Introduction
à la biochimie clinique
Biochimie clinique
2ème année de médecine
Pr H. KHALKI
Objectifs généraux
• Etudier les différents marqueurs biochimiques et leurs intérêts
séméiologiques
• Maitriser l’exploration biochimique des différentes fonctions
biologiques et leurs anomalies.
Objectifs spécifiques
• Expliquer le fonctionnement biochimique de divers organes
(foie, reins, cœur, glandes endocrines...)
• Etudier les métabolites et les enzymes d’intérêt clinique.
• Connaitre les notions de base sur les processus analytiques
utilisés pour évaluer ces marqueurs et certaines notions sur
l’assurance de qualité en biochimie clinique.
Objectifs spécifiques (suite)
• Connaître l’ordre de grandeur des valeurs usuelles et les limites
de variations compatibles avec la vie.
• Discuter l’étiopathogénie et la physiopathologie des désordres
biochimiques
• Evoquer les tests biochimiques nécessaires devant un contexte
clinique précis +++
• Intégrer les résultats de laboratoire dans leur contexte
physiopathologique et clinique +++
PLAN
• Introduction
• Intérêt des examens biochimiques
• Parcours du bilan biologique (demande … rendu des résultats)
• Techniques d’analyse
• La biologie délocalisée
• Performance analytique
• Avenir
Introduction
• Biologie médicale: discipline située au confins de la médecine,
des sciences biologiques et de la technologie.
• But: réalisation d’examens de biologie médicale càd mesure de
marqueurs biologiques
• Marqueur biologique: « une caractéristique biologique qui est
objectivement mesurée et évaluée comme un indicateur de
processus biologiques normaux ou pathologiques » National
Institute of Health
Introduction
• Nature des marqueurs et des matrices dans lesquelles ils sont
mesurés sont extrêmement variables
• Marqueurs biochimiques: différentes molécules contenues dans
les liquides biologiques (sang, urines, LCR…)
→ Rechercher la présence anormale ou mesurer la concentra on
Environ 70 % des décisions cliniques sont prises sur la base des
résultats des analyses biologiques.
Introduction
La biochimie clinique - Chimie clinique
(anglo-saxons)
Développement considérable:
Connaissances fondamentales
Mécanismes des maladies
Méthodes de chimie analytique
Introduction
Chez l’homme, Les cellules baignent dans un environnement liquide =
milieu intérieur
Le Milieu Intérieur s’interpose entre le milieu extérieur (hostile) et le
milieu intracellulaire,
Les cellules subiront les variation du milieu extérieur de manière plus
atténuée (amortie)
« La constance du milieu intérieur est la condition d’une vie libre »
Claude BERNARD 1885
La stabilité du Milieu Intérieur est maintenue grâce à des mécanismes
compensateurs
L’HOMEOSTASIE: maintient de certaines grandeurs physicochimiques
du milieu intérieur très proche d’une valeur donnée dite grandeur de
référence, en dépit des perturbations qui tendent à les en écarter
grâce aux mécanismes de régulation.
INTERET DES EXAMENS BIOCHIMIQUES
• Pourquoi demande-t-on une
analyse biologique ?
Car les résultats fournis au médecin par
l’analyses d'un échantillon
SONT PRÉCIS ET PLUS OBJECTIFS QUE
Ce qu’il peut recueillir à travers
Les symptômes
L’examen clinique
Et…. Les dires du patient
INTERET DES EXAMENS
BIOCHIMIQUES
• Diagnostic: confirmer ou infirmer le
diagnostic clinique
• Suivi:
– Mesurer la progression et l’extension de la maladie
– Mesurer l’effet du traitement
– Suivre la stabilité d’une fonction
• Dépistage chez les sujets « sains »: détection des
situations infra cliniques
• Pronostic: information sur l’évolution d’une
pathologie, facteurs de risque…
• But de recherche
PARCOURS DU BILAN BIOLOGIQUE (DEMANDE
D’UN BILAN RENDU DES RÉSULTATS)
Ensemble d'étapes
successives allant de la
prescription au compte rendu
final qui nécessitent une
surveillance permanente
(assurance qualité - SMQ).
Etape 1: préanalytique
Etape 2: analytique
Etape 3: post-analytique
①PHASE PRE-ANALYTIQUE
• Prescription
• Prélèvement
• Transport
• Réception du prélèvement par le laboratoire
• Conformité
• Enregistrement
• Prétraitement, aliquotage, conservation …
→ Studies report that approximately 46%-68% of all laboratory errors occur in the
preanalytical phase
G. Lippi, J.J. Chance, S. Church, P. Dazzi, R. Fontana, D. Giavarina, et al., Preanalytical quality improvement: from dream to reality, Clin. Chem. Lab. Med. 49
(2011) 1113-1126.
M. Plebani, Errors in clinical laboratories or errors in laboratory medicine? Clin. Chem. Lab. Med. 44 (2006) 750-759.
②PHASE ANALYTIQUE
C’est l'étape technique proprement dite avec tous les éléments du
traitement de l'échantillon:
• Maintenance
• Validation technique
• Validation analytique
PHASE ANALYTIQUE - TECHNIQUES D’ANALYSE
Exp: Spectrophotométrie
PHASE ANALYTIQUE - TECHNIQUES D’ANALYSE
Exp: Spectrophotométrie
PHASE ANALYTIQUETECHNIQUES D’ANALYSE
Exp: Spectrophotométrie
BIOLOGIE DELOCALISEE (EBMD)
• La biologie délocalisée, dénommée également Point of Care Testing (POCT),
• C’est une solution miniaturisée de mesure de paramètres biologiques
réduisant à son strict minimum la phase pré-analytique.
• Elle autorise des mesures de paramètres sanguins directement au chevet du
patient, pour un résultat au plus proche du processus décisionnel.
• Son intérêt potentiel en médecine d'urgence est de contribuer à améliorer le
temps de passage en réduisant le délai de rendu des résultats.
BIOLOGIE DELOCALISEE
Inconvénients:
• Coût
• Responsabilité – compétence
• Problèmes analytiques (étalonnage,
nettoyage, conservation…)
• Problèmes d’interprétation
③PHASE POST ANALYTIQUE
• Analyse des résultats bruts
– Validation des résultats; Commentaire, interprétation
– Compte rendu
– Archivage
• Résultats → ques ons:
– Est il normal ?
– Est il significativement différent des résultats précédents ?
– Est il compatible avec les données cliniques ?
INTERPRETATION DES RESULTATS
Comparer les résultats aux valeurs
de référence
Comparer les résultats aux
antériorités du patient
Tenir compte :
Renseignements Cliniques
Des variations analytiques
Des variations biologiques
De l’évolution de la maladie
les écarts par rapport aux valeurs
de référence ou aux antériorités
doivent refléter une pathologie,
une amélioration ou une
dégradation de l’état du malade
SINON
INTERPRETATION DES RESULTATS
Incompatibilité du résultat avec les
données cliniques:
Chercher une explication
→ pré analy que
→ analy que
→ post analy que
VALEURS DE REFERENCE
Le concept de «valeurs de référence» vient se substituer au terme très répandu il
y a encore quelques années de «valeurs normales» qui est peu précis,
La définition de la «normalité» en biologie humaine étant particulièrement
difficile et ardue.
La notion de «valeurs de référence» vise donc à:
– Standardiser
– harmoniser,
– rendre plus rigoureuse la présentation des résultats,
– la comparaison des résultats d'un laboratoire à l'autre, d'une technique à une autre,
– améliorer l'interprétation des résultats de laboratoire par le clinicien.
VALEURS DE REFERENCE
• Distribution des valeurs obtenues à partir
d’une population donnée « courbe de Gauss »
• 95% des valeurs de la population sont
retrouvées dans l’intervalle : M ± 2 ET
valeurs observées sur une population supposée
en bonne santé, c’est-à-dire sans pathologie
influençant l’examen de laboratoire.
• Les intervalles de références varient en
fonction de la méthodologie ou du
recrutement des populations de référence
Limites de décision
l’interprétation des résultats d’examens de biologie médicale est
complexe.
La mention de Valeurs de référence sur les comptes rendus de
biologie médicale: un « outil » pour les cliniciens.
Les limites de décision recommandées par la communauté
scientifique: soumises aux mêmes contraintes que les Limites de
référence, notamment concernant l’harmonisation et la
standardisation des techniques
Variations biologiques
PERFORMANCE ANALYTIQUE
Précision- justesse
• Méthode analytique idéale:
– Précise
– Exacte
– Sensible
– Spécifique
– Peu couteuse
– Rapide
PERFORMANCE ANALYTIQUE
Précision- justesse
• Précision: reproductibilité d’une méthode analytique
• Justesse: la valeur obtenue est -elle proche de la valeur
réelle et de combien en est-elle éloignée?
PERFORMANCE ANALYTIQUE
Sensibilité - Spécificité
• Détecter les patients malades: Sensibilité
• Exclure les patients non malades: Spécificité
PERFORMANCE ANALYTIQUE
Sensibilité - Spécificité
PERFORMANCE ANALYTIQUE
Sensibilité - Spécificité
• La haute sensibilité est
primordiale dans les situations
de dépistages: les faux positifs
suscitent des investigations
complémentaires
• La haute spécificité est
primordiale dans les essais
thérapeutiques: étudier les
vrais malades pour en tirer des
conclusions valables
PERFORMANCE ANALYTIQUE
Sensibilité - Spécificité
MAIS AUSSI
• On désire connaitre la
probabilité d’une maladie
quand un test est positif!
• Qu’en est-il encore de la
probabilité d’absence de la
maladie quand le test est
négatif!
Intérêt Assurance qualité au laboratoire
• Les laboratoires produisent des résultats d’analyses qui sont
largement utilisés à des fins cliniques ou de santé publique, et les
bénéfices pour la santé dépendent de la justesse de ces analyses et
du rendu des résultats. Si des résultats inexacts sont rendus, les
conséquences peuvent être très graves :
– Traitements inutiles ; complications du traitement
– Traitement inapproprié
– Retard dans l’établissement d’un diagnostic correct
– Analyses supplémentaires et inutiles Ces conséquences entraînent une
augmentation en coût, en temps, en ressources humaines et n’apportent
aucun bénéfice au patient.
Assurance qualité
• Qualité:
Ensemble de propriétés et caractéristiques d’un produit ou d’un service, qui
lui confère l’aptitude à satisfaire des besoins exprimés ou implicites.
• Assurance qualité:
Ensemble des actions préétablies et systématiques nécessaires, pour donner
la confiance appropriée, en ce qu’un produit ou service satisfera aux
exigences données relatives à la qualité.
Assurance qualité
• Contrôle qualité: Ensemble de mesures qui permettent
de vérifier l’exactitude et la précision des analyses de
laboratoire
Interne: journalier, par le personnel du laboratoire CQI
Externe: inter-laboratoires, associations habilitées (Nationales
ou internationales) CIL, EEQ
Assurance qualité
• Certification: C'est l'existence d'un système d'assurance qualité, répondant aux normes
internationales
• Accréditation: Reconnaissance de la compétence et de la maîtrise du processus qualité mis en place,
l'accréditation peut être alors délivrée par des organismes habilités (Maroc: SEMAC, France le COFRAC).
• Référentiels:
Réglementaires:
GBEA (Guide de Bonne Exécution des Analyses: Septembre 2010) réglementation marocaine
Normatifs:
ISO 9001 (certification)
ISO 15189 (Accréditation) version 2022
Système de management de la qualité au LBM
Perspectives – Progrès…
Recherche de nouveaux marqueurs:
– Progrès de l’électronique appliqué, l’informatisation, les
nouvelles technologies et les techniques de biostatistiques
– Mesure globale d’un ensemble de constituants biologique
– Résultat: milliers voire des millions d’informations biologiques
pour un même patient
L’ère post-génomique et ses outils:
– gène (génome) par des puces à ADN ou microarrays
– ARN (transcriptome) par des puces à ADNc
– Protéines (protéome) par spectrométrie de masse et par des
puces protéiques
– Lipides (lipidomes) par des puces lipidiques
– Métabolites (métabolome)…
CONCLUSION
• Une bonne communication et une bonne coordination
entre le prescripteur et le biologiste
permettraient de:
– Assurer le bon déroulement de l’analyse
– Parfaire l'interprétation
– Optimiser les éventuelles prescriptions complémentaires
Améliorer la prise en charge du patient