COMPTE RENDU
TP : Dosage des pigments photosynthétiques
Réalise par : Ikram Chentoufi
Meryem Bounhar
Lhoussine Oubarkouks
Reda Grada
Enseignants : Belkacem Amrani
Année universitaire : 2024/2025
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INTRODUCTION
Les organismes chlorophylliens utilisent la lumière visible pour synthétiser des molécules
organiques simples via la photosynthèse, grâce à des pigments comme la chlorophylle et les
caroténoïdes. les caroténoïdes aident à la capture de la lumière et protègent contre les
excès de lumière.
OBJECTIF DE TP :
L´Objectif de ce TP est le doser les pigments photosynthétique , pricipalement la
chlorophylle et les caroténoïdes , dans les feuille végétale , à l´aide d´un spectrométre
MÉTHODE :
1 . extraction des pigments :
Découper à l´aide d´un emporte–piéce des disque foliaire de taille
identique.
Peser 0,5 g de matiére fraiche des disques foliaires .
Placer les disques foliaires dans un mortier et ajouter 3 ml d´acétone à 80% ,
peu de sable , et une petite quantité de carbonate de calcuim
Broyer soigneusement les feuilles pour extrait de pigments .
Centrifuger l´extrait 3000 rpm 5 minutes, puit récupérer les surnageant dans
une fiole propre
Compléter la fiole avec de l´acétone jusq´au trait de jauge (10 ml )
2. Mesure de l´absorbance :
Mesure la densité optique (DO) de l´extrait obtenu à plusieurs longueurs d´onde des
pigments à doser :
Pour le chlorophylle A (Chl A) = 663 nm
Pour le chlorophylle B (Chl B) =645 nm
Pour le chlorophylle Totale (Chl A + Chl B ) = 652 nm
Pour le caroténöides = 450 nm
3. Calculs des concentration en chlorophylle :
3-1 : Protocole
on placer une cuve en verre, qui contient le solvant d’extraction,
dans le spectrometrie et régler (régler le zéro de l’appareil pour chaque longueur
d’onde utilisée).
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zéro de l’appareil à 460nm.
l’absorbance (A);
recommencer les opérations successivement à 450 et 663nm
3-2 : Interprétations des résultats
3-2.1 la teneur de chlorophylle et la Caroténoides
Avant Extraction des pigments Nous comparons d´abord entre deux feuilles :
Feuille sénescentes Feuille mature
7,69 66,16
16,37 64,38
13,51 67,75
11,37 66,24
Moyen : 12,235 Moyen : 66,132
Après Extraction des pigments on calculer la quantité de chlorophylle A et
chlorophylle B et Caroténoides :
Feuille sénescentes Feuille mature
λ = 663 0,119 0,423
λ = 645 0,064 0,15
λ total = (chl A+ CHL 0,076 0,23
B) : 652
λ= 450 0,26 0,85
Donc , pour la plante sénescentes:
Chlorophylle A = ( 0.0127 x λ 663) –( 0,00269 x λ 645)
=(0,0127 x 0,119) – ( 0,00269 x 0,064 )
= 0,0015113– 0,00017216
= 0,00133914 mg/mL
Chlorophylle B = (0, 0269 x λ 645 ) – (0,00468 x λ 663)
= (0, 0269 x 0,064 ) – ( 0,00468 x 0,119 )
= 0,0017216 – 0,00055692
= 0,00116468 mg/mL
Chlorophylle total = (0,0202 x λ 663) + (0,00802 x λ 645 )
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= ( 0,0202 x 0,119 ) + (0,00802 x 0,064 )
= 0,0024038 + 0,00051328
= 0,00291708 mg/m L
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les caroténoïdes = λ 450 x V / £ x l donc 0,26 x 0, 01 / (2,45 x 104 ) x 1
= 0,0026 / 24500
= 1,0612 x10 -7 Mg/L
pour : la plante Mature :
Chlorophylle A = ( 0.0127 x λ 663) –( 0,00269 x λ 645)
= (0,0127 x 0,423) – ( 0,00269 x 0,15)
= 0,0053721 – 0,0004035
= 0,0049686 Mg /mL
Chlorophylle B = (0, 0269 x λ 645 ) – (0,00468 x λ 663)
= (0, 0269 x 0,15 ) – (0,00468 x 0,423 )
= 0,004035 – 0,00197964
= 0,00205536 Mg/ mL
Chlorophylle total = (0,0202 x λ 663) + (0,00802 x λ 645 )
= (0,0202 x0,423) + ( 0,00802 x 0,15 )
= 0,0085446 + 0,001203
= 0,0097476 Mg/mL
les caroténoïdes =( λ 450 x 2) x V / £ x l donc Nous devons multiplier x 2 car l
´échantillon a été dilué une deuxiéme fois
donc = (0,85x2 ) x 0,01 / (2,45 x 104 ) x 1
= 1,7 x 0, 01 / (2,45 x 104 ) x1
= 0,0017 / 24500 x1
= 6,939 x10-7 Mg/ L
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3-2.2 la teneur de matiére fraiche des feuilles
Pendant l'expérience, après avoir découpé les disques a la taille identique on trouve
exactement 0,5 g avant de commencer l'extraction des pigments.
Donc on applique la Formule :
LA MASSE DE PIGMENT / MASSE DE MATIÉRE FRAICHE
Pour la plante sénescentes ::
Chlorophylle A= Masse de Chlorophylle A / Masse de matière fraîche
= 0,00133914 mg /0,0005 Kg
= 2,67828 Mg/kg
Chlorophylle B = Masse de Chlorophylle B / Masse de matière fraîche
= 0,00116468 mg /0,0005 Kg
= 2,32936 Mg/Kg
Chlorophylle total = Masse de Chlorophylle Total / Masse de matière fraîche
= 0,00291708 mg / 0,0005 Kg
= 5,83416 Mg/Kg
les caroténoïdes = Masse de caroténoide / Masse de matière fraîche
= 1,0612 x10-7 Mg /0,0005Kg
= 0,00021224 Mg / Kg
la plante Mature :
Chlorophylle A= Masse de Chlorophylle A / Masse de matière fraîche
=0,0049686 Mg / 0,0005 Kg
= 9,9372 Mg/Kg
Chlorophylle B = Masse de Chlorophylle B / Masse de matière fraîche
=0,00205536/0,0005 Kg
= 4,11072 Mg/Kg
Chlorophylle total = Masse de Chlorophylle Total / Masse de matière fraîche
= 0,0097476 Mg/0,0005Kg
=19,4952 Mg/Kg
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les caroténoïdes = Masse de caroténoide / Masse de matière fraîche
=6,939 x10-7 Mg / 0,0005 Kg
=0,0013878 Mg/Kg
3-2.3 conclusion
Donc on va voire des différences concentrations de pigments entre la feuille sénescente et la
feuille mature pour le :
Chlorophylle A : La feuille mature contient une concentration plus élevée 9,9372 mg/Kg que
la feuille sénescente 2,67828 mg/Kg
Chlorophylle B : De même, : La feuille mature est plus abondante 4,11072 mg/Kg que la
feuille sénescente 2,32936 mg/Kg.
Chlorophylle totale : La concentration totale de chlorophylle suit la même étant plus élevée
dans la feuille mature 19,4952 mg/Kg que dans la feuille sénescente 5,83416 mg/Kg.
Caroténoïdes : Les caroténoïdes sont également plus grande quantité dans la feuille mature
0,0013878 mg/Kg par rapport à la feuille sénescente 0,00021224 mg/Kg.
CONCLUSION La feuille mature est plus importante que la feuille sénescente car elle
contient beaucoup plus de pigments photosynthétiques (chlorophylles et caroténoïdes).
La feuille sénescente, ayant moins de pigments, perd sa capacité photosynthétique c´est á
dire perde de chlorophylle et sa couleur verte (jeune ) donc on va voire la jaunissement des
feuille est lié á Chlorose
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