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Extraction éthanoïque des feuilles de gboma

Ce document présente un guide détaillé pour l'extraction éthanoïque des feuilles de gboma, visant à obtenir un extrait pour injection dans des œufs. Les étapes incluent la récolte, la macération, la filtration, la concentration et le stockage de l'extrait, ainsi que les précautions à prendre lors de l'injection. L'objectif est d'évaluer les effets de l'extrait sur le développement embryonnaire et le taux d'éclosion.

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Extraction éthanoïque des feuilles de gboma

Ce document présente un guide détaillé pour l'extraction éthanoïque des feuilles de gboma, visant à obtenir un extrait pour injection dans des œufs. Les étapes incluent la récolte, la macération, la filtration, la concentration et le stockage de l'extrait, ainsi que les précautions à prendre lors de l'injection. L'objectif est d'évaluer les effets de l'extrait sur le développement embryonnaire et le taux d'éclosion.

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Voici un guide complet sur l'extraction éthanoïque des feuilles de gboma (Solanum macrocarpon) à

des fins d'injection dans les œufs (utilisation expérimentale). Cette méthode permet d’obtenir un
extrait concentré et relativement pur.

🧪 1. Objectif

Obtenir un extrait éthanoïque des feuilles de gboma pour l’utiliser sous forme d’injection ou
d’application sur des œufs en incubation, dans le but d’évaluer ses effets sur le développement
embryonnaire ou le taux d’éclosion.

🔬 2. Matériel nécessaire

Feuilles

Feuilles de gboma (fraîches et saines)

Solvant et produits

Éthanol à 70° (de préférence de qualité analytique)

Eau distillée (pour dilution si nécessaire)

Matériel

Mortier ou broyeur électrique

Bocal en verre ou flacon hermétique

Filtre à café ou gaze stérile

Entonnoir

Évaporateur rotatif ou plaque chauffante (basse température)

Flacon ambré pour conservation

Seringues stériles pour l’injection

Aiguilles fines (pour injection intra-œuf)

Gants, masque et blouse

🧭 3. Étapes d’extraction

🟢 Étape 1 : Récolte et préparation des feuilles

Récolter les feuilles jeunes, vertes et sans maladies.

Laver soigneusement à l’eau propre puis à l’eau distillée.

Égoutter et sécher à l’ombre pendant 5 à 7 jours jusqu’à ce qu’elles soient cassantes.


Réduire en poudre fine à l’aide d’un broyeur ou d’un mortier.

🟠 Étape 2 : Macération

Peser environ 100 g de poudre de feuilles.

Ajouter dans un bocal propre avec 500 mL d’éthanol à 70°.

Fermer hermétiquement et laisser macérer pendant 72 h à l’abri de la lumière, en agitant doucement


2 fois par jour.

🔵 Étape 3 : Filtration

Après 3 jours, filtrer le mélange à l’aide de gaze stérile ou de filtre à café.

Répéter si nécessaire pour obtenir un liquide limpide.

🔴 Étape 4 : Concentration de l’extrait

Faire évaporer partiellement l’éthanol :

Soit à l’aide d’un évaporateur rotatif (idéal)

Soit sur une plaque chauffante à 40–50°C max (attention à ne pas détruire les composés actifs).

Vous obtenez un extrait semi-liquide ou pâteux concentré.

⚪ Étape 5 : Stockage

Transvaser dans un flacon ambré propre et stérile.

Conserver au réfrigérateur à +4°C.

Étiqueter avec : nom, date, concentration.

💉 4. Préparation pour l’injection dans les œufs

Dilution

Diluer l’extrait concentré dans une solution saline stérile (NaCl 0,9%) selon les doses choisies :

Exemple : 5 %, 10 %, 15 %

Stérilisation

Filtrer à nouveau à l’aide d’un filtre stérile (0,22 µm si possible) avant injection.

Injection
Nettoyer la coquille avec de l’alcool 70°.

Percer légèrement à la chambre à air.

Injecter 0,1 à 0,3 mL selon la taille de l’œuf.

Reboucher avec de la cire ou du sparadrap stérile.

⚠ Précautions

Travailler dans des conditions les plus stériles possibles.

Ne jamais surchauffer l’extrait : risque de dégradation des composés actifs.

Vérifier l’absence de contamination fongique ou bactérienne de l’extrait.

Toujours faire un test préliminaire de tolérance (sur 3–5 œufs) avant traitement massif.

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