ROYAUME DU MAROC

MINISTERE DE LA SANTE ET DE LA PROTECTION SOCIALE

INSTITUT SUPEREUR DES PROFESSIONS INFIRMIERES
ET TECHNIQUES DE SANTE
FES

Rapport de stage :
Stage en hématologie et en Biochimie
(Hôpital EL Ghassani)

 Réalisée par : Manal Drioueche

 Filière : Technique de santé

 Option : Laboratoire
 Promotion : 2022/2025
 Encadré par : Mr. Amaiach Rachid

 Durée de stage : 4/12/23 – 20/12/23

 Encadrée par : Mme Fouzia DAHMANI
 Lieu de stage : Hôpital El Ghassani

1
 Remerciement :

Tout d’abord, je remercie mon Dieu pour ses

innombrables bienfaits.

Mes remerciements les plus sincères sont adressés à

tous ceux qui nous à aider de près ou de loin à réaliser ce
stage :

-L’équipe pédagogique de l’ISPITS d’avoir intégré la

partie pratique au cours de la formation ;
-Notre coordinateur Mr Rachid Amaiach ;
-Nos encadrants dans le stage : Mme Fouzia Dahmani
et Mr Rachid Benrzouk ;
-L’équipe du CRTS ;
- L’équipe du laboratoire de L’hôpital El Ghassani.

2
 Table de matières :

I. Introduction

II. Présentation du Laboratoire de l’Hôpital El

Ghassani

III. Activités Réalisés au niveau de L’hôpital El

Ghassani

1-Salle de prélèvement
2-Service de biochimie
3- Service d’Hématologie

IV. Difficultés confrontés au niveau de stage

V. Conclusion

3
 I. Introduction

La biochimie, en explorant les liquides biologiques tels que le sang, la lymphe et le

liquide céphalorachidien, dévoile les secrets moléculaires de la vie. Ces liquides
transportent une multitude de molécules biochimiques, telles que des protéines, des
hormones, des nutriments et des déchets, jouant un rôle essentiel dans le métabolisme, la
régulation et la communication cellulaire. L'analyse biochimique de ces liquides permet de
diagnostiquer des maladies, de surveiller la santé métabolique et de comprendre les
mécanismes sous-jacents à diverses conditions médicales. En examinant la composition
moléculaire de ces liquides, la biochimie offre une perspective unique sur le
fonctionnement interne des organismes vivants, ouvrant la voie à des avancées
significatives dans la médecine et la recherche biomédicale.

L'hématologie est la branche de la médecine qui se concentre sur l'étude du sang. Elle
examine les cellules sanguines et les composants du plasma pour diagnostiquer et traiter
des conditions telles que l'anémie, la leucémie et les troubles de coagulation. Les tests
hématologiques sont essentiels pour évaluer la santé du système circulatoire et guider le
traitement des patients. En résumé, l'hématologie est cruciale pour comprendre et traiter
un large éventail de maladies liées au sang.

Afin de lier ce que nous avons vu au niveau de la formation théorique à l’ISPITS

surtout dans les deux modules de biochimie clinique et d’hématologie, nous avons réalisé
un stage au niveau de laboratoire de l’hôpital EL GHASSANI, pour s’adapter avec le milieu
de professionnalisation et pour maitriser aussi les différentes analyses et à quoi sert
chacune d’eux.

4
II. Présentation du laboratoire de l’hôpital El GHASSANI

1-Présentation des locaux présents dans le laboratoire :

Le laboratoire comprend 3 services :

Biochimie Hématologie Sérologie

Le laboratoire est composé en deux étages, chacune comporte des salles

 Au niveau de la cave : il y a où se fait la distillation de l’eau et des chambres de

conservation de matériel.
 Dans le premier étage : on trouve le laboratoire de biochimie d’hématologie et
de sérologie. Il y a aussi une salle de conservation des réactifs et des tubes. Et un
bureau de major de service et un deuxième bureau pour le médecin. On trouve
aussi une toilette et une salle de repos pour les techniciens.

5
 2- Personnels du laboratoire :

-Le laboratoire est sous la présidence d’un médecin biologiste chef.

-Un autre médecin biologiste qui s’occupe de la signature et l’interprétation des résultats
et voir s’ils peuvent être délivrés ou non.
-Un major de service.
-Des techniciens de laboratoire qui s’occupe des laboratoires de biochimie et
d’hématologie et un qui s’occupe de la garde et ils font bien sûr un changement de tour.
-Une secrétaire qui s’occupe de la saisie des noms et des services où ils sont hospitalisé
(urgence ; maternité ; réanimation anesthésie…).
-Et une femme de ménage qui s’occupe du nettoyage des salles…

III -Les activités réalisées au niveau de stage :

Toute analyse doit passer en trois phases :

Phase pré-analytique

C’est la première phase de l’analyse médicale. Elle est très importante et elle comprend :
• Prise en charge des prescriptions et des patients
• Exécution des prélèvements
• Transport et conditions de conservation
• Enregistrements
Pendant cette phase, des opérations peuvent fausser les résultats comme
L’utilisation d’un Tube avec un mauvais anticoagulant ou la présence d’une hémolyse.

Prise en charge des prescriptions et des patients :

_ Voir les analyses demandées
_ Poser des questions pour savoir : le nom, le prénom, L’état du patient est ce qu’il a
Peur ou non, de quoi il souffre, est ce qu’il est en jeun ou nom .... Etc.
_La préparation du matériel pour le prélèvement.

Exécution des prélèvements

_Pour la plupart des gens, cette première étape se déroule dans une salle de
Prélèvement où une infirmière extrait un échantillon du sang du patient dans des
Tubes qui ont été préparés pour subir des tests précis.

6
 Tubes utilisés

▪ Tube rouge sec sans anticoagulant ou tube sec + activateur de coagulation

(silice ou Thrombine) analyses de chimie, d’immunologie et hormonologie
(test de grossesse) + Tube pour prélever le sérum.

▪ Tube bleu contient du citrate qui bloque de façon réversible le calcium qui
est utilisé À toute étape de la coagulation. Concentration = 9 unités de sang
pour 1 unité de Citrate. Dosage des facteurs de coagulations (TCA, TP,
fibrinogène)

▪ Tube violet contient de l’EDTA qui altère le moins la morphologie des

cellules. Numération de formule sanguine (NFS), groupe sanguin.

▪ Tube vert : contient l’héparinate de lithium il sert au dosage de la plupart des

molécules en biochimie.

▪ Tube noir même contenu que le tube bleu mais avec un volume de 1 unité
d’anticoagulant Pour 4 unités de sang. Analyse de la vitesse de sédimentation.

7
Transport et conservation des échantillons prélevés :

Une fois les prélèvements sont réalisés, dans un portoir on conserve les
échantillons jusqu’ ils sont transporter dans un sac
conservateur avec le port de la fiche contenant les analyses qu’on doit réaliser pour
chaque patient.

Enregistrement :

L’enregistrement se fait dans un registre juste pour les tubes des patients
Hospitalisés.
Dans ce registre la secrétaire saisie le nom, le prénom, le service où le patient est
hospitalisé, le numéro ou le code du patient.

8
 Triage
Au niveau de cette étape on trie les échantillons par couleur ceux qui
vont subir des tests biochimique et ceux pour les tests d’hématologie.
En séparant les feuilles de demande d’analyse ceux d’hématologie et
ceux pour la biochimie. En posant

Chaque tube sur la feuille qu’il le correspond et en énumérant les

tubes et les feuilles pour faciliter la tâche parce que au niveau de ce
laboratoire ils ne travaillent pas par les codes à barre.

Phase analytique

❖ Elle débute par :

a) La maintenance :
• Quotidienne
• Hebdomadaire
• Mensuel
Dont on fait inspecter les aiguilles et les consommables.
b) Lancement du contrôle :
En utilisant le blanc.
c) Calibration :
Elle ne se fait pas toujours, juste au début de la semaine par exemple.
Elle consiste à donner un calibrateur qui a une valeur déterminée (sorte de
référence).

9
 NB : la calibration se fait par exemple au cas où le contrôle n’a pas donner de
valeurs justes par exemple à cause de la fibrine qui reste collé dans les aiguilles, et
peut alors fausser les résultats.
d) Contrôle qualité :
Donner une valeur déterminée et voir par conséquent le résultat affiché par
l’automate.
e) L’arrivée des tubes :
• Centrifugation
• Faire entrer les coordonnés des patients et leurs paramètres dans l’ordinateur

f) Validation technique par les techniciens de laboratoire :

g) Validation biologique par le médecin biologiste :

 Service de biochimie

Définition

La biochimie est la discipline scientifique qui explore les processus chimiques

et les molécules impliqués dans les phénomènes vitaux des organismes vivants. En
se concentrant sur la structure, la fonction et l'interaction des composés biologiques
tels que les protéines, les acides nucléiques, les lipides et les glucides, la biochimie
cherche à comprendre les mécanismes fondamentaux qui sous-tendent la vie.

Les différents bilans

-Bilan glucidique
Le bilan glucidique mesure la glycémie, c’est-à-dire le niveau de sucre présent dans
le sang.
• La glycémie est régulée à partir du pancréas qui sécrète deux hormones
intervenant dans la fonction glycémique :
- l’insuline (hormone hypoglycémiante)
- le glucagon (hormone hyperglycémiant)
VN :
0.70 - 1.10 g/l

10
 -Bilan protéique

➢ LES PROTIDES TOTAUX :

Les protides totaux, que l'on nomme également protidémie ou protéinémie, désignent
la concentration de protéines dans le plasma sanguin. Ces protéines sont représentées
par l'albumine et les différentes globulines, parmi lesquelles les alpha, les bêta et les
gammaglobulines.
VN : 60 – 80 g/L

➢ BILIRIBUNE :

La bilirubine est un pigment de couleur jaune présent dans la bile et en faible quantité
dans le sang. Une accumulation de bilirubine dans l’organisme se traduit par une
jaunisse. Une bilirubine élevée peut être le signe d’une hépatite.
VN : 0 – 10 mg/L

➢ La CRP (C-réactive protéine) :

La protéine C-Réactive (ou CRP) est une protéine synthétisée par le foie à la suite d'une
inflammation de l'organisme. Elle apparaît dans les six heures suivant l'agression, et
disparaît presque aussitôt après son éradication.
VN : 0.0 – 6.0 mg/L

➢ La CREATININE :

La créatinine est issue de la dégradation de la créatine, elle-même synthétisée par le

foie et stockée dans les muscles où elle joue un rôle important dans la production
d’énergie. L’utilisation de créatine par les muscles produit des déchets, le plus notable
étant la créatinine. Celle-ci est transportée par le sang, filtrée par les reins et éliminée
dans les urines. Ainsi, comparer le niveau de créatinine dans le sang à la quantité de
créatinine évacuée par les urines permet d'évaluer l'activité des reins.
VN : 6 – 13 g/L

11
➢ UREE :

L'urée est un déchet azoté qui provient de la dégradation des protéines par le foie.
Filtrée par les reins, l'urée est ensuite éliminée dans les urines. Mesurer les taux
sanguins et urinaires d'urée permet d'identifier un éventuel dysfonctionnement des
reins.
VN : 0.10 – 0.50 g/L

-Bilan lipidique :

➢ CHOLESTEROL TOTAL :
Le cholestérol est un lipide (corps gras) dont le rôle est essentiel dans l’organisme car il
sert à la fabrication des hormones produites par les glandes génitales et surrénales. Il
est pour partie fabriqué par le foie, le reste provient de notre alimentation.
VN :
De 4,1 à 6,2 mmol/l ou de 1,6 à 2,4 g/l.
Valeurs dépendantes de l’âge et du sexe (plus bas chez la femme), du rythme
nycthéméral (plus bas la nuit), des saisons (plus élevé en hiver), du régime alimentaire.

On distingue deux types de cholestérol :

➢ LE HDL-CHOLESTÉROL :

Le HDL ou "bon cholestérol" qui élimine le cholestérol des artères et l’entraine vers le
foie pour être détruit.
VN :
– Homme : de 0,4 à 0,5 g/l (1 à 1,3 mmol/l).
– Femme : de 0,5 à 0,6 g/l (1,3 à 1,6 mmol/l).

➢ LE LDL-CHOLESTÉROL :

Le LDL ou "mauvais cholestérol" se dépose sur les parois des vaisseaux sanguins pour
former des plaques d’athérome constituant ainsi un facteur de risque cardiovasculaire.
VN :
Homme : 2.84 - 4.13 mmol/l soit 1.10 - 1.60 g/l
Femme : 2.58 - 3.87 mmol/l soit 1.00 - 1.50 g/l

12
➢ LES TRIGLYCÉRIDES :

Les triglycérides sont apportés par l’alimentation et stockés dans les cellules adipeuses
pour servir de réserve d’énergie à l’organisme. Les résultats normaux varient en
fonction de l’âge.
VN :
– Homme : 0,5-2 mmol/l, soit 0,45-1,75 g/l.
– Femme : 0,40-1,60 mmol/l, soit 0,35-1,40 g/l.
– Valeurs plus faibles chez le nouveau-né et chez le sujet âgé.

Le bilan hydro-électrolytique « ionogramme » :

L’ionogramme sanguin est un test extrêmement commun - et l’un des plus demandés,
qui correspond au dosage des principaux constituants ioniques du sang (ou
électrolytes). A savoir le sodium (Na), le potassium (K), le calcium (Ca), le chlore (Cl), le
magnésium (Mg), les bicarbonates (CO3).
VN :
Voilà les valeurs dites normales des principaux constituants ioniques du sang :
• Sodium (natrémie) : 135 - 145 mmol/l (milli moles par litre)
• Potassium (kaliémie) : 3,5 - 4,5 mmol/l
• Calcium (calcémie) : 2,2 - 2,6 mmol/l
• Chlore (chlorémie) : 95 - 105 mmol/l
• Magnésium : 0,7 - 1 mmol/l
• Bicarbonates : 23 - 27 mmol/l
Notons que ces valeurs peuvent varier selon les laboratoires qui effectuent les
analyses. En plus, elles varient légèrement en fonction de l’âge.

 Service d’hématologie

Dans ce laboratoire 4 tests sont réalisés :

• La Numération Formule Sanguine NFS
• Taux Prothrombine
• Temps De Céphaline Kaolin
• La Vitesse De Sédimentation VS

13
La Numération Formule Sanguine NFS

La Numération Formule Sanguine (NFS) est un test sanguin couramment réalisé en

médecine. Il évalue la composition cellulaire du sang, comprenant les globules rouges,
les globules blancs et les plaquettes. Les globules rouges transportent l'oxygène, les
globules blancs sont impliqués dans le système immunitaire, et les plaquettes
contribuent à la coagulation sanguine. La NFS fournit des informations essentielles sur
la santé globale du patient, permettant de diagnostiquer diverses conditions telles que
l'anémie, les infections ou les troubles de la coagulation. Les résultats de la NFS sont
souvent interprétés en conjonction avec d'autres tests pour établir un diagnostic
complet.

Après le triage et la numération des tubes on passe à la saisie.

On saisit le nom le prénom et le numéro du tube puis on passe à l’arrangement
de tube dans les portoirs .puis on les lance dans l’automate pour être analysée.

14
Exemple d’un résultat obtenu

-Taux de prothrombine :

Le taux de Prothrombine (TP), ou temps de Quick, est un examen qui évalue une
partie de la coagulation sanguine. Dosé pour surveiller l’activité d’un traitement
anticoagulant ou des troubles hémorragiques pour explorer la coagulation
sanguine.
Un Taux de prothrombine normal doit être supérieur à 70%
S’il y a une baisse plusieurs interprétations sont localisées par exemple :
• • Cirrhose
• • Traitement anticoagulant
• • Hépatite
• • Insuffisance hépatique
• • Déficit en facteur de coagulation et en vitamine k
• • … Etc.

-Temps de CEPHALINE KAOLIN :

Le Temps de Céphaline Kaolin (TCK), ou Temps de Céphaline Activée (TCA),
évalue le temps de coagulation d’un échantillon de plasma sanguin en présence
de céphaline et préalablement débarrassé de ses plaquettes sanguines. Cette
analyse s’inscrit dans le cadre du bilan de l’hémostase ou de la surveillance des
patients sous anticoagulants.

15
Alors la réalisation de ce test se fait après centrifugation des tubes citratés
contenant le sang dans 4000 tours pendant 15 min afin de dépourvoir le sang
des plaquettes.

Ces deux tests se font dans la même automate

Alors après centrifugation on passe à la saisie dans l’automate et on remplit les

racks ou les portoirs et on lance.
Après 20 min les résultats sont prêts.

-La vitesse de sédimentation :

La vitesse de sédimentation est un test qui mesure le taux de sédimentation, ou
chute libre des globules rouges (hématies) dans un échantillon de sang laissé
dans un tube vertical, au bout d’une heure. Cette vitesse dépend de la
concentration des protéines .et elle varie notamment dans l’inflammation
Cette vitesse est réalisé sur un sang total citraté “dans un tube noir “

Etapes suivi pour la réalisation de cette analyse :

En premier lieu on fait la saisie dans un registre

16
Puis on suit la technique de la réalisation qui se pose sur l’utilisation d’un tube
westergreen qui doit être posé verticalement à l’aide d’un support spécial
La lecture se fait au bout d’une heure

Phase post-analytique

La validation biologique
Lorsque les résultats sont fiables et il y a pas d’erreur le médecin signe pour
qu’ils peuvent être délivrées aux patient
La conservation des échantillons
Une Fois l’analyse est réalisée et le médecin biologiste valide les résultats on
passe à la conservation des échantillons dans un réfrigérateur pendant trois à 5
jours.

17
IV- Difficultés confrontés au niveau de stage

Les Difficultés que j’ai rencontrées au niveau de stage :

_ L’absence d’utilisation des tests manuels
_ La difficulté d’interpréter quelques paramètres
_ La période de stage est très courte (on n’a pas vu le laboratoire de sérologie)

Recommandation
-Elargir la période de stage
-Bien veillez de l’utilisation de la phase manuelle pour que l’étudiant puisse
savoir qu’est ce qui se passe dans l’automate parce que l’explication théorique
ne suffit pas.

V - Conclusion

Le stage que j’ai effectué au sein du laboratoire d’analyses médicales de

l’hôpital El Ghassani a été très enrichissant, il m’a permis tout de montrer mes
capacités à s’intégrer dans un travail d’équipe, il m’a offert une vision proche de
la réalité du monde de la santé.

Ce stage m’a également permis d’améliorer mes connaissances pratiques et de

faire le lien entre la théorie acquise à l’institut et l’application dans le milieu
professionnel. Il m’a permis ainsi de prendre connaissance des protocoles
expérimentaux pour la réalisation de différentes analyses.

Finalement je suis très satisfaite de ma période du stage au niveau de de

l’hôpital El Ghassani, malgré qu’on n’a pas pu réaliser tous les objectifs.

18
 Rapport de stage :
Centre régional de transfusion sanguine

Durée de stage : 21/12/2023- 28/12/2023

Encadré par : Monsieur Rachid Benrzouk

19
 Table de matières

Introduction

I. Présentation de centre de transfusion sanguine

1. Locaux
2. Personnels

II. Activités du CRTS

1. Circuit des donneurs :

• Accueil et Salle de consultation pré don ou service médical
• Salle de prélèvement

2. Circuit de poche et de qualification biologique de don de sang :

• laboratoire de production « centrifugation »
• laboratoire de « production séparation et étiquetage »
• laboratoire sérologie
• laboratoire d'immunohématologie donneur
• laboratoire d'immunohématologie receveur

Conclusion

20
 Liste des abréviations :

 RAI : Recherche des agglutinines irrégulières

 PS : plaquette sanguine
 CRTS : Centre Régional de Transfusion Sanguine
 CGR : concentration des globules rouges
 PFC : plasma frais congelé
 Ac : Anticorps
 Ag : Antigène
 AGH : anti-globuline humain
 Rh : Rhésus
 SAG-Mannitol : Saline adénine glucose mannitol
 CPS : Concentrés de la plaquette standard

21
 Introduction

Un centre de transfusion sanguine est un établissement médical qui collecte,

traite, stocke et distribue le sang et ses composants. Ces centres sont essentiels pour
assurer un approvisionnement adéquat en sang pour les patients nécessitant des
transfusions, notamment lors de chirurgies, de traitements contre le cancer, ou
d'urgences médicales. Ils organisent des collectes de sang, effectuent des tests de
compatibilité, stockent les produits sanguins, et les distribuent aux hôpitaux en
fonction des besoins. En outre, ils jouent un rôle dans l'éducation du public sur
l'importance du don de sang volontaire.

Le don de sang est un acte volontaire où une personne donne une partie de son
sang pour aider les patients nécessitant des transfusions. C'est un geste altruiste qui
peut sauver des vies. Les donneurs sont souvent des volontaires, et le processus est
sûr avec des contrôles réguliers pour assurer la sécurité du donneur et du receveur. Le
don de sang est crucial pour traiter diverses conditions médicales, et les donneurs
peuvent contribuer à maintenir des stocks suffisants en faisant des dons réguliers.

I. Présentation de centre de transfusion sanguine

1-Locaux
Le CRTG de Fès est composé de :
 Salle d’accueil
 Salle de consultation
 Salle de prélèvement
 Salle de repos ou Cafétéria
 Laboratoires
 Salle de réunion

22
 Bureau de directeur de centre
 Chambre froide
2-Personnels

Son staff est composé de :

 Un directeur de CRTS
 Un directeur adjoint
 Un responsable d’assurance de qualité
 Un infirmier chef
 Un responsable de formation continue
 Un responsable de métrologie
 Un responsable de promotion du don du sang
 Un responsable d’hémovigilance
 Un responsable de distribution
 Un responsable d’hygiène et de sécurité
 Un responsable de sérologie
 Un responsable de contrôle de qualité
 Deux responsables de production : un pour séparation et l’autre pour
validation
 Un responsable d’immunohématologie receveurs
 Un responsable d’immunohématologie donneurs

De plus les personnes qui viennent au centre pour donner le sang chaque CRTS
fait des collectes dans les établissements ou bien par des caravanes afin de
permettre la stabilité d’un stock capable de garantir les besoins des malades
pour sept jours au moins.

II. Activités de CRTS

1-Circuits des donneurs
• Accueil et Salle de consultation pré don ou service médical

Réception et L'accueil et l'orientation des donneurs, l'enregistrement des

données nécessaires (nom, prénom, âge, CNE, la date...) puis, le donneur passe
chez le médecin pour le contrôle de sa situation sanitaire. Si tout est bien et le
donneur est apte...

23
 .Salle de consultation pré don ou service médical:

Un médecin qui permet d'évaluer la capacité de la personne pour donner le

sang en se basent sur des critères de base : l'âge (18-65ans), poids (il doit
dépasser 50 Kg), santé (exclus certains maladie), ainsi que pas de don du sang
pendant 4 mois chez la femme et 3 mois chez l'homme interdit aussi pour les
femmes enceintes et toute femme en période de menstruation, la pression
artérielle...
Chaque personne capable de donner le sang reçoit une série de même code
barre puis de placer vers la salle de prélèvement.

24
 • Salle de prélèvement

Le donneur entre dans la salle de prélèvement prenant dans sa main la feuille

des informations donné par le secrétaire et un petit rouleau des étiquettes donné
par le médecin par lesquels l’infirmier préleveur va étiqueter les poches et les tubes.

Le prélèvement dans le CRTS est un acte qui permet de prélever :

400 ml à 450 ml du Sang total dans une poche quadruple ; deux prélèvements en
deux tubes mauves.

25
2. Circuit de poche et de qualification biologique de don de sang :

Le sang prélevé n'est jamais transfusé directement à un patient. Il suit un

parcours selon des procédures extrêmement rigoureuses. Ainsi, les échantillons
sanguins recueillis dans les tubes-échantillons lors du prélèvement sont soumis
à une série d'analyses. Détermine notamment le groupe sanguin qui permet
d'établir la carte de donneur de sang qu'il est conseillé de porter constamment
sur soi
Parallèlement :
➤ La poche passe au service de séparation
➤ Un tube passe au service de sérologie
➤ Un tube passe au service d'immuno-hématologie
-Laboratoire de séparation

A partir du sang ou de ses composés prélevés chez les donneurs de sang

volontaires, peuvent être préparés des produits sanguins labiles à usage
thérapeutiques qui sont :

Concentré de globule rouge (CGR).

Concentré plaquettaire standard (CPS).
Plasma frais congelé (PFC).

26
-Laboratoire de production « étiquetage »

❑ Après que les poches sont séparées on passe à l’étiquetage pour contrôler les
résultats de la sérologie et celles de l’hématologie

❑ L’étiquetage consiste à identifier le groupe sanguin de chaque poche avec

son système rhésus

❑ Il y a «trois types d’étiquette : étiquette pour le culot plaquettaire, la

deuxième pour le concentré de globules rouges et la troisième pour le plasma
frais congelé.

❑ Dans cette salle le contrôle se fait par la réalisation du groupage ABO

Figure : les réactifs anti-A ; anti-B ; anti-AB ; anti-D

27
Groupage en plaques
o Poser une goutte de sang totale sur la plaque
o Poser une goutte des réactifs (anti-B, anti-A, anti-D, anti-AB)
o Mélanger les deux gouttes (sang+ réactif)
o Agiter la plaque
o Observer l’agglutination
o Interpréter les résultats

-Laboratoire de sérologie
Les tests réalisés sont :
_Test de VIH
_Test de HCV et HBs
_Test de syphilis (TPHA)

VIH ; HCV et HBs

Pour le dépistage de VIH ; HCV et HBs on utilise l’automate Quadriga
BeFree qu’il fournit un traitement entièrement automatisé des plaques de
micro titration (MTP) et aide à détecter les maladies infectieuses telles
que l’hépatite ; VIH et autre

28
 Le système QUADRIGA BEFREE avec dosage Enzygnost(ELISA)
permet le dépistage des donneurs de sang et les banques de sang

✓ Préparer les tubes à tester, les microplaques, les réactifs « Bio Rad»
et tout le matériel nécessaire
✓ Le contrôle de l’appareil
✓ Préparer les réactifs nécessaire, un contrôle Ag seulement pour
hépatite B, et contrôle Ag et Ac pour les autres tests
✓ Met les échantillons déjà enregistré dans des racks, et les
microplaques test dans leur position
✓ Présentation des résultats après une heure

29
 Syphilis(TPHA)

Il consiste à observer l’hémagglutination de globules rouges

animaux qui ont absorbé des antigènes du tréponème de
Nicholas.
Grace à plusieurs dilutions on peut déterminer à quel stade se
trouve la syphilis du patient.
Le dépistage de la syphilis se fait manuellement on réparti une
microplaque en séries ; chaque série formé de trois cupules

Cupule 1 190 μL de tampon

10 μL de sérum

Cupule 2 25 μL de solution A
75 μL de cellules de contrôle

Cupule 3 25 μL de solution A
75 μL de cellules tests

_Cellules de contrôle : confirmer la négativité du test

_Cellules tests : confirmer la positivité du test
NB : on laisse la plaque incubée pendant une heure à une température
ambiante
Résultats
-Les résultats sont imprimés sur des papiers à l’aide d’une imprimante
-Encas d’un test positif on refait un deuxième test pour la confirmation

30
-Laboratoire d’immuno-hématologie donneur

Un tube des prélèvements du sang réalisé dans la salle de prélèvement est

transporté vers cette salle où il va subir plusieurs tests qui sont :
Le groupage
Phenotypage
RAI
Hémolysines
A l’aide de cette automate (QWALYS 3) on réalise les tests cités

31
 Groupage et phénotypage
Les tests de groupage et Phenotypage consiste à chercher à l’aide des réactifs
contenant des anticorps anti A et Anti B et Anti AB et Anti C, Anti D,
Anti c, Anti E, Anti e, Anti k. La réaction entre antigène anticorps produit une
réaction d’agglutination.
La visualisation des résultats se fait à l’œil nue. Ce test se fait par les deux
méthodes Beth Vincent et simonin.

Recherche des agglutinines irréguliers RAI : “coombs indirect”

Le test RAI consiste à chercher dans le sérum du donneur des anticorps qui ont
un pouvoir hémolytique
Ce test est réalisé sur carte gel (le gel est AGH : ANTIGLOBULINES)
On prend une carte gel dans laquelle il y’a déjà un gel AGH
On réalise une dilution des hématies O1, O2, O3 de 8 pour 1000
On réalise un témoin positif et négatif pour le contrôle
On ajoute 50 µl des hématies diluées et 20 µl de sérum du malade
Puis on incube pendant 15min à une température de 37 C

32
 Puis centrifugation pendant 10 min
Puis la lecture sur carte gel

-Laboratoire d’immuno-hématologie receveur

Au niveau de ce laboratoire plusieurs taches seront réalisées :
_ Conservation des plasmas, plaquettes et les globules rouges
_Réalisation des smatch.
_ Système A.B.O sur microplaque
_Système Rhésus
_ Phénotypage

Le système ABO est réalisé par deux méthodes : Beth Vincent et simonin

- Technique de Beth Vincent :

On utilise des sérums tests anti A, anti B et anti AB. Dans un tube et sur une
plaque ou sur microplaques, on mélange une goutte de chacun des sérums tests
avec une goutte des globules rouges à tester. Une agglutination des globules
visible à l’œil nu s’observe lorsque l’antigène Correspondant caractérisant le
groupe, est présent dans les hématies.
-Lors de l’utilisation des microplaques, on dilue une goutte de sang par le sérum
salé puis on ajoute une goutte de sang dilué dans les puits contenant les
réactifs.

33
-Technique de Simonin
On utilise les GR tests A et B avec le sérum à tester. Dans des tubes et sur
plaque, on mélange une goutte de suspension des GR tests A et B et une goutte
du sérum à tester. Une agglutination des GR visible à l’œil nu s’observe quand
l’anticorps correspondant est présent dans le sérum.

-Réalisation des smatch :

Cette feuille est donné avec les poches afin que le médecin qui va faire la
transfusion s’assure du groupage du sang de la poche et celui du patient avant
de réaliser la transfusion.

34
 Conclusion

Je suis satisfaite de ma période du stage au niveau du Centre

Régional de la Transfusion Sanguine malgré qu’on n’ait pas pu
réaliser tous les objectifs.

Ce stage est une occasion d’appliquer ma formation théorique,

ainsi d’acquérir plusieurs informations, connaissances et certaines
expériences que nous n’avons pas eu l’occasion d’apprendre en
théorie et de me rapprocher beaucoup plus de la vie professionnelle.

Il faut même noter que Cette formation pratique était un

champ riche et plein d’informations, de techniques et une chance
pour apprendre la notion de responsabilité.

35
36