(Cystine Lactose
Electrolyte)
Réalisé par Hassan Bourri
Réalisé par Hassan Bourri 1
Gélose CLED
Le milieu CLED (Cystine Lactose Electrolyte Deficient) possède les caractéristiques
suivantes :
• milieu non sélectif
• présence de lactose
• présence d'un indicateur coloré : le bleu de bromothymol
Ce milieu permet donc d'identifier 2 types de colonies :
❖ colonies jaunes : bactéries non exigeantes lactose + : Escherichia, Citrobacter,
Enterobacter, Klebsiella ...
❖ colonies bleu vert : bactéries non exigeantes lactose - : Serratia, Salmonella, Shigella,
Proteus, Providencia, Yersinia, Pseudomonas, Staphylococcus, Enterococcus ...
Cette gélose est principalement utilisée pour l'ensemencement des urines.
La gélose Cled (Cystine Lactose Electrolyte Deficient) est un milieu de culture
différentielle, non inhibiteur, utilisée pour l’isolement, la numération et la différenciation des
micro-organismes urinaires. Il favorise la croissance des agents pathogènes urinaires, mais
empêche l'essaimage excessif des espèces de Proteus en raison de son manque d'électrolytes.
Le milieu permet une détermination quantitative des pathogènes urinaires dont Proteus
lorsque des anses calibrées sont utilisées pour l'inoculation.
Composition gélose Cled
Ingrédients gramme/litre Ingrédients gramme/litre
Peptone équilibrée 4.0 g Tryptone 4.0 g
Extrait de boeuf 3.0 g Lactose 10.0 g
L-Cystine 0.128 g Bleu de bromothymol 0.02 g
Agar 15.0 g PH 7.3 +/- 0.2
Le milieu contient de la cystine, du lactose, du bleu de bromothymol et est déficient
en électrolytes.
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• La cystine est ajoutée au profit des organismes qui ont un besoin spécifique en cystine.
Elle favorise la croissance des coliformes.
• Le lactose est inclus pour fournir une source d'énergie aux organismes capables de
l'utiliser par un mécanisme de fermentation.
• Le bleu de bromothymol est l'indicateur utilisé dans la gélose, il vire au jaune en cas
de production d'acide lors de la fermentation du lactose ou vire au bleu foncé en cas
d'alcalinisation. Les bactéries lactose-positives forment des colonies jaunes. Les
bactéries qui décarboxylent la L-cystine provoquent une réaction alcaline et forment des
colonies bleu foncé
• La déficience en électrolytes réduit l’envahissement du milieu par les Proteus.
Organismes Croissance
Escherichia coli, Citrobacte Colonies jaunes d'or, opaques, entourées d'un halo jaune
Enterobacter, Klebsiella Colonies jaunes à bleu blanchâtre, souvent mucoïdes ; milieu jaunâtre
Proteus, Serratia Colonies transparentes, translucides, entourées d'un halo bleu
Pseudomonas aeruginosa Colonies vertes avec une surface mate typique et une périphérie rugueuse
Streptocoques Petites colonies opaques, jaune pâle
Staphylococcus epidermidis Très petites colonies opaques, jaunes
Entérococcus faecalis var. Petites colonies jaunes d'environ 0,5 mm de diamètre
zymogenes
Shigella sonnei Colonies Bleues
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Les colonies jaunes sont lactose + Les colonies vertes/bleues sont lactose –
Culture d’Escherichia coli 24h à 37°C Culture de Providencia rettgeri 24h à 37°C
Culture
Les colonies vertes/bleues sont lactose – d’Enterococcus faecalis
Culture de Providencia rettgeri 24h à 37°C sur gélose CLED 24h à 37°C
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Culture de Klebsiella oxytoca Culture de Proteus vulgaris sur gélose
sur gélose CLED 24h à 37°C CLED après 24h à 37°C
Culture de Pseudomonas aeruginosa
sur gélose CLED 24h à 37°C
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