INSTITUT NATIONAL DE

FORMATION SUPERIEUR
PARAMEDICAL
2023/2024

L’ELECTROPHOESE

Réalisé par :
 ATSFAHA
Lydia
 HOUARI Sara
Introduction :
Qui dit identification des espèces chargées électriquement, dit alors
un champ électrique.
Donc les espèces pourront ainsi se déplacer dans ce champ
électrique.
Le déplacement des ions est réalisé par la charge positive ou négative
des espèces.
Les ions auront donc des vitesses de migrations différentes et c’est
ainsi que les espèces vont se séparer les unes des autres.
L'électrophorèse est une technique fondamentale en biologie
moléculaire qui permet la séparation des molécules chargées, telles
que les acides nucléiques et les protéines, en fonction de leur
mobilité électrophorétique dans un champ électrique. Cette méthode
cruciale offre un moyen efficace de caractériser, quantifier et purifier
ces biomolécules, contribuant ainsi significativement à la
compréhension des processus biologiques et à la recherche médicale.

1. Définition du principe de l’électrophorèse

des protéines
L'électrophorèse des protéines est une méthode d'analyse des
protéines basée sur leur migration enfonction de leurs charges
électriques. Elle permet de séparer les protéines en différentes
fractions.
Cette technique repose sur la capacité des protéines chargées à
migrer à travers les pores d'un gel sous l'effet d'un champ électrique.
L'électrophorèse des protéines est largement utilisée en
protéinique et en médecine, principalement à partir de sérum
sanguin. Elle permet, par exemple, de réaliser un protéinogramme,
un examen médical fréquent et peu coûteux, qui met en évidence
cinq fractions de protéines sériques : albumine, α1-globulines, α2-
globulines, β-globulines et γ- globulines[2]. L'électrophorèse des
protéines repose sur le principe de la migration des protéines en
fonction de leurs charges électriques, permettant ainsi leur
séparation en différentes fractions.
2. Les différents types d’électrophorèses
des protéines
Il existe plusieurs types d'électrophorèse des protéines, chacun ayant
des applications spécifiques en biologie et en médecine. Voici
quelques types d'électrophorèse des protéines :
1. Électrophorèse sur gel: Cette méthode utilise un gel (par exemple,
à base d'agarose, de polyacrylamide ou de polyacrylate) pour séparer
les protéines en fonction de leur taille et de leur charge.
L'électrophorèse sur gel d'agarose est souvent utilisée pour analyser
les protéomes de sérum sanguin.

2. Électrophorèse bidimensionnelle: Cette technique combine deux

types d'électrophorèses pour séparer les protéines en fonction de
leur masse et de leurs propriétés. Elle permet d'obtenir une
séparation plus fine et de mieux résoudre les problèmes de fusion
des bandes.

3. Électrophorèse en champ pulsé : Cette méthode utilise un champ

électrique pulsé pour séparer les protéines sur un gradient de
densité.

4. Immuno-électrophorèse : Cette technique est utilisée pour

détecter une interaction antigène-anticorps.

5. Électrophorèse sur papier : Cette méthode est moins résolutive

que les autres techniques d'électrophorèse sur gel, mais elle est
souvent utilisée pour vérifier les résultats d'une Séparation.
6. Électrophorèse sur gel de zones: Cette technique utilise des
supports solides pour séparer les protéines en fonction de leur
charge et de leur taille.

7. Électrophorèse bi-dimensionnelle : Cette méthode combine deux

types d'électrophorèses pour séparer les protéines en fonction de
leur masse et de leurs propriétés.

8. Électrophorèse en veine liquide : Cette technique utilise un

support liquide (généralement une solution tamponée de pH et de
concentration convenables) pour séparer les protéines.

Chacun de ces types d'électrophorèse des protéines a ses propres

avantages et applications, permettant à la fois d'étudier les protéines
et de les utiliser pour diagnostic et suivi de maladie.

3. Principes de base de l’électrophorèse

des protéines
L'électrophorèse des protéines, également appelée électrophorèse
sur gel, est une méthode d'analyse utilisée pour séparer et étudier un
mélange de protéines. Elle repose sur la capacité des protéines
chargées à migrer au travers des pores d'un gel lorsqu'elles sont
soumises à un champ électrique. Voici les principes de base de
l'électrophorèse des protéines :
- Séparation des protéines: Les protéines sont séparées en fonction
de leur masse et de leur charge. Elles migrent au travers des mailles
du gel en fonction de leur taille et de leur forme.

- Pourvoir de séparation: L'électrophorèse sur gel d'agarose est une

technique simple et efficace pour séparer des molécules chargées,
telles que les protéines, à partir d'un mélange complexe.

- Visualisation des protéines: Les protéines sont souvent colorées

directement sur le gel (par exemple, avec le bleu de Coomassie) pour
faciliter leur visualisation et leur étude.

- Applications: L'électrophorèse des protéines est utilisée en

protéinique et en médecine pour analyser les protéomes de sérum
sanguin, notamment pour détecter des anomalies ou des maladies.

4. Comment fonctionne L’électrophorèse

des protéines
L'électrophorèse des protéines fonctionne en utilisant un champ
électrique pour séparer les protéines présentes dans un échantillon,
généralement le sérum sanguin. Voici les étapes principales de ce
processus :

1. Préparation des échantillons: Un prélèvement sanguin est réalisé,

et le sérum est déposé sur un gel d'agarose ou un support similaire.
2. Séparation des protéines: Les protéines sont séparées en fonction
de leur charge et de leur taille. Elles migrent au travers des pores du
gel sous l'influence d'un champ électrique. Les protéines chargées
(ionisées) migreront vers le pôle électrique opposé à leur charge.

3. Coloration: Les protéines sont colorées, généralement avec le bleu

de Coomassie, pour faciliter leur visualisation et leur étude.

4. Interprétation des résultats : Les bandes de protéines

apparaissent sur le gel coloré, et leur masse moléculaire est
déterminée en comparant leur position avec des étalons
commerciaux calibrés en unités de masse protéique.
L'électrophorèse des protéines sériques est utilisée pour analyser les
protéines de sérum sanguin , notamment pour détecter des
anomalies ou des maladies.
5. Comment interpréter les résultats
d’une électrophorèse
L'interprétation des résultats d'une électrophorèse des protéines
consiste à analyser les différentes fractions de protéines sériques et
leurs concentrations pour évaluer la fonction des organes et détecter
éventuelles anomalies. Voici comment interpréter les résultats d'une
électrophorèse des protéines :
1. Interprétation qualitative: Les résultats sont généralement
exprimés par une courbe avec cinq pics, représentant les différentes
fractions de protéines sériques : albumine, alpha 1 globulines, alpha 2
globulines, bêta-globulines et gamma-globulines. Les protéines
sériques sont colorées pour faciliter leur visualisation et leur étude.

2. Interprétation quantitative: La concentration de chaque fraction

est calculée en fonction de la protidémie totale. Les valeurs de
référence pour les protéines sériques varient en fonction des
protéines et sont généralement exprimées en pourcentage ou en
g/L[]. Par exemple, pour l'albumine, la valeur de référence doit être
comprise entre 55 et 65 % (36 et 50 g/L).

3. Anomalies: L'électrophorèse des protéines sériques est utilisée

pour détecter des anomalies de certaines protéines, telles que une
augmentation ou une diminution de certaines fractions, qui peuvent
indiquer un syndrome inflammatoire, une infection, un problème
hépatique ou rénal, ou une maladie autoimmune.
4. Diagnostic et suivi de maladies: L'électrophorèse des protéines
sériques est utilisée pour le diagnostic et le suivi de nombreuses
maladies, notamment les maladies autoimmunes, les infections
et les troubles du système hématopoïétique.

En résumé, l'interprétation des résultats d'une électrophorèse des

protéines consiste à analyser les différentes fractions de protéines
sériques et leurs concentrations pour évaluer la fonction des organes
et détecter éventuelles anomalies. Cette technique est utilisée pour
le diagnostic et le suivi de diverses maladies et pour évaluer la
fonction du système immunitaire et hématopoïétique.

6. Les facteurs qui peuvent influencer sur

les résultats de l’électrophorèse des
protéines :
Plusieurs facteurs peuvent influencer les résultats de

l'électrophorèse des protéines. Voici quelques exemples :

- Le pH: Le pH de l'échantillon peut affecter la charge des protéines et

donc leur migration dans le gel.
À pH basique, les protéines ionisées négativement migrent vers
l'anode (+), tandis qu'à pH acide, les protéines ionisées positivement
migrent vers la cathode (-).
- Les interférences: Certains composants de l'échantillon, tels que les
lipides, les glucides ou les médicaments, peuvent interférer avec la
migration des protéines et fausser les résultats.

- La qualité de l'échantillon: La qualité de l'échantillon peut affecter

la quantité et la qualité des protéines présentes, ce qui peut affecter
la séparation et la visualisation des bandes de protéines.

- La technique d'électrophorèse: Différentes techniques

d'électrophorèse peuvent être utilisées, telles que l'électrophorèse
sur gel d'agarose ou l'électrophorèse bidimensionnelle, qui peuvent
avoir des performances différentes.

- La coloration: La coloration des protéines peut affecter la

visualisation et l'interprétation des résultats. Certaines colorations
peuvent être plus sensibles ou spécifiques pour certaines protéines.

Il est important de prendre en compte ces facteurs lors de

l'interprétation des résultats de l'électrophorèse des protéines pour
éviter les erreurs d'interprétation.
7. Les avantages et les inconvénients de
l’électrophorèse
L'électrophorèse des protéines présente plusieurs avantages et
inconvénients, qui sont listés ci-dessous :

7.1. Avantages
1. Séparation fine: L'électrophorèse permet de séparer les protéines
en fonction de leur masse et de leurs propriétés, offrant une
résolution élevée.

2. Analyse simultanée : Cette technique permet de traiter plusieurs

échantillons en même temps, ce qui est particulièrement utile pour
l'étude de nombreuses protéines.

3. Applications en médecine : L'électrophorèse des protéines est

utilisée pour analyser les protéomes de sérum sanguin, ce qui est
d'une grande importance pour le diagnostic et le suivi de maladies.

4. Utilisation de détergents : L'utilisation d'un détergent permet de

solubiliser les protéines hydrophobes, notamment les protéines
membranaires, qui ne peuvent pas être séparées par électrophorèse
en conditions non dénaturantes.

8.2. Inconvénients
1. Appareillage couteux : L'équipement utilisé pour l'électrophorèse
peut être coûteux, ce qui peut limiter son utilisation dans certains
laboratoires.
2. Dénaturation des protéines : L'électrophorèse nécessite la
dénaturation des protéines, ce qui peut altérer leur structure et leur
fonction.

3. Interprétation des résultats : L'interprétation des résultats

obtenus peut être complexe, en particulier pour les échantillons
mélangés.

En résumé, l'électrophorèse des protéines est une technique

puissante et efficace pour séparer et étudier les protéines, mais elle
présente quelques inconvénients, tels que le coût de l'appareillage et
la dénaturation des protéines.

8. Conclusion
Le principe de l'électrophorèse des protéines repose sur la migration
des protéines en fonction de leurs charges électriques. Cette
méthode permet de séparer un mélange de protéines en différentes
fractions en les faisant migrer à travers un gel sous l'effet d'un champ
électrique. L'électrophorèse des protéines est largement utilisée en
protéinique et en médecine, notamment pour l'analyse des protéines
sériques. Elle est utile pour identifier et quantifier les différentes
protéines présentes dans le sang, ce qui peut aider au diagnostic et
au suivi de diverses maladies. Par exemple, un protéinogramme, qui
est un type d'électrophorèse des protéines sériques, peut mettre en
évidence des anomalies telles qu'une immunoglobuline monoclonale,
ce qui peut être associé à certaines conditions médicales.
L'électrophorèse des protéines sériques est un examen fréquemment
prescrit et peu coûteux, et ses résultats sont interprétés en
comparant les proportions des différentes fractions de protéines à
des valeurs de référence.