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Schéma du frottis sanguin annoté

Ce document présente un TP sur la réalisation d'un frottis sanguin pour l'examen hématologique, essentiel pour le diagnostic des pathologies sanguines. Il décrit les étapes de préparation, fixation, coloration et observation microscopique des éléments figurés du sang, ainsi que les caractéristiques morphologiques des hématies, leucocytes et plaquettes. Les objectifs incluent l'observation et l'analyse des composants sanguins pour identifier d'éventuelles anomalies cellulaires.

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Ce document présente un TP sur la réalisation d'un frottis sanguin pour l'examen hématologique, essentiel pour le diagnostic des pathologies sanguines. Il décrit les étapes de préparation, fixation, coloration et observation microscopique des éléments figurés du sang, ainsi que les caractéristiques morphologiques des hématies, leucocytes et plaquettes. Les objectifs incluent l'observation et l'analyse des composants sanguins pour identifier d'éventuelles anomalies cellulaires.

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TP 1 :

Frottis sanguin pour examen hématologique

Introduction

L’examen hématologique constitue une étape fondamentale dans le diagnostic et le suivi des
pathologies sanguines. Le frottis sanguin, technique classique en biologie médicale, permet
d’observer les éléments figurés du sang (hématies, leucocytes, plaquettes) et d’évaluer leur
morphologie. Ce TP vise à maîtriser les étapes de réalisation d’un frottis sanguin, à interpréter
les observations microscopiques et à comprendre les principes sous-jacents aux techniques de
coloration. Ces compétences sont essentielles pour identifier d’éventuelles anomalies
cellulaires et contribuer à des diagnostics précis.

Objectifs du TP :

- Observer, reconnaitre et énumérer les éléments constituants le sang.


- Établir l’examen leucocytaire dans le cadre d’un hémogramme.
- Décrire la morphologie des éléments figurés dans le sang.

Principe :

Le frottis sanguin est préparé en étalant une goutte de sang sur une lame, puis en utilisant des
colorants acidobasiques (May-Grünwald et Giemsa) pour différencier les structures
cellulaires. Les colorants réagissent avec les composants acides (noyaux) et basiques
(cytoplasme) des cellules, permettant une observation microscopique détaillée. L’examen à
l’objectif à immersion (grossissement x1000) facilite l’identification des leucocytes,
l’évaluation de la morphologie des hématies et la détection d’anomalies.

Protocole expérimental :

à Préparation du frottis :

- Déposer une goutte de sang sur une lame.


- Étaler le sang à l’aide d’une seconde lame inclinée à 45°, en exploitant la capillarité
pour obtenir une couche mince et uniforme.
à Fixation :

- Recouvrir la lame d’éthanol pendant 2 minutes pour fixer les cellules.

à Coloration :

- Immersion dans le May-Grünwald dilué (3 minutes), puis dans le Giemsa dilué (20
minutes).
- Rincer à l’eau tamponnée (pH 7) et sécher les lames.

à Observation microscopique

- Grossissement : x200 pour une vue d’ensemble ; x1000 pour l’analyse détaillée.
- Zones analysées : Répartition uniforme des cellules, absence d’agrégats, et qualité de
la coloration.

Résultats de l’observation

1- Éléments identifiés :

à Hématies : Forme ronde, absence de noyau, cytoplasme rose.

à Leucocytes :

- Neutrophiles : Noyau trilobé, cytoplasme peu coloré, granulations fines.


- Éosinophiles : Noyau bilobé, granulations orangées volumineuses.
- Basophiles : Noyau masqué par des granulations violettes.
- Lymphocytes : Noyau arrondi occupant la majeure partie de la cellule.
- Monocytes : Noyau en fer à cheval, cytoplasme gris clair.

à Plaquettes : Discoïdes, très nombreuses, cytoplasme bleu clair.

2- Schéma annoté :

Plasma, hématies, plaquettes et leucocytes répartis uniformément.


Titre : Schéma des éléments constituants un frotti sanguin

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