2.2.2.
Test de l’activité antifongique
L’activité antifongique des extraits aqueux desdites plantes à l’égard de Verticillium dalhiae
sera étudiée in vitro, dans des boites de pétri.
Recette
Peser 1kg de végétal (feuilles, écorce/tige ou fruits) pour 10 litres d’eau de pluie ou eau de
source.
Temps de préparation et application
En fonction de la disponibilité des plantes, compter environ 6 heures pour la
réalisation et l’application des extraits végétaux.
Parties de la plante utiliser
- Feuilles (récolter en lune montante)
- Fruits (récolter en lune montante)
- Ecorce (récolter en lune descendante)
Précautions à prendre:
- Il est préférable d’utiliser un récipient en plastique pour contenir les extraits
fermentés;
- Le mélange doit être remué tous les jours pour que la fermentation soit
homogène;
- Si la préparation est nauséabonde, c’est que le mélange est entré en
putréfaction. Il n’est plus efficace comme bio-pesticide mais peut être utilisé
comme fertilisant.
Préparation des purins en fonction des parties du végétal
- Hacher les feuilles de papaye en morceaux;
- Ecorcer et battez la tige pour briser les fibres;
- Passer au broyeur manuel ou piler les fruits préalablement coupés. Filtration et
conservation du mélange:
- Filtrer le mélange à l’aide d’un sac en toile ou d’un vieux manou ;
- Placer le mélange filtré soit dans une seringue pour un traitement direct ;
- Conservation indiquée: 6 mois dans un endroit sombre et frais.
L’incubation sera réalisée à 28 °C pendant dix jours correspondant à la colonisation totale des
mycéliums sur les boites témoins. La prise de la mesure de la croissance radiale doit être
réalisée à l’intervalle de 48 heures, sur la face inférieure de la boîte de pétri, en prenant les
mesures sur quatre fronts (verticalement et horizontalement) d’avancement de la croissance de
mycéliums (du centre vers la périphérie). Le témoin est constitué par un repiquage du
pathogène au centre de la boîte. Les expériences seront répétées trois fois pour chacun des
traitements à base de biopesticides.
[Link] Paramètres à observer et analyse statistique
Les paramètres à observer seront constitués de la croissance radiale et du taux d’inhibition.
La sensibilité de l’agent phytopathogène sera évaluée tout d’abord en mesurant la croissance
radiale des colonies du champignon. La croissance radiale sera mesurée selon deux axes
perpendiculaires tracés à la base de chaque boîte de pétri et qui se coupent au milieu de
l’explant.
L’effet antifongique exercé par les extraits aqueux des plantes sera évalué par le calcul du
taux d’inhibition. Ce dernier sera évalué au bout de 10 jours de test suivant la formule de
Leroux et Credet (1978) : T (%) = [(D – d)/D] x 100
T : taux d‘inhibition.
D : croissance radiale mycélienne dans les boîtes de pétri témoins.
d : croissance radiale mycélienne dans les boîtes d’essais.
Le logiciel Excel SPSS va nous servir à la collecte et au dépouillement des données. Word
2013 va servir pour les courbes et l’histogramme. Les taux d’inhibition, au bout des
observations, seront comparés et le test de la plus petite différence significative sera calculé
au seuil de signification de 5% à l’aide du logiciel SPSS.
2.3. Résultats escomptés
2.3.1. Croissance radiale de Verticillium dalhiae en présence des extraits aqueux
de chacune des plantes biopesticides
2.3.2. Taux d’inhibition de la Croissance radiale de Verticillium dalhiae en présence des
extraits aqueux des plantes biopesticides
2. Budget de l’étude
Eléments Coûts
Echantillons 15$
Frais de laboratoire 95$
Matériels de travail 40$
Transport 50$
Frais connexes 50$
Total 250$