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Analyse biochimique de la germination du baobab

Ce mémoire analyse la germination des graines de Adansonia digitata (baobab) en examinant les variations biochimiques de plusieurs composés au cours du processus. Les résultats montrent des variations significatives des acides aminés, des composés phénoliques, des sucres réducteurs, des sucres solubles totaux et des protéines totales, fournissant des bases pour l'embryogenèse somatique de cette espèce. Ces données sont essentielles pour optimiser les conditions de régénération et de développement des plantules de baobab.

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Analyse biochimique de la germination du baobab

Ce mémoire analyse la germination des graines de Adansonia digitata (baobab) en examinant les variations biochimiques de plusieurs composés au cours du processus. Les résultats montrent des variations significatives des acides aminés, des composés phénoliques, des sucres réducteurs, des sucres solubles totaux et des protéines totales, fournissant des bases pour l'embryogenèse somatique de cette espèce. Ces données sont essentielles pour optimiser les conditions de régénération et de développement des plantules de baobab.

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UNIVERSITE DE MAROUA

THE UNIVERSITY OF MAROUA

ECOLE NORMALE HIGHER TEACHERS’


SUPERIEURE DE TRAINING COLLEGE OF
MAROUA MAROUA

DEPARTEMENT DES DEPARTMENT OF EARTH


SCIENCES DE LA VIE ET AND LIFE SCIENCES
DE LA TERRE ********
********

ANALYSE DE LA VARIATION DE QUELQUES MARQUEURS DE


DEVELOPPEMENTS AU COURS DE LA GERMINATION DES GRAINES DE
Adansonia digitata L (Bombacaceae)

Mémoire présenté en vue de l’obtention du Diplôme de Professeur de


L’Enseignement Secondaire de Deuxième Grade (DIPES II)
Rédigé par

HADJA SALWA SOULEYMANOU, 23ENS0715 (Licence en Biologie des


Organismes Animaux)
SAKATAI JUSTIN, 23ENS0270 (Licence en Biologie des Organismes Végétaux)
TCHOUPANOU TCHILYA JUSTIN, 23ENS0719 (Licence en Biologie des
Organismes Végétaux)
Sous la direction de
M SANONNE

ANNEE ACADEMIE : 2024-2025

[Texte] Page I
DÉDICACE

GUIDAM VOHOD
SOULEYMANOU YERIMA
LAMOUNDI VOUDOUNGUE ZOKNGA

[Texte] Page II
REMERCIEMENTS
Ce mémoire réalisé en vue d’obtention du diplôme de professeur de
l’enseignement secondaire de deuxième grade (DIPES II) est le fruit des efforts de
plusieurs personnes à qui nous tenons à adresser nos sincères gratitudes :

Nous tenons à exprimer notre immense gratitude au Dr SANONNE, notre encadreur


et Enseignant au département de SVT à l'École Normale Supérieure de Maroua. Il a
non seulement proposé le sujet, mais a également dirigé l'intégralité de ce travail avec
une rigueur exemplaire. Ses conseils pertinents, ses suggestions éclairées et ses
critiques constructives ont été des piliers fondamentaux. Nous lui sommes
profondément redevables pour les sacrifices qu'il a consentis, sa disponibilité sans
faille, la richesse de ses supports didactiques et l'humanité de sa sympathie, des atouts
précieux durant toute la conception de cette œuvre. Sa patience et sa sollicitude ont
marqué durablement notre parcours ;

Au Pr Benoit KOUBALA BARGUI, Chef de Département de Chimie à la Faculté des


Sciences et Chargé de Cours à l’Ecole Normale Supérieur de l’Université de Maroua
pour son laboratoire mise à notre disposition, sa grande contribution malgré ses
multiples occupations ;

Nos remerciements vont, également, à l’endroit de M. KODA TAMASSA Pépiniériste


à l’IRAD pour son orientation et sa technique qui nous a aidés à réussir la
germination ;

Nous réitérons également nos remerciements à tout le corps Enseignant du


Département des Sciences de la Vie et de la terre de l’ENS pour leurs conseils ;

Nous remercions sincèrement nos familles et amis, pour leur encouragement et


soutien moral et financiers. À toutes personnes qui, de près ou de loin, ont contribué à
la réalisation de ce mémoire ; qu’ils trouvent là l’expression de notre profonde
gratitude.

[Texte] Page III


RÉSUMÉ
Adansonia digitata, communément appelé baobab, est une espèce emblématique
des zones arides et semi-arides d’Afrique, retrouvée également dans certaines régions
de Madagascar et de l’Australie. Il revêt de nombreuses importances alimentaires,
médicinales, écologiques, culturelles et économiques. Cette espèce est confrontée à
une régénération naturelle très lente et aléatoire, principalement en raison de la
dormance des graines, de la dégradation de son habitat naturel et des pressions
anthropiques. Pour contribuer à sa régénération par la technique de l’embryogenèse
somatique qui apparaît comme une alternative prometteuse et d’obtention des
plantules, une analyse biochimique de quelques composés chimique a été faite à
différents stades de la germination des graines de Adansonia digitata afin de mesurer
leur implication dans ce développement. Les résultats montrent une variation
significatives des teneurs d’un tube à l’autre de 0 à 10 jours en acides aminés (de
11,298 pour 3,729 mg/g MF), en composés phénoliques ( de 0,768 pour 7,379 mg/g
MF), en sucres réducteurs (de 5,795 pour 19,196 mg/g MF), en sucres solubles
totaux( de 11,211 pour 38,392 mg/g MF) et en protéines totales ( de 12,223 pour 6,119
g/100g MS) .Ces données constituent une base précieuse pour la mise en œuvre de
protocoles d’embryogenèse somatique chez Adansonia digitata, en identifiant les
conditions biochimiques optimales pour l’induction et la maturation des embryons
somatiques.
Mots clés : Adansonia digitata, Embryogenèse, endosperme, marqueurs.

ABSTRACT
Adansonia digitata (baobab) is an iconic species in arid and semi-arid regions of
Africa, Madagascar, and Australia, with significant food, medicinal, ecological,
cultural, and economic importance. However, its natural regeneration is slow and
unpredictable due to seed dormancy, habitat degradation, and human pressures. To
promote regeneration through somatic embryogenesis, a biochemical analysis was
conducted on Adansonia digitata seeds at different germination stages. The results
showed significant variations in amino acids (11.298 to 3.729 mg/g FW), phenolic
compounds (0.768 to 7.379 mg/g FW), reducing sugars (5.795 to 19.196 mg/g FW),
total soluble sugars (11.211 to 38.392 mg/g FW), and total proteins (12.223 to 6.119
g/100g DW). These findings provide a valuable basis for implementing somatic
embryogenesis protocols in Adansonia digitata, identifying optimal biochemical
conditions for somatic embryo induction and maturation.
Keywords: Adansonia digitata, Embryogenesis, endosperm, markers.

[Texte] Page IV
SOMMAIRE

DÉDICACE .................................................................................................................II

REMERCIEMENTS ................................................................................................. III

RÉSUMÉ ................................................................................................................... IV

ABSTRACT .............................................................................................................. IV

LISTE DES FIGURES ........................................................................................... VIII

LISTE DES TABLEAUX ......................................................................................... IX

LISTE DES SIGLES ET ABRÉVIATIONS .............................................................. X

INTRODUCTION ....................................................................................................... 1

CHAPITRE I : REVUE DE LA LITTERATURE ...................................................... 3

I-1. Généralités sur Adansonia digitata ....................................................................... 3

I-1-1. Position systématique et dénominations ............................................................ 3

I-1-2- Origine et distribution ....................................................................................... 5

I-1-3- Description botanique ....................................................................................... 6

I-1-4- Phénologie ......................................................................................................... 9

I-1-5-Habitat et dispersion ......................................................................................... 10

I-1-6- Importance ....................................................................................................... 10

I-1-6-1- Importance alimentaire ................................................................................ 10

I-1-6-2- Importance médicale et cosmétique ............................................................. 11

I-1-6-3-Importance artisanale et commerciale .......................................................... 12

I-1-6-4- Importances écologique ............................................................................... 13

I-1-6-5- Reproduction du baobab et difficultés de régénération (Adansonia digitata)


................................................................................................................................... 13

I-2-Généralités sur L’embryogenèse ......................................................................... 14

I-2-1- Définition et caractéristiques........................................................................... 14

[Texte] Page V
I-2-2- Différentes étapes d’embryogenèse ................................................................ 15

I-2-3- Avantages et limites de l’embryogenèse somatique ....................................... 16

I-2-4-Marqueur moléculaires du développement des embryons ............................... 16

I-3- Rôles de quelques composes chimique sur la germination des embryons ......... 17

I-3-1- Rôles biologiques des composés phénoliques ................................................ 17

I-3-2- Rôles des acides aminés au cours de la germination ...................................... 17

I-3-3- Rôles des sucres réducteurs au cours de la germination ................................. 18

I-3-4-Roles des sucres solubles totaux au cours de la germination ........................... 19

I-3-5- Rôles des protéines totales au cours de la germination ................................... 20

CHAPITRE II : MATERIEL ET METHODES ........................................................ 21

II-1-Site de récolte ..................................................................................................... 21

II-2-Matériel végétal .................................................................................................. 22

II-2-1-Extraction des graines d’Adansonia digitata .................................................. 22

II-2-2-Test de viabilité ............................................................................................... 22

II-2-3-Levée de la dormance ..................................................................................... 23

II-2-4-Germination des graines ................................................................................. 23

II-3-Methodologie ..................................................................................................... 24

II-3-1-Analyses biochimiques ................................................................................... 24

II-3-1-1-Détermination de la teneur en matière sèche (TMS) ................................... 25

II-3-1-2- Détermination de la teneur en acides aminés totaux .................................. 25

II-3-1-3- Détermination de la teneur en sucres réducteurs et sucre soluble totaux ... 26

II-3-1-4-Détermination de la teneur en composés phénoliques totaux ..................... 27

II-3-1-5-Détermination de la teneur en protéines totales .......................................... 28

CHAPITRE III : RESULTATS ET DISCUSSION .................................................. 30

III-1-RESULTATS .................................................................................................... 30

[Texte] Page VI
III-1-1-Variation des teneurs en acides amines ......................................................... 30

III-1-2- Variation de la teneur en composes phénoliques totaux .............................. 31

III-1-3-Variation des teneurs en sucres réducteurs.................................................... 33

III-1-4-Variation des teneurs en sucres solubles totaux ............................................ 34

III-1-5-Variation de la teneur en protéines totales .................................................... 35

III-2-DISCUSSION ................................................................................................... 37

III-2-1- Teneur en Acide aminé ................................................................................. 37

III-2-2- Teneur en composés phénoliques ................................................................. 38

III-2-3- Teneur en sucres réducteurs ......................................................................... 38

III-2-4- Teneur en sucres solubles totaux .................................................................. 39

III-2-5- Teneur en Protéines totales ........................................................................... 40

CONCLUSION, LIMITES ET PERSPECTIVES .................................................... 42

REFERENCES BIBLIOGRAPHIQUES .................................................................. 43

ANNEXES................................................................................................................. 60

[Texte] Page VII


LISTE DES FIGURES
Figure 1: Distribution géographique de Adansonia digitata (Wan et al., 2024) ........... 6
Figure 2: Pied d’Adansonia digitata. (Diop et al., 2005) .............................................. 8
Figure 3: Feuilles d’Adansonia digitata a, b, c, d, e (3 à 7 folioles) (Alioune et al.,
2018) ............................................................................................................................... 8
Figure 4: Fleur de baobab (Dieng, 2022) ....................................................................... 8
Figure 5: Fruit de Adansonia digitata (Diop et al., 2005) ............................................. 9
Figure 6: Graines de Adansonia digitata ([Link], juillet 2024 cité par
Malam et al., 2024).................................................................................................. 9
Figure 7: Carte administrative de la région de l’extrême-nord montrant la localité ou
les fruits ont été récoltés ............................................................................................... 21
Figure 8: Fruits d’Adansonia digitata récoltés ............................................................ 22
Figure 9: les graines nettoyées mises dans les conditions de séchage ......................... 22
Figure 10: Les graines de Baobab Scarifiées ............................................................... 23
Figure 11: Graines misent dans les conditions de germination ................................... 24
Figure 12: Graines récoltés à un intervalle de 48heures et conservés au réfrigérateur 24
Figure 13: Sortie de la radicule (fin de la germination) ............................................... 24
Figure 14: Variation de la Teneur en acide aminé dans les graines témoins et dans les
graines en cours de germination . ................................................................................. 30
Figure 15: Courbe d’étalonnage de la densité optique de l’acide amine ..................... 31
Figure 16: Variation de la Teneur en composés phénoliques totaux (mg/g) dans les
graines témoins et les graines en cours de germination. ............................................... 32
Figure 17: Courbe d’étalonnage de la densité optique des composés phénoliques ..... 32
Figure 18 : Variation de la Teneur en sucre réducteur (mg/g) dans les graines témoins
et les graines en cours de germination . ........................................................................ 33
Figure 19: Courbe d’étalonnage de la densité optique des sucres réducteurs ............. 34
Figure 20: Variation de la Teneur en sucres solubles totaux dans les graines témoins et
les graines en cours de germination . ............................................................................ 35
Figure 21: Courbe d’étalonnage de la densité optique des sucres solubles totaux ...... 35
Figure 22:Variation de la Teneur en protéines totales (g/100g) de MS dans les graines
témoins et les graines en cours de germination. ........................................................... 36
Figure 23: Courbe de variation de la densité optique en fonction de la concentration
des protéines totales ...................................................................................................... 37

[Texte] Page VIII


LISTE DES TABLEAUX
Tableau I : Quelques noms vernaculaires du baobab (Wickens, 1982 ; Kherhero,
1974 ; Sidibee et williams, 2002 ; Alioune et al., 2018) ................................................ 4
Tableau II : Résultats des teneurs en matière frais des acides aminés, teneur en
matière frais des sucres réducteurs, teneur en matière frais des sucres solubles totaux,
teneur en matière frais des composés phénoliques et en protéines ............................... 61
Tableau III : Masse aqueuse et solution d’éthanol et méthanol prélevés ................... 62

[Texte] Page IX
LISTE DES SIGLES ET ABRÉVIATIONS
µg : Microgramme ;

ADNS : Acide dinitrosalicylique ;

BSA : Bovine serum albumin ou Albumine de sérum bovin en français ;


DO : Densité optique ;
ES : Embryon somatique ;

EZ : Embryon zygotique ;

fd : Facteur de dilution ;
H2SO4 : Acide sulfurique ;

HCL : Acide Chloridrique ;

MF : Matière Fraiche.

mg : Milligramme ;

ML : Millilitre ;

MS : Matière sèche ;

Na2CO3 : Bicarbonate de sodium ;


NaOH : Hydroxyde de sodium ;

Pe : Prise d’essai ;
TAa : Teneur en acides aminés totaux ;
TMS : Teneur en matière sèche ;
TPt : Teneur en polyphénols totaux ;

TSSR : Teneur en sucres solubles réducteurs ;

[Texte] Page X
INTRODUCTION
Reconnu comme l’un des arbres emblématiques du sahel, le baobab Africain
(Adansonia digitata) est une angiosperme appartenant à la famille des bombacacées
(Diarrasouba et al., 2022 ; Venter et Witkowski, 2010). C’est un arbre remarquable qui
attire l’attention par sa taille énorme, son tronc grotesque et épaissi (Kotina et al.,
2017). L’arbre a plusieurs usages, la pulpe du fruit et ses feuilles sont comestibles
(Cisse, 2012), il est également utilisé comme fournisseur de fibre, de fourrage et de
médicaments (Gebauer et al., 2016). En outre le baobab joue un rôle important sur les
plans socio-culturel (Akinnifesi et al., 2006), alimentaire (Assogbdagjo et al., 2009),
économique (Chuimvuramahwe et al., 2011),médical (Folega et al., 2012 ; Krishnappa
et al., 2012), écologique (Assogbadjo et al., 2010 ; Assogbadjo et Loo,
2011).L’exploitation excessive dont il fait l’objet compromet sa capacité à produire
des fruits et à disperser ses graines ce qui entraine une rareté de ses plantules (Chia et
al., 2008). Les activités anthropiques telles que les feux de brousse, le déboisement et
le surpâturage limitent la régénération du baobab par destruction des semences et des
plantes (Schumann et al., 2010 ; Venter et Witkowski, 2011 ; Dube et al., 2017). Il
apparait nécessaire et urgent de domestiquer la plante afin d’augmenter le rendement
et de sauvegarder l’espèce (Jackering et al., 2019). La reproduction par graine s’avère
difficile à cause de leur entrée en dormance et ne permet pas de conserver les
caractères organoleptiques supérieurs (Diop et al., 2005 ; Assogbadjo et al., 2006 ;
cités par Agbohessou et al., 2020). La reproduction asexuée offre l’avantage de
stabiliser les caractères recherchés. Parmi les techniques de cette reproduction,
l’embryogenèse somatique permet une production rapide et à grande échelle des
plantules (Lelu et Thompson, 2000). Chez le baobab aucune étude n’a été menée pour
sa reproduction par embryogenèse somatique, d’où l’intérêt de cette étude. La réussite
de l’embryogenèse somatique passe par la maitrise d’un certain nombre des facteurs
(interne et externe à la plante) parmi lesquels l’enrichissement des milieux des cultures
pour les explants (Morel, 2014). Les embryons zygotiques et les embryons somatiques
ayant les mêmes besoins nutritifs (Lelu et Thompson, 2000), et en absence
d’information sur l’application de la technique de l’embryogenèse somatique sur le
baobab, il serait intéressant d’analyser l’endosperme des graines au cours de la

[Texte] Page 1
germination pour s’informer sur les besoins nutritifs des embryons au cours de ce
processus de développement (Nonogaki, 2006). Ainsi, les acides aminés sont
essentiels pour la germination des graines et jouent un rôle clé dans la synthèse des
protéines, la régulation du métabolisme essentiels pour la croissance de l’embryon
(Galili et Amir, 2013 ; Weichert et al., 2010) ; les composées phénoliques protègent
l’embryon contre le stress oxydatifs et les dormances causées par les radicaux libres (
Rice- Evans et al., 1997), ils régulent les processus biochimiques et contrôlent la
germination et la croissance de l’embryon (Peer et Murphy, 2007) ; les sucres solubles
réducteurs, tels que le glucose et le fructose, servent de source d'énergie pour la
germination et la croissance de l'embryon, ils régulent les processus biochimiques pour
fournir l'énergie nécessaire à la germination (Taiz & Zeiger, 2010) ; les sucres solubles
totaux servent également de source d'énergie pour la germination et la croissance de
l’embryon, et permettent la synthèse des parois cellulaires et d'autres composés
nécessaires à la croissance et au développement de la plantule (Nonogaki et al., 2010) ;
Les protéines totales sont essentielles pour la germination des graines, ils stimulent les
processus métaboliques, en fournissant des enzymes nécessaires à la mobilisation des
réserves nutritives (Gallardo et al., 2002), et en participant à la protection contre les
stress environnementaux (Rajjou et al., 2012). Ces composés ont été analysés dans les
graines. L’objectif de ce travail est de contribuer à la régénération par l’embryogenèse
somatique de Adansonia digitata. Et de façon spécifique il est question d’évaluer dans
l’endosperme des graines de Adansonia digitata au cours de la germination : Les
variations de teneurs en acides aminés ; Les variations de teneurs en composés
phénoliques ; Les variations de teneurs en sucre soluble ; Les variations de teneurs en
sucre réducteur ; Les variations de teneurs en protéines.

[Texte] Page 2
CHAPITRE I : REVUE DE LA LITTERATURE

I-1. Généralités sur Adansonia digitata

I-1-1. Position systématique et dénominations


Adansonia digitata occupe la Position suivante en Systématique (Diallo,
2022 ; Alioune et al., 2018).

Règne Plantae
Sous-règne Tracheobionta
Embranchement Angiosperms
Sous-embranchement Eudicotyledons
Classe Dicotyledones (Magnolpsida)
Sous-classe Dillenniida
Ordre Malvales
Famille Bombacaceae
Genre Adansonia
Espèce Adansonia digitata

Le baobab possède plusieurs noms vernaculaires (Tableau I) qui varient selon


les régions géographiques ainsi que le dialecte ou la langue des populations locales
(Alioune et al., 2018).

[Texte] Page 3
Tableau I : Quelques noms vernaculaires du baobab (Wickens, 1982 ; Kherhero,
1974 ; Sidibee et williams, 2002 ; Alioune et al., 2018)

Pays Langues Noms vernaculaires


Bambara Sira
Baoulé Fromdo
Diola Bubak, buba, bubakabu
Dogon Oro
Malinké Bavdi, sirra, boki
Mandingue, Socé Sito, sira
Afrique occidentale
Maure Téydum, téyhum, téyduma
(Burkina Faso, Côte d’Ivoire,
Mali, Sénégal) Moré Trega, twega, toayga, toéga
Niominka Bak
Poular,Toucouleur Boy, boïo, bore, bôki, book
Sarakolé Kidé
Sérère Bâk, mbak
Wolof Guy
Afrique centrale Arabe (Tchad) Hamar, hamaraya, hahar
(Niger, Nigeria, Tchad, Foulani Boki
Cameroun) Haoussa Kuka
Amhara Bamba
Arabe (Soudan) Habhab, Tebeldi, humr, homeira
Chichewa Mnambe, Mlambe
Afrique orientale et australe Kamba Mwambo
(Ethiopie, Kenya, Masaï Olimisera
Mozambique,
Mérou Muramba
Somalie, Soudan, Tanzanie,
Zimbabwe) Ndebele Umkhomo
Somalie Yag
Swahili Mbuyu
Yao Mlonje
Baobab, Monkey bread tree,
Anglais Senegal calabash (fruit),
Upside-down tree…
Europe
Baobab, pain de singe (fruit),
(Angleterre, France,
Français arbre aux calebasses,
Portugal)
arbre de mille ans…
Portugais Cabaçevre
Asie
Hindi Gorakh-imli, hathi-khatiyan
(Inde)

[Texte] Page 4
I-1-2- Origine et distribution
L’origine du terme est néanmoins controversée (Gabar, 2005). Mais le baobab
serait originaire d’Afrique tropicale (Malam et al., 2024), le mot baobab serait une
translittération du terme arabe « bu hibab » signifiant « fruit aux nombreuses graines »
(Hafiz, 2013 ; Malam et al., 2024). L’aire de répartition de l’espèce Adansonia
digitata L. est très vaste. En Afrique, cette espèce est présente (Fig.1) dans les régions
semi-arides et subhumides situées au sud du Sahara (Diop et al., 2005). La zone de
distribution du baobab est très vaste. À l’Ouest, sa distribution va du Cap-Vert aux
plaines côtières du Ghana, du Bénin et du Togo. Au Nord, elle est limitée par le
Sahara. En Érythrée et en Somalie, le baobab pousse principalement dans les plaines,
tandis qu’au Soudan on le trouve dans les montagnes du Nouba et jusqu’à 1500 m
d’altitude en Éthiopie. Il s’est également implanté dans certaines zones à climat
équatorial comme le Gabon et la république démocratique du Congo, ainsi que sur les
îles africaines caractérisées par une saison sèche marquée telles que l’ouest de
Madagascar, les Comores, et Sao Tomé (Wickens, 1982 ; Sidibé et Williams, 2002).
La distribution du baobab est limitée dans certains pays. En effet, au Tchad, on ne le
trouve que dans l’ouest, en Afrique du Sud, il se limite essentiellement au Transvaal et
au Cameroun, on le retrouve uniquement dans les régions du Nord et de l’Extrême
Nord (Sidibe et Williams, 2002 ; Assogbadjo et al., 2006). Diop et al., 2005 indiquent
que le baobab a été exporté en dehors du continent africain par les commerçants
arabes, français et portugais. Par conséquent, le baobab s’est retrouvé en Asie (Inde,
Indonésie, Sri Lanka, Malaisie, Java, Philippines, Yémen, Iran, Taiwan), en Guyane,
en Nouvelle-Calédonie, en Floride, à Hawaï et aux îles Maurice et de la Réunion (Diop
et al., 2005 ; Sidibe et Williams, 2002 ; Bell et al.,2015 ; Parsa, 1959).

[Texte] Page 5
Figure 1: Distribution géographique de Adansonia digitata (Wan et al., 2024)

I-1-3- Description botanique


L’espèce Adansonia digitata Lin., présente sur le continent Africain, est l’espèce
la plus répandue, la plus reconnaissable et la mieux décrite (Soloviev et al., 2004).
C’est un arbre massif avec un tronc épais et une couronne large et étalée il peut
atteindre des hauteurs de 10 à 30 mètres et son tronc cylindrique, souvent renflé à la
base, peut avoir un diamètre supérieur à 10 mètres (Odoom, 2021). L’écorce est lisse
et verte chez les jeunes arbres, mais devient plus rugueuse et grise avec l’âge (Wanjeri
; 2020). Elle est très fibreuse dans sa partie interne. Le bois mou est gorgé d’eau
possède une structure stratifiée (Assogbadjo, 2006). Les feuilles sont composées et les
pétioles atteignent jusqu’à 20cm de diamètre (Diop et al., 2005). Elles sont alternes,
digitées et présentent cinq à sept folioles oblongues, longuement pétiolées de (8 à 16)
cm, acuminées à l’apex, décurrentes à la base, avec 13 à 20 paires de nervures
secondaires. Le limbe, doté de marges entières ou denticulées, est le plus souvent
glabre et brillant sur sa face supérieure et légèrement pubescente sur sa face inferieure.
Les stipules sont précocement caduques, subulées ou étroitement triangulaires, de 2 à 5
mm de long, glabre à l'exception des bords ciliés (Kehlenbeck et al., 2015). Les fleurs
ont 10 cm de diamètre et sont des boules blanches constituées par les étamines
[Texte] Page 6
entourant un pistil redressé par le haut. Les grands pétales blancs sont aussi retroussés
vers le haut. Le tout au bout d’une longue ficelle de 50 ou 60 cm de long (Douamba,
2006). Les fruits sont très variables, généralement globuleux à ovoïdes mais parfois
oblongs cylindriques, souvent de forme irrégulière, 7,5-54 cm de long, 7,5-20 cm de
large, apex pointu ou obtus, couvert de poils veloutés jaunâtres parfois verdâtres
(Dieng, 2022). Le fruit est une capsule accrochée à une longue tige avec une cosse
dure et ligneuse mesure de 20 à 30 cm de long (Diop et al., 2005). Les graines sont
réniformes et noyées dans la pulpe, brun foncé à noir rougeâtre avec testa lisse et 10-
13 x 8-10 x 4-5 mm en raison de l'aplatissement latéral. (Dieng, 2022). La dispersion
des graines de baobab se fait généralement par la zoochorie (Wilson et Traveset,
2000), par l’hydrochorie ou par l’homme. Les racines sont pivotantes et proéminente,
mais sont bientôt remplacés par les latérales. Les arbres matures ont des racines qui
s'étendent rarement au-delà de 2 m et sont relativement peu profondes : une raison
expliquant pourquoi les arbres sont souvent renversés dans leur vieil âge (Kehlenbeck
et al., 2015).

[Texte] Page 7
Figure 2: Pied d’Adansonia digitata. (Diop et al., 2005)

Figure 3 : Feuilles d’Adansonia digitata a, b, c, d, e (3 à 7 folioles) (Alioune et al.,


2018)

Figure 4: Fleur de baobab (Dieng, 2022)

[Texte] Page 8
Figure 5: Fruit de Adansonia digitata (Diop et al., 2005)

Figure 6: Graines de Adansonia digitata ([Link], juillet 2024 cité par


Malam et al., 2024)
I-1-4- Phénologie
La phénologie de Adansonia digitata est étroitement liée au cycle pluviométrique
(Diop et al., 2005). Pour la fructification de Adansonia digitata L., la période de
floraison varie considérablement. En général, elle peut se produire à tout moment, sauf
pendant le pic de la saison sèche, et si les feuilles sont présentes ou non (Baum et al.,
cités par Assogbadjo et al., 2008). Aussi, le moment de la floraison semble différé
entre des populations isolées géographiquement, à cause des différences climatiques
régionales (Sidibé et Williams, 2002). Après la pollinisation, le développement des
fruits dure de (5 à 6) mois généralement varie en fonction de la zone (FAO, 1988 cité
par Gebauer et al., 2002 ; Wickens, 1982 cité par Savard, 2003, Diop et al., 2005 ;
Sidibé et Williams, 2002). En outre, le temps nécessaire pour qu’un pied de baobab
produise des fruits varie de 8 à 23 ans (Gebauer et al., 2002).

[Texte] Page 9
I-1-5-Habitat et dispersion
Adansonia digitata est présente dans les zones sahélo-soudaniennes (Jesen et al.,
2011). C’est une espèce protégée, souvent plantée, dont la présence est liée à
l’occupation humaine. En brousse, elle signale notamment les villages disparus
(Thiombiano et Tranchant, 2011). Il pousse sur une large gamme de sols bien drainés,
des argiles aux sables mais pas sur des sables profonds non consolidés, ou il est
incapable d’obtenir suffisamment d’humidité ou d’ancrage, en général il se développe
le mieux dans les régions où les précipitations se situent en dessous de 400 et 800mm
(Korbo et al., 2012). La vaste zone de distribution de Adansonia digitata sur le
continent africain est notamment liées aux conditions climatiques et à la qualité du sol,
qui néanmoins à une préférence pour les sols calcaires, et à la large gamme de
conditions climatiques admise (Wickes, 1982 ; Sidibé et William, 2002).

I-1-6- Importance
Plusieurs usages sont connus chez Adansonia digitata L, notamment sur plusieurs
plans tels que : le plan alimentaire, médicinal, cosmétique, artisanal, commercial,
écologique.

I-1-6-1- Importance alimentaire


Le baobab fournit des vitamines, des minéraux et de l’Energie qui ne sont pas
disponibles dans les céréales des zones sèches d’Afrique (Jensen et al., 2011).

La pulpe du fruit reste la partie la plus exploitée et la plus consommée (Diop et


al., 2005 ; Cisse et al., 2009). Elle est utilisée directement comme ingrédient dans
diverses préparations pour ses propriétés liante, épaississante et acidifiante (Codjia et
al., 2001 ; Sidibé & Williams, 2002). Elle entre ainsi dans la composition de
nombreuses préparations céréalières telles les bouillies ou couscous, de sauces ou de
crèmes d’accompagnement (Pamba et al., 2018). Elle est également transformée en
confiture (Ambe, 2001 ; Cisse et al., 2008). Par ailleurs, la pulpe du fruit de baobab est
de plus en plus valorisée comme jus et commercialisée sur les places publiques et dans
certains centres commerciaux en Afrique (Tembo, 2016). C’est cette dernière forme
d’utilisation de la pulpe qui est la plus connue au Cameroun, mais pas encore assez
vulgarisée et exploitée (Abdoulwaliyu et al, 2024). Dans 100 g de pulpe du fruit du

[Texte] Page 10
baobab on retrouve 75,6 % de glucides, 2,3 % de protéines et très peu de lipides
(0,27%) (Wehmeyer, 1996). Le fruit du baobab est connu pour sa haute teneur en
acide ascorbique (Vitamine C). Une masse de 100 g de pulpe peut en effet contenir
jusqu’à 300 mg de vitamine C, une quantité 6 fois supérieure à celle présente dans une
orange (Cisse et al., 2008). Les feuilles de baobab (Adansonia digitata L.) sont très
largement consommées en Afrique comme légumes surtout par les populations locales
et du fourrage pour le bétail (De Caluwé et al., 2010). En effet, les feuilles jeunes
peuvent être consommées crues ou bouillies (Malam et al., 2024 ; Assogbadjo et Loo
2011). La poudre de feuilles de baobab séchées et tamisées, appelée le « bokko » au
Cameroun, est utilisée comme liant dans le couscous du mil ou pour aromatiser les
sauce (Assogbadjo et Loo 2011 ; Diop et al., 2005). Les feuilles sont très riches en
calcium et fer et constituent une source appréciable de potassium et de magnésium
(Boukari et al., 2001). Les feuilles sont particulièrement riches en vitamine A. les
collecteurs de feuilles recherchent des caractéristiques particulières, notamment le gout
des feuilles, le mucilage, la disponibilité des feuilles et la hauteur des arbres pour
sécher et conserver et vendre (Jensen et al., 2011). Transformées en huile, Dans
certaines cuisines africaines, les graines de baobab torréfié sont consommées comme
un succédané du café (Salih et Yahia, 2015). Après la cuisson ou grillée, l’amande des
graines est consommée directement comme épaississant sous forme de poudre (Diop et
al.,2005). Pilées, les graines servent d’épaississant dans de nombreuses sauces, soupes
ou sont utilisées en association avec d’autres ingrédients (arachides par exemple) pour
la préparation de crèmes sucrées (Codjia et al., 2001 ; Sidibé & Williams, 2002).

I-1-6-2- Importance médicale et cosmétique


Les graines tiennent une place importante dans l’alimentation et en médecine
traditionnelle. Outre les diverses préparations alimentaires qui peuvent être faites à
partir des différentes parties du baobab dans diverses localisées, il est utilisé pour
produire certains médicaments et cosmétiques (Kabore et al, 2011). Les utilisations
médicinales de la plante sont nombreuses et variées. Partout en Afrique, les différentes
parties du baobab telles que les racines, le tronc, l’écorce, les feuilles, la pulpe et les
graines sont exploitées à des fins thérapeutiques (Zahrau et al, 2014). Dans la
pharmacopée traditionnelle africaine l’écorce du baobab entre dans la préparation de
[Texte] Page 11
nombreux remèdes, en particulier pour les problèmes digestifs, mais aussi
inflammatoires (Codjia et al., 2001 ; Sidibe et Williams, 2002). Ses feuilles auraient
des vertus médicinales prouvées, on y trouve de la gomme et du mucilage, très
efficaces pour lutter contre la dysenterie (Kerharo & Adam, 1974). Feuilles
pulvérisées utilisées pour traiter la transpiration abondante, l’âcreté du sang, les fièvres
inflammatoires, les diarrhées accompagnées de dysenterie (Assogbadjo et Loo, 2011).
Le macéré des jeunes rameaux est utilisé contre la toux (Thiombiano et Tranchant,
2011 ; Assogbadjo et al., 2005 ; Sidibe & Williams, 2002). La pulpe est utilisée
comme fébrifuge, analgésique, anti-diarrhéique, anti-dysenterie et dans le traitement
de la variole et de la rougeole Kerharo et Adam, 1974). La pulpe possède également
des propriétés anti-oxydantes, antiplasmodiales, analgésiques, antianémiques,
cardioprotectrices, anticancéreuses, hépato-protectrices, antidiabétiques (Lesschaeve et
Noble, 2005 ; Karumi et al., 2008 ; Chadare et al., 2009 ; Fahmy, 2013 ; Ghoneim et
al., 2016). Des graines sont extraites une huile riche en acides gras essentiels (acide
oléique, linoléique et linolénique en particulier) utilisée dans l’alimentation humaine et
en cosmétique. Cette huile soulage la douleur provoquée par les brûlures et régénère
rapidement les tissus épithéliaux, en rendant ainsi la peau élastique (Codja et al., 2001
; Sidibe & Williams, 2002). En Sierra Léone, la racine sous forme de poudre est
utilisée comme stimulant de l’activité sexuelle (Codja et al., 2001 ; Sidibe & Williams,
2002). L’écorce sous forme de poudre est appliquée sur la plaie pour accélérer la
cicatrisation (Thiombiano et Tranchant, 2011).

I-1-6-3-Importance artisanale et commerciale


Le baobab fournit également des fibres (écorce) utilisées pour fabriquer de la
corde. Il est aussi reconnu comme source de revenu d’où l’attention particulière
accordée à ses produits dans le commerce national et sous-régional (Bationo, 2009).
Certaines parties de la plante sont traditionnellement valorisées pour la fabrication de
cordages ou vanneries avec les fibres de l’écorce interne ou les racines, de récipients
avec les coques des fruits, de colle avec le pollen des fleurs, de teintures avec les
racines (Sidibe & Williams, 2002 ; Wickens, 1982).

[Texte] Page 12
I-1-6-4- Importances écologique
Le baobab est une composante vitale de l’écosystème sec et semi-aride ou il
pousse. Ils réduisent l’érosion du sol et offrent un couvert ou de l’ombre grâce à leur
canopée (Wikkens et Lowe, 2008). Les animaux sauvages et les bétails utilisent
l’ombre, surtout pendant les heures chaudes de la journée. Ces animaux laissent des
excréments autour du tronc de l’arbre, ajoutant des nutriments au sol et de la nourriture
pour d’autres organismes de la chaine alimentaire (Venter et Witkowski, 2011 ;
Wickens et Low, 2008). Il peut résister à des températures allant jusqu’à 42 o C, mais
reste très sensible au gel et se limite à des zones où ce phénomène a lieu au maximum
un jour par an (Assogbadjo et Loo, 2011).

I-1-6-5- Reproduction du baobab et difficultés de régénération (Adansonia


digitata)
Le baobab se propage ou se multiplie habituellement par semis direct (Sidibe &
Williams, 2002 ; Wickens, 1982), Un kilogramme de semences contient entre 2000 et
3000 graines. La germination requiert 3 à 5 semaines. Afin de l’accélérer, les graines
sont traditionnellement soit scarifiées, soit immergées avant semis 1 à 2 jours dans de
l’eau froide ou une quinzaine de minutes dans de l’eau bouillante. Les taux de
germination sont dans ce cas souvent médiocres, parfois inférieurs à 10 %. Un
trempage dans une solution d’acide sulfurique ou nitrique concentrée suivi d’un
rinçage à l’eau froide permet d’obtenir un taux de germination supérieur à 86 %. Les
durées de traitement recommandées sont très variables selon les auteurs : 15 min à12 h
pour le trempage acide et 10 min à 24 h pour le rinçage (Danthu et al., 1995 ;
Razanameharizaka et al., 2006). Généralement, les semis se font en godet par paquet
de trois graines 3 à 5 mois avant la saison des pluies. Les plantules émergent de terre
après 4 jours à 3 semaines. Compte tenu de la taille des individus adultes, l’écartement
doit être important (> 10 m) (Anon, 2003b ; Diop et al., 2005). Le baobab peut
également se reproduire par voie végétative, par bouturage de tiges ou par greffage
(Sidibe & Williams., 2002). Le taux de réussite est compris entre 46 et 98 %. Cette
technique permet non seulement d’obtenir des plants appropriés pour la production de
fruits, mais conduit également à des arbres plus petits (Agbohessou, 2020 ;
Assogbadjo et al., 2010). Ce qui facilite la récolte des fruits, et surtout à des floraisons
[Texte] Page 13
observées dès la troisième année. Cela représente un avantage considérable par rapport
à la propagation par semis. Le marcottage est également utilisé pour multiplier le
baobab notamment pour les variétés qui ne produisent pas de graine viable
(Assogbadjo et al., 2010).

Cette situation entraîne une surexploitation de cette espèce à usages multiples et


à fort potentiel socio-économique, plaçant ainsi les populations de cette espèce dans
une dynamique régressive caractérisée par la raréfaction ou l’absence des jeunes
individus (Ouédraogo et al., 2006). Cette surexploitation entraine un déséquilibre
croissant entre la disponibilité de la ressource naturelle et la demande en produit
forestiers non ligneux en raison de la croissance continue de la population (Ariori et
Ozer, 2005). Le taux élevé de dégradation des essences végétales dues aux activités
anthropiques et aux aléas climatiques explique parfois la faible régénération naturelle
du baobab observée dans certains habitats écologiques (Venter, and Witkowski, 2011).
Les feux de brousse, l’utilisation incontrôlée des ressources dans les habitats naturels
et les aires protégées des forêts et des savanes sont autant de phénomènes qui
influencent leur régénération naturelle (Masahiro, 2003).

I-2-Généralités sur L’embryogenèse

I-2-1- Définition et caractéristiques


L’embryogenèse chez les végétaux est le processus qui précède la germination et
qui permet d’obtenir un individu (l’embryon) nouveau à la suite de la fécondation
(Tamborindeguy, 2004). Cette étape du développement est donc essentielle pour la
survie des espèces et fondamentale pour la vie du futur individu car c’est au cours de
ce processus qu’il sera formé et ses potentialités définies (Moussouni, 2008).

 Embryogenèse zygotique
L’embryogenèse zygotique est le processus qui permet d’obtenir un individu
nouveau à la suite de la fécondation. Elle débute toujours à partir d’une seule cellule,
le zygote, qui se forme à la suite de la fécondation (Williams and Maheswaran, 1986).
Apres la différenciation Les embryons zygotiques s’orientent vers un programme de
maturation et de préparation à la vie ralentie (Aberlenc-Bertossi et al., 2003). La

[Texte] Page 14
réduction de la teneur en eau et les modifications des teneurs en régulateurs de
croissance induisent l’arrêt du développement des embryons zygotiques (Yeung,
1995).

 L’embryogenèse somatique
L’embryogenèse est appelée somatique quand l’embryon est formé à partir des
cellules issues du soma, par opposition aux cellules du germe ou sexuelles (Lelu et
Thomson, 2000). Ainsi l’embryogenèse somatique est une reproduction asexuée car
l’embryon se développe en l’absence de fusion gamétique. Par conséquent les
embryons somatiques sont les clones de l’individu à partir du qui ils ont été produits
(Savane, 2003). L’embryogenèse somatique peut être indirecte, c’est à dire d’origine
multicellulaire, ou directe lorsqu’elle dérive d’une seule cellule (Williams and
Maheswaran, 1986). Les embryons somatiques passent par des stades morphologiques
et ontogénétiques similaires à ceux des embryons zygotiques (Merkle et al., 1995).
Toutefois, les processus d’embryogenèse zygotique et somatique divergent après
l’étape de la différentiation. Les embryons somatiques croissent et se développent de
façon continue, activant les méristèmes caulinaires et racinaires sans présenter de
quiescence (Yeung, 1995 ; Sané et al., 2006). Les embryons somatiques germent
précocement, ce qui limite l'intérêt de la méthode par manque de possibilité de
stockage (Yeung, 1995). Selon Borman, (1994) l’absence de maturation des embryons
somatiques constitue souvent le principal facteur limitant la technologie des semences
artificielles. Le suspenseur qui peut soit ne pas se former lors de l’embryogenèse
somatique ou bien avoir une morphologie très différente (Yeung and Meinke, 1993).
Les embryons somatiques ne rentrent pas en dormance. En revanche, l’expression des
gènes semble être similaire chez les deux types d’embryons (Perez-Grau and
Goldberg, 1989).

I-2-2- Différentes étapes d’embryogenèse


L’embryogenèse zygotique permet la mise en place de l’architecture de la
future plante, avec l’ébauche des futurs organes et des méristèmes apicaux caulinaire
et racinaire, reliés par un axe embryonnaire. L’embryon se développe d’après un
patron bien défini par une succession de divisions cellulaires coordonnées permettant

[Texte] Page 15
la mise en place d’une polarité apico-basale et d’un axe de symétrie radiale (Zhang and
Laux, 2011).

I-2-3- Avantages et limites de l’embryogenèse somatique


 Avantages

Le système idéal de multiplication végétative aurait les caractéristiques


suivantes : il serait indépendant du génotype, indépendant de l’âge de la plante,
possédant un taux de multiplication élevé et uniforme, disponible et utilisable à long
terme possédant un cout de production de plants bas (Lelu et Harvengt, 2002). Aucun
système multiplication végétative ne peut prétendre répondre à tous ces critères,
cependant comparé au bouturage, l’embryogenèse somatique se révèle intéressant pour
un certain nombre d’aspects (Lelu et Harvengt, 2002).

L’embryogenèse somatique trouve sa place dans un programme d’amélioration,


grâce au maintien de la juvénilité du tissu, et a un taux de multiplication élevé. Dans
un premier temps, L’embryogenèse somatique pourrait fournir suffisamment de copies
afin d’estimer avec précision les valeurs génotypiques de chaque arbre sélectionné
(Gautier, 2017). Dans un second temps, elle pourrait fournir du matériel pour le
déploiement de variété polyclonales (Bastien et al., 2013)

 Limites
L’embryogenèse somatique présente certaines limites. La première vient de la
méthode elle-même. En effet, il existe toujours une réticence reflexe face à du matériel
produit en culture in vitro du fait de risque éventuels de production de plants non
conformes génétiquement (Lelu et Harvengt, 2002). Elle présente le problème de non
synchronisation du développement des embryons somatiques et également des limites
des techniques de clonage à grande échelle et des difficultés du passage de l’embryon
somatique à la plantule (Himour, 2025)

I-2-4-Marqueur moléculaires du développement des embryons


L’EZ constitue la référence en matière de développement embryonnaire, référence
à approcher afin d'optimiser le développement de l'ES. Une meilleure compréhension
des différences physiologiques existant entre le développement de l’EZ et celui de

[Texte] Page 16
l’ES pourrait être obtenue grâce à l'analyse des profils d'expression génique. Cela
pourrait contribuer à l’amélioration des protocoles in vitro (Bonga et al., 2010). Les
analyses d'expression génique peuvent aussi être un outil utile pour le suivi du
développement de l'embryon, depuis l'acquisition de la compétence embryonnaire
jusqu'à la maturation (Feher et al., 2003). Ainsi, l’identification, dans un premier
temps, de marqueurs pouvant discriminer la qualité des embryons de différentes
lignées cellulaires, en termes de potentiel embryogène et en qualité de maturation,
permettrait la sélection de lignées embryogènes plus proches des EZ. Dans l’idéal, ces
gènes « marqueurs » devraient être universels, sensibles, détectables dans de petites
quantités de tissu, et révélateurs de processus spécifiques qui caractérisent chacune des
étapes ou des transitions au cours du développement (Lara-Chavez et al., 2012).
L'expression des gènes peut être visualisée par la présence des transcrits des protéines
qui en découlent, des acides aminés, des composes phénoliques, des sucres réducteurs,
des sucres solubles totaux (Le et al., 2010).

I-3- Rôles de quelques composes chimique sur la germination des embryons

I-3-1- Rôles biologiques des composés phénoliques


Les polyphénols ont une multitude d’activités biologiques dépendant de leur
structure chimique. Ils constituent une importante famille d’antioxydants dans le règne
végétal. Contrairement aux antioxydants synthétiques comme le butylhydroxyanisole
(BHA) et le butylhydroxytoluène (BHT) (Bounatirou et al., 2007). Les polyphénols
ont également un rôle dans le contrôle de la croissance et le développement des plantes
en interagissant avec les diverses hormones végétales de croissance. Ils permettent aux
végétaux de se défendre contre les rayons ultraviolets. Certains d’entre eux jouent le
rôle de phytoalexines comme les isoflavonols permettant de lutter contre les infections
causées par les champignons, ou par les bactéries (Makoi et al., 2007).

I-3-2- Rôles des acides aminés au cours de la germination


Les acides aminés jouent un rôle crucial au cours de la germination des graines
chez les végétaux. Ils ne sont pas seulement les éléments de base des protéines, mais
aussi des molécules bioactives essentielles qui influencent divers processus
physiologiques (Kasele, 2017 ; Møller et al., 2020) :

[Texte] Page 17
 Hydrolyse des Protéines : Pendant la germination, les protéines stockées sont
hydrolysées en acides aminés, qui servent de nutriments essentiels pour le
développement des jeunes plants. Cette libération d'acides aminés fournit les
matériaux de base nécessaires à la synthèse de nouvelles protéines impliquées dans la
croissance cellulaire (Kasele, 2017) ;
 Synthèse des Acides Nucléique : Les acides aminés sont également nécessaires
pour la synthèse des acides ribonucléiques (ARN) et des acides désoxyribonucléiques
(ADN), éléments fondamentaux pour la régénération et la transmission de
l'information génétique durant la croissance rapide qui accompagne la germination
(Møller et al., 2020) ;
 Amélioration de la Biodisponibilité Nutritionnelle : La germination augmente la
disponibilité et la digestibilité des acides aminés dans les graines. (Ayerza, 2016). Les
acides aminés sont fondamentaux pour le processus de germination des graines chez
les végétaux. Leur rôle va au-delà de la simple fourniture de matériaux pour la
synthèse des protéines : ils participent activement à la régulation du métabolisme, à la
réponse au stress et à l'amélioration de la qualité nutritionnelle des plantes.
Comprendre ces fonctions est crucial pour optimiser la germination et la culture des
espèces végétales.

I-3-3- Rôles des sucres réducteurs au cours de la germination


Les sucres réducteurs jouent un rôle essentiel au cours de la germination des
graines chez les végétaux. Ils servent de sources d'énergie et de carbone, soutenant
divers processus métaboliques nécessaires à la croissance initiale des plants. Il permet
entre autres :

 Fourniture d’Énergie : Les sucres réducteurs, tels que le glucose et le fructose,


sont rapidement mobilisés durant la germination. Ils fournissent l'énergie nécessaire
pour les processus métaboliques, notamment la respiration cellulaire, qui est
particulièrement intense lors des premières étapes de la croissance (Bewley et Black,
1994) ;
 Support à la Synthèse des Acides Aminés et des Protéines : Les sucres
réducteurs jouent un rôle clé dans la synthèse des acides aminés et des protéines. Ils

[Texte] Page 18
sont impliqués dans le métabolisme primaire, servant de substrats pour divers
processus biochimiques nécessaires au développement précoce des plants (Ghosh et
Dubey, 2018) ;
 Implication dans la Signalisation Cellulaire : Les sucres réducteurs participent
également à la signalisation cellulaire en influençant les niveaux d'hormones comme
l’auxine et la gibbérelline, essentielles pour la germination et la croissance. Ces
hormones régulent la division cellulaire et l'élongation, influence importante dans le
développement des jeunes plants (Rolland et al., 2006).

I-3-4-Roles des sucres solubles totaux au cours de la germination


Les sucres solubles totaux jouent un rôle clé au cours de la germination des
graines chez les végétaux. Ils sont essentiels non seulement en tant que source
d'énergie, mais aussi pour divers processus métaboliques qui supportent le
développement des jeunes plants. Il permet de :

 Fourniture d’énergie : Les sucres solubles, tels que le glucose, le fructose et le


saccharose, sont rapidement mobilisés lors de la germination, fournissant l'énergie
nécessaire pour les processus métaboliques critiques. La respiration cellulaire, qui
fournit de l'ATP (adénosine triphosphate) pour les activités enzymatiques et
énergétiques, dépend fortement de ces sucres (Bewley et Black.,1994).
 Soutien à la Croissance Cellulaire et développement : Les sucres solubles sont
également des précurseurs importants pour la synthèse des acides aminés, des
protéines et des acides nucléiques, qui sont nécessaires pour le développement
cellulaire. Ces composés sont essentiels pour la formation des tissus et la régénération
des cytokinines pendant la phase de croissance (Ghosh et Dubey., 2018).
 Régulation Hormonal et Communication Cellulaire : Les sucres solubles jouent
un rôle dans la régulation des hormones végétales, telles que les auxines et les
gibbérellines, qui sont cruciales pour la germination et le développement. Ils peuvent
influencer la signalisation cellulaire, entraînant des réponses adaptées aux conditions
environnementales (Rolland et al., 2006)

Les sucres solubles totaux sont essentiels durant la germination des graines chez
les végétaux. Ils fournissent l'énergie nécessaire, soutiennent la croissance cellulaire,

[Texte] Page 19
influencent la signalisation hormonale et participent à la protection contre le stress.
Comprendre le rôle de ces sucres peut aider à améliorer les pratiques agricoles et de
culture, favorisant ainsi le succès de la germination et la qualité des plantes cultivées
(Galili, 2014).

I-3-5- Rôles des protéines totales au cours de la germination


Les protéines jouent un rôle crucial au cours de la germination des graines chez
les végétaux. Elles interviennent dans une variété de processus biologiques essentiels
au développement des jeunes plants.

 Hydrolyse des Protéines : Lors de la germination, les réserves de protéines


stockées dans les graines sont rapidement hydrolysées en acides aminés. Ces acides
aminés servent de blocs de construction pour la synthèse de nouvelles protéines
nécessaires à la croissance cellulaire et au développement des tissus (Bewley et Black,
1994) ;
 Régulation du Métabolisme : Les protéines exercent un rôle clé en tant
qu'enzymes, catalysant des réactions biochimiques nécessaires durant la germination.
Par exemple, des enzymes comme l'α-amylase hydrolysent l'amidon en sucres simples,
qui sont essentiels pour fournir l'énergie nécessaire à la croissance (Kasele, 2017) ;
 Développement des Tissus Végétaux (croissance et Élongation) : Les protéines
sont essentielles pour la formation et l'élongation des cellules, ainsi que pour la
structuration des tissus. Elles interviennent dans la formation de la paroi cellulaire et
sont nécessaires à la croissance des jeunes plantules (Ghosh et Dubey,2018) ;
 Signalisation Cellulaire : Les protéines jouent un rôle crucial dans la
signalisation cellulaire. Les récepteurs protéiques sur les membranes cellulaires
peuvent détecter les hormones de croissance et d'autres signaux environnementaux,
permettant à la plante d’ajuster sa croissance en fonction des conditions extérieures
(Rolland et al., 2006).

[Texte] Page 20
CHAPITRE II : MATERIEL ET METHODES

II-1-Site de récolte
Les fruits ont été récoltés dans la localité de Kongola-djoulgouf-kodek, un
quartier de l’arrondissement de Maroua III, dans le département du Diamaré, région de
l’Extrême-Nord Cameroun, entre 10°62'805’’N degré de latitude Nord, 14°41'248’’E
degré de longitude Est, 370m d’altitude et 1m de précision (fig.13). Le climat est du
type Soudano-sahélien, à dominance sèche. Le régime climatique est uni-modal avec
deux saisons : une saison sèche plus longue s’étendant d’octobre à mai (9mois) et une
saison des pluies de juin à septembre (4mois). La température moyenne annuelle est de
28,7°C et les précipitations sont en moyenne de726, 2mm (Yaouba et Dieudonné,
2022) La végétation est du type soudano-sahélienne. En zone rurale, l’emploi se
concentre autour de l’agriculture, de l’élevage et de l’artisanat, tandis qu’on a le
commerce dans le milieu urbain (Minepat, 2002).

Figure 7: Zone d’etude

[Texte] Page 21
II-2-Matériel végétal
Le matériel végétal est constitué des graines de Baobab (Adansonia digitata), à
différentes étapes de germination et de graines témoins non mise en germination. Elles
ont été obtenues à partir des fruits (Figure 7) secs récoltés sur un arbre adulte.

Figure 8: Fruits d’Adansonia digitata récoltés


II-2-1-Extraction des graines d’Adansonia digitata
Les fruits ont été brisés à l’aide du marteau. La pulpe farineuse a été extraite et
après lavages successifs à l’eau coulante, ont été obtenues des graines propres et
exemptes de débris (fig. 8). Les graines ainsi nettoyées ont été mise à sécher à l’ombre
pendant 2 jours.

Figure 9: les graines nettoyées mises dans les conditions de séchage


II-2-2-Test de viabilité
Après séchage des graines, le test de viabilité a été réalisé par la méthode de
flottaison selon Assogbadjo et al., (2005). Le principe est basé sur l’observation du
déplacement des graines une fois mises en eau. Les graines immatures remontent à la
surface tandis que celles qui sont viables vont au fond du récipient. Cela a duré
pendant 15minutes d’observation afin de séparer nettement les graines. Les graines

[Texte] Page 22
flottantes ont été recueillies et jetées. Celles qui sont viables ont été séchées à l’air
libre avant le prétraitement.

II-2-3-Levée de la dormance
Après séchage, une partie a été mise dans des papiers plastiques et conservée au
congélateur à 4°C constituant les graines témoins pour les analyses biologiques. Le
restent des graines a subi une scarification mécanique (Fig. 9). Chaque graine a été
saisie à l’aide d’une pince et sa surface tégumentaire a été abrasée par frottement sur
une dalle. Suite à la scarification, les graines ont été soumises à une hydratation par
immersion dans de l’eau tiède à 35°C, maintenue dans une thermos, durant une
période de trois jours. À l’issue de ce trempage, une augmentation significative de leur
volume, atteignant le double de leur taille initiale, a été observée.

Figure 10: Les graines de Baobab Scarifiées


II-2-4-Germination des graines
Après leur retrait, les graines ont été mises en culture sur des substrats de coton
(fig.10). Elles ont été récoltées à un intervalle de deux jours et conservées à chaque
fois dans des papiers plastiques au congélateur (fig.11) à 4°C (en vue des analyses
biochimiques) jusqu’à l’émergence de la radicule au bout de 10 jours marquant la fin
du processus de germination (fig.12).

[Texte] Page 23
Figure 11: Graines misent dans les conditions de germination

Figure 12: Graines récoltés à un intervalle de 48heures et conservés au réfrigérateur

Figure 13: Sortie de la radicule (fin de la germination)

II-3-Methodologie

II-3-1-Analyses biochimiques
Pour l’analyse des différents paramètres chimiques, les graines de baobab ont
été broyées et ont été mises dans des bocaux opaques et gardées au frais à 4°C
jusqu’aux analyses. Les poudres obtenues ont subi une macération à froid au méthanol

[Texte] Page 24
80%, à l’éthanol 80% et à l’eau distillée respectivement. Les mélanges ont été filtrés et
les filtrats obtenus au méthanol 80%, à l’éthanol 80% et à l’eau distillée. Celles à l’eau
distillée ont été dilués au 1/10ème et ont été gardés au frais afin d’être utilisés pour
l’analyse quantitative. Cependant, les échantillons destinés à la détermination de la
teneur en protéines insolubles totales ont été séchés dans l’étuve à ventilation à 90° C
pendant 24heures jusqu’au poids constant et ont été utilisés pour la préhydrolyse.

II-3-1-1-Détermination de la teneur en matière sèche (TMS)


 Principe
La détermination de la TMS consiste à éliminer l’eau de l’amande broyer des
graines de baobab par chauffage à 90 °C dans une étuve à ventilation pendant 24h,
jusqu’à ce que la masse demeure constante.
 Mode opératoire
Dans des creusets vides préalablement pesés (M0) à l’aide d’une balance
électronique de marque Sartorius, environ quelques grammes des échantillons de
graines de baobab y ont été introduits et pesés (M1). Les creusets contenant les
échantillons ont été ensuite mis dans l’étuve à ventilation à 90 °C pendant 24 heures.
Après refroidissement, les creusets contenant les échantillons secs ont été pesés (M2).
Les essais ont été faits en deux répétitions pour chaque échantillon. La teneur en
matière sèche des échantillons (TMS) exprimée en pourcentage a été calculée selon la
méthode suivante :

( ) ( )

Avec M0 = masse des creusets vides ; M1= masse des échantillons et des
creusets avant d’être mise à l’étuve ; M2 = masse des échantillons et des creusets
refroidis après retrait de l’étuve.

II-3-1-2- Détermination de la teneur en acides aminés totaux


 Principe

Le dosage a été effectué selon la méthode de Michel (1968). La ninhydrine est


un composé aromatique utilisé comme révélateur des acides aminés, qui en présence

[Texte] Page 25
de ces derniers et à chaud à 90 °C, forme un complexe de couleur violette qui absorbe
à 530 nm au spectrophotomètre.
 Mode opératoire
Dans un tube pyrex, 0,2 ml d’échantillon ou de la solution étalon (Alanine 5
mg/ml) et 1 ml de Ninhydrine ont été introduits. Après une vigoureuse agitation, le
mélange a été porté au bain-marie bouillant à 90 °C pendant 5 minutes. Les
échantillons ont été refroidis à température ambiante puis, 1 ml d’éthanol a été ajouté
avant de lire la densité optique à 530 nm à l’aide d’un spectrophotomètre.
La courbe d’étalonnage de la densité optique en fonction de la concentration
d’Alanine (0-250 µg/ml) a été tracée pour calculer la teneur en acides aminés libres de
l’échantillon. Les opérations ont été faites en double. La teneur en acides aminés libres
est exprimée en milligramme équivalent Alanine par 100 grammes de matière sèche
(mgEA/100g).

( )

Avec TAa =Teneur en acides aminés totaux ; DO = Densité optique ; fd =


Facteur de dilution ; V = Volume total d’extraction ; Pe = Prise d’essai ; a = Pente de
la courbe d’étalonnage.

II-3-1-3- Détermination de la teneur en sucres réducteurs et sucre soluble totaux


 Principe
Le dosage a été effectué selon le protocole défini par Miller (1958). Le principe
est basé sur le fait que les sucres réducteurs (glucose, galactose, fructose) provenant de
la dégradation des macromolécules d’amidon sont, sous l’effet de la chaleur,
transformés en furfural. En présence des composés phénoliques tel que l’ADNS et à
chaud, le furfural forme un complexe rouge-brun qui absorbe à 530 nm.
 Extraction :
Environ 100 mg de poudre de graines de Baobab et 10 mL d’éthanol 80 % ont
été introduits tour à tour dans un flacon, puis le mélange a été agité pendant 24 heures
et filtré en utilisant le papier filtre. Le filtrat obtenu a été séparé en deux dont le
premier servant du dosage des sucres réducteurs solubles a été gardé au frais (-4 °C) et
le second filtrat a subi une hydrolyse à l’acide chlorhydrique (1M) et à chaud (90 °C)

[Texte] Page 26
pendant 10 minutes pour les sucres solubles totaux. Brièvement, 1 ml du filtrat a été
introduit dans un tube à vis de 10 ml dans lequel 0,5 ml de HCl (1M) y a été ajouté. Le
mélange a été porté au bain marie bouillant pendant 10 minutes à 90 °C et après
refroidissement, 0,6 ml de NaOH (1M) a été introduit. La neutralité du pH a été
vérifiée à l’aide du papier pH et les hydrolysats ont été gardés au frais (4 °C).

 Mode opératoire
Dans un tube pyrex, 0,5 ml d’échantillon ou d’étalon (galactose 10 mg/ml) et 1
ml de l’ADNS y ont été introduits tour à tour. Le mélange a été porté au bain marie
bouillant pendant 5 minutes à 90 °C, puis 1 ml d’eau distillé a été ajouté après
refroidissement. Les essais ont été faits en double répétition. La courbe d’étalonnage
de la densité optique en fonction de la concentration en galactose (0-500 µg/ml) a été
établie pour calculer la teneur en sucres solubles réducteurs et sucres solubles totaux,
exprimée en gramme équivalent galactose par 100 grammes de matière sèche
(mgEG/100g).

( )

Avec SSR = Teneur en sucres solubles réducteurs ; DO = Densité optique ; fd =


Facteur de dilution ; V = Volume total d’extraction ; Pe = Prise d’essai ; a = Pente de
la courbe d’étalonnage.

II-3-1-4-Détermination de la teneur en composés phénoliques totaux


 Principe
La détermination de la teneur en composés phénoliques totaux en utilisant le
Folin Ciocalteu a été réalisée selon le protocole décrit par Singleton et al. (1999). La
coloration bleue obtenue présente une absorption maximale à 750 nm et est
proportionnelle à la quantité de composés phénoliques présents dans le milieu.
 Mode opératoire
Dans un tube à essai, 0,2 ml d’échantillon ou de solution étalon (acide gallique)
a été introduit dans lequel 1 ml de Folin (dilué au 1/10ème) y a été ajouté. Le mélange a
été agité pendant 5 minutes avant l’ajout de 1mL de Na2CO3 (7,5 %). Le mélange a été
de nouveau agité et incubé à 30 °C pendant 30 minutes.

[Texte] Page 27
La courbe d’étalonnage de la densité optique à 750 nm en fonction de la
concentration de l’acide gallique (0-250 µg/ml) a été établie pour déterminer la teneur
en polyphénols totaux de chaque échantillon. Les opérations ont été faites en double.
La teneur de chaque forme des polyphénols totaux a été exprimée en milligramme
équivalent acide gallique par 100 grammes de matières sèche (mgEAG/100g).

( )

Avec TPt = Teneur en polyphénols totaux ; DO = Densité optique ; fd = Facteur


de dilution ; V = Volume total d’extraction ; Pe = Prise d’essai ; a = Pente de la courbe
d’étalonnage.
II-3-1-5-Détermination de la teneur en protéines totales

 Principe :
La teneur en protéines totales a été déterminée par la méthode
spectrophotométrique décrite par Bradford (1976). Il consiste à triturer chaque
échantillon et par la suite le neutraliser en présence de la base. Chaque filtrat obtenu à
pH neutre de l’échantillon servant ainsi à la détermination des protéines totales.
 Préhydrolyse
Dans un tube à vis de 15 ml contenant environ 100 mg de poudre de chaque
échantillon de graines de Baobab, 2,5 ml de H2SO4 (13M) y ont été introduits. Le
mélange a été trituré avec une baguette en verre pendant 30 minutes puis, 7,5 ml d’eau
distillée y ont été ajoutées. Le mélange a été agité pendant 5 minutes et porté au bain
marie à 90 °C pendant une heure puis refroidi dans un bain d’eau. Le mélange a été
filtré à l’aide du papier filtre et 0,2 ml de l’hydrolysat de chaque échantillon a été
introduit dans un autre tube à essai de 10 ml puis, neutralisé avec 0,75 ml de NaOH
(2N) en utilisant le papier pH. Après neutralisation, le volume du filtrat a été complété
à 4 ml avec de l’eau distillée. Enfin, chaque tube à essai contenant le filtrat à pH neutre
de l’échantillon a été agité pendant une minute et gardé au frais (-4 °C).
 Mode opératoire
Dans un tube en verre, introduire tour à tour 0,2 ml d’échantillon ou de l’étalon
BSA (0-20-40-60-80-100 µg/ml) et 1,5 ml de réactif de Coomassie (préalablement
dilué n fois). Agiter et incuber pendant 15 minutes à la température ambiante.

[Texte] Page 28
Lire la DO à 595 nm. Les opérations ont été faites en double. La teneur de
chaque forme des protéines totales a été exprimée en milligramme équivalent BSA par
100 grammes de matières sèche (mgEBSA/100g).

( )

Avec TPt = Teneur en protéines totales ; DO = Densité optique ; fd = Facteur de


dilution ; V = Volume total d’extraction ; Pe = Prise d’essai ; a = Pente de la courbe
d’étalonnage.

[Texte] Page 29
CHAPITRE III : RESULTATS ET DISCUSSION

III-1-RESULTATS

III-1-1-Variation des teneurs en acides amines


La variation de la teneur en acide aminés a été évaluée au cours de la
germination des graines de Adansonia digitata. Les résultats révèlent une dynamique
marquée au fil du temps. Dans les graines témoins (avant inhibition) la teneur en acide
aminé est de 11,298 mg/g MF. 2 jours après la mise en germination cette teneur chute
significativement à 5,874mg/g MF. Entre le 2ème et le 6èmejours une augmentation
significative est observée atteignant 11,092mg/g MF. Cette progression est suivie
d’une baisse marquée entre le 6èmejours et le 10èmejours la teneur retombant à
3,723mg/g MF. L’évolution en acides aminés au cours de la germination suit ainsi
l’allure d’une cloche.

Une analyse de variance a été effectuée, il en ressort qu’il existe une différence
significative entre les traitements au seuil de 5%. Le test post-hoc ont été effectué
ensuite pour déterminer les différences entre les différents traitements.

Les résultats de l’analyse de la teneur en acide aminé (mg/g) des échantillons


de Baobab sont présentés ainsi qu’il suit :

14,00
Teneur en acide aminé

12,00 a a
a
(mg/g de MF)

10,00
8,00
b b
6,00 c
4,00
2,00
0,00 Temps(jrs)
01 jour 22jours 3
4 jours 64jours 85 jours 6 jours
10

Figure 14 Variation de la Teneur en acide aminé dans les graines témoins et dans les
graines en cours de germination : les traitements ayant les même lettre (0 ,4 et 6jours)
et (2,8jours) ne sont pas significativement différents et ceux qui ont des lettres
différentes sont significativement différents (a-b, b-c, a-c).

[Texte] Page 30
0,7

0,6
y = 0,00575x

0,5

0,4

0,3

0,2

0,1

0
0 20 40 60 80 100 120

Figure 15 : Courbe d’étalonnage de la densité optique de l’acide amine


III-1-2- Variation de la teneur en composes phénoliques totaux
La variation de la teneur en composés phénoliques a été évaluée au cours de la
germination des graines de Adansonia digitata. Les résultats révèlent une dynamique
importante. Dans les graines témoins (avant inhibition) la teneur en composés
phénoliques est de 1,226 mg/g MF. 2jours après la mise en germination cette teneur
diminue à 0,768mg/g MF ; avant d’augmenter progressivement pour atteindre un pic
au 10èmejours (graines germées), avec une concentration de 7,379mg/g MF ; cette
valeur représente une teneur exceptionnellement élevée en composés phénoliques à ce
stade de germination
Une analyse de variance a été effectuée, il en ressort qu’il existe une différence
significative entre les traitements au seuil de 5%. Le test post-hoc ont été effectué
ensuite pour déterminer les différences entre les différents traitements.
Les résultats de l'analyse de la teneur en composés phénoliques totaux (mg/g)
des échantillons de Baobab sont présentés ainsi qu’il suit :

[Texte] Page 31
9,00
d
Teneur en composés phénoliques totaux (mg/g de

8,00

7,00

6,00

5,00
MF)

4,00 c
3,00
a
2,00 a a
b
1,00

Temps(jrs)
0,00
0 jour1 2
2 jours 4jours
3
6 jours
4
8 jours
5
10 jours
6

Figure 16 : Variation de la Teneur en composés phénoliques totaux (mg/g) dans les


graines témoins et les graines en cours de germination : les traitements ayant les même
lettre (0 ,4 et 6jours) ne sont pas significativement différents et ceux qui ont des lettres
différentes sont significativement différents (a-b, b-c, b-d, a-c, c-d, a-d,).

0,7

0,6
y = 0,00575x

0,5

0,4

0,3

0,2

0,1

0
0 20 40 60 80 100 120

Figure 17 : Courbe d’étalonnage de la densité optique des composés phénoliques

[Texte] Page 32
III-1-3-Variation des teneurs en sucres réducteurs
La variation de la teneur en sucre réducteur a été évaluée au cours de la
germination des graines de Adansonia digitata. Les résultats révèlent une dynamique
importante. . Dans les graines témoins (avant inhibition) la teneur en sucre réducteur
est de 7,274mg/g MF. 2jours après le début de la germination, cette teneur diminue à
5,795mg/g MF ; On observe donc une baisse initiale. Entre le 2ème et le 4èmejours la
teneur augmente significativement pour atteindre 13,736mg/g MF. Une diminution est
enregistrée entre le 4ème et le 6èmejours ou la teneur chute à 5,893mg/g MF ; puis une
forte augmentation est observée entre le 6ème et le 10èmejours, avec une concentration
maximale de 19,196mg/g MF. Cette dernière phase présente la plus forte concentration
en sucres réducteurs, indiquant que les graines germées génèrent une accumulation
importante en sucres réducteurs.
Une analyse de variance a été effectuée, il en ressort qu’il existe une différence
significativement entre les traitements de 5%. Le test post-hoc ont été effectué ensuite
pour déterminer les différences entre les différents traitements.

Les résultats de l'analyse de la teneur en sucre réducteur (mg/g) des échantillons


de Baobab sont présentés dans l’histogramme suivant :

25,00
Teneur en sucre reducteur (mg/g de

d d
20,00

c
15,00
MF)

10,00 a b
b
5,00

0,00 Temps(jrs)
1
0jour 22jours 43 jours 46jours 85 jours 6
10jours

Figure 18 : Variation de la Teneur en sucre réducteur (mg/g) dans les graines témoins
et les graines en cours de germination : les traitements ayant les même lettres (2ème et
6ème jours) et (8ème et 10ème jours) ne sont pas significativement différents et ceux qui
ont des lettres différentes sont significativement différents (a-b, b-c, b-d, a-c, c-d, a-d,).

[Texte] Page 33
0,5

0,4
y = 0,00076x
0,3

0,2

0,1

0
0 100 200 300 400 500 600

Figure 19 : Courbe d’étalonnage de la densité optique des sucres réducteurs


III-1-4-Variation des teneurs en sucres solubles totaux
La variation de la teneur en sucre soluble totaux a été évaluée au cours de la
germination des graines de Adansonia digitata. Les résultats révèlent une dynamique
notable au cours du temps. Dans les graines témoins (avant inhibition) la teneur en
sucre solubles est de 14,549 mg/g MF. 2jours après la mise en germination elle chute à
11,211mg/g MF. Entre le 2ème et le 4èmejours on observe une augmentation marquée
des sucres soluble totaux, La teneur passant de 11,211 à 27,867mg/g MF. Cette phase
est suivie d’une diminution entre 4ème et le 6èmejours avec une teneur qui redescend à
11,786 MF. Enfin entre le 6ème et le 10èmejours une nouvelle hausse significative est
enregistrée, atteignant un pic à 38,392mg/g MF, représentant la plus forte
concentration en sucres solubles totaux dans les graines germées.

Une analyse de variance a été effectuée, il en ressort qu’il existe une différence
significative entre un traitement et un autre de 5%. Le test post-hoc (Tukey HSD) ont
été effectué ensuite pour déterminer les différences entre les différents traitements.
Les résultats de l'analyse de la teneur en sucre soluble totaux (mg/g) des
échantillons de Baobab sont présentés dans l’histogramme suivant :

[Texte] Page 34
45,00
a
Teneur en sucres solubles totaux en (mg/g de
b
40,00

35,00
c
30,00

25,00
MF)

20,00 d
e e
15,00

10,00

5,00

0,00 Temps(jrs)
1 2 3 4 5 6
0 jour 2jours 4jours 6jours 8jours 10 jours

Figure 20 : Variation de la Teneur en sucres solubles totaux dans les graines témoins
et les graines en cours de germination : les traitements ayant les même lettres (2ème et
6ème jours) ne sont pas significativement différents et ceux qui ont des lettres
différentes sont significativement différents (a-b, b-c, b-d, a-c, c-d, a-d, a-e, b-e, c-e, d-
e,).

0,5

0,4
y = 0,00076x

0,3

0,2

0,1

0
0 100 200 300 400 500 600

Figure 21 : Courbe d’étalonnage de la densité optique des sucres solubles totaux


III-1-5-Variation de la teneur en protéines totales
La variation de la teneur en protéines totales a été évaluée au cours de la
germination des graines de Adansonia digitata. Les résultats mettent en évidence une
dynamique marquée. Dans les graines témoins (avant inhibition) la teneur en protéine
est de 7,099g/100g MS. 2jours après le début de la germination une légère

[Texte] Page 35
augmentation est observée, avec une teneur atteignant 8,302g/100g MS. Entre le 2ème
et le 4èmejours la teneur en protéines augmente de manière significative pour atteindre
un pic à 12,223g/100g MS. En revanche, à partir du 4ème jour jusqu’au 10èmejours
(graines germées) une forte diminution est constatée, la teneur chute jusqu’à 6,19
g/100g MS dans les graines germées. L’évolution globale de la teneur en protéines au
cours du temps suit donc une courbe en cloche, avec une phase de montée progressive
jusqu’à un maximum, suivie d’une décroissance notable.

Une analyse de variance a été effectuée, il en ressort qu’il existe une différence
significative entre un traitement et les autres 5%. Le test post-hoc ont été effectué
ensuite pour déterminer les différences entre les différents traitements.

Les résultats de l'analyse de la teneur en protéines totales (g/100g) des intervalles


des jours de germination des graines de Baobab sont présentés dans l’histogramme
suivant :
14,00 c
Teneur en protéines totales en (g/100g de

12,00

10,00 b
b b
a
8,00
a
MS)

6,00

4,00

2,00

0,00
Temps (jrs)
1 2 3 4 5 6
0 jour 2 jours 4 jours 6 jours 8 jours 10 jours

Figure 22 :Variation de la Teneur en protéines totales (g/100g) de MS dans les graines


témoins et les graines en cours de germination : les traitements ayant les même lettres
(2ème et 6ème et 8ème jours) et (jour 0 et 10ème jours) ne sont pas significativement
différents et ceux qui ont des lettres différentes sont significativement différents (a-b,
b-c, a-c).

[Texte] Page 36
0,4
0,35 y = 0,00342x
0,3
0,25
0,2
0,15
0,1
0,05
0
0 20 40 60 80 100 120

Figure 23 : Courbe de variation de la densité optique en fonction de la concentration


des protéines totales
III-2-DISCUSSION

III-2-1- Teneur en Acide aminé

La teneur en acide aminées initialement élevée dans l’échantillon des graines


non traitées a présenté une diminution significative au cours de la germination variant
de 11, 298 ± 0.118 à 3,729 ± 0,251 dans les graines germées. Les acides aminés sont
des briques de base des protéines, pendant la germination, ils sont utilisés pour
synthétiser les protéines nécessaires pour la croissance (Galili, 2011) ce qui peut
expliquer leur dynamique régression. Outre leur utilisation lors de la biosynthèse des
protéines, ils représentent également des blocs de construction pour plusieurs autres
voies de synthèses et jouent des rôles pivots dans le processus de signalisation
cellulaire et la régulation de l’expression des graines au cours de la germination
(Hildebradt et al., 2015). Les acides aminés peuvent influencer la régulation
hormonale pendant la germination notamment en modulant les niveaux d’hormones
telles que l’acide abscissique et les gibbérellines (Finkelstein et al., 2018). Ces
résultats s’opposent à ceux de Rabiou et al (2012) ou les teneurs en acides aminées
dans les graines de Boscia senegalencis augmente au cours de la germination. Dans
leur étude ils ont évalué la teneur de plusieurs acides aminés leur résultats montrent
que les teneurs en acide glutamique varient de 2,32 à 3.33 %, l’acide aspartique 171 à
2,36% et la phénylalanine 1.34 à 2,19 %. De plus ces données sont divergeant avec
ceux trouvés par Shimizou et al., (2000) ou les teneurs en acide aminés au cours de la

[Texte] Page 37
germination des graines de cafés diminuent par l’intervalle d’une semaine durant 6
semaines variant de 9,2 ±0,5 à 5,4 ± 0,5 mg/g.

III-2-2- Teneur en composés phénoliques

La concentration en composées phénolique était de 1,226 ± 0,043 dans les graines


témoins. Ces composées phénoliques ont augmenté significativement dans les graines
de baobab atteignant un pic au bout de 10 jours après la mise en germination avec une
moyenne de 7,379 ± 0,059. La germination peut déclencher la synthèse de nouveaux
de composés phénoliques, qui sont importants pour la protection de l’embryon
(Winkel-Shirley, 2001). Les enzymes telles que la phénylalanine ammonia-lyase
(PAL) jouent un rôle clé dans la biosynthèse des composés phénoliques. L'activation
de ces enzymes lors de la germination peut contribuer à l'augmentation des composés
phénoliques (Shirley, 1996 ; Nugroho et al., 2002). Les graines stockent des réserves
de composés phénoliques qui peuvent être mobilisées lors de la germination pour
fournir des nutriments et des antioxydants aux tissus en croissance (Dueñas et al.,
2009). Ces composées phénoliques sont impliquées dans de nombreux processus
physiologiques comme la croissance cellulaire, la rhizogenèse, la germination des
graines ou la croissance des fruits (Lugasi et al, 2003). D’après les travaux de Dicko et
al., (2005a) sur le sorgho, les composées phénoliques seraient impliquées dans la
germination des graines par le piégeage de l’oxygène de l’air, empêchant ainsi les
réactions d’oxydation, ce qui provoque leur entrée en dormance (Nugroho et al.,
2002). Les résultats contrastes avec ceux obtenus par Ghiassi et al., (2012) dans les
graines de pois chiches germées et les graines témoins ou les teneurs en composées
phénoliques varient significativement en fonction du temps. Dans l’extrait au méthanol
elle varie de 39,20 ± 0,10 à 75,60 ± 0,24.

III-2-3- Teneur en sucres réducteurs


La teneur en sucre réducteur a significativement augmenté au cours de la
germination des graines de baobab allant de 7, 274 ± 0,180 pour l’échantillon témoin à
19,196 ± 0,395. Cette augmentation significative peut s’expliquer par la mobilisation
des sucres tels que le glucose et le fructose durant la germination. Ils fournissent

[Texte] Page 38
l'énergie nécessaire pour les processus métaboliques, notamment la respiration
cellulaire, qui est particulièrement intense lors des premières étapes de la croissance
(Bewley et Black, 1994). Au cours de la germination, la dégradation de l’amidon en
glucose nécessite l’intervention de plusieurs hydrolases synthétisées en abondance
dans la couche a aleurone et qui migrent vers l’albumen. Les sucres provenant de cette
dégradation présentent des valeurs variables en fonction des phases de germination
(Magtouf et al., 2019). Selon Dewi, (2015), une teneur accrue en glucose diminue le
taux de germination chez Vigna senegalensis, probablement en raison du sucre qui
augmente les effets inhibiteurs de l’ABA (L’acide abscissique arrête le développement
de l’embryon en inhibant l’absorption d’eau et donc la germination des graines). Ces
résultats sont supérieurs à ceux obtenus par Gnanwa et al., (2021) dans les graines
d’arachide ou la teneur en sucres réducteurs varie de 4,30 ± 0,30 à 6,50 ± 0,40 %.

III-2-4- Teneur en sucres solubles totaux

Les teneurs en sucres solubles totaux dans l’amande du baobab ont augmenté
avec la durée de germination atteignant des pics aux jours 8 (36,863 ± 0,724) et 10
(38,392 ± 0,790). Cette tendance reflète l’hydrolyse des réserves d’amidon par les
enzymes amylolytiques, générant des sucres simples (glucose, maltose) nécessaires au
métabolisme énergétique (Xu et al., 2012 ; Coulibali & Chen, 2011). Pendant la
germination, certains sucres solubles totaux à l’exemple des oligosaccharides sont
positivement corrélés avec la longévité potentielle des graines. Ainsi, ces
oligosaccharides sont impliqués dans la protection des membranes des protéines et des
acides nucléiques contre la dormance qui se produisent pendant le séchage (Lin et al.,
1994 ; Sinnah et al., 1998). Des études sur le soja, le maïs (Zea mays) et la navette
(Brassica campestis) démontrent le rôle des sucres solubles totaux dans la protection
des graines contre les dommages pendant la déshydratation et le vieillissement
(Obedort et al., 1997 ; Sinnah et al., 1998). De même, koster et Leopold, (1998) ont
montré que les teneurs en sucres soluble solubles totaux tel que les teneurs en
saccharoses et en raffinose diminuent fortement dans les axes embryonnaires de pois,
de soja et de mais au cours de la germination. La raffinose pourrait jouer un rôle
antioxydant en réagissant avec les radicaux hydroxyles (Nishizawa et al., 2008), tout

[Texte] Page 39
comme le saccharose (Ende et Valluru, 2009). Leur mobilisation pourrait servir de
substrat respiratoire durant la germination (Blöchl et al., 2007). La teneur en sucre
totaux des échantillons de baobab (non germée et germée) est supérieure à celle obtenu
par Gnanwa et al., (2021) dans les graines d’arachide qui était de 5,43 ± 0,41 et 6,85 ±
0,09 %. Elles sont également supérieures à celles obtenues par Mezajoug et al., (2010)
dans les tourteaux de apki qui était de 2,97 et 5,55%. Des auteurs ont démontré que la
teneur en sucre dans les graines germées pourrait être utilisées comme indicateur pour
maintenir la viabilité des graines (Leher et al., 2006 ; Sinah et al., 1998)

III-2-5- Teneur en Protéines totales

Les analyses biochimiques ont montré que les broyats produits à partir des
graines de baobab ont une teneur en protéine qui varie de façon significative passant
de 7,009 ± 0,028 à 6,191± 0.087 (produit à partir des graines germées). La teneur en
protéine totale a présenté une augmentation progressive jusqu’au 4èmejours (12,223 ±
0,420) de germination suivie d’une diminution progressive. Le pic initial pourrait être
dû à une forte biosynthèse des protéines liées à l’activité métabolique au début de la
germination. Gallardo et al., (2002) ont montré que la germination est associée à une
augmentation de la synthèse des protéines impliquées dans le métabolisme énergétique
et la croissance cellulaire. La baisse subséquente pourrait résulter de l’utilisation des
protéines comme substrat énergétique ou comme source d’acide aminées pour d’autres
processus du développement. Au moment de la germination, les réserves protéiques
sont digérées grâce à des protéases formées par l’embryon (Steber, 2007). Effa et al
(2010) ont montré que les protéines pourraient intervenir au cours des premiers stades
de la germination du cola (Cola nitida) à cause du réveil métabolique du a une plus
grande synthèse des enzymes. Ces résultats corroborent à ceux de Gnanwa et al.,
(2021), où les valeurs en protéines trouvées au sein des graines d’arachide (Arachis
hypogaea L) augmentent de façons significatives de 21,07 ± 0,47 pour les graines
témoins à 24,15 ± 0,111 pour les graines germées, au seuil de 5%. La valeur en
protéine trouvée dans les graines de baobab germée est inférieure à celle des noix
africaines (Tetracarpidium conophorun) (14,98% soit 14, 98 g/100g MS) Trouvée par
Sahore et al., (2012) et Ihemeje et al., (2015). De plus les résultats sont divergeant

[Texte] Page 40
avec ceux trouvés par Shimizou et al., (2000) ou les teneurs en protéines totales
diminuent au cours de la germination des graines de cafés par l’intervalle d’une
semaine durant 6 semaines variant de 65,9 ±0,9 à 65,5 ± 1,2mg/g.

[Texte] Page 41
CONCLUSION, LIMITES ET PERSPECTIVES
Ce travail, portant sur l’analyse de la variation de quelques marqueurs de
développement au cours de la germination des graines d’Adansonia digitata, s’inscrit
dans une perspective de la valorisation et de préservation de cette espèce à fort intérêt
écologique, nutritionnel et économique. L’objectif général visé était de contribuer à la
régénération de Adansonia digitata par embryogenèse somatique, en explorant certains
marqueurs biochimiques associés aux premières étapes du développement. Les
analyses effectuées ont permis d’évaluer, au cours de la germination, les teneurs en
acides aminés, composés phénoliques totaux, sucres solubles, sucres réducteurs et
protéines totales. Les résultats ont mis en évidence une variabilité significative de ces
marqueurs entre les différents échantillons, vraisemblablement liée à des facteurs tels
que la variété, la maturité des graines et les conditions environnementales. Ces
variations biochimiques constituent des indicateurs pertinents du développement
embryonnaire et offrent des pistes intéressantes pour l’optimisation des protocoles de
régénération in vitro. Les données obtenues sont en accord avec la littérature
scientifique et renforcent l’hypothèse selon laquelle le suivi de certains marqueurs
biochimiques peut contribuer à la compréhension des mécanismes physiologiques
impliqués dans la germination et la mise en place du développement somatique.
Cependant, ce travail présente certaines limites, notamment l’absence de contrôle strict
des conditions environnementales et le nombre restreint d’échantillons, qui pourraient
influencer la reproductibilité des résultats. Des recherches complémentaires, intégrant
des approches moléculaires et des essais de culture in vitro, seront nécessaires pour
affiner les protocoles de régénération somatique de cette espèce. Cette étude pose donc
les premiers jalons pour une meilleure compréhension des bases physiologiques de la
germination chez Adansonia digitata, et ouvre la voie à des applications futures en
biotechnologie végétale et en conservation des ressources génétiques. Dans la
perspective d’améliorer encore davantage les conditions d’embryogenèse somatique,
nous souhaiterons que les travaux futurs portent sur l’analyse de la variation des autres
marqueurs de développement tel que : la teneur en lipide, en minéraux (macroéléments
et microéléments), en hormones végétales (éthylènes, acide abscissiques,
gibbérellines).

[Texte] Page 42
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[Texte] Page 59
ANNEXES

[Texte] Page 60
Annexe 1
Tableau II : Résultats des teneurs en matière frais des acides aminés, teneur en
matière frais des sucres réducteurs, teneur en matière frais des sucres solubles totaux,
teneur en matière frais des composés phénoliques et en protéines

Sucres
Composés Sucre solubles totaux
Temps(jrs) Acide aminé (mg/g) phénoliques (mg/g) réducteur (mg/g) (mg/g) Protéines totales (g/100g)
a a a d
0 jr 11,298 ± 0,118 1,226 ± 0,043 7,274 ± 0,180 14,549 ± 0,361 7,099 ± 0,028 a
2 jrs 5,874 ± 0,086 b 0,768 ± 0,028 b 5,795 ± 0,589 b 11,211 ± 0,643 e 8,302 ± 0,069 b
4 jrs 8,963 ± 0,244 a 1,855 ± 0,064 a 13,736 ± 0,651 c 27,867 ± 0,744 c 12,223 ± 0,420 c
6 jrs 11,092 ± 0,115 a 1,302 ± 0,090 a 5,893 ± 0,051 b 11,786 ± 0,101 e 8,560 ± 0,387 b
8 jrs 6,187 ± 0,360 b 2,956 ± 0,076 c 18,431 ± 0,362 d 36,863 ± 0,724 b 9,064 ± 0,036 b
10 jrs 3,729 ± 0,251 c 7,379 ± 0,059 d 19,196 ± 0,395 d 38,392 ± 0,790 a 6,191 ± 0,087 a

Lettres pour la comparaison en colonne (entre les jours pour un même paramètre) :
a : Les teneurs avec cette lettre ont des moyennes qui ne diffèrent pas
significativement entre eux pour le paramètre donné.
b, c, d, e, : Indiquent des moyennes qui diffèrent significativement les unes des autres
pour le paramètre donné.
Chiffres pour la comparaison sur la ligne (entre les paramètres pour un même
échantillon) :
0 jr : Les paramètres avec ce chiffre ont des moyennes qui ne diffèrent pas
significativement entre eux pour le jour donné.
2 jours, 4 jours, 6 jours, 10 jours : Indiquent des moyennes qui diffèrent
significativement les unes des autres pour l'échantillon donné.

[Texte] Page 61
Annexe 2
Tableau III : Masse aqueuse et solution d’éthanol et méthanol prélevés

TUBE Masse. AQ S .Ethanol [Link]


1 103,9 103,1 114,2
2 143,6 193,7 173,3
3 100,9 100,1 115,8
4 107,4 184,2 163,6
5 102,6 102,8 130,3
6 146,9 188,5 125,5

Annexe : 3

Photo1 : Encrassage de l’amande du baobab à l’aide du pilon

Photo2 : Echantillons conservé dans le réfrigérateur

[Texte] Page 62
Photo 3: Mélange porté au bain marie bouillant à 90°C pendant 5minutes

Photo 4 : Formation du complexe violet après avoir porté au bain marie

Photo 5: Spectrophotomètre permettant de lire la DO à 530nm.

Photo 6: Filtration du mélange à l’aide d’un papier filtre

[Texte] Page 63
Photo 7: Tube montrant la formation du complexe bleu au cours de la détermination de la
teneur des composés phénoliques

Photo 8: formation du complexe jaune déterminant la teneur en protéine

[Texte] Page 64

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