Les différents niveaux de structures des protéines
Source : Elysia Bioscience
Technopole Bordeaux Montesquieu
Méthodes d’identification et de dosage des protéines
La précipitation : Technique de purification qui consiste à modifier la nature du solvant (addition
de sels neutres ou de solvant organique miscible dans l’eau, modification du pH ou de la
température). Les protéines précipitent et sont ensuite séparées par filtration.
La chromatographie : Technique de séparation des différents constituants d’un mélange. Le
mélange est déposé sur une phase stationnaire (solide ou liquide fixe) puis une phase mobile
(liquide ou gaz) passe dans la colonne et entraine les différents constituants du mélange.
Il existe de nombreuses variantes de cette technique : chromatographie échangeuses d’ions
(utilise le pHi des AA), gel filtration ou HPLC.
Les protéines sont séparées en fonction de leur charge, taille ou leur forme.
Electrophorèse : technique séparant les composés chargés (ionisés) d’un mélange sous l’effet
d’un champ électrique. Le caractère amphotère et le pHi des AA sont utilisés.
source : //[Link]/
source : Probioqual :(Association pour la Promotion
du Contrôle de Qualité en Biologie Médicale)
Technique enzymatique : cette technique repose sur la digestion de la protéine étudiée par des
enzymes spécifiques (Ex : Trypsine, etc…) qui libère progressivement les AA de la protéine et
permet son séquençage.
Colorimétrie : Techniques de dosage des protéines grâce à diverse réaction colorées comme le
biuret.
Immunodétection : Utilisation de la réaction antigène - anticorps pour mettre en évidence et
doser les protéines.
Polarimétrie : Dosage des protéines basé sur leurs capacités à diffuser ou absorber la lumière.