Effets du sulpiride sur la reproduction masculine
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eladib poste 04Effets du sulpiride sur la reproduction masculine
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eladib poste 04Introduction générale :
L’infertlité d’un couple est défini comme l’incapacité de concevoir apres un an de relations
sexuelles réguliere est non protégées
Plusieurs facteurs peuvent etre en cause
Facteurs génétique
Facteurs enviromentaux
Facteurs hormonaux
Traitement médicaux
Certain médicament dont les neuroleptiques ont un effet néfaste sur la fonction
reproductive de l’homme
Le mécanisme d’action du sulpiride (shéma)
L’objectif :
Evaluer l’ effet du sulpiride sur la fonction reproductive chez des lapins males peubere
Materiel et methodes
Materiel :
-materiel biologique (photo des lapins) : lapin Oryctolagus cuniculus,sont
reconnus pour sa prolificité et sa croissance rapide.
-materiel chimique : sulpiride, Nacl 0.9 %, Eosine, Citrate de sodium , fructose, Eau
distillée, formol
Protocole experimentale (shéma)
Les lots expérimentaux
08 lapins mâles pubères répartis en
deux groupes
Groupe T Groupe
SLP
Après une semaine
d’adaptation
04 semaines successives de gavage à l’eau 04 semaines successives de traitement
uniquement (50 mg de SLP/kg par jour)
Tubes secs Prélèvement du sang
Dosage hormonal (testostérone, prolactine)
Décapitation
Prélèvement du sperme (Spermogramme) Etudes histologiques des testicules
Mobilité des spermatozoïdes
Vitesse des spermatozoïdes
Vitalité des spermatozoïdes
Concentration des spermatozoïdes
Methode :
-spermogramme :concentration ,mobilité ,vitesse,vitalité
-étude histolgique
- dosage hormonale ;prolectine, testosterone
Concentration :
Concentration (Spz. 106/ml) = D x V x n /N
La concentration des spermatozoïdes est mesurée à l’aide d’une cellule de Malassez
1. Prélèvement de sperme
↓
2. Dilution du sperme
↓
3. Dépôt d’une goutte dans la cellule de Malassez
↓
4. Recouvrement avec une lamelle
↓
5. Observation au microscope (grossissement x40)
↓
6. Comptage des spermatozoïdes dans 5 cases (cellules)
Mobilité des spermatozoides :
1. Prélèvement de sperme
↓
2. Dilution du sperme
↓
3. Dépôt d’une goutte entre lame + lamelle
↓
4. Observation au microscope optique (grossissement 40x)
↓
5. Champ visuel divisé en 3 zones
↓
6. Comptage de 100 spermatozoïdes
↓
7. Classement selon mobilité :
▪ Mobiles rapides
▪ Mobiles lents
▪ Immobiles
↓
8. Calcul du pourcentage de spermatozoïdes mobiles
Vitesse des spermatozoides :
V= d / t
1. Dilution du sperme
↓
2. Prélèvement d’une goutte avec une micropipette
↓
3. Dépôt sur la lame de Nageotte
↓
4. Recouvrement avec une lamelle
↓
5. Observation au microscope (grossissement 40x)
↓
6. Suivi du déplacement d’un spermatozoïde entre 2 lignes
↓
7. Mesure du temps avec un chronomètre
↓
8. Calcul de la vitesse = distance / temps
Vitalité des spermatozoides :
Teste iosine :(Coloration vitale)
Cette technique de coloration permet d’obtenir de bons résultats sur la
vitalité des spermatozoïdes, elle est basée sur le principe que les cellules
mortes ayant des membranes plasmiques perméables à certains colorants.
1. Dilution du sperme
↓
2. Mélange :
▪ 1 goutte de sperme dilué
▪ 1 goutte d’éosine 1 %
↓
3. Dépôt sur lame + recouvrement avec une lamelle
↓
4. Attente : 1 à 2 minutes
↓
5. Observation au microscope (grossissement 40x)
↓
6. Observation dans 3 champs :
▪ Spermatozoïdes colorés = morts
▪ Spermatozoïdes incolores = vivants
↓
7. Calcul du pourcentage
Test HOS
Ce test de gonflement hypo-osmotique est basé sur le principe que la
membrane de la cellule intacte est semi-perméable
Le HOS-TEST ne devrait pas être utilisé comme un test d’évaluation
fonctionnelle des spermatozoïdes mais plutôt comme un autre test de
vitalité. Il fournit des informations supplémentaires sur l’intégrité et le
fonctionnement de la membrane plasmique au niveau du flagelle
1. Préparation de la solution :
▪ Dissoudre :
- 0,367 g de citrate de sodium
- 0,675 g de fructose
▪ Dans 50 ml d’eau distillée
▪ Conserver à -20°C
↓
2. Décongélation et agitation de la solution
↓
3. Prélèvement de 1 ml → chauffer à 37°C (5 min)
↓
4. Verser dans un tube Eppendorf fermé
↓
5. Ajouter 0,1 ml de sperme dilué
↓
6. Mélanger doucement à la pipette
↓
7. Incubation à 37°C pendant 30 min
↓
8. Observation au microscope (grossissement x40)
↓
9. Observation des spermatozoïdes :
▪ Gonflés = flagelle modifié
▪ Non gonflés = flagelle intact
↓
10. Comptage sur 100 spermatozoïdes
↓
11. Calcul du pourcentage de gonflement :
A : modification faible du flagelle.
B : modification importante du flagelle.
C : modification très importante du flagelle.
N : spermatozoïde normal.
Etude histolique : elle est effectuée après la fixation des testicules dans le formol
Résultats et discussion
Paramètres hormonaux
Dosage de PRL5 histogramme
On observe une élévation du taux de prolactine chez le groupe SLP par apport au
groupe té[Link] élévation est due a l’action du SULPIRIDE qui consiste à
bloquer spécifiquement les récepteurs dopaminergiques D2, ce qui perturbe le
système de contrôle de la dopamine sur les cellules lactotropes
Dosage de testostérone.. histogramme
On observe une diminution du taux de testostérone chez le groupe SLP PAR
APPORT au groupe témoin ,cette diminution est la conséquence de l’élevation de la
PRL (feed back négative sur l’axe hypothalaom hypophysaires )
Paramètres spermatiques (spermogramme)
. Concentration des spermatozoïdes( histogramme)
On observe une diminution de la concentration des SPZ chez le groupe SLP par
apport au groupe témoin , cette diminution est due àl’hyperprolactinémie chronique
qui peut compromettre la fonction testiculaire et réduire la production testiculaire des
spermatozoïdes
Mobilité et vitesse des SPZ :histogramme
On observe une diminution de la mobilité et de la vitesse des SPZ chez le groupe SLP
par apport au groupe T cela peut être causé par un déficit énergétique lié à une
diminution de l’activité mitochondriale ou de la glycolyse dans les spermatozoïdes
Vitalité des SPZ :histogramme
On observe une diminution de la vitalité des SPZ chez le groupe SLP par apport au
groupe T cela pourrait être attribué à un stress oxydatif provoqué indirectement par la
perturbation hormonale ou à une modification de l’environnement testiculaire
notamment au niveau des cellules de Sertoli responsables du soutien nutritionnel des
spermatozoïdes.
Etude histologique photo
La lumière des tubes séminifères chez le groupe T est réduite signe de
spermatogénèse en cours
Les coupes histologiques du testicule dans le groupe SLP(hyperprolactinémique)
reflètent les changements morphologiques qui peuvent être provoquées par des
troubles des hormones de la reproduction en entrainant une altération de la
spermatogénèse
Conclusion et préspective
Résumé
Common questions
Alimenté par l’IAThe negative effects of sulpiride on male rabbit fertility are primarily attributed to its action as a D2 dopaminergic receptor antagonist, leading to elevated prolactin levels. This hyperprolactinemia interferes with testosterone production through negative feedback on the hypothalamic-pituitary axis, reducing sperm concentration and compromising sperm function. Additionally, stress or an altered testicular environment, possibly due to oxidative stress or disrupted support from Sertoli cells, contributes to decreased sperm vitality and mobility .
The study measures sperm vitality in male rabbits using the eosin staining technique, which distinguishes living sperm cells from dead ones based on membrane permeability. Live sperm remain unstained, while dead sperm absorb the stain. The sperm are mixed with eosin, placed on a slide, covered, and observed under a microscope, counting colored (dead) versus colorless (live) sperm to calculate the percentage of vitality .
Sulpiride presents substantial reproductive hazards in male mammals, notably by inducing hyperprolactinemia which disrupts testosterone production, reducing sperm concentration and functionality. These changes impair fertility by lowering sperm quality and altering hormonal homeostasis, signaling significant concerns over reproductive health in mammals exposed to sulpiride .
Sulpiride administration appears to cause energy deficits in sperm, possibly by reducing mitochondrial activity or glycolysis efficiency. This energy shortfall impacts sperm motility and velocity, likely due to compromised ATP production within sperm cells, which rely on mitochondrial function for energy provision .
Hyperprolactinemia, induced by sulpiride treatment, leads to reduced sperm concentration, mobility, and vitality. The elevated prolactin levels disrupt testicular function by impairing testosterone synthesis, reducing sperm production. Moreover, decreased sperm mobility and velocity could be due to energy deficits linked to mitochondrial dysfunction or impaired glycolysis. The overall sperm quality decline illustrates a direct hormonal disruption on reproductive capabilities .
Histological examination reveals that in sulpiride-treated rabbits, the seminiferous tubule lumen is dilated, illustrating impaired spermatogenesis. These morphological alterations are attributed to disrupted reproductive hormone signaling due to hyperprolactinemia, reflecting an adverse environment for normal spermatogenic processes .
The experimental protocol involves dividing eight male rabbits into two groups: a control group receiving water and a treatment group receiving 50 mg/kg/day sulpiride for four weeks. Blood samples are collected for hormonal assays, and sperm samples are analyzed for various parameters: concentration, mobility, velocity, and vitality. Histological studies on testicular tissue further assess reproductive impacts, providing a comprehensive analysis of sulpiride's effects on reproductive health .
Sulpiride significantly increases prolactin levels in male rabbits by blocking D2 dopaminergic receptors, disrupting the regulatory dopamine control on lactotropic cells. This elevated prolactin condition negatively impacts testosterone levels due to negative feedback mechanisms on the hypothalamic-pituitary axis, ultimately reducing testosterone biosynthesis and affecting reproductive functions .
To prepare for the HOS test, 1 ml of a prepared fructose-citrate solution is warmed to 37°C, mixed with 0.1 ml of diluted sperm, and gently agitated. After a 30-minute incubation at 37°C, the sperm are examined under a microscope to assess flagellar integrity through swelling, with observations categorized as minor, major, or no modification .
Sperm mobility in the study is assessed by diluting a sperm sample, placing a drop between a slide and coverslip, and observing the drop under a microscope. The visual field is divided into zones, and 100 spermatozoids are counted, classifying them as fast mobile, slow mobile, or immobile. The percentage of mobile spermatozoids is then calculated to determine mobility .