fr

B12
07P67
B12 Reagent Kit G73233R01
B7P672
Créé en décembre 2017.

07P6722
07P6732
Suivre scrupuleusement les instructions. La fiabilité des résultats la prise de contraceptifs par voie orale, la compétition parasitaire,
du dosage ne peut pas être garantie si ces instructions ne sont pas la déficience pancréatique, l'épilepsie traitée et la vieillesse.2, 8-11
strictement respectées. Les maladies liées à des concentrations sériques élevées en
vitamine B12 comprennent l'insuffisance rénale, les affections
ll
DENOMINATION hépatiques ainsi que les maladies myéloprolifératives.8, 12
Alinity i B12 Reagent Kit
ll
DOMAINE D'APPLICATION
ll
PRINCIPES BIOLOGIQUES DE LA METHODE
Ce dosage est un dosage immunologique en deux étapes pour la
Le dosage Alinity i B12 est un dosage microparticulaire détermination quantitative de la vitamine B12 dans le sérum et le
(microparticules recouvertes de facteur intrinsèque) par plasma humains utilisant la technologie de dosage immunologique
chimiluminescence utilisé pour la détermination quantitative de la microparticulaire par chimiluminescence (CMIA).
vitamine B12 dans le sérum et le plasma humains sur l'analyseur
L'échantillon et les réactifs 1, 2 et 3 de prétraitement sont mis
Alinity i.
en présence. Une partie aliquote de l'échantillon prétraité, les
ll
RESUME ET EXPLICATION DU TEST microparticules paramagnétiques recouvertes de facteur intrinsèque
La vitamine B12 (B12) appartient à la famille des cobalamines et et le diluant de dosage sont mis en présence et incubés. La B12
constitue un cofacteur pour la conversion de la méthylmalonyl- présente dans l'échantillon se lie aux microparticules recouvertes
coenzyme-A (CoA) en succinyl-CoA. En outre, la vitamine B12 est un de facteur intrinsèque. Après lavage, le conjugué de B12 marqué
cofacteur de la synthèse de la méthionine à partir de l'homocystéine. à l'acridinium est ajouté pour former un mélange réactionnel, puis
Elle est également impliquée dans la formation de la myéline et est incubé. Après un autre cycle de lavage, les solutions de préactivation
nécessaire, avec les folates, à la synthèse de l'ADN.1, 2 et d'activation sont ajoutées.
La vitamine B12 absorbée provient des aliments après s'être liée La réaction chimiluminescente résultante est mesurée en unités
à une protéine appelée facteur intrinsèque produite par l'estomac. relatives de lumière (URL). Il existe une relation inverse entre la
Les différentes causes d'une carence en vitamine B12 peuvent être quantité de vitamine B12 présente dans l'échantillon et les URL
classées en trois catégories : malnutrition, malabsorption et autres détectées par le système optique.
troubles gastro‑intestinaux. Une carence en vitamine B12 peut Pour de plus amples informations concernant l'analyseur et
être à l'origine d'une anémie mégaloblastique (MA), de syndromes la technologie de dosage, se référer au Manuel Technique
neurologiques et de dégénérescence de la mœlle épinière. Alinity ci-series, Chapitre 3.
Toute carence en vitamine B12, même faible, peut entraîner une
détérioration de la gaine de myéline entourant et protégeant les
ll
REACTIFS
fibres nerveuses et aboutir à une neuropathie périphérique. Les Contenu du kit
lésions neurologiques dues à une carence en vitamine B12 peuvent Alinity i B12 Reagent Kit 07P67
devenir irréversibles si la cause de la carence n'est pas traitée. En REMARQUE : Certains conditionnements ne sont pas disponibles
l'absence de traitement, les personnes présentant des carences en dans tous les pays. Contacter le distributeur local.
facteur intrinsèque risquent de développer une MA appelée anémie REMARQUE : Ce produit comprend 6 flacons, conditionnés sous
pernicieuse (PA).2 forme de jeu de 2 cartouches de réactifs. Les deux cartouches sont
La relation entre les concentrations en vitamine B12 et l'anémie nécessaires à la réalisation du dosage.
mégaloblastique n'est pas toujours claire puisque certains patients Les volumes (mL) dans le tableau ci-dessous indiquent le volume
souffrant de MA présentent des concentrations en vitamine B12 par jeu de cartouches.
normales ; à l'inverse, de nombreux individus présentant une
carence en vitamine B12 ne sont pas atteints de MA. Toutefois, en 07P6722 07P6732
présence d'anémie mégaloblastique (caractérisée par un volume Tests par jeu de
100 600
corpusculaire moyen (VCM) élevé), il y a généralement une carence cartouches
en vitamine B12 ou en folates sériques.2, 3 Nombre de jeux de
2 2
La prévalence de la carence en vitamine B12 dans la population cartouches par kit
générale n'est pas connue mais elle augmente avec l'âge. Selon une Tests par kit 200 1200
étude,4 pour 15 % des adultes âgés de plus de 65 ans, les analyses 5.4 mL 24.8 mL
de laboratoire ont mis en évidence une carence en vitamine B12. 4.9 mL 24.3 mL
Un taux sérique de B12 inférieur à la valeur attendue peut indiquer
un épuisement prochain des réserves en B12 tissulaires. Par contre, 8.1 mL 42.8 mL
un taux de B12 se situant dans la plage normale basse ne permet 48.1 mL 48.1 mL
pas de garantir que les taux de B12 sont normaux ; d'autres tests 5.3 mL 24.6 mL
permettant de doser l'holotranscobalamine,5 l'homocystéine et
l'acide méthylmalonique s'imposent donc pour toute personne 5.3 mL 24.8 mL
symptomatique.6, 7
Microparticules recouvertes de facteur intrinsèque
Il existe un nombre important d'affections associées à des (porcin) dans du tampon borate avec des stabilisants de protéines
concentrations sériques basses en vitamine B12, dont la carence (bovines). Concentration minimale : 0.1 % de particules solides.
en fer, la grossesse normale près du terme, le végétarisme, la Conservateurs : agents antimicrobiens.
gastrectomie partielle, les détériorations iléales, la maladie cœliaque,

1
 07P6722 07P6732 Réponse
P308+P313 EN CAS d'exposition prouvée ou
Conjugué de B12 marqué à l'acridinium dans du
suspectée : Consulter un médecin.
tampon MES. Concentration minimale : 0.7 ng/mL.
Elimination
Conservateur : ProClin 300.
P501 Eliminer le contenu / récipient
Tampon borate avec de l'EDTA. conformément aux réglementations
Conservateurs : agents antimicrobiens. locales.
Hydroxyde de sodium 1.0 N avec 0.005 % Les mises en garde et précautions suivantes sont applicables pour :
de cyanure de potassium.
Alpha-monothioglycérol et EDTA.
Dicyanure de cobinamide dans du tampon
borate avec des stabilisants de protéines (aviaires).
Conservateur : azide de sodium. MISE EN GARDE Contient du monothioglycérol.
H319 Provoque une sévère irritation des yeux.
Mises en garde et précautions
H315 Provoque une irritation cutanée.
•
Prévention
• Pour diagnostic in vitro
P264 Se laver soigneusement les mains après
Mesures de sécurité manipulation.
ATTENTION : Ce produit nécessite la manipulation d'échantillons P280 Porter des gants de protection / des
humains. Il est recommandé de considérer tous les produits d'origine vêtements de protection / un équipement
humaine comme potentiellement infectieux et de les manipuler selon de protection des yeux.
les règles OSHA Standard on Bloodborne Pathogens. Les produits Réponse
contenant ou susceptibles de contenir des agents infectieux doivent P305+P351+P338 EN CAS DE CONTACT AVEC LES YEUX :
être manipulés selon les règles de biosécurité de niveau 2 ou autres Rincer avec précaution à l'eau pendant
règles de biosécurité en vigueur.13-16 plusieurs minutes. Enlever les lentilles
Les mises en garde et précautions suivantes sont applicables pour : de contact si la victime en porte et si
/ elles peuvent être facilement enlevées.
Continuer à rincer.
P337+P313 Si l'irritation oculaire persiste : Consulter
un médecin.
P302+P352 EN CAS DE CONTACT AVEC LA PEAU :
DANGER Contient du tétraborate de disodium
Laver abondamment à l'eau.
décahydraté.
P332+P313 En cas d'irritation cutanée : Consulter un
H360 Peut nuire à la fertilité ou au fœtus.
médecin.
Prévention
P362+P364 Enlever les vêtements contaminés et les
P201 Se procurer les instructions avant laver avant réutilisation.
utilisation.
P280 Porter des gants de protection / des Les mises en garde et précautions suivantes sont applicables pour :
vêtements de protection / un équipement
de protection des yeux.
Réponse
P308+P313 EN CAS d'exposition prouvée ou
suspectée : Consulter un médecin. DANGER Contient de l’hydroxyde de sodium.
Elimination H314 Provoque des brûlures de la peau et des
P501 Eliminer le contenu / récipient lésions oculaires graves.
conformément aux réglementations H290 Peut être corrosif pour les métaux.
locales. Prévention
Les mises en garde et précautions suivantes sont applicables pour : P234 Conserver uniquement dans le récipient
d'origine.
P260 Ne pas respirer les brouillards / vapeurs /
aérosols.
P264 Se laver soigneusement les mains après
manipulation.
DANGER Contient du tétraborate de disodium
P280 Porter des gants de protection / des
décahydraté et de l'azide de sodium.
vêtements de protection / un équipement
H360 Peut nuire à la fertilité ou au fœtus.
de protection des yeux.
EUH032 Au contact d'un acide, dégage un gaz très
toxique.
Prévention
P201 Se procurer les instructions avant
utilisation.
P280 Porter des gants de protection / des
vêtements de protection / un équipement
de protection des yeux.

2
Réponse • Après homogénéisation, placer les cartouches de réactif en
P301+P330+P331 EN CAS D'INGESTION : Rincer la bouche. position verticale pendant 48 heures avant emploi pour permettre
NE PAS faire vomir. aux bulles qui ont pu se former de se dissiper.
P305+P351+P338 EN CAS DE CONTACT AVEC LES YEUX : • Si une cartouche de réactif tombe, la placer en position verticale
Rincer avec précaution à l'eau pendant pendant 1 heure avant emploi pour permettre aux bulles qui ont
plusieurs minutes. Enlever les lentilles pu se former de se dissiper.
de contact si la victime en porte et si • Les réactifs sont susceptibles de former de la mousse ou
elles peuvent être facilement enlevées. des bulles. La présence de bulles dans les réactifs peut
Continuer à rincer. compromettre la détection correcte du niveau de réactif dans la
P303+P361+P353 EN CAS DE CONTACT AVEC LA PEAU cartouche, entraînant une aspiration insuffisante de réactif qui
(ou les cheveux) : Enlever immédiatement peut compromettre les résultats.
les vêtements contaminés. Rincer la peau Pour de plus amples informations sur les précautions relatives à la
à l’eau / se doucher. manipulation des réactifs lors du fonctionnement de l'analyseur, se
P310 Appeler immédiatement un CENTRE référer au Manuel Technique Alinity ci-series, Chapitre 7.
ANTIPOISON ou un médecin. Conservation des réactifs
P390 Absorber toute substance répandue Température Durée
pour éviter qu'elle attaque les matériaux de maximale de Conditions de conservation
environnants. conservation conservation supplémentaires
Elimination Non ouvert 2 à 8 °C Jusqu'à Conserver en position
P501 Eliminer le contenu / récipient la date de verticale.
conformément aux réglementations péremption Si la cartouche ne reste
locales. pas en position verticale,
retourner délicatement
Les mises en garde et précautions suivantes sont applicables pour :
la cartouche 10 fois et
la placer en position
verticale pendant
48 heures avant emploi.
A bord Température 30 jours
MISE EN GARDE Contient des méthylisothiazolones. du système
H317 Peut provoquer une allergie cutanée. Ouvert 2 à 8 °C Jusqu'à Conserver en position
Prévention la date de verticale.
P261 Eviter de respirer les brouillards / péremption Si la cartouche ne reste
vapeurs / aérosols. pas en position verticale
P272 Les vêtements de travail contaminés ne lors de sa conservation,
devraient pas sortir du lieu de travail. jeter la cartouche.
P280 Porter des gants de protection / des Ne pas réutiliser les
vêtements de protection / un équipement bouchons d'origine des
de protection des yeux. réactifs ou les bouchons
de remplacement en
Réponse
raison du risque de
P302+P352 EN CAS DE CONTACT AVEC LA PEAU :
contamination et pour
Laver abondamment à l'eau.
ne pas compromettre la
P333+P313 En cas d'irritation ou d'éruption cutanée : performance des réactifs.
Consulter un médecin.
P362+P364 Enlever les vêtements contaminés et les Les réactifs peuvent être conservés à l'intérieur ou à l'extérieur de
laver avant réutilisation. l'analyseur. Si les réactifs sont retirés de l'analyseur, les conserver
Elimination en position verticale avec des bouchons de remplacement neufs
P501 Eliminer le contenu / récipient entre 2 et 8 °C. Pour les réactifs conservés à l'extérieur de
conformément aux réglementations l'analyseur, il est recommandé de les placer dans leurs portoirs ou
locales. emballages d'origine afin de les maintenir en position verticale.
Pour de plus amples informations sur le déchargement des réactifs,
Les fiches de données de sécurité sont disponibles sur se référer au Manuel Technique Alinity ci-series, Chapitre 5.
[Link] ou auprès du Service Clients Abbott.
Indications d'altération des réactifs
Pour de plus amples informations sur les mesures de sécurité lors
du fonctionnement de l'analyseur, se référer au Manuel Technique Une erreur de calibration ou un contrôle dont la valeur se situe
Alinity ci-series, Chapitre 8. en dehors des limites spécifiées peut indiquer une altération des
réactifs. Les résultats des échantillons analysés dans la même série
Manipulation des réactifs ne sont pas valides et ces échantillons devront être réanalysés. Une
• A la réception de la commande, retourner délicatement le kit non recalibration du dosage peut être nécessaire.
ouvert contenant les cartouches de réactif en effectuant une Pour de plus amples informations sur le dépannage, se référer au
rotation de 180 degrés, 5 fois avec l’étiquette verte orientée vers Manuel Technique Alinity ci-series, Chapitre 10.
le haut, 5 fois avec l’étiquette verte orientée vers le bas. Ceci
permet de garantir que le liquide recouvre toutes les parois des ll
FONCTIONNEMENT DE L'APPAREIL
flacons inclus dans les cartouches. Lors du transport des kits, Avant d’effectuer le dosage, le fichier de dosage Alinity i B12 doit
les microparticules peuvent se déposer sur le septum du réactif. être installé sur l'analyseur Alinity i.
–– Cocher la case sur l’emballage pour indiquer que le kit a Pour de plus amples informations concernant l'installation d'un fichier
déjà été retourné. de dosage, la visualisation et la modification des paramètres de
dosage, se référer au Manuel Technique Alinity ci-series, Chapitre 2.

3
Pour des informations sur l'impression des paramètres de dosage, se REMARQUE : En cas de présence de fibrine, de globules rouges
référer au Manuel Technique Alinity ci-series, Chapitre 5. ou d'autres particules en suspension, mélanger à faible vitesse au
Pour une description détaillée du fonctionnement de l'analyseur, se Vortex ou retourner les flacons 10 fois avant la recentrifugation.
référer au Manuel Technique Alinity ci-series. Préparer les échantillons congelés comme suit :
Autres unités de résultat • Les échantillons congelés doivent être complètement décongelés
Modifier le paramètre de dosage "Unités de résultat" pour avant homogénéisation.
sélectionner une autre unité. • Homogénéiser soigneusement les échantillons décongelés en
Formule de conversion : les passant au Vortex à une vitesse faible ou en les retournant
10 fois.
(Concentration en unité de résultat par défaut) x (Facteur de
conversion) = (Concentration en unité de résultat alternative) • Inspecter visuellement les échantillons. En cas d'apparition de
couches ou de stratifications, continuer à mélanger jusqu'à ce
Unité de résultat
par défaut Facteur de conversion Autre unité de résultat que les échantillons soient visiblement homogènes.
pg/mL 0.7378 pmol/L • Si les échantillons ne sont pas homogénéisés avec soin, des
résultats incohérents peuvent être obtenus.
ll
PRELEVEMENT ET PREPARATION DES • Centrifuger à nouveau les échantillons.
ECHANTILLONS POUR L'ANALYSE Recentrifugation des échantillons
• Transférer les échantillons dans des tubes pour centrifugeuse et
Types d'échantillons
les centrifuger à un minimum de 100 000 g-minutes.
L'utilisation des types d'échantillons indiqués ci-dessous a été
• Des exemples de durée de centrifugation et de force centrifuge
validée pour ce dosage.
relative (RCF) correspondant à ce critère sont indiqués dans le
L'utilisation d'autres types d'échantillons et de tubes de prélèvement
tableau ci-dessous.
n'a pas été validée pour ce dosage.
La durée de centrifugation utilisant d'autres valeurs de force
Type d'échantillon Tubes de prélèvement centrifuge relative (RCF) peut être calculée à l'aide de la
Sérum Sérum formule suivante :
Séparateur de sérum 100 000 g-minutes
Plasma Séparateur de plasma à Durée de centrifugation minimale (minutes) =
RCF
l'héparinate de lithium
Héparinate de sodium Durée de
recentrifugation
EDTA dipotassique (minutes) RCF (x g)* g-minutes
• La performance de ce dosage n'a pas été établie pour les fluides 10 10 000 100 000
corporels autres que le sérum et le plasma humains. 20 5000 100 000
• L'analyseur n'est pas configuré pour détecter le type 40 2500 100 000
d'échantillon utilisé. Il est de la responsabilité de l'utilisateur * Afin d'obtenir des résultats cohérents, les échantillons doivent
de vérifier que le type d'échantillon utilisé dans le dosage est être centrifugés dans des tubes adéquats à une vitesse minimale
correct. de 2500 RCF (force centrifuge relative) afin d'atteindre au moins
Etats des échantillons 100 000 g-minutes.
• Ne pas utiliser : RCF = 1.12 × rmax (tpm/1000)2
–– d'échantillons inactivés par la chaleur RCF - La force centrifuge relative atteinte au cours de la
–– de pools d'échantillons centrifugation.
–– d'échantillons fortement hémolysés tpm - Les tours par minute du rotor sur lequel les
–– d'échantillons présentant une contamination microbienne échantillons sont centrifugés (généralement,
évidente l'affichage numérique sur la centrifugeuse indique
• Pour obtenir des résultats exacts, les échantillons de sérum les tpm).
et de plasma ne doivent pas contenir de fibrine, de globules Durée de Cette durée doit être mesurée à partir du moment
rouges ou d'autres particules en suspension. Les échantillons centrifugation où le rotor atteint la RCF ou les tpm requis jusqu'au
de sérum provenant de patients sous traitement anticoagulant - moment où il commence à décélérer.
ou thrombolytique peuvent contenir de la fibrine en raison d'une rmax - Le rayon du rotor en millimètres. REMARQUE : Si
coagulation incomplète. des adaptateurs de tubes personnalisés (c'est-à-
• Afin d'éviter toute contamination croisée, il est recommandé dire des adaptateurs non définis par le fabricant de
d'utiliser des pipettes ou des embouts de pipettes à usage la centrifugeuse) sont utilisés, le rayon (rmax) devra
unique. être mesuré manuellement en millimètres et la RCF
calculée.
Préparation pour l'analyse g-minutes - L'unité de mesure du produit de la RCF (× g) et de
• Suivre les instructions du fabricant de tubes relatives la durée de centrifugation (minutes).
à l'utilisation des tubes de prélèvement. La séparation
gravimétrique n'est pas suffisante pour la préparation des • Pour l'analyse, transférer l'échantillon clarifié dans un godet-
échantillons. échantillon ou un tube aliquot. Pour les échantillons centrifugés
• Les échantillons ne doivent pas contenir de bulles. S'ils présentant une couche lipidique, transférer uniquement
contiennent des bulles, les éliminer à l'aide d'un bâtonnet avant l'échantillon clarifié sans substances lipémiques.
l'analyse. Utiliser un bâtonnet neuf pour chaque échantillon afin
d'éviter toute contamination croisée.
Afin d'obtenir des résultats cohérents, centrifuger à nouveau les
échantillons avant l'analyse si
• les échantillons contiennent de la fibrine, des globules rouges ou
d'autres particules en suspension.

4
Conservation des échantillons ◦◦ Volume d'échantillon pour chaque dosage supplémentaire
Température Durée effectué sur le même godet-échantillon : 37 µL
Type de maximale de –– > 3 heures à bord du passeur de réactifs et d'échantillons :
d'échantillon conservation conservation Instructions spéciales
◦◦ Remplacer par une partie aliquote fraîche de l'échantillon.
Sérum/ Température 3 jours Les échantillons • Se référer aux notices Alinity i B12 Calibrators et/ou Alinity i B12
Plasma ambiante peuvent être Controls pour des instructions sur la préparation et l'emploi.
conservés avec ou
• Pour les procédures de fonctionnement standard, se référer au
sans le caillot, les
Manuel Technique Alinity ci-series, Chapitre 5.
globules rouges ou le
• Pour obtenir une performance optimale de l'analyseur, il est
gel séparateur.
important d'effectuer les procédures de maintenance de routine
2 à 8 °C 7 jours Les échantillons décrites dans le Manuel Technique Alinity ci-series, Chapitre 9.
peuvent être Si les procédures du laboratoire requièrent une maintenance plus
conservés avec ou fréquente, se conformer à ces exigences.
sans le caillot, les
globules rouges ou le Procédures de dilution des échantillons
gel séparateur. Les échantillons dont les concentrations en vitamine B12
sont supérieures à 2000 pg/mL (1476 pmol/L) sont annotés
Si le dosage est effectué plus de 3 jours après le prélèvement "> 2000 pg/mL" ("> 1476 pmol/L") et peuvent être dilués à l'aide
pour les échantillons conservés à température ambiante ou plus de du protocole de dilution automatique ou de la procédure de dilution
7 jours après le prélèvement pour les échantillons conservés entre 2 manuelle.
et 8 °C, séparer le sérum ou le plasma du caillot, des globules Protocole de dilution automatique
rouges ou du gel séparateur et conserver les échantillons congelés Le système effectue une dilution au 1/3 de l'échantillon, puis calcule
à une température inférieure ou égale à -20 °C. automatiquement la concentration de l'échantillon en multipliant le
Eviter plus de 3 cycles de congélation/décongélation. résultat par le facteur de dilution.
Transport des échantillons Procédure de dilution manuelle
Les échantillons doivent être conditionnés et étiquetés conformément Dilution recommandée : 1/4
à la législation régissant le transport des échantillons cliniques et La dilution recommandée pour les échantillons provoquant à
des substances infectieuses. plusieurs reprises (2 ou davantage) des erreurs d'aspiration de
l'échantillon est de 1/2.
ll
PROCEDURE
Pour une dilution au 1/4, ajouter 100 μL de l'échantillon à 300 μL
Matériel fourni d'Alinity i Multi-Assay Manual Diluent.
07P67 Alinity i B12 Reagent Kit Pour une dilution au 1/2, ajouter 100 μL de l'échantillon à 100 μL
Matériel requis mais non fourni d'Alinity i Multi-Assay Manual Diluent.
• Alinity i B12 assay file (fichier de dosage) Saisir le facteur de dilution dans l'onglet Echantillon ou Contrôle de
• 07P6701 Alinity i B12 Calibrators l'écran Créer demande. Le système utilisera ce facteur de dilution
• 07P6710 Alinity i B12 Controls ou autres contrôles disponibles afin de calculer automatiquement la concentration de l'échantillon et
dans le commerce communiquera le résultat.
• 09P1540 Alinity i Multi-Assay Manual Diluent Le résultat (avant l'application du facteur de dilution) doit
être > 148 pg/mL (> 109 pmol/L).
• Alinity Pre-Trigger Solution
Si le facteur de dilution n'est pas saisi, le résultat doit être multiplié
• Alinity Trigger Solution
manuellement par le facteur de dilution approprié avant d'être
• Alinity i-series Concentrated Wash Buffer
communiqué. Ne pas communiquer le résultat de l'échantillon
Pour de plus amples informations sur le matériel requis pour le dilué si celui-ci est inférieur à 148 pg/mL (109 pmol/L). Réanalyser
fonctionnement de l'analyseur, se référer au Manuel Technique l'échantillon en utilisant une dilution adéquate.
Alinity ci-series, Chapitre 1.
Pour de plus amples informations sur les demandes de dilutions, se
Pour de plus amples informations sur le matériel requis pour les référer au Manuel Technique Alinity ci-series, Chapitre 5.
procédures de maintenance, se référer au Manuel Technique
Alinity ci-series, Chapitre 9. Calibration
Pour des instructions sur la procédure de calibration d'un dosage, se
Procédure du dosage référer au Manuel Technique Alinity ci-series, Chapitre 5.
Pour obtenir une description détaillée de la réalisation d'un dosage,
Chaque contrôle de dosage doit être analysé pour évaluer la
se référer au Manuel Technique Alinity ci-series, Chapitre 5.
calibration du dosage.
• En cas d'utilisation de tubes primaires ou d'aliquots, se référer
Lorsque la calibration a été acceptée et mémorisée, tous les
au Manuel Technique Alinity ci-series, Chapitre 4, afin de
échantillons suivants peuvent être analysés sans effectuer de
s'assurer que le volume d'échantillon présent est suffisant.
nouvelle calibration, sauf si :
• Afin de minimiser les pertes par évaporation, vérifier que
• Un kit de réactifs portant un nouveau numéro de lot est utilisé.
le volume d'échantillon adéquat est présent dans le godet-
• Les résultats du contrôle de qualité quotidien se situent en
échantillon avant d'effectuer le dosage.
dehors des valeurs limites CQ sur la base de statistiques
• Nombre maximum de répliques à partir du même godet-
utilisées pour surveiller et contrôler la performance du système,
échantillon : 10
comme décrit à la partie Procédures du contrôle de qualité de
–– Echantillon prioritaire : cette notice.
◦◦ Volume d'échantillon pour le premier dosage : 87 µL –– Si les valeurs limites CQ sur la base de statistiques ne sont
◦◦ Volume d'échantillon pour chaque dosage supplémentaire pas disponibles, la calibration ne devra alors pas dépasser
effectué sur le même godet-échantillon : 37 µL la limite de 30 jours pour la fréquence de recalibration.
–– ≤ 3 heures à bord du passeur de réactifs et d'échantillons : Ce dosage peut nécessiter une recalibration après la maintenance
◦◦ Volume d'échantillon pour le premier dosage : 150 µL de pièces ou sous-systèmes essentiels ou après la réalisation de
procédures de dépannage.

5
Procédures du contrôle de qualité Annotations
Le contrôle de qualité recommandé pour le dosage Alinity i B12 La rubrique Annotations peut contenir des informations sur certains
consiste à analyser un échantillon de chaque niveau de contrôles résultats. Pour une description des annotations qui peuvent
une fois toutes les 24 heures chaque jour d'utilisation. apparaître dans cette rubrique, se référer au Manuel Technique
Des contrôles supplémentaires peuvent être analysés conformément Alinity ci-series, Chapitre 5.
à la réglementation en vigueur ou aux exigences relatives à Intervalle de mesure
l'accréditation ainsi qu'aux exigences du laboratoire en matière de L'intervalle de mesure est défini comme étant la plage de valeurs
contrôle de qualité. en pg/mL (pmol/L) correspondant aux limites de performance
Pour établir des valeurs limites CQ sur la base de statistiques, acceptable pour la linéarité, l'imprécision et le biais.
chaque laboratoire doit établir ses propres valeurs cibles et limites L'intervalle de mesure du dosage Alinity i B12 est compris entre 148
de concentration pour les nouveaux lots de contrôles à chaque et 2000 pg/mL (entre 109 et 1476 pmol/L).
niveau de contrôles cliniquement pertinent. Ceci peut être effectué
en analysant un minimum de 20 répliques sur plusieurs jours (3 à 5) ll
LIMITES DE LA METHODE
et en utilisant les résultats communiqués pour établir la moyenne • Les résultats doivent être utilisés en association avec d'autres
(cible) et la variabilité attendues de cette moyenne (limites) pour données, à savoir les symptômes, les résultats d'autres analyses
le laboratoire. Cette étude devra prendre en compte les sources de et les signes cliniques.
variation potentielles afin de rendre compte de la future performance • Le diagnostic d'une carence en vitamine B12 ne peut pas
du système : se baser uniquement sur les concentrations sériques ou
• Calibrations mémorisées multiples plasmatiques en vitamine B12. Chez les patients symptomatiques
• Lots de réactifs multiples présentant des anomalies hématologiques ou neurologiques,
• Lots de calibrateurs multiples il est recommandé d'analyser également l'acide folique, les
• Modules d'analyse multiples (le cas échéant) anticorps anti-facteur intrinsèque, l'holotranscobalamine,5
l'homocystéine et/ou l'acide méthylmalonique.6, 7
• Données prélevées à différents moments de la journée
• Si les concentrations en vitamine B12 ne correspondent pas à
Se référer au document C24-A3 du Clinical and Laboratory
l'observation clinique, il est recommandé d'effectuer des dosages
Standards Institute (CLSI) ou aux autres directives publiées
supplémentaires afin de pouvoir confirmer le résultat.
contenant des recommandations générales en matière de contrôle
de qualité.17 • Il a été démontré que l'hémolyse interfère avec ce dosage B12.
Ne pas utiliser d'échantillons hémolysés.
• Si des contrôles plus fréquents sont nécessaires, suivre les
procédures de contrôle de qualité en vigueur dans le laboratoire. • Les échantillons contenant des concentrations en protéines
supérieures à la valeur normale peuvent provoquer à plusieurs
• Si les résultats des contrôles de qualité ne répondent pas aux
reprises (2 ou davantage) des erreurs d'aspiration de
critères de validation définis par le laboratoire, il se peut que les
l'échantillon. Il est recommandé de diluer ces échantillons au 1/2
résultats obtenus pour les échantillons soient erronés. Suivre les
à l'aide du protocole de dilution automatique ou de la procédure
procédures du contrôle de qualité en vigueur dans le laboratoire.
de dilution manuelle.
Une recalibration peut s'avérer nécessaire. Pour obtenir des
informations sur le dépannage, se référer au Manuel Technique • Les anticorps hétérophiles et le facteur rhumatoïde (FR)
Alinity ci-series, Chapitre 10. présents dans le sérum humain peuvent réagir avec les
immunoglobulines des réactifs, interférant ainsi avec les dosages
• Vérifier les résultats des contrôles de qualité et les critères de
immunologiques in vitro. Les patients régulièrement en contact
validation à chaque changement de lot de réactifs ou de lot de
avec des animaux ou des produits contenant du sérum d'origine
calibrateurs.
animale peuvent être sujets à cette interférence et fournir de ce
Les contrôles disponibles dans le commerce doivent être utilisés
fait des valeurs anormales. Pour établir un diagnostic, de plus
selon les directives et les recommandations du fabricant des
amples informations peuvent être nécessaires.19
contrôles. Les limites de concentration fournies dans la notice des
• Le dosage est destiné à l'analyse de sérum et de plasma
contrôles doivent être utilisées à titre indicatif uniquement.
humains. Les échantillons analysés sur d'autres matrices
Pour tout contrôle utilisé, le laboratoire doit vérifier que la
peuvent ne pas donner de résultats précis.
composition des contrôles est compatible avec le dosage selon la
• Se référer à la partie PRELEVEMENT ET PREPARATION DES
notice.
ECHANTILLONS POUR L'ANALYSE de cette notice pour de plus
Recommandations en matière de contrôle de qualité
amples informations sur les limites des échantillons.
Se référer à “Basic QC Practices” de James O Westgard, Ph.D.,
pour obtenir des recommandations en matière de pratiques de ll
VALEURS ATTENDUES
contrôle de qualité au sein du laboratoire.18 Cette étude a été réalisée sur l'ARCHITECT i System.
Vérification des performances des dosages Cette partie présente des données de performance indicatives. Les
Pour de plus amples informations sur les protocoles de vérification résultats obtenus peuvent varier d'un laboratoire à l'autre.
des performances des dosages mentionnés dans la notice, se Il est recommandé à chaque laboratoire de déterminer ses propres
référer à la partie Vérification des performances des dosages du valeurs de référence en fonction des caractéristiques locales et de
Manuel Technique Alinity ci-series. la population qu'il dessert.
Concentrations en vitamine B12 normales
ll
RESULTATS
Une étude a été menée sur la base du document C28-A2 du Clinical
Calculs and Laboratory Standards Institute (CLSI).20 Des échantillons de
Le dosage Alinity i B12 utilise une méthode de traitement des sérum provenant de 143 individus avec des valeurs normales de
données par ajustement de la courbe logistique à 4 paramètres volume globulaire moyen, d'homocystéine et de folates ont été
(4PLC, pondération en Y) pour créer une courbe de calibration et analysés avec le dosage ARCHITECT B12. La plage de concentration
générer les résultats. en vitamine B12 de cette population était comprise entre 141 et
Pour de plus amples informations concernant les autres > 1218 pg/mL (entre 104 et > 899 pmol/L) avec une moyenne de
unités utilisées pour le rendu du résultat, se référer à la partie 407 pg/mL (300 pmol/L). L'intervalle de confiance à 95 % de cette
FONCTIONNEMENT DE L'APPAREIL, Autres unités de résultat de population d'échantillons est défini ci-dessous :
cette notice. Plage attendue 187 à 883 pg/mL (138 à 652 pmol/L)

6
Concentrations en vitamine B12 indéterminées b La limite de détection (LD) représente la concentration la plus

Des taux supérieurs à 300 ou 400 pg/mL (221 ou 295 pmol/L) basse à laquelle l'analyte peut être détecté avec une probabilité
sont rarement associés à des affections hématologiques ou de 95 %, basée sur n ≥ 60 répliques d'échantillons présentant un
neurologiques induites par des carences en vitamine B12. Des faible niveau d'analyte.
analyses supplémentaires sont recommandées pour les patients c La limite de quantification (LQ) a été déterminée à partir
symptomatiques présentant des taux de vitamine B12 compris de n ≥ 60 répliques d'échantillons présentant un faible niveau
entre 100 et 300 pg/mL (entre 74 et 221 pmol/L) (anomalies d'analyte et est définie comme étant la plus petite concentration
hématologiques) et entre 100 et 400 pg/mL (entre 74 et 295 pmol/L) pouvant être quantifiée avec un coefficient de variation maximal
(anomalies neurologiques).6, 7 acceptable de 10 % et un biais maximal acceptable de 10 %.
ll
CARACTERISTIQUES DES PERFORMANCES Linéarité
Cette partie présente des données de performance indicatives. Les Une étude a été menée sur la base du document EP06-A du CLSI.23
résultats obtenus peuvent varier d'un laboratoire à l'autre. Ce dosage est linéaire tout au long de l'intervalle de mesure de 148
Les analyseurs Alinity i et ARCHITECT i System utilisent les mêmes à 2000 pg/mL (de 109 à 1476 pmol/L).
réactifs et ratios échantillon/réactif. Spécificité analytique
Sauf indication contraire, toutes les études ont été réalisées sur Cette étude a été réalisée sur l'ARCHITECT i System.
l'analyseur Alinity i. La spécificité du dosage ARCHITECT B12 a été déterminée en
Reproductibilité étudiant la réactivité croisée avec le cobinamide. Un échantillon
Reproductibilité intra-laboratoire de sérum humain présentant une valeur d'environ 230 pg/mL
Une étude a été menée sur la base du document EP05-A2 du (168 pmol/L) a été surchargé avec du cobinamide à 9000 pg/mL et
CLSI.21 L'analyse a été menée à l'aide d'1 lot d'Alinity i B12 Reagent l'interférence était de 4 pg/mL (3 pmol/L).
Kit, d'1 lot d'Alinity i B12 Calibrators, d'1 lot d'Alinity i B12 Controls et Interférences
d'1 analyseur. Trois contrôles et 2 panels de sérum humain ont été Cette étude a été réalisée sur l'ARCHITECT i System.
analysés au minimum en double, 2 fois par jour, pendant 20 jours. Substances endogènes potentiellement interférentes
Intra-série Intra-laboratoire Aux concentrations indiquées ci-dessous, la bilirubine (fractions
Moyenne (répétabilité) (total)a
conjuguées et non conjuguées), les protéines totales et les
Echantillon n (pg/mL) E.T. CV (%) E.T. CV (%)
triglycérides ont montré moins de 10 % d'interférence dans le
Contrôle bas 119 251 10.4 4.2 13.5 5.4
dosage ARCHITECT B12 pour les échantillons à concentration basse
Contrôle moyen 120 451 17.9 4.0 21.9 4.9 (plage de concentration : 150 pg/mL à 250 pg/mL (111 pmol/L à
Contrôle haut 120 929 28.7 3.1 30.6 3.3 184 pmol/L)) et les échantillons à concentration élevée (plage de
Panel de sérum 1 118 187 12.9 6.9 14.7 7.9 concentration : > 500 pg/mL (> 369 pmol/L)) :
Panel de sérum 2 120 1902 48.1 2.5 70.5 3.7 Substance potentiellement interférente Concentration
a Inclut la variabilité intra-série, inter‑séries et inter-jours. Bilirubine < 25.1 mg/dL
Intra-série Intra-laboratoire Protéines totales < 12 g/dL
Moyenne (répétabilité) (total)a Triglycérides < 3325 mg/dL
Echantillon n (pmol/L) E.T. CV (%) E.T. CV (%)
Les échantillons hémolysés ne doivent pas être analysés ; se référer
Contrôle bas 119 185 7.7 4.2 10.0 5.4
à la partie LIMITES DE LA METHODE de cette notice.
Contrôle moyen 120 333 13.2 4.0 16.2 4.9
Contrôle haut 120 685 21.1 3.1 22.6 3.3 Comparaison des méthodes
Panel de sérum 1 118 138 9.5 6.9 10.8 7.9 Une étude a été menée sur la base du document EP09-A3 du CLSI
Panel de sérum 2 120 1404 35.5 2.5 52.0 3.7 selon la méthode de régression de Passing-Bablok.24
Coefficient
a Inclut la variabilité intra-série, inter‑séries et inter-jours. de Ordonnée Limites de
Unités n corrélation à l'origine Pente concentration
Précision par rapport au standard de l'OMS
Alinity i B12 vs Sérum pg/mL 126 0.99 -12.84 1.04 171 à 1868
Cette étude a été réalisée sur l'ARCHITECT i System. ARCHITECT B12 Sérum pmol/L 126 0.99 -8.92 1.04 126 à 1378
Une étude a été menée afin d'évaluer la précision du dosage
ARCHITECT B12 à l'aide du standard international de la
vitamine B12 03/178 de l'Organisation Mondiale de la Santé. Le
ll
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Wayne, PA: CLSI; 2012. Numéro de série
23. Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI). Evaluation of
the Linearity of Quantitative Measurement Procedures: A Statistical Alinity et ARCHITECT sont des marques commerciales d'Abbott
Approach; Approved Guideline. CLSI Document EP06-A. Wayne, PA: Laboratories dans plusieurs pays. Toutes les autres marques
CLSI; 2003. commerciales sont la propriété de leurs détenteurs respectifs.
24. Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI). Measurement
Procedure Comparison and Bias Estimation Using Patient Samples; Abbott Ireland
Approved Guideline—Third Edition. CLSI Document EP09-A3. Wayne, Diagnostics Division
PA: CLSI; 2013. Lisnamuck, Longford
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10 000 échantillons).
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