Extraction de polyphénols de Combretum Micranthum
Extraction de polyphénols de Combretum Micranthum
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Résumé
Afin d’évaluer la meilleure méthode d’extraction aqueuse des polyphénols totaux, trois méthodes d’extraction
à savoir la décoction, la macération et l’infusion ont était testées. L’analyse de la variance (ANOVA) montre
des différences significatives (p ˂ 0,05) sur différents paramètres évalués. Les résultats révèlent que la
décoction à 100 °C/ 70 mn donne la plus grande concentration en polyphénols totaux extraite. Soit
5,703 ± 0,123 [Link].100 g-1 en décoction, 1,32 ± 0,04 g AG.100 g-1 en infusion (100 °C/ 20 mn) et 0,26 ± 0,01
[Link].100 g-1 en 48 h de macération à 25 ± 4 °C. L’intensité de la coloration jaune en décoction est 2.45 fois
supérieure à celle obtenue en infusion à 100 °C et 3,49 fois pour la macération. L’intensité de la coloration
rouge est 9 fois supérieure en décoction qu’en macération, et 1,2 fois en infusion. La conductivité augmente
de façon significative avec les températures d’infusion, elle passe de 815,4 ± 1,7 µ[Link]-1 à 50 °C à
978,01 ± 0,65 µ[Link]-1 à 100 °C. Une classification avec l’utilisation du logiciel R version 3.2.4. 2017 a permis
de différencier les méthodes d’extractions en fonction de la quantité maximale de polyphénols totaux extraite
dans les conditions d’essais.
Mots-clés : infusion, décoction, macération, polyphénols, extraction, coloration.
Abstract
Effect of maceration, infusion and decoction on the aqueous extraction of polyphenols
from dry leaves of Combretum Micranthum
In order to evaluate the best method of aqueous extraction of total polyphenols, three methods of extraction
namely decoction and maceration and infusion were tested. The analysis of variance (ANOVA) shows
significant differences (p ˂ 0.05) on different parameters evaluated. The results reveal that the decoction at
100°C/70 min gives the highest concentration of total polyphenols extracted. That is 5.703 ± (0.123) [Link].100
g-1 in decoction, 1.32 ± (0.04) g AG.100 g-1 in infusion (100°C/ 20 min) and 0.26 ± (0.01) [Link].100 g-1 in 48 h
maceration at 25 ± (4°C). The intensity of the yellow color in decoction is 2.45 times greater than that
obtained in infusion at 100°C and 3.49 times for maceration. The intensity of the red color is 9 times greater
in decoction than in maceration, and 1.2 times in infusion. The conductivity increases significantly with the
infusion temperatures, it goes from 815.4 ± (1.7) µ[Link]-1 at 50 °C to 978.01 ± (0.65) µ[Link]-1 at 100 °C. A
classification with the use of R software version 3.2.4. 2017 made it possible to differentiate the extraction
methods according to the maximum quantity of total polyphenols extracted under the test conditions.
Keywords : infusion, decoction, maceration, polyphenols, extraction, coloring.
1. Introduction
En Afrique de l’Ouest, Combretum micranthum est une plante très utilisée en médecine traditionnelle. Selon
l’UNICEF (2004), près de 11 millions d'enfants meurent chaque année dans la plupart des pays d’Afrique
tropicale, dont environ 70 % sont dus au paludisme et à la diarrhée [1]. La décoction de cette plante est
consommée comme boisson pour traiter le paludisme [2]. Appeler kinkeliba au Sénégal, c’est une plante qui
pousse dans la plupart les pays du Sahel (Burkina Faso, Guinée, Sénégal, Mali, Niger, Guinée-Bissau). Cette
plante est retrouvée également en Côte d'Ivoire et au Soudan [3, 4]. Diallo et al. (2001) ont rapporté que les
propriétés diurétiques de Combretum micranthum s’expliquent par la présence de nitrate de potassium et
divers acides-alcools [5]. Dans le traitement de l’insuffisance hépatique, de la constipation, des bronchites et
de la toux, les feuilles sont utilisées en infusion à 10 %. Selon [6], la poudre de fruits est employée pour
traiter les dermatoses suintantes des enfants (typeimpétigo). Taura et al. (2009) ont mis en évidence les
activités antibactériennes et antifongiques des extraits d’organe de Combretum micranthum [7]. L’effet
antidiabétique des feuilles de Combretum micranthum est révélé par CHIKA et al. (2010). Au Sénégal, les
feuilles séchées sont vendues attachées en rameau et ficelées [8]. Plusieurs auteurs ont relatés des
mécanismes d’actions thérapeutiques des composés phénoliques contre le cancer, inflammation, paludisme
et maladies cardiovasculaires [9 - 12]. Les composés phénoliques contenus dans les feuilles de kinkéliba
peuvent se comporter comme des antioxydants en éteignant radicaux des systèmes biologiques avec leur
cycle phénolique et leurs multiples fractions hydroxyle. Les composés qui présentent une telle activité antioxydant
peuvent également présenter des propriétés anti-activité inflammatoire [13, 14]. Les polyphénols sont le résultat du
métabolisme secondaire des plantes à travers des voies métaboliques fondamentales [15, 16]. Selon [16], ces
métabolites secondaires sont impliqués dans la défense des plantes contre le rayonnement ultraviolet et contre les
agressions d’agents pathogènes [16]. Le terme « polyphénols» est utilisé pour désigner l'ensemble des composés
phénoliques des végétaux [17]. Ces composés regroupent une multitude de molécules présentes dans le règne végétal
[18 - 20]. Laurent a montré en 1983 qu’en outre des propriétés diurétiques et cholagogues, les feuilles et
l’extrait fluide de Combretum micranthum possèdent une activité antibiotique vis-à-vis du Staphylocoque, du
Streptocoque et l’Entamoeba coli [21]. Cette action a été aussi montrée sur Shigella sp, Salmonella parathyphi B,
Staphylococcus aureus, Klebsiella pneumonia et Klebsiella ozaenae. Les extraits aqueux des racines de l’espèce
nigériane présentent également un pouvoir antibiotique important vis-à-vis des organismes Gram + et
Gram – [22, 23]. La durée de décoction, la température d’infusion et macération restent des paramètres non
maitrisés par les populations pour l’extraction des polyphénols totaux. L’objectif principal de ces travaux est de
déterminer la quantité maximale de polyphénols totaux extraite ainsi que l’évolution de la couleur en utilisant
trois méthodes d’extractions aqueuses (macération, décoction et infusion). La finalité est de proposer aux
populations la meilleure méthode pour l’extraction aqueuse des polyphénols totaux des feuilles de
Combretum micranthum et le meilleur barème qui va permettre une extraction maximale. Des feuilles
séchées de kinkékiba seront utilisées, la méthode de Folin sera utilisée pour le dosage des polyphénols
totaux, les résultats seront traités par le logiciel R version 3.2.4 (2017) et minitab 17.
2. Matériel et méthodes
2-1. Matériel végétal
Les feuilles séchées de Combretum micranthum viennent de la région de Thiès du Sénégal récoltées et séchées. Elles
sont conditionnées avec les tiges de la plante et vendues sur les différents marchés de Dakar (Figure 2).
Figure 1 : Feuille fraiches Figure 2 : Feuille et tiges ficelées Figure 3 : Feuilles séchées
Un volume de 1500 mL d’eau est utilisé. L’eau est portée à ébullition constante à 100 °C puis on introduit les
25 g de feuille. Un chronomètre est démarré dès l’introduction des 25 g de feuilles. Un prélèvement est
effectué toutes les 10 mn jusqu’à 90 mn à température constante (100 ° C) pour l’analyse des différents
paramètres.
3. Résultats et discussion
3-1. Détermination de quelques paramètres physiques et de couleur pour les trois méthodes
d’extraction des polyphénols totaux
Les Tableaux 1, 2 et 3 présentent les résultats des paramètres en fonction de la température d’infusion,
de la durée de décoction et de macération.
Tableau 1 : Paramètres physiques et de couleur des produits après infusion à différentes températures
Paramètres Infusion 100 °C Infusion 80 °C Infusion 70 °C Infusion 60 °C Infusion 50 °C
pH à 25 °C 7,01b ± 0,05 7,26bc ± 0,05 7,23c ± 0,05 7,38ab ± 0,03 7,47a ± 0,04
Brix g/100g 0,46a ± 0,05 0,40ab ± 0,00 0,30bc ± 0,00 cd
0,23 ± 0,05 0,13d ± 0,05
Conductivité
978,01a ± 0,65 939,90a ± 1,79 890,20b ± 1,60 887,18b ± 0,65 815,40c ± 1,70
µs/cm à 25 °C
PARAMÈTRES DE COULEURS
a
A 16,83 ± 0,14 7,40b ± 0,07 6,20b ±0,20 3,90bc ± 0,03 2,02c ± 0,22
B 24,99a ± 0,17 14,15c ± 0,11 13,98c ± 0,15 17,37ab±0,03 14,42b ±0,14
L 85,82b ± 0,31 a
91,20 ± 0,80 93,52a ± 0,80 93,10a ±0,29 94,23a ±3,06
La conductivité évolue proportionnellement avec les températures d’infusion. Elle augmente de façon
significative de 815,4 ± 1,7 µ[Link]-1 à 50 °C et 978,01 ± 0,65 µ[Link]-1 à 100 °C. Pour la décoction la
conductivité passe de 925,05 ± 0,15 µ[Link]-1 en 10 mn de décoction à 1124,00 ± 10,00 µ[Link]-1 en 70 mn de
décoction. Cette augmentation de la conductivité s’associe à l’extraction des minéraux et d’autres composés
présents sur les feuilles (sel de calcium, sel de magnésium, sel de sodium, sel de potassium, citrate). La
conductivité est directement proportionnelle à la quantité de substances dissoutes, ainsi plus la concentration
de solide dissoute est importante plus la conductivité croit. L’infusion à température croissante et la décoction
favorisent l’extraction progressive des minéraux des feuilles de Combretum micranthum. Les résultats
montrent une chute de la conductivité à partir de 80 mn de décoction 943,31 ± 0,55 µ[Link]-1. En effet la
décoction poussée favorise l’extraction progressive de la matière organique des feuilles qui par opposition
des sels minéraux conduit très faiblement le courant électrique. Après 48 h de macération à la température
ambiante de 25 °C ± 4 °C, la conductivité affichée est de 1033 µ[Link]-1
Les résultats montrent une chute du pH en fonction de la température d’infusion et de la durée de la décoction.
A une infusion de 50 °C le pH est de 7,47 ± 0,04 il diminue à 7,26 ± 0,05 à 80 °C et 7,01 ± 0,05 à 100 °C.
Après 100 mn de décoction le pH passe de 8,95 à 8,77 ± 0,01. Cette baisse du pH pourrait être expliquée par
l’extraction progressive des acides phénols contenus dans la feuille de Combretum micranthum. D’autres
acides sont signalés par différents auteurs (palmitique, oléique, linoléiques, acides aminés, acides malique,
citrique, oxalique ; acides tartrique, acide glycolique) par [22, 23, 26 - 28]. Après 48 h de macération le pH
affiché est 8,74.
Figure 14 : Classification des différents traitements par rapport à la quantité de polyphénols extraite
La classification fait apparaitre 9 classes de traitements. Le meilleure traitement pour l’extraction des
polyphénols totaux est la décoction à l’eau à 70 mn/100 °C (5 ,703 [Link].100 g-1). Pour l’infusion le meilleur
résultat est obtenu est à 100 °C/ 20 mn (1,320 [Link].100 g-1). Après 48 h de macération, seul 0,260 [Link].100
g-1 de feuille sèche est extraite. La Figure 15 montre les quantités de polyphénols extraites par les
différentes méthodes d’extractions et la Figure 16 donne La synthèse de la classification des méthodes et
barèmes pour une meilleure extraction à l’eau des polyphénols totaux.
90 – 100
Indice de couleur
0,7
> 100
0,45
0,6
0,40
0,5
0,35
0,4
0,30
0,3
0,25
50 60 70 80 90 100 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
Températures d'infusion (°C) Durées de décoction en (mn)
4. Conclusion
L’extraction des polyphénols totaux est une étape cruciale pour la valorisation de ces principes actifs des
produits végétaux, cette extraction dépend des conditions et de la méthode utilisée. L’objectif de ses travaux
était d’étudier l’effet de la macération, de l’infusion et la décoction sur l’extraction des polyphénols totaux du
Combretum Micranthum. De cette étude, il ressort que la décoction aqueuse est la meilleure technique
d’extraction des polyphénols totaux par rapport à l’infusion et la macération aqueuse. Cette décoction
aqueuse à 70 mn/100 °C permet d’extraire 5,703 [Link].100 [Link], tandis-que l’infusion à 100 °C/ 20 mn
permet d’extraire 1,320 [Link].100 [Link] et la macération 0,260 [Link].100 [Link]. L’intensité des couleurs rouge
et jaune obtenues en décoction sont plus accentuées que celles obtenues par l’infusion et la macération. Dans
la suite, il serait intéressant détaillé ce travail par :
- Dosage des différents types de substances polyphénoliques présentes dans les extraits aqueux de
feuilles de Combretum Micranthum ;
- L’extraction et la caractérisation des polyphénols dans la poudre de feuilles de Combretum
Micranthum ;
- Explorer l’activité antioxydant des polyphénols en fonction de la durée de décoction.
- L’extraction des polyphénols avec ajout de carbonate de sodium.
Remerciements
Ce travail a été réalisé au niveau du Laboratoire Eau, Energie, Environnement et Procédés Industriels (LE3PI)
et au Centre d’Etudes sur la Sécurité alimentaire et le Développement des Molécules fonctionnelles (CESAM)
de l’Ecole Supérieure Polytechnique de Dakar Université Cheikh Anta Diop (Sénégal). Les auteurs remercient
vivement les responsables de laboratoire, ainsi que tout le personnel.
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