alors formé. Le galactose ou
chauffé dans un bain-marie pendant environ les cristaux sont lactose.
une heure. observé à travers un
microscope.

Morceau de verre brisé

des cristaux façonnés sont
observé.

10
8. Test d'osazone
À 1 ml de la solution test, ajoutez Couleur jaune Présence de
2-3 gouttes d'acide acétique glaciaire, les cristaux se forment dans la galactosémie
suivi d'une pincée de 10 minutes, confirmé.
chlorhydrate de phénylhydrazine et
deux fois la quantité d'acétate de sodium
et le contenu est bouilli

Structure de ventilateur large

les cristaux sont observés
à travers le microscope.

ANALYSE QUALITATIVE DU XYLOSE

[Link]. EXPÉRIENCE OBSERVATION INFERENCE

1. Test de Molisch
À 1 ml de solution de test, ajoutez 2 Bague de couleur violette Présence de
des gouttes du réactif de Molisch. Ensuite, ajoutez se forme au glucide.
con.H2ALORS4soigneusement le long des côtés de la jonction des 2
le tube à essai. couches.
2. Test à l'iode
À 1 ml de la solution test, 2 gouttes Pas de caractéristique Absence de
de l'iode est ajouté et observe le changement de couleur. polysaccharide.
changement de couleur.
3. Test de Benedict
5 ml de réactif de Benedict est mélangé (i) Rouge orangé Présence de
avec 1 ml de solution test et le précipité est sucres réducteurs.
Les contenus sont mijotés pendant quelques minutes. obtenu.

4. Le test de Barfoed
À 2 ml de solution test, 2 ml de Rouge brique Présence de
Le réactif de Barfoed est ajouté et porté à ébullition. précipité est réduction
pendant 3 minutes et le changement de couleur est obtenu à la monosaccharide.
noté. fond du tube à essai.
5. Test de Bial
À 1 ml de la solution test, 5 ml de Couleur bleu-vert Présence de
Le réactif de Bial est ajouté. Le contenu est obtenu. sucre pentose.
sont bouillis et refroidis.
6. test de Seliwanoff
À 1 ml de la solution d'essai, 3 ml de Aucune caractéristique Absence de
Le réactif de Seliwanoff est ajouté et le changement de couleur. fructose.
les contenus sont bouillis

11
7. Test de l'acide mucique
1 ml de solution test est mélangé avec Aucune caractéristique Absence de
volume égal de HNO concentré3, alors changement. galactose et
chauffé dans un bain-marie pendant environ lactose.
une heure.
8. Test des osazones
À 1 ml de la solution test, ajoutez Couleur jaune Présence de
2-3 gouttes d'acide acétique glaciaire des cristaux se forment dans le Xyloseis
suivi de l'ajout d'une pincée de 5 à 10 minutes confirmé.
hydrochlorure de phénylhydrazine et
deux fois la quantité d'acétate de sodium
et le contenu est bouilli

Aiguille aléatoire
des cristaux façonnés sont
observé à travers un
microscope.

ANALYSE QUALITATIVE DU MALTOSE

N° EXPÉRIENCE OBSERVATION INFERENCE

1. Test de Molisch
Ajoutez 2 à 1 ml de solution test. Anneau couleur violette Présence de
des gouttes du réactif de Molisch. Ensuite, ajoutez se forme au hydrate de carbone.
con.H2ALORS4soigneusement le long des côtés de la jonction des 2
le tube à essai. couches.
2. Test à l'iode
À 1 ml de la solution d'essai, 2 gouttes Pas de caractéristique Absence de
du iode est ajouté et observe le changement de couleur. polysaccharide.
changement de couleur.
3. Test de Benedict
5 ml de réactif de Benedict est mélangé (i) Rouge orangé Présence de
avec 1 ml de solution test et le précipiter est sucre réducteur.
les contenus sont bouillis pendant quelques minutes. obtenu.

4. Test de Barfoed
À 2 ml de solution test, 2 ml de Aucune caractéristique Absence de
Le réactif de Barfoed est ajouté et bouilli changement de couleur. réduction
pendant 3 minutes et le changement de couleur est monosaccharide.
noté.
5. Le test de Bial

12
 À 1 ml de la solution test, 5 ml de Aucune caractéristique Absence de
Le réactif de Bial est ajouté. Le contenu changement de couleur. sucre pentose.
sont bouillis et refroidis.

6. Le test de Seliwanoff
À 1 ml de la solution d'essai, 3 ml de Pas de caractéristique Absence de
Le réactif de Seliwanoff est ajouté et le changement de couleur. fructose.
les contenus sont bouillis.
7. Test de l'acide mucique
1 ml de solution test est mélangé avec Pas de caractéristique Absence de
volume égal de HNO concentré3, alors changement. galactose et
chauffé dans un bain-marie pendant environ lactose.
une heure.
8. Test d'osazone
À 1 ml de la solution test, ajoutez Couleur jaune Présence de
2-3 gouttes d'acide acétique glaciaire, les cristaux se forment dans le maltose
suivi de l'ajout d'une pincée de 20-25 minutes confirmed.
hydrochlorure de phénylhydrazine et
deux fois la quantité d'acétate de sodium
et le contenu est bouilli

En forme de tournesol
les cristaux sont vus
au microscope.

ANALYSE QUALITATIVE DU LACTOSE

[Link]. EXPERIMENT OBSERVATION INFERENCE

1. Test de Molisch
À 1 ml de solution test, ajoutez 2 Anneau de couleur violette Présence de
des gouttes de réactif de Molisch. Ensuite, ajoutez se forme à la glucide
con.H2ALORS4soigneusement le long des côtés de la jonction des 2
le tube à essai. couches.
2. Test à l'iode
À 1 ml de la solution de test, 2 gouttes Pas de caractéristiques Absence de
d'iode est ajouté et observer le changement de couleur. polysaccharide.
changement de couleur.
3. Test de Benedict
5 ml de réactif de Benedict est mélangé rouge orange Présence de
avec 1 ml de solution de test et le précipité est réduction du sucre.
les contenus sont bouillis pendant quelques minutes. obtenu.

13
4. Le test de Barfoed Aucune caractéristique Absence de
À 2 ml de solution test, 2 ml de changer. réduction
Le réactif de Barfoed est ajouté et bouilli Monosaccharide.
pendant 3 minutes et le changement de couleur est
remarqué.

5. Test de Bial
À 1 ml de la solution test, 5 ml de Couleur bleu-vert Présence de
Le réactif de Bial est ajouté. Le contenu est obtenu. sucre pentose
sont bouillis et refroidis.
6. Test de Seliwanoff
À 1 ml de la solution test, 3 ml de Pas de caractéristique Absence de
Le réactif de Seliwanoff est ajouté et le changement de couleur. fructose.
les contenus sont bouillis.
7. Test de l'acide mucique
1 ml de solution test est mélangé avec (i) Cristaux incolores Présence de
volume égal de HNO concentré3, puis formé. lactose.
chauffé dans un bain d'eau bouillante pendant environ les cristaux sont
une heure. observé
à travers un
microscope.

Morceau de verre brisé

des cristaux en forme
observé

8. Test des osazones

À 1 ml de la solution test, ajoutez Couleur jaune Présence de
2-3 gouttes d'acide acétique glaciaire, les cristaux se forment dans le lactose
suivi de l'ajout d'une pincée de 20 – 30 minutes confirmé.
hydrochlorure de phénylhydrazine et
deux fois la quantité d'acétate de sodium
et le contenu est bouilli

Poudre ou
forme de hérisson
observé à travers un
microscope.

14
 ANALYSE QUALITATIVE DU SUCROSE

[Link]. EXPÉRIENCE OBSERVATION INFERENCE

1. Test de Molisch
À 1 ml de solution test, ajoutez 2 Bague de couleur violette Présence de
des gouttes de réactif de Molisch. Ensuite est formé au glucide.
ajouter con.H2ALORS4avec précaution le long de jonction des 2
côtés du tube à essai. couches.
2. Test à l'iode
À 1 ml de la solution d'essai, 2 Pas de caractéristique Absence de
des gouttes d'iode sont ajoutées et ensuite changement de couleur. polysaccharide.
observez le changement de couleur.
3. Test de Benedict
5 ml de réactif de Benedict Pas de caractéristique Absence de
mélangé avec 1 ml de solution test et changement de couleur. réduction du sucre.
les contenus sont bouillis pendant quelques
minutes.

4. Hydrolyse
Le sucre non réducteur est converti en sucre réducteur par le
hydrolyser la substance en ajoutant quelques gouttes de HCl concentré. Ensuite, il est chauffé pour
10 minutes dans un bain d'eau bouillante. Il est neutralisé par le carbonate de sodium.
solution jusqu'à ce que l'effervescence cesse. Ensuite, des réactions de réduction sont effectuées,
en utilisant la solution hydrolysée.
5. Test de Benedict
5 ml de réactif de Benedict Rouge orangé Présence de
mélangé avec 1 ml de solution test et précipité est sucre réducteur
les contenus sont bouillis pendant quelques obtenu. dans le
minutes. hydrolysat.
6. Le test de Barfoed
À 2 ml de solution test, 2 ml de Rouge brique Présence de
Le réactif de Barfoed est ajouté et bouilli précipiter est réduction
pendant 3 minutes et le changement de couleur obtenu. monosaccharide.
est noté.
7. Le test de Bial
À 1 ml de la solution d'essai, 5 ml de No caractéristique Absence de
Le réactif de Bial est ajouté. La couleur du contenu change. sucre pentose
sont cuits à l'eau et refroidis.

8. Test de Seliwanoff
À 1 ml de la solution test, 3 ml de (i) couleur rouge cerise Présence de
Le réactif de Seliwanoff est ajouté et le est obtenu. fructose.
les contenus sont bouillis.
9. Test de l'acide mucique
1 ml de solution test est mélangé sans caractéristique Absence de

15
 volume égal de HNO concentré3, puis changement. galactose et
chauffé à bain-marie pendant environ lactose.
une heure.
10. Test de l'osazone
À 1 ml de la solution test, ajoutez Couleur jaune Cela confirme
2-3 gouttes d'acide acétique glaciaire, les cristaux se forment en présence
suivi de l'ajout d'une pincée de 5 à 10 minutes, de glucose et
chlorhydrate de phénylhydrazine et fructose dans le
deux fois la quantité d'acétate de sodium hydrolysat.
et les contenus sont bouillis

Cristaux de paille
observé à travers un
microscope.

ANALYSE QUALITATIVE DE L'AMIDON

[Link]. EXPÉRIENCE OBSERVATION INFERENCE

1. Test de Molisch
À 1 ml de solution test, ajoutez 2 Anneau de couleur violette Présence de
gouttes de réactif de Molisch. Ensuite se forme à la carbohydrate
ajouter con.H2ALORS4 soigneusement le long de
jonction des 2
les côtés du tube à essai. couches.
2. test à l'iode
À 1 ml de la solution test, 2 Couleur bleu profond Présence de
des gouttes d'iode sont ajoutées et ensuite est obtenu polysaccharide.
observez le changement de couleur.
3. Hydrolyse
Le sucre non réducteur est converti en sucre réducteur par le
hydrolyser la substance en ajoutant quelques gouttes de HCl concentré. Ensuite, elle est chauffée pendant
10 minutes dans un bain d'eau bouillante. Il est neutralisé par le carbonate de sodium.
solution jusqu'à ce que l'effervescence cesse. Ensuite, des réactions de réduction sont effectuées.
en utilisant la solution hydrolysée.
4. Test de Benedict
5 ml de réactif de Benedict Rouge orange Présence de
mélangé avec 1 ml de solution test et précipité est réduisant le sucre.
les contenus sont cuits à l'eau pendant quelques obtenu.
minutes.
5. Test de Barfoed
À 2 ml de solution de test, 2 ml de Rouge brique Présence de
Le réactif de Barfoed est ajouté et le précipité est bouilli. réduction
pendant 3 minutes et le changement de couleur obtenu à la monosaccharide.
est noté. fond du tube à essai.

16
6. Test de Bial Aucune caractéristique Absence de
À 1 ml de la solution test, 5 ml de changement de couleur. sucre pentose.
Le réactif de Bial est ajouté. Le contenu
sont bouillis et refroidis.

7. Test de Seliwanoff
À 1 ml de la solution test, 3 ml de sans caractéristique Absence de
Le réactif de Seliwanoff est ajouté et le changement de couleur. fructose.
les contenus sont bouillis
8. Test de l'acide mucique
1 ml de solution de test est mélangé avec aucune caractéristique Absence de
volume égal de HNO concentré3, puis changement. galactose et
chauffé dans un bain-marie pendant environ lactose.
une heure.
9. Test des osazones Présence de
À 1 ml de la solution test, ajoutez Couleur jaune glucose dans le
2-3 gouttes d'acide acétique glaciaire, les cristaux se forment dans l'hydrolysat.
suivi de l'ajout d'une pincée de 5 à 10 minutes, car confirmé.
hydrochlorure de phénylhydrazine et observé à travers un
deux fois la quantité d'acétate de sodium microscope.
et le contenu est bouilli.

En forme de meule de foin

cristaux.

ANALYSE QUALITATIVE DU GLYCOGÈNE

[Link]. EXPÉRIMENT OBSERVATION INFERENCE

1. Test de Molisch
À 1 ml de solution test, ajoutez 2 Bague de couleur violette Présence de
des gouttes du réactif de Molisch. Ensuite, se forme au glucide.
ajouter con.H2SO4soigneusement le long des jonction des 2
côtés du tube à essai. couches.
2. Test à l'iode
À 1 ml de la solution d'essai, 2 La couleur brun foncé est la présence de
des gouttes d'iode sont ajoutées et ensuite obtenu polysaccharide.
observez le changement de couleur. GLYCOGÈNE

17
3. Hydrolyse
Le sucre non réducteur est converti en sucre réducteur par le
hydrolyser la substance en ajoutant quelques gouttes de HCl concentré. Puis, il est chauffé pendant
10 minutes dans un bain d'eau bouillante. Il est neutralisé par le carbonate de sodium.
solution jusqu'à ce que l'effervescence cesse. Ensuite, des réactions de réduction sont effectuées,
en utilisant la solution hydrolysée.
4. Test de Benedict
5 ml de réactif de Benedict Rouge orange Présence de
mélangé avec 1 ml de solution test et le précipité est réduire le sucre.
les contenus sont bouillis pendant quelques obtenu.
minutes.
5. Test de Barfoed
À 2ml de solution test, 2ml de Rouge brique Présence de
Le réactif de Barfoed est ajouté et le précipité est bouilli. réduire
obtenu à la
pendant 3 minutes et le changement de couleur monosaccharide.
est noté. fond du tube à essai.
6. Test de Bial
À 1 ml de la solution test, 5 ml de sans caractéristiques Absence de
Le réactif de Bial est ajouté. Le contenu change de couleur. sucre pentose.
sont bouillis et refroidis.

7. Le test de Seliwanoff
À 1 ml de la solution test, ajouter 3 ml de No caractéristique Absence de
Le réactif de Seliwanoff est ajouté et le changement de couleur. fructose.
les contenus sont bouillis
8. Test de l'acide mucique
1 ml de solution teste est mélangé avec aucune caractéristique Absence de
volume égal de HNO concentré3, alors changement. galactose et
chauffé dans un bain d'eau bouillante pendant environ lactose.
une heure.

9. Test des osazones Présence de

À 1 ml de la solution de test, ajoutez Couleur jaune glucon dans le
2-3 gouttes d'acide acétique glaciaire, des cristaux se forment dans l'hydrolysat est
suivi de l'ajout d'une pincée de 5 à 10 minutes, comme confirmé.
chlorhydrate de phénylhydrazine et observé à travers un
deux fois la quantité d'acétate de sodium microscope.
et le contenu est bouilli.

De forme de meule de foin

cristaux.
.

18
 RECTIONS GÉNÉRALES DES PROTÉINES (PROTÉINE D'OEUF)

S.N0 EXPÉRIENCE OBSERVATION INFÉRENCE

1) Solubility:
La solubilité de
la substance donnée est
observé avec le suivi-
ing.

a) Eau Une solution colloïdale est formée. Présence de protéines.

solution de NaOH diluée Partiellement soluble. Présence de protéine.

2) Précipitations par neutre

solution saline
À 1 ml de la
Ajoutez une substance en volume égal. Un précipité blanc se forme. Présence de globuline.
d'une solution saturée de
Sulfate d'ammonium (demi-
saturation).
La solution est saturée
avec du sulfate d'ammonium Un précipité blanc se forme. Présence d'albumine.
(saturation complète).
3) Précipitations par fortes
Métaux :
À 1 ml de la
ajoutez un volume égal de 5% Un précipité blanc se forme. Présence de protéines.
Nitrate de mercure.
4) Précipitation par l'alcool :
À 1 ml de la
Ajoutez une substance en volume égal. Un précipité blanc se forme. Présence de protéines.
d'alcool.
5) Coagulation par la chaleur :

Environ 1 ml de Un précipité blanc nuageux se forme en présence de protéines.

la substance est prise dans un état propre
par coagulation.
tube à essai et chauffé.
6) Test de Biuret :
À 1 ml de la
substance ajouter quelques gouttes de
Réactif de Biuret. Purple colour is formed. Présence de protéines.
7) Test de ninhydrine :
À 1 ml, une couleur violette est obtenue. Présence d'acide aminé
solution de test ajouter quelques gouttes dans la protéine.
de réactif de Ninhydrine et
chauffez pendant 2 minutes.

19
8) Test xanthoprotique :
À 1 ml de test La couleur jaune se forme après le Présence d'aromatiques
solution ajouter quelques gouttes de addition d'acide nitrique concentré et Acide aminé dans le
acide nitrique conc. et chauffer. cela devient rouge à l'ajout Protéine.
Refroidissez-le. Ajoutez ensuite quelques gouttes de NaOH.
de 40 % de NaOH.
9) Test de Pauly :
À 1 ml de test Une teinture de couleur bleu profond est obtenue. Présence de tyrosine
solution ajouter quelques gouttes de et unités d'histidine dans
1% d'acide sulfanilique et protéine.
Refroidissez-le dans un bain de glace. Puis

ajoutez 1 ml de NaNO à 5 %2et

1 ml de Na à 1%2CO3.
10) Millon’s test:
À 1 ml de test La couleur rouge est obtenue. Présence de phénoliques
solution ajouter le Millon groupe contenant des acides aminés
réactif et le chauffer pendant quelques acide (tyrosine) dans le
minutes. protéine.
11) Test de Morner :
1 ml de la couleur verte est obtenu.
test solution ajouter des millions Présence de la tyrosine dans
Réactif et chauffez-le dans un la protéine.
bain-marie
12) Test du phénol de Folin :
1 ml de la couleur bleue est obtenu.
solution de test ajouter égal Présence de tyrosine dans
volume du réactif de Folin la protéine.
suivie de l'ajout de
1 % de Na2CO3.
13) Test de l'aldéhyde :
À 1 ml du test A, un anneau de couleur violette se forme à
solution ajouter 2-3 gouttes de 1 % au point de jonction des deux couches. Présence de Tryptophane
HCHO et ensuite soin- dans la protéine.
ajoutez quelques gouttes de concentré.
H2DONC4le long des côtés du
tube à essai.
14) Test d'Ehrlisch :
Pour 1 ml du test, une couleur rose rouge est obtenue.
solution ajouter quelques gouttes de Présence de Tryptophane
Le réactif d'Ehrlich et le chauffer dans la protéine.
dans un bain d'eau bouillante.
15) Le test de Sakaguchi :
Une couleur rouge est obtenue avec 2 ml de solution test.
ajoutez quelques gouttes d'alpha-
naphthol dans l'alcool suivi Présence d'arginine dans
par l'ajout de 1 ml de la protéine.

20
 20 % NaOH et quelques gouttes
d'eau de brome.
16) Test au soufre :
À 1 ml de solution d'essai, un précipité noir sale est obtenu. Présence de cystéine dans.
ajoutez quelques gouttes de NaOH à 45 % la protéine.
et faites-le bouillir pendant 2 minutes, puis refroidissez
puis ajoutez de l'acétate de plomb.
17) Test au nitroprussiate de sodium :
À 2 ml de la solution de test, une couleur pourpre rougeâtre est obtenue. Présence de méthionine
ajoutez quelques gouttes de NaOH à 20 % dans la protéine.
. Ensuite, ajoutez 1 ml de sodium -
nitroprussiate suivi de
l'ajout de 1,5 ml de 1%
Glycine. Faites-le bouillir pendant quelques minutes.
minutes. Puis ajoutez 1 ml de
6N HCl.
18) Test de Molisch :
Une bague de couleur violette se forme en présence de 1 ml de la substance.
ajoutez quelques gouttes de la réaction de Molisch entre deux couches. Unité de glucides dans le
réactif puis ajouter de l'acide sulfurique concentré protéine.
acide sulfurique le long des côtés
des tubes à essai.

Results:
La protéine donnée (protéine d'œuf) contient les éléments suivants,
Arginine, Tyrosine, Tryptophan, Cysteine, Methionine
et glucides.

21